专利名称：一种增强人体免疫力的保健食品及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种营养保健品及其制备方法，特别是涉及一增强人体免疫力的保健 食品及其制备方法。
背景技术：
健康的身体和充沛的精力是人们适应现代社会竞争的资本，然而每日紧张的工作 和学习会使机体处于透支状态，如得不到及时的休息和调整，日积月累，就会导致机体免疫 力低下。随着亚健康人群逐渐增多，不少消费者希望通过食用保健品来改善身体状况。据上 海致联市场研究有限公司对中国内地654个县级以上城市，20 64岁的成年城市居民的抽 样调查显示，消费者购买保健品所要达到的目的排名前四位的分别是调节免疫力、改善骨 骼状况、抗疲劳、改善睡眠。其中东南沿海、黄河中游和西南地区的消费者重视调节免疫能 力的比例相对其它地区较高。由此可见，经历了 SARS和禽流感的恐慌之后，“提倡保健，预 防为主”观点已被群众广泛接受，增强免疫力、提高机体的抗病能力也已成为共识。因此，调 节机体免疫力的保健食品具有巨大市场需求量，越来越多的人力物力投入到这块领域中。蜂胶是蜜蜂将胶源性植物上采集的树胶和树脂，混入其上颚腺分泌物与蜂蜡等加 工而成的一种天然物质，含有黄酮类化学成分，现代药理研究表明，蜂胶具有增强免疫力作 用。紫苏在我国已有悠久的种植历史，自古就作为中草药发挥作用。本品所用紫苏子油是 由紫苏子经压榨制得，现代医学研究证实，紫苏子油具有调节免疫功能，目前已广泛应用 于医药和保健食品领域。但是由于技术原因，蜂胶和紫苏的联用比较少，目前仅中国专利 200410014842. 9记载了一种超临界可溶性蜂胶液配方及其加工工艺，此专利公开加工工艺 的同时并未对蜂胶液的功能进行深入研究，作用不明显。
发明内容
发明目的本发明针对现有技术的不足，提供了一种增强人体免疫力的保健食品 以及制备方法。技术方案本发明所述的一种增强人体免疫力的保健食品，包括以下重量百分比 的组分蜂胶粉16 36 %，紫苏子油60 80 %，蜂蜡1 5 %。其中，所述蜂胶粉由蜂胶原料经过人工去杂，80%乙醇提取，粗滤，加压精滤，浓 缩，干燥，提纯蜂胶，低温冷冻，粗粉碎，投加20 %碳酸钙，细粉碎，过筛混合而成。其中，所述紫苏子油由紫苏子经润湿，蒸炒，压榨，过滤得到。制备所述的一种增强人体免疫力的保健食品的方法包括如下步骤(1)将蜂蜡、紫苏子油加热熔化，搅拌混勻，放至室温；(2)取蜂胶粉，过筛，得蜂胶粉细粉，按配方量将蜂胶粉细粉和蜂蜡、紫苏子油的混 合物料混合，搅拌混勻，研磨成质地细腻的浆状物，静置抽真空至无气泡，加压出料，过筛， 装入胶囊，每粒胶囊含上述混合物0. 6g。其中，步骤(2)优先选用80目筛。
其中，步骤⑵中静止抽真空的真空度在0. 06 0. 08Mpa。其中，步骤(2)中研磨的速度为2400 2600r/min。本发明是以蜂胶粉、紫苏子油为主要原料制成的具有增强免疫力功能的保健食品。其中，蜂胶中含有黄酮类化学成分，现代药理研究表明，具有增强免疫力作用，本品所用 蜂胶粉是在蜂胶中加入一定量的碳酸钙制得；紫苏子油经现代医学研究证实，具有调节免 疫功能，目前已广泛应用于医药和保健食品领域。本发明通过各原料的共同作用，从而达到 增强免疫力功能，是科学合理的。2005版药典规定，蜂胶的日用量为0. 2-0. 6g，本发明蜂胶 粉中蜂胶占80%，每日蜂胶服用量为0. 5g，在标准范围内；紫苏子的日用量为3-9g，本发明 紫苏子油的每日服用量为1. 715g，按出油率36%计算，折合紫苏子为4. 76g，亦在标准范围 内。本发明中紫苏子油为油状物，对于含油量高的药物不适宜制成片剂、硬胶囊等固 体制剂，但可制成软胶囊剂型。同时软胶囊剂型具有以下特点良好的隔离功能，能将对光、 氧敏感的功能性物料与空气、光线隔离开来，避免有效物质的氧化，使产品在有效期内保持 含量稳定，保证功效的发挥；定量准确，吸收快；产品外观新颖，诱人，对消费者很有吸引力 和新奇感；表面光滑，口感好，易吞服；携带安全，食用方便。故本发明选择软胶囊剂型。有益效果本发明很好地将蜂胶及紫苏两种原料联用，总黄酮的含量高，能增强人 体的免疫力，适用于各个年龄段的人群，无任何副作用，值得大力提倡。
具体实施例方式实施例1:将4%的蜂蜡、80%的紫苏子油(单位重量百分数，下同)置真空均质乳化机中，力口 热熔化，搅拌混勻，得混合物料，放至室温；取16%的蜂胶粉过80目筛，得蜂胶粉细粉，加入 到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中，搅拌混勻，用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物， 控制胶体磨转速2400r/min。0. 06Mpa静置抽真空至无气泡，加压出料，过80目筛网，装入 胶囊，每粒胶囊含上述药物0. 6g。实施例2:将5%的蜂蜡、75%的紫苏子油(单位重量百分数，下同)置真空均质乳化机中，力口 热熔化，搅拌混勻，得混合物料，放至室温；取20%的蜂胶粉过80目筛，得蜂胶粉细粉，加入 到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中，搅拌混勻，用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物， 控制胶体磨转速2600r/min。0. OSMpa静置抽真空至无气泡，加压出料，过80目筛网，装入 胶囊，每粒胶囊含上述药物0. 6g。实施例3:将3%的蜂蜡、71%的紫苏子油(单位重量百分数，下同)置真空均质乳化机中，力口 热熔化，搅拌混勻，得混合物料，放至室温；取26%的蜂胶粉过80目筛，得蜂胶粉细粉，加入 到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中，搅拌混勻，用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物， 控制胶体磨转速2500r/min。0. 07Mpa静置抽真空至无气泡，加压出料，过80目筛网，装入 胶囊，每粒胶囊含上述药物0. 6g。实施例4 将2%的蜂蜡、68%的紫苏子油(单位重量百分数，下同)置真空均质乳化机中，力口热熔化，搅拌混勻，得混合物料，放至室温；取30%的蜂胶粉过80目筛，得蜂胶粉细粉，加入到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中，搅拌混勻，用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物， 控制胶体磨转速2400r/min。0. 06Mpa静置抽真空至无气泡，加压出料，过80目筛网，装入 胶囊，每粒胶囊含上述药物0. 6g。实施例5 将4%的蜂蜡、60%的紫苏子油(单位重量百分数，下同)置真空均质乳化机中，力口 热熔化，搅拌混勻，得混合物料，放至室温；取36%的蜂胶粉过80目筛，得蜂胶粉细粉，加入 到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中，搅拌混勻，用过分体式胶体磨研磨成质地细腻的浆状物， 控制胶体磨转速2600r/min。0. OSMpa静置抽真空至无气泡，加压出料，过80目筛网，装入 胶囊，每粒胶囊含上述药物0. 6g。实施例6 本发明增强免疫力功能实验研究1.材料1. 1样品由无锡市天赐康生物科技有限公司提供。1. 2试剂、实验器材及动物1. 2. 1 试剂SRBC (绵羊红细胞)，Hank’ s液，DNFB (2,4 二硝基氟苯)，Sa缓冲液，琼脂糖，印度 墨汁，Na2CO3 (碳酸钠)，RPMI1640培养液，鸡红细胞悬液，生理盐水，YAC-I细胞。以上试剂 由四川省疾病预防控制中心提供。1.2.2实验器材100 μ微量注射器，二氧化碳培养箱，电子分析天平，723分光光度仪，离心机，手 术器械。1. 2. 3实验动物四川省医学科学院实验动物研究所提供的昆明种小鼠160只，全雌，体重18_22g， 生产许可证号为SCXK(川)2004-16SPF级；试验动物房为屏障系统，使用许可证号为川实动 管 SYXK (川)2008-043。温度 20-25 °C，相对湿度 40 70 %。2.实验方法2. 1剂量选择受试物设400mg/kg. BW、800mg/kg. BW、1200mg/kg. Bff三个剂量组(分别相当于人 体推荐摄入量的10倍、20倍、30倍)，分别称取10g、20g、30g受试物加蒸馏水至250ml混勻，
冷藏保存，用完再配，另设植物油阴性对照组，每组40只动物。分为免疫一组、二组、三组、 四组，其中一组用于小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验；二组用于NK细胞活性测定及淋 巴细胞转化实验；三组用于抗体生成细胞实验、血清溶血素测定和迟发型变态反应；四组 用于小鼠碳廓清实验。小鼠按20mg/kg. BW体重一次经口灌胃，连续给予30天，每周称一次 体重，调整灌胃体积。2. 2实验步骤2. 2. 1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)连续灌胃30天后，每只 小鼠腹腔注射20%的鸡红细胞悬液lml，30分钟后，颈椎脱白处死，将其固定在鼠板上，正 中剪开腹壁皮肤，经腹腔注入生理盐水2ml，转动鼠板1分钟，吸出腹腔洗液1ml，平均滴于2张载玻片上，置湿盒37°C 30分钟，取出在生理盐水漂洗、晾干、固定，4% GiemsaPBS染色 3分钟，蒸馏水漂洗晾干，镜检。计算吞噬百分率及吞噬指数。2. 2. 2NK细胞活性测定(乳酸脱氢酶LDH测定法)连续灌胃30天后，颈椎脱臼处死动物，取出脾脏，撕碎，过200目筛网后，用Hank’ s液洗3次，用完全RPMI1640培养液配 成2X IO7个/ml细胞悬液。将各只小鼠的细胞悬液取300 μ 1分3孔置于96孔培养板中， 每孔100 μ 1，每孔加靶细胞(YAC-1细胞，4Χ IO5个/ml) 100 μ 1，同时做靶细胞自然释放孔 (靶细胞100 μ 1+培养液100 μ 1)及最大释放孔(靶细胞100 μ 1+2. 5% TritonlOO μ 1)各 8孔，37°C 5% CO2培养4小时，取出1500r/min离心5min。将各孔上清液100 μ 1置于另一 培养板中，每孔再加入100 μ 1基质液，10分钟后加lmol/L的HCL30 μ 1终止反应，在490nm 处测定OD值，计算NK细胞活性率。2. 2. 3ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验(MTT法)首先进行脾细胞悬液的制备。 将细胞浓度调整为3X IO6个/ml，然后将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1ml， 一孔加75 μ IConA液，另一孔作对照，置5% CO2孵箱37°C培养72h。培养结束前4h，每孔 轻轻吸去上清液0. 7ml加入0. 7ml不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT (5mg/ ml) 50 μ/孔继续培养4h，培养结束后，每孔加入Iml酸性异丙醇，使紫色结晶完全溶解，然 后将每孔液体移入比色杯中，用723分光光度仪于570nm波长处比色测定光密度值。2.2.4抗体生成细胞检测(Jernr改良玻片法)连续灌胃30天后，每只小鼠腹腔 注射2%压积SRBCO. 2ml，将免疫5天半后的小鼠颈椎脱白处死，取出脾脏放在盛有Hank's 液的平皿内，制成脾细胞悬液。将琼脂糖配成1 %水溶液，水浴煮30min，与等量双倍Hank’ s 液混合，分装小试管，每管0. 5ml，再向管内加10% (用Sa缓冲液配制)压积SRBC50y 1，脾 细胞悬液各20 μ 1做两个平行样，迅速混勻后，倾倒于琼脂糖薄层玻片上，待琼脂凝固后， 将玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培养箱中孵育1. 5h，然后将补体加入到玻片架凹 槽内，继续温育1. 5h，计数溶血空斑数。2.2.5血清溶血素测定(血凝法)在连续灌胃30天后，每只小鼠腹腔注射2% SRBCO. 2ml免疫，继续灌胃5天后，摘除眼球取血于离心管内，放置lh，剥离，2000r/min离 心lOmin，收集血清，用生理盐水将血清作倍比稀释，每份稀释12孔，将不同稀释度的血清 置于血凝板中，每孔100 μ 1，再加入0. 5% SRBC悬液100 μ 1，混勻，置湿盒37°C 3h后观察 结果，记录每孔的凝集程度。计算抗体积数。2. 2. 6迟发型变态反应(DTH)(足跖增厚法)灌胃30天后，给小鼠腹腔注射2%压 积SRBC(0. 2ml/每鼠)致敏4天后，测量左后足跖厚度，然后再测量部位皮下注射20% (ν/ ν) SRBC (20 μ 1/每鼠)，于注射后24h测量左后足跖厚度，同一位测量三次，取平均值，以攻 击前后足跖厚度差值(足跖肿胀度)来表示DTH的程度。2. 2. 7小鼠碳廓清试验连续灌胃30天后，于小鼠尾静脉注射用4倍生理盐水稀 释的印度墨汁，按0. lml/10g墨汁注入后立即计时，于注入墨汁后第2、10min分别从内眦 静脉丛取血20 μ 1，加到2mlNa2C03溶液中，以Na2CO3溶液作空白对照，用723分光光度计在 600nm处测定光密度值。取血后处死小鼠，取肝、脾称重，计算吞噬指数。3.试验数据统计试验数据采用SPSS10. 0 for Windows软件包处理。对照组与剂量组的数据经方 差齐性检验，方差齐，进行方差分析，如P值小于0. 05，则用Durmett法进行两两比较；若方差不齐，则进行数据转换，仍不齐，改用秩和检验，如P值小于0. 05，则用Durmett’sT3法进
行两两比较。4.结果4. 1本发明对小鼠体重的影响见表1-4。表1各组小鼠的初始体重(又士 S) 表2各组小鼠的中期体重(又士S) 表3各组小鼠的结束体重(I士S) 表4本发明对小鼠体重增重的影响》士S)
~免疫一组 免疫二组 免疫三组免疫叫组
(mg/kg.BW)动物数(只)体重(g) 动物数(只)体重(g) 动物数(只)体重(g)动物数(只)体重(g)
0 10 32.90士2.51 10 32.20±2.20 10 33.00±2.2610 32.00±2.40
400 10 31.80±2.25 10 33.30±1.89 10 33.20士 1.9310 31.10±3.28
800 10 32.70±2.21 10 33.30士2.54 10 32.40±2.5510 31.80±2.15
1200 10 31.40±2.27 10 31.20±1.99 10 31.80±2.2010 31.10±2.88由表1-4可见，本发明免疫一组、免疫二组、免疫三组及免疫四组小鼠的初始体重
与阴性对照组相比，经方差齐性检验，方差齐(p>0. 05)，且方差分析结果(P>0. 05)，说
明各组小鼠与阴性对照组之间的初始体重是均衡的。三个剂量组小鼠试验中期、末期的体
重以及试验期间小鼠体重的增长与阴性对照组相比，经统计学处理，无显著性差异(P >
0. 05)，即本发明对小鼠的体重增长无影响。4. 2本发明对小鼠单核_巨噬细胞吞噬功能的影响
表5本发明对小鼠单核_巨噬细胞碳廓清功能的影响》士S) 由表5可见，连续灌胃30天后，三个剂量组小鼠的碳廓清能力与阴性对照组相比， 经统计学处理，中剂量组有显著性差异(P < 0. 05)表6本发明对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响》士S) 由表6可见，连续灌胃30天后，三个剂量组动物的吞噬率和吞噬指数与阴性对照 组相比，经统计学处理，无显著性差异(P > 0. 05)。由表5、表6可见，本发明对小鼠单核_巨噬细胞吞噬功能试验结果阴性。4. 3本发明对小鼠细胞免疫的影响表7本发明对小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响》士S) 由表7可见，连续灌胃30天后，三个剂量组小鼠的足跖肿胀度与阴性对照组相比， 经统计学处理，高剂量组动物的足跖肿胀度有显著性差异(P < 0. 05)表8本发明对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响(又士S) 由表8可见，连续灌胃小鼠30天后，三个剂量组小鼠的淋巴细胞增殖能力与阴性 对照相比，经统计学处理，无显著性差异(P > 0. 05)。由表7、表8可见本发明对小鼠细胞免疫试验结果为阴性。4. 4本发明对小鼠体液免疫的影响表9本发明对小鼠抗体生成细胞的影响》士S)
由表9可见，连续灌胃30天后，三个剂量组小鼠的溶血空斑数与阴性对照相比，经 统计学处理，无显著性差异(P > 0. 05)。表10本发明对小鼠血清溶血素的影响》士S)
1200_10_152.00士26.17 0.0由表10可见，连续灌胃30天后，三个剂量组小鼠的抗体积数与阴性对照组相比， 经统计学处理，低、高剂量组有显著性差异(P < 0. 05、P < 0. 05)由表9、表10可见，本发明对小鼠体液免疫试验结果呈阳性。4. 5本发明对小鼠NK细胞活性的影响表11本发明对小鼠NK细胞活性的影响》士S) 由表11可见，连续灌胃30天后，三个剂量组小鼠NK细胞活性与阴性对照相比，经 统计学处理，中、高剂量组有显著性差异(P < 0. 05、P < 0. 05)。本发明对小鼠的NK细胞 活性试验结果显阳性。5.总结本发明连续灌胃小鼠30天后，对小鼠体重无明显影响(P>0.05)；对小鼠的 单核-巨噬细胞吞噬功能试验结果阴性；对小鼠的细胞免疫试验结果阴性；对小鼠的体 液免疫试验，三个剂量组的抗体积数与阴性对照组比较，低、高剂量组差异均有显著性(P < 0. 05)，试验结果阳性；对小鼠的NK细胞试验，三和剂量组NK细胞活性与阴性对照组比 较，中、高剂量组差异均有显著性(P < 0. 05)，试验结果阳性。依据《保健食品检验与评价技术规范》2003年版可以判定，本发明对动物具有增强 免疫力的功能。
权利要求
一种增强人体免疫力的保健食品，其特征在于它包括以下重量百分比的组分蜂胶粉16～36％，紫苏子油60～80％，蜂蜡1～5％。
2.根据权利要求1所述的一种增强人体免疫力的保健食品，其特征在于所述蜂胶粉由 蜂胶原料经 过人工去杂，80 %乙醇提取，粗滤，加压精滤，浓缩，干燥，提纯蜂胶，低温冷冻， 粗粉碎，投加20%碳酸钙，细粉碎，过筛混合而成。
3.根据权利要求1所述的一种增强人体免疫力的保健食品，其特征在于所述紫苏子油 由紫苏子经润湿，蒸炒，压榨，过滤得到。
4.制备权利要求1所述的一种增强人体免疫力的保健食品的方法，其特征在于它包括 如下步骤(1)将蜂蜡、紫苏子油加热熔化，搅拌混勻，放至室温；(2)取蜂胶粉，过筛，得蜂胶粉细粉，按配方量将蜂胶粉细粉和蜂蜡、紫苏子油的混合物 料混合，搅拌混勻，研磨浆状物，静置抽真空至无气泡，加压出料，过筛，装入胶囊。
5.根据权利要求4所述的制备一种增强人体免疫力的保健食品的方法，其特征在于步 骤⑵选用80目筛。
6.根据权利要求4所述的制备一种增强人体免疫力的保健食品的方法，其特征在于步 骤(2)中静止抽真空的真空度在0. 06 0. 08Mpa。
7.根据权利要求4所述的制备一种增强人体免疫力的保健食品的方法，其特征在于步 骤(2)中研磨的速度为2400 2600r/min。
全文摘要
本发明公开了一种增强人体免疫力的保健食品及其制备方法，所述保健食品包括以下重量百分比的组分蜂胶粉16～36％，紫苏子油60～80％，蜂蜡1～5％。该保健食品的制备方法为将蜂蜡、紫苏子油加热熔化，搅拌混匀，放至室温；取蜂胶粉过筛，得蜂胶粉细粉，加入到蜂蜡、紫苏子油的混合物料中，搅拌混匀，研磨成质地细腻的浆状物，静置抽真空至无气泡，加压出料，过筛，装入胶囊。本发明很好地将蜂胶及紫苏两种原料联用，总黄酮的含量高，增强人体的免疫力，无任何毒副作用，适用于各个年龄段的人群。
文档编号A23L1/076GK101856112SQ20101013069
公开日2010年10月13日 申请日期2010年3月23日 优先权日2010年3月23日
发明者张国清, 潘亚莲 申请人:无锡市天赐康生物科技有限公司