专利名称：转氨酶多肽的制作方法
转氨酶多肽1.相关申请的交叉引用本申请要求35U. S. C. § 119 (e)下2009年1月8日提交的申请序列号为 61/143,401的权益，其内容通过引用并入本文。2.参考序列表、表格或计算机程序序列表的正式复本作为ASCII格式化文本文件与说明书经EFS-Web同时被提交， 文件名“376247-0；34. txt”，创建日期2010年1月8日，且大小为569千字节。经EFS-Web 提交的序列表是说明书的一部分且通过引用全部并入本文。3.背景氨基转移酶，还称为转氨酶(E.C.2.6. 1)，催化来自氨基供体底物的伯胺的氨基， 一对电子和质子向氨基受体分子的羰基转移。Ω-转氨酶(ω-转氨酶)转移与羰基间隔至少一个亚甲基插入的胺基团。通常的转氨酶反应显示在下面的反应I中。在这一反应中，氨基受体(I，酮基 (keto)或酮)，即期望的氨基酸产物的前体，与氨基供体(II)反应。转氨酶交换氨基供体的氨基与氨基受体的酮基团。因此反应产生期望的手性胺产物(III)和作为副产物的新的氨基受体(酮)化合物(IV)。
权利要求
tttgcggaaccggtgatgggtgcgggcggtgttattccgccggcgaaaggctattttcag 720gcgattctgccgatcctgcgcaaatatgatattccggtgatcagcgatga agtgatttgc780ggctttggccgtaccggcaacacctggggctgcgtgacctatgattttac cccggatgcg 840attatt.agcagcaaaaacctgaccgcgggtttttttccgatgggcgcggtgattctgggt900ccggaactgagcaaacgtctggaaaccgcgattgaagcgatcgaagaatttccgcatggt960tttaccgcgagcggccatccggtgggttgtgcgattgcgctgaaagcgattgatgtggtg1020atgaacgaaggcctggccgaaaacgtgcgtcgtctggccccgcgttttga agaacgtctg1080aaacatattgcggaacgtccgaacattggcgaatatcgtggcattggctttatgtgggcg1140ctggaagcggtgaaagataa agcgagcaaaaccccgtttgatggcaacctgagcgtgagc1200gaacgtattgcgaacacctgcaccgatctgggcctgatttgccgtccgctgggccagagc1260gtggttctgtgcccgccgtttattctgaccgaagcgcagatggatgaaatgttcgataaa1320ctggaaaaagcgctggataaagtgtttgcggaagtggcgtaa1362<210> 2 <211> 453 <212> PRT <213>人丄序列<220> <223>来自河流弧菌(V. fluvialis)的转氨酶 <400> 2Met Asn Lys Fro Gln Ser Trp Glu 15Tyr Gly Fhe Thr Asp Met Fro Ser 20Va丄 Thr His Gly Glu Giy Fro Tyr 3540Tyr Leu Asp Ala Asn Ser Gly Leu(5055His Lys Giy Leu lie Asp Ala Ala 6570Gly Tyr His Ala Fhe Fhe Gly Arg 85Ser Glu Lys Leu Val Glu Val Ser 100Tyr Thr Asn Ser Gly Ser Glu Ala 115120Trp Phe Leu His Ala Ala Glu Gly(130135Thr Arg Trp Asn Ala Tyr His Gly 145150Thr Gly Lys Pro Tyr Asn Ser Val
AlaLeu(25lieTrpLysMetPro 105 AsnLysValPheArg 10 HisValAsnAlaSer(90PheAspProThrGlyAla Gln Asp MetGln(75 AspAspThrGlnAla 155 LeuGluArgValVal 60 TyrGlnSerMetLys 140 ValProThrGlyAsn(45AlaGluThrGlyVal 125 ArgSerLeuTyrThr(30GlyGlyArgValArg 110 LysLysAlaProSer(15VaiArgFheFheMet(95ValMetlieSerGlvLeuValArgAspFro(80LeuPheLeuLeuMet 160 PheVal His LeuThr 180 Gln165CysIlc Gln 210 MeLVal 225 AlaGluThrAlaLys 305 PheIleAlaIleLys 385 GluLeuGlnGly lie Leu Pro lieVal TyrGly Ala GlyAsp 275 PheCys 260 PheThrAspProGly 370 AspArgGlyMetAla Ser ValArg 355 GluLyslieGlnlie 245 GlyGly 290Arg Leu Glu ThrVal 340 PheTyrAlaAlaSer 420 GluPhe Ala 450Asp 435Glu Val AlaPro His TyrThr Glu Glu 195Arg Glu GIy AlaGly 230 LeuPhe Pro Met GluGly 325 MetGluArgSerAsn 405 ValAsp 215 ValArg Phe Gly Thr Pro AspGly 295lieAla 310His ProAsnGluGlyLys 390 ThrVal Met PheGluArglie 375 ThrCysLeuAsp170ArgPhe Val Ala Arg 200 ThrTrp 185Leu AlaTyr Arg Ilc Ala GlyLys Tyr ArgAla 280 AlaGluValGlyLeu 360 GlyProThrCysLys 440Thr 265 lieValAlaGlyLeu 345 LysAsp 250 GlyCys 330 AlaPhePhe AspAsp Leu 410 Pro Pro 425Leu GluGly Glu GluPhc 220 Lyslie Pro Pro Ala 235lie Prolie Ser Ser lie Leu lieGlu 315 AlaGly 300 GluGlu His lie Met TrpGly 395 GlyPheLyslieAsnAlaAla 380 AsnLeulieAlaGlu 190 Glu175Gly Glu Glu ThrLeu 205Phc Ala Glu ProGly Val Asn Thr TrpTyr Plie lieGly 270 AsnSer 255 CysGln 240 AspVal Leu ThrLys 285Pro Glu Leu SerPhe Pro His Ala Leu ValLys 335 ArgGlu 365 LeuLeulieLeuLeu 445Arg 350Arg ProGluSerCysThr 430 AspAlaValArg 415 GluGly 320 AlaLeuAsnValSer 400 ProAla Lys Val<210> 3 <211> 1362 <212> DNA <213>人工序列
9全文摘要
本公开内容提供与天然存在的野生型转氨酶相比具有改进的性质的工程转氨酶。还提供了编码所述工程转氨酶的多核苷酸，能够表达所述工程转氨酶的宿主细胞和使用所述工程转氨酶合成多种手性化合物的方法。
文档编号C12N15/63GK102341494SQ201080010926
公开日2012年2月1日 申请日期2010年1月8日 优先权日2009年1月8日
发明者伊什·库马尔·达万, 张希云, 格雷戈里·米勒 申请人:科德克希思公司