专利名称：不对称还原制备(r)-1,3-丁二醇的方法及菌株的制作方法
技术领域：
本发明涉及一株产羰基还原酶新菌株一克鲁斯假丝酵母(CandidakruseDZJB 09162，及其在催化不对称还原4-羟基-2- 丁酮制备(R) _1，3- 丁二醇中的应用。
背景技术：
(R)-l，3_ 丁二醇，又可记作(R)-1，3_BD0 (结构见式(I))，是一种无色粘稠状，带甜味液体，能与水、乙醇、丙酮、丁酮等混溶。(R)_l，3-丁二醇是一种具有广泛用途的重要手性砌块，如在医药领域用于合成碳青霉烯类抗生素母核氮杂环丁酮，在农药领域用于合成杀虫剂和信息激素，同时它也是合成一大类香料的重要中间体。因此，开展(R)_l，3-丁二醇合成研究具有重要的实际应用价值。
权利要求
1.一株产羰基还原酶菌株一克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)ZJB 09162，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址中国，武汉，武汉大学，430072，保藏编号CCTCC No =M 2010335，保藏日期2010年12月6日。
2.如权利要求1所述的克鲁斯假丝酵母ZJB09162在不对称还原4-羟基-2-丁酮制备(R)-l，3-丁二醇中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述应用为以4-羟基-2-丁酮为底物，以克鲁斯假丝酵母ZJB 09162经培养获得的含酶菌体细胞为催化剂，在20 45°C下，于pH 6. 0 9. 0的缓冲液中进行不对称加氢还原反应8 36h，反应结束后反应液经分离纯化得到所述(R)-1，3-丁二醇。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述缓冲液中还添加有20 100g/L缓冲液的辅助底物，所述辅助底物为下列之一①葡萄糖、②乳糖、③蔗糖、④木糖、⑤果糖、⑥麦芽糖、⑦异丙醇、⑧乙醇、⑨丙三醇。
5.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述缓冲液为下列之一pH6. 0 6. 6的柠檬酸缓冲液、pH 6. 5 7. 8的磷酸盐缓冲液或pH 7. 4 9. 0的Tris-HCl缓冲液。
6.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述缓冲液中底物初始浓度为5 30g/L。
7.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述含酶菌体细胞由如下方法获得将克鲁斯假丝酵母ZJB 09162接种至发酵培养基，在25 43°C、100 300rpm下培养M 72h，得到发酵液离心分离，即得到所述含酶菌体细胞；所述发酵培养基终浓度组成如下葡萄糖 10 60g/L，酵母膏 10 50g/L, MgSO4O. 2 1. 5g/L, (NH4)2HPO4O. 5 3. 5g/L, KH2PO4O. 5 3. 5g/L，溶剂为水，pH 5. 5 8. 5。
全文摘要
本发明提供了一株产羰基还原酶新菌株——克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)ZJB 09162，及其在催化不对称还原4-羟基-2-丁酮制备(R)-1，3-丁二醇中的应用。该菌株保藏于中国典型培养物保藏中心，地址中国，武汉，武汉大学，430072，保藏编号CCTCC NoM 2010335，保藏日期2010年12月6日。本发明的有益效果主要体现在提供了一种产4-羟基-2-丁酮羰基还原酶的新菌种，通过该菌种可制备高光学纯度的(R)-1，3-丁二醇，转化率＞90％，光学纯度＞99％；使用本发明的不对称还原工艺，反应条件温和，节能，环保，更重要的是显著提高了过程的原子经济性，具有很好的工业应用前景。
文档编号C12R1/72GK102154133SQ20111003066
公开日2011年8月17日 申请日期2011年1月27日 优先权日2011年1月27日
发明者沈寅初, 邱照宽, 郑仁朝, 郑裕国 申请人:浙江工业大学