专利名称：用于防止核酸扩增反应中的反应溶液的蒸发的组合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于防止核酸扩增反应中的反应溶液的蒸发的组合物、防止反应溶液在核酸扩增反应中蒸发而进行核酸扩增反应的方法、容纳用于防止反应溶液在核酸扩增反应中蒸发的组合物的预包装试剂、以及连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置。
背景技术：
近年来，基因分析在医学领域、农学领域、理学领域、药学领域等所有领域中进行，其目的涉及多方面，例如基因组测序、临床诊断、农植物品种改良、食品细菌检查、药物开发等。如此，应用领域非常广泛，并且，在期待该应用的基因分析中，频繁利用核酸扩增反应。·其中，聚合酶链式反应(以下，“PCR”)为利用耐热性聚合酶和引物、通过温度的升降、使目标核酸扩增的技术，其原理在于，按照设定为如下3个阶段的热曲线(温度升降)进行循环，将该循环反复多次进行，由此使目标DNA按几何级数扩增，所述3个阶段包括 第I阶段温度维持在包含目标DNA序列的双链DNA解离成单链的温度(约94°C );第2阶段温度维持在正向和反向引物与解离的单链DNA退火的温度(约50°C至约60°C );以及第3阶段利用DNA聚合酶，合成与单链DNA互补的DNA链的温度(约74°C )。在利用PCR的情况下，需要进行分离、纯化包含目标DNA的细胞、以及从细胞中提取目标DNA等操作，制备包含目标DNA的PCR反应液。特别是，最近，在基因诊断、基因组计划等中，为了有效处理多个检验体，将分离、纯化包含目标DNA的细胞、从细胞中提取目标DNA、利用PCR扩增目标DNA这样的一系列作业自动化，并列有效处理多个检验体的必要性增加。目前，开发并利用一次性处理多个检验体用的自动化装置(专利文献1、2)。现有技术文献专利文献专利文献I :日本专利第3115501号专利文献2 日本专利第3630499号
发明内容
发明要解决的课题通常，在自动化装置中，为了密封反应容器(管)，利用盖体或粘接封条(日文接着&一 >)，但其在装置中的安装、完全密封化使装置变得复杂、且价格变得昂贵。另外，由于反应容器(管)的加热而蒸发的液体附着于盖体或封条，变得模糊不清，因此从反应容器(管)上部难以进行光学地测定，而且变得需要加热板，由此装置变得更加复杂。本发明的目的在于提供一种不使用盖体或粘接封条而能够密封反应容器的组合物。
另外，本发明的目的在于提供一种防止反应溶液在核酸扩增反应中蒸发，而进行核酸扩增反应的方法。进而，本发明的目的还在于提供一种预包装试剂，其容纳用于防止核酸扩增反应中的反应溶液的蒸发的组合物。再进而，本发明的目的还在于提供一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置。用于解决课题的手段本发明人通过利用分注器等将矿物油等油性成分分注到反应容器中来封入反应 液，在保证与盖体或封条同等或其以上的密封性的同时，由于不使气体介入至组合物与反应液之间，由此成功地不产生加热所致的模糊不清。另外，作为油性成分，采用在核酸扩增反应中为液体、反应终止后通过化学变化、温度变化成为固体这样的组合物，由此可以在核酸扩增反应终止后，使油性成分固化，容易废弃包含检验体的反应溶液，并且可以防止由反应液的飞溅、操作失误等引起的污染、沾染(日文P O ^彳、一'>3 >)。进而，通过用表面张力小的材料涂敷反应容器的内壁，可以使油性成分的表面平坦化(图15b)，其结果，可以防止光的散射，扩大均匀受光面积，提高从反应容器上部的照光和/或受光的效率。本发明是基于这些发现而完成的。本发明的要旨如下。(I) 一种组合物，其用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发，所述组合物在反应中为液体，在反应终止后通过化学变化或温度变化成为固体。(2) 一种组合物，其用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发，所述组合物的熔点为0-15°C。(3) 一种组合物，其用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发，所述组合物的熔点为5-10°C。(4) 一种核酸扩增方法，其包括将(I)至(3)中任一项所述的组合物层叠在核酸扩增反应溶液的上层的工序。(5) 一种核酸扩增方法，其包括在核酸扩增反应终止后使⑴至⑶中任一项所述的组合物固化的工序。(6) 一种核酸扩增方法，其使用如下组合反应容器和用于防止反应溶液的蒸发的组合物，所述反应容器为防止核酸扩增反应容器中的反应溶液蒸发用的组合物与空气之间的界面形状呈水平或上凸的反应容器。(7) 一种核酸扩增方法，其使用如下组合反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物，所述反应容器为反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的反应容器。(8) 一种核酸扩增方法，其使用如下组合反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物，所述反应容器为反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的80%的反应容器。(9) 一种核酸扩增用的预包装试剂，所述预包装试剂容纳用于防止反应溶液蒸发的组合物，所述试剂包含(I)至(3)中任一项所述的用于防止反应溶液蒸发的组合物。(10) 一种核酸扩增用的预包装试剂，所述预包装试剂容纳反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物，其中，所述反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合为(6)至(8)中任一项所述的组合。(11) 一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其可以在扩增及检测工序中，由用于防止蒸发的组合物密封核酸反应溶液，隔着该组合物光学地检测核酸的扩增。(12) 一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其可以在扩增及检测工序中，由用于防止蒸发的组合物密封核酸反应溶液，反应终止后使该组合物固化，防止反应溶液的泄漏、飞溅等。(13) 一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其可以利用(I)至(3)中任一项所述的用于防止反应溶液蒸发的组合物，防止反应溶液的蒸发。(14) 一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其中，作为反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合，可以采用(6)至(8)中任一项所述的组合。·(15) 一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其可以容纳(9)或(10)所述的预包装试剂。发明效果根据本发明，可以防止反应溶液在核酸扩增反应中蒸发。此外，可以容易废弃包含检验体的反应溶液，防止由反应液的飞溅、操作失误等引起的污染或沾染。进而，可以防止反应溶液中的光散射，扩大均匀受光面积，提高从反应容器上部的照光和/或受光的效率。本说明书包含作为本申请优先权的基础的日本国专利申请、特愿2010-141510的说明书和/或附图中所记载的内容。
图I为将第I检验体检查装置的壳体的一部分去除后显示的立体图。图2为显示将图I的检验体检查装置的一部分部件去除并拉出检查盒式(cartridge)容器后的状态的立体图。图3为内置在图I和图2所示的光测定部中的部件的放大立体图。图4为图I和图2所示的检查盒式容器的放大立体图。图5为显示容纳在图4所示的检查盒式容器中的各种吸头(日文★ )的立体图。图6为图I和图2所示的检验体检查装置的处理流程图。图7为将第2检验体检查装置的主要部件从壳体中取出后显示的立体图。图8为将第3检验体检查装置的主要部件从壳体中取出后显示的立体图。图9为将图8所示的光测定部和温度控制器的一部分切缺后显示的放大立体图。图10为将第4检验体检查装置的主要部件从壳体中取出后显示的立体图。图11为将图10所示的光测定部和温度控制器的一部分切缺后显示的放大立体图。图12为显示图11所示的盖的放大立体图。图13为将图12所示的盖的一部分切缺后显示的立体图。图14为将第5检验体检查装置的包括4个检查盒式容器在内的主要部件从壳体中取出后显示的示意图。图15是通过用表面张力小的材料涂敷反应容器的内壁，使油性成分的表面平坦化的概念图。a :显示未涂敷内壁的反应容器I中的反应溶液2和油性成分3的状态的截面图。b :显示内壁上具有涂敷4的反应容器I中的反应溶液2和油性成分3的状态的截面图。图16显不反应容器的开口面的突光强度分布。16-1 :未处理反应容器的开口面的荧光强度分布。 未处理容器、仅有荧光水溶液。■未处理容器、荧光水溶液+矿物油。16-2 :用疏水疏油处理剂处理的反应容器的开口面的荧光强度分布。 处理容器、仅有荧光水溶液。■处理容器、荧光水溶液+矿物油。
具体实施例方式下面，对本发明的实施方式更详细说明。本发明提供一种用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其在反应中为液体、反应终止后通过化学变化或温度变化成为固体。另外，本发明提供一种用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其熔点为0-15°C。进而，本发明提供一种用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其熔点为5-10°C。本发明的组合物可以含有矿物油、硅油、其它化学合成油脂、它们的组合等。矿物油为源自石油的油，可以列举液体石蜡、固体石蜡等。硅油是含有硅氧烷键为2000以下的直链结构的分子的油，大致可分为直接硅油(日文> 卜 > 一卜一 > 才、11 )和改性娃油，可以为其中的任一种。为了使本发明的组合物在反应中为液体、在反应终止后通过化学变化成为固体，可以按照熔点为室温或反应温度(例如，约50°C)以下的方式调整成分的组成，进而也可利用固化剂。作为熔点为室温或反应温度以下的组合物，可以列举液体石蜡、矿物油等。作为固化剂，可以列举高熔点(室温以上)石蜡(例如，熔点44_46°C的固体石蜡
坐、坐寸/ 寸ο为了使本发明的组合物在反应中为液体、在反应终止后通过温度变化成为固体，可以按照组合物的熔点为0-15°C、优选为5-10°C的方式调整成分的组成。例如，可以对于液体石蜡1，添加固体石蜡(熔点44-46°C ) 5. 0-15. O质量％，由此使组合物的熔点为_10 40。。。本发明的组合物只要添加仅完全覆盖容器中的核酸扩增反应液与空气接触的面的量即可，可以优选添加仅完全覆盖容器中的核酸扩增反应液与空气接触的面的最低量的I. I至3倍、更优选为I. 5至2倍的量。通过使本发明的组合物层叠在核酸扩增反应溶液的上层，可以防止反应溶液的蒸发。如此，通过利用本发明的组合物封入反应溶液，在保证与盖或封条同等或以上的密封性的同时，由于不使气体介入至组合物与反应溶液之间，因此不产生模糊不清、或减少模糊不清。
本发明提供一种包括使上述组合物层叠在核酸扩增反应溶液的上层的工序的核酸扩增方法。另外，本发明还提供一种包括在核酸扩增反应终止后使组合物固化的工序的核酸扩增方法。通过在核酸扩增反应终止后使上述组合物固化，可以容易废弃反应溶液，并且可以防止由反应液的飞溅、操作失误等引起的污染或沾染。固化方法如上。如果使用于防止反应溶液在核酸扩增反应容器中蒸发的组合物(例如，矿物油或硅油等油性成分)层叠在反应溶液的上层 ，则组合物与空气之间的界面形状呈上凹(图15a)，因此光散射，均匀受光面积变小(图16-1 ■)。其结果，产生测定精度变低这样的问题。为了解决该问题，采用了如下的组合。·反应容器和用于防止反应溶液的蒸发的组合物的组合，所述反应容器为防止核酸扩增反应容器中的反应溶液蒸发用的组合物与空气之间的界面形状呈水平或上凸的反应容器。·反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合，所述反应容器为反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的反应容器。·反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合，所述反应容器为反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的80%的反应容器。因此，本发明提供一种核酸扩增方法，其采用用于防止反应溶液在核酸扩增反应容器中蒸发的组合物与空气之间的界面形状呈水平或上凸的反应容器、和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合。另外，本发明提供一种核酸扩增方法，其采用反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的反应容器、和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合。润湿张力试验方法在JIS K6768中有规定。进而，本发明提供一种核酸扩增方法，其采用反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的80%的反应容器、和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合。作为用于防止反应溶液在核酸扩增反应容器中蒸发的组合物的与空气之间的界面形状呈水平或上凸的反应容器、反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的反应容器、以及反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的80%的反应容器，可以列举用聚四氟乙烯、四氟乙烯-全氟烷基乙烯醚共聚物、四氟乙烯-乙烯共聚物等、以及用含氟丙烯酸树脂、含氟硅烷、其他氟导入型合成树脂等表面张力小的涂敷剂涂敷内壁的反应容器。反应容器的材质可以为聚丙烯、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚酯、尼龙等中的任一种材质。涂敷厚度没有特别限定，但以Iym左右为宜。在涂敷剂为含氟硅烷的情况下，为了增强密合性，优选进行底涂(primer)处理。作为底涂，可以列举液态玻璃等。用于防止反应溶液在核酸扩增反应容器中蒸发的组合物的与空气之间的界面形状呈水平或上凸的反应容器可以为反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的反应容器、优选为反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的80%的反应容器。在本发明的核酸扩增方法中，用于防止反应溶液蒸发的组合物除了本发明的上述组合物之外可以是为了防止反应溶液的蒸发而使用的公知的组合物(例如，矿物油(应用生物系统公司制)、美国专利第5411876号说明书、美国专利第5576197号说明书、美国专利第5599660号说明书、美国专利第5413924号说明书、日本特开2007-275005号公报、日本特开2007-175006号公报等中所记载的油状成分)。作为用于防止反应溶液在核酸扩增反应容器中蒸发的组合物的与空气之间的界面形状呈水平或上凸的反应容器、和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合的例子，可以举出由株式会社Fluoro Technology公司制氟系涂敷剂FS-1010涂敷内壁表面的Roche公司制PCR管、和应用生物系统公司制矿物油等。本发明的组合物也可以被容纳在核酸扩增用预包装试剂中。 本发明提供一种容纳用于防止反应溶液蒸发的组合物的核酸扩增用预包装试剂，所述试剂包含以下的(I) (3)中任一项所述的防止反应溶液蒸发的组合物。(I) 一种用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其在反应中为液体、在反应终止后通过化学变化或温度变化成为固体。(2) 一种用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其熔点为 0-15。。。(3) 一种用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其熔点为 5-10。。。(I) (3)的组合物如上。本发明的预包装试剂可以包括反应容器。反应容器如上所述。本发明提供一种容纳反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物的核酸扩增用预包装试剂，其中，反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合为(la)_(3a)中任一项所述的组合。(Ia)用于防止反应溶液在核酸扩增反应容器中蒸发的组合物的与空气之间的界面形状呈水平或上凸的反应容器、和用于防止反应溶液的蒸发的组合物的组合。(Ib)反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的反应容器、和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合。(Ic)反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液蒸发的组合物的表面张力的80%的反应容器、和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合。(Ia) (Ic)的组合物和反应容器如上。本发明的预包装试剂可以进一步包括核酸提取试剂、核酸扩增反应液等。本发明的组合物、预包装试剂及核酸扩增方法可以利用于手动操作，也可以利用于核酸扩增自动化装置。本发明提供一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增、检测的装置，其可以在扩增及检测工序中，由用于防止蒸发的组合物密封核酸反应溶液，隔着该组合物光学地检测核酸的扩增。另外，本发明还提供一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增、检测的装置，其可以在扩增及检测工序中，由用于防止蒸发的组合物密封核酸反应溶液，在反应终止后，使该组合物固化，而防止反应溶液的泄漏、飞溅等。本发明的装置只要是能够利用上述的⑴至(3)中任一项所述的用于防止反应溶液蒸发的组合物来防止反应溶液蒸发的装置即可。另外，本发明的装置也可以是能够使用上述的(Ia)-(IC)中任一项所述的组合作为反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合的装置。另外，本发明提供一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增、检测的装置，其可以容纳上述的预包装试剂。
接着，基于图I至图6，对连续进行从检验体中提取核酸、扩增、检测的装置(以下，称为“第I检验体检查装置”)10进行说明。该检验体检查装置10例如由长度250 400mm(X轴方向)、宽度70 100mm(Y轴方向)、高度300 500mm(Z轴方向)左右的书状(日文々状)壳体12包围。在该壳体12内具备由透光性部件形成的检查盒式容器14，其排成一列地设有容纳有或能够容纳检验体和该检验体的检查中所用的I种或2种以上的试剂溶液等的多个凹部22 (在该例中为10个)、和容纳有作为检查用器具的多种(在该例中为3种)吸头的吸头容纳部20，且显示识别或管理该检验体的检验体信息和检查内容的检查信息被表示在作为可视记录介质的封条24上；自动检查部(15、19)，其用于使容纳于该检查盒式容器14中的检验体和上述试剂反应而得到作为规定的光学状态的发光；光测定部17，其对作为由该自动检查部得到的检查结果而产生的上述发光进行测定；数码相机28，其拍摄包括上述检验体信息和上述检查信息的显示在上述检查盒式容器14上的内容而得到图像数据；热转印印刷机机构21，其能够将检查结果打印到上述检查盒式容器14的上述封条24上的空白处；板52，其设有用于控制上述自动检查部(15、19)、光测定部17、数码相机28、以及热转印印刷机机构21的CPU等集成电路。上述检查盒式容器14可拆装地被装填到与嵌装板16连结的装填箱18中，所述嵌装板16按照能够通过手动从上述壳体12向该壳体12外拉出的方式设置。设有上述自动检查部(15、19)、上述检查盒式容器14、光测定部17的室与设置有上述板52的室由隔板51隔开，从而防止由被吸引排出的液体的飞沫等导致的电路的破坏或污染。换气用风扇54被设置成贯通该隔板51，并以贯通设有上述板52的室的壳体12的方式设置了另一个换气用风扇56。上述自动检查部(15、19)具备分注器的注嘴头15和移动机构19，该移动机构19能够使上述注嘴头15相对于容纳在上述壳体12内的上述检查盒式容器14移动。上述分注器的上述注嘴头15具备X轴移动体11，其能够通过上述移动机构19、相对于容纳在壳体12内的上述检查盒式容器14沿着相当于其长度方向的X轴方向移动；Z轴移动体13，其被设置成能够相对于该X轴移动体11沿着上下方向由导柱41导引而移动。在上述X轴移动体11上，螺合有与上述Z轴移动体13连结的螺母部，可旋转式安装有使该Z轴移动体13沿着上下方向移动的后述的Z轴移动用滚珠丝杠43，并且安装有上述导柱41以及介由该导柱41安装的支撑板39。在该注嘴头15中具备注嘴30，其被安装于上述Z轴移动体13，并通过以从侧面突出的方式设置的气体胶管31与进行气体的吸引和排出的汽缸连通；电动机40，其用于驱动上述汽缸内的活塞；以及滚珠丝杠42，其以可旋转方式安装。另外，安装在上述X轴移动体11上的上述支撑板39可旋转式支撑上述滚珠丝杠42，并且在其下侧，以能够沿着前后方向移动的方式支撑吸头拆装板48，在该吸头拆装板48上，为了将该载体封入吸头26等吸头从上述注嘴30拆装，而形成有大于该注嘴30的直径且小于上述吸头的最粗部分的外径的U字状孔，在该支撑板39的上侧，沿着前后方向驱动该吸头拆装板48的电动机38被安装于述X轴移动体11。上述数码相机28藉由相机支撑板29安装在上述X轴移动体11上，使上述注嘴头15移动至能够拍摄容纳在该壳体12内的上述检查盒式容器14的上述封条24上的全部的检验体信息和检查信息的位置。使该分注器的注嘴头15相对于容纳在上述壳体12内的上述检查盒式容器14移动的移动机构19具备轨道44，其与上述注嘴头15的上述X轴移动体11配合，沿着上述检查盒式容器14的长度方向、即X轴方向进行导引；X轴移动用电动机58，其使该注嘴头15沿着X轴方向移动；上述导柱41，其沿着上下方向、即Z轴方向导引上述Z轴移动体13 ;上述Z轴移动用滚珠丝杠43 ;以及Z轴移动用电动机。需要说明的是，上述汽缸、上述滚珠丝杠42及上述电动机40相当于吸引排出机构。此外，上述导柱41、上述Z轴移动用滚珠丝杠43、Z轴移动用电动机相当于移动机构19内的Z轴移动机构。上述光测定部17具备吸头插入部34 ;和光电部32，其具有至少I个将接受到的荧光转换成规定电信号的光电倍增管等光电元件。上述热转印印刷机机构21通过上述板52与上述光测定部17连接，其接收与该光测定部17的测定结果对应的电信号以在上述检查盒式容器14的上述封条24上进行打印。该热转印印刷机机构21优选如下设置在将上述检查盒式容器14插入到该壳体12内时，该热转印印刷机机构21位于上方，以使其不与该检查盒式容器14接触，并且通过容纳该检查盒式容器14，从而例如利用凸轮机构下降，使该热转印印刷机机构21的打印头21a位于该检查盒式容器14的上述封条24上的规定的空白部分。作为该打印头21a，由规定位数的数码化数字(日文7 >数字)形成，通过对打印头21a的数码化数字的规定段进行加热，而在由热敏介质形成的上述封条24上自动写入对应数码化数字。图2表示通过手动将上述检验体检查装置10的上述检查盒式容器14从上述壳体12拉出后的状态。需要说明的是，为了便于说明，除去了上述热转印印刷机机构21。装填有上述检查盒式容器14的上述装填箱18被设置成沿着该装填箱18的长度方向、即沿着X轴方向伸长的导引部件18a由在上述壳体12内沿着X轴方向铺设的导轨23导引而能够通过手动沿着X轴方向移动，由此能够将该检查盒式容器14完全容纳在该壳体12内。另外，优选在该导引部件18a及上述热转印印刷机机构21上，设置上述凸轮机构，以使该容器14的插拔与该机构21的上下移动进行联动。另外，在上述注嘴头15的上述注嘴30上，可拆装式安装有载体封入吸头26，该载体封入吸头26在内部容纳有作为多个载体的粒子26c。上述光测定部17还具备测定用块36，其在边缘形成有半圆状孔36a并固定于上述光电部32 ;和测定板35 :在该测定用块36的下侧且上述吸头插入部34的上方，在其边缘形成有长孔35a，并能够通过电磁铁沿着该长孔35a的长轴方向(X轴方向)向前后进退。设置在该测定板35的下方的上述吸头插入部34被形成为箱状，以便通过由上述半圆状孔36a和长孔35a组合而成的空隙部分下降的上述载体封入吸头26的细径管26a能够通过其方孔34a插入。上述测定板35、测定用块36和上述光电部32在测定时相对于上述壳体12固定，使上述载体封入吸头26相对于上述壳体12上升或下降，由此扫描测定多个粒子26c。 图3表示内置在上述光测定部17中的光学系统。该光学系统例如为适于测定化学发光的装置，其设有3组光纤37a、37b、37c ;和在该光纤前端设置的由透镜等构成的受光端33a、33b、33c。上述受光端33a、33b配置在上述测定板35的上述长孔35a的侧壁上，上述受光端33c配置在上述测定用块36的半圆状孔36a的侧壁上，这些所述受光端33a、33b、33c从3个方向呈放射状地包围上述载体封入吸头26的细径管26a。上述测定板35在插入上述载体封入吸头26时,利用电磁铁所产生的磁力使其向前方向移动，而扩大由长孔35a和半圆状孔36a形成的空隙部分的水平截面积；在测定时，使上述测定板35往后方移动，以使其与插入到长孔35a内的上述载体封入吸头26接近，而缩小上述水平截面积。图4放大表示上述检查盒式容器14。在该检查盒式容器14的基板14a上，设置有吸头容纳部20的开口部和凹部22的开口部。该各凹部22的容量例如为Icc至几cc左右，例如为2cc。在吸头容纳部20中，该例子中为3个吸头、即分注吸头25、载体封入吸头26、以及穿孔用吸头27的安装用开口部朝上，以通过上述注嘴30的下降及插入形成可安装状态，分别容纳在相应深度的筒体20a、20b,20c内。在10个凹部22中，容纳有检验体、用于该检验体的检查中的I种或2种以上的试剂溶液，该开口部由能够以上述穿孔用吸头27穿孔的I张膜密封。另外，对于上述吸头容纳部20的开口部，由可通过人工剥离的封条进行密封，在使用时将该封条剥离后进行使用。另外，上述检查盒式容器14可以以容纳有用于上述检验体的检查的I种或2种以上的试剂溶液(包含用于防止核酸扩增反应中核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物)的形态、以预包装试剂形式提供给用户。在上述预包装试剂中也可以包含上述载体封入吸头26 (相当于本发明中的反应容器)等吸头。在该检查盒式容器14的上述基板14a的作为上述介质安装部的封条贴合区域14b中，如上所述，可拆装式粘贴有封条24，该封条24可视地显示有检验体信息(24a、24b)和表示检查内容的检查信息(24c、24d、24e)。在此，在上述检验体信息(24a、24b)中，例如设有将患者名用手写记入并显示的栏24a、显示患者识别号码的栏24b，在检查信息(24c、24d、24e)中，例如设有显示检查项目的栏24c ;显示LOT号码的LOT号码栏24d，所述LOT号码显示出预先容纳在上述检查盒式容器14中的I种或2种以上的各试剂的制造场所、制造时期、有效期限、制造试剂数、保管场所、品质等管理信息；以及备注栏24e，例如，将由上述光测定部17测定的检查结果记入并显示的栏。作为上述检查项目，例如有TSH(甲状腺刺激激素)、体内炎症、过敏等的检查，如图3所示，例如以二维代码显示。另外，标号24f为在将该封条24从上述基板14a剥离时的捏持部。图5表示容纳在上述检查盒式容器14的吸头容纳部20中的3种吸头(25、26、27)。如图5(A)所示，分注吸头25通过吸引液体而将液体容纳在吸头内，并在上述凹部22之间移动而排出容纳的液体，从而用于该凹部22间的液体移送等。该分注吸头25具备细径管25a，其具有尖端可插入到上述凹部22内的粗细；粗径管25b，其与上述细径管25a连通，在后端具有能够安装上述注嘴30的安装用开口部；和多个突条25d，其沿着轴向平行设置在该粗径管25b的后端部。如图5(B)所示，对于上述载体封入吸头26而言，多个(在该例子中为43个)作为载体的粒子26c在能够插入到上述凹部22内的粗细的上述细径管26a内排成一列，在各粒子上，固定有能够与用荧光标记的目标物质结合的结合物质，通过在位置26d、26e上对该细径管26a进行敛缝而被封入在内部。该细径管26a藉由设有仅使空气通过的过滤器的过滤器部26f与粗径管26b连通，该粗径管26b的开口部以能够安装到上述注嘴30的方式设置。在粗径管26b的周围，沿着轴向平行地设置有多个突条26g。如图5 (C)所示，穿孔用吸头27具有锐利的尖端部27a，以对将上述检查盒式容器14的上述凹部22的开口部密封的膜进行穿孔，位于后端部27b的开口部能够安装到上述注嘴30上，在后端部27b的外周，沿着轴向平行地设置有多个突条27c。另外，对于这些吸头而言，细径管或尖端部的长度例如为Icm至IOcm,粗径管的长度例如为Icm至IOcm,上述粒 子的直径例如为O. Imm至3mm。如此，上述细径管26a的内径是可以将该粒子保持在一列的尺寸，例如使其具有约O. 2mm至6mm左右的内径。接着，基于图6，对检验体检查装置10的动作进行说明。如图6(A)所示，在步骤SI中，用手拉出该检验体检查装置10的壳体12的嵌装板16。如图6(B)所示，在步骤S2中，将上述装填箱18向壳体12的外部展开。如图6(C)所示，在步骤S3中，将预先容纳有作为检查对象的检验体、检查用试剂以及吸头的上述检查盒式容器14装填到上述装填箱18内。此时，在该检查盒式容器14的上述封条24上，用手写记录有属于上述检验体信息的患者的姓名，预先记载了表示检查内容的检查信息。如图6(D)所示，在步骤S4中，用手将上述装填箱18及装填后的上述检查盒式容器14插入并容纳在上述壳体12内。在图6(D)的状态下，进行以下所示的处理。在步骤S5中，上述注嘴头15移动至上述检查盒式容器14的吸头容纳部20，使上述注嘴30位于穿孔用吸头27的正上方。使上述注嘴30沿着Z轴方向下降，将该注嘴30的尖端插入而压入安装于上述穿孔用吸头27的开口部。在步骤S6中，使安装有该穿孔用吸头27的该注嘴30依次位于该检查盒式容器14的各凹部22的正上方，然后使其下降，由此对覆盖了 10个各凹部22的膜进行穿孔。在步骤S7中，当全部凹部22的穿孔结束时，该注嘴30移动至容纳有上述吸头容纳部20的上述穿孔用吸头27的位置，使上述吸头拆装板48的U字状的槽接近上述注嘴30后，使该注嘴30沿着上面方向(Z轴方向)移动，由此在上述吸头容纳部20的筒体20c中拆装上述穿孔用吸头27。在步骤S8中，使上述注嘴30移动至上述吸头容纳部20容纳有分注吸头25 (或载体封入吸头26)的位置的正上方，使上述注嘴30沿着Z轴方向下降，使该注嘴30的尖端插入而压入安装于上述分注吸头25 (或上述载体封入吸头26)的开口部。接着，将另一个(第2)检验体检查装置70示于图7。该检验体检查装置70与第I检验体检查装置的不同之处在于，代替第I检验体检查装置10中所用的上述光测定部17，使用光测定部77。该光测定部77具备上述光电部32，其设有至少I个上述光电元件；扫描测定部74，其具有能够供上述载体封入吸头26的细径管26a插入的孔76，并被设置成与上述光电部32连接的光纤37a、37b、37c的各受光端33a、33b、33c能够沿着通过上述孔76插入的上述细径管26a的轴向移动，所述上述光电部32以包围通过上述孔76插入的上述载体封入吸头26的细径管26a的方式设置。即，在测定时，上述各受光端33a、33b、33c相对于上述壳体12不固定而能够相对移动，在该点上，与第I检验体检查装置的光测定部17不同。图8表示另一个(第3)检验体检查装置80。该检验体检查装置80与第I和第2检验体检查装置10、70主要的不同点在于设有磁力机构79，其具有磁石106，该磁石106被设置成能够与该细径管25接触分离，以使得能够对分注吸头25的细径管25a施加磁力并且除去磁力；温度控制器82，其对设置在检查盒式容器84中的后述的凹部96进行温度控制；以及盖移动机构86，其用于以盖92密封该凹部96。在此，凹部96相当于本发明中的反应容器。另外，上述检查盒式容器84可以以容纳有用于检验体的检查的I种或2种以上的试剂溶液(包含用于防止核酸扩增反应中核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物)的形态、作为预包装试剂被提供给用户。该检验体检查装置80与第I和第2检验体检查装置10、70同样地装入到上述壳 体12内。在该壳体12内具备由透光性部件形成的检查盒式容器84，其排成一列地设有容纳有多种(在该例中为容量不同的2种分注吸头25、125和穿孔用吸头27这3种)吸头的多个吸头容纳部20、容纳有或者能够容纳检验体和检验体的检查中所用的I或2种以上的试剂溶液的多个(在该例中为10个)凹部22、以及与凹部22隔开设置的进行温度控制的凹部96，且显示识别或管理该检验体的检验体信息和检查内容的检查信息被表示在作为可视记录介质的封条94上；自动检查部(85、19)，其用于使容纳在该检查盒式容器84内的检验体和上述试剂反应而得到规定的发光；光测定部177，其对作为由该自动检查部得到的检查结果而产生的上述发光进行测定；数码相机28，其拍摄包括上述检验体信息和上述检查信息在内的被表示于上述检查盒式容器84上的内容而得到图像数据；作为写入机构的热转印印刷机机构21 (参照图I)，其能够将检查结果打印到上述检查盒式容器84的上述封条94上的空白处；上述磁力机构79 ;上述温度控制器82 ;上述盖移动机构86 ;板52，其设有用于控制上述自动检查部(85、19)、光测定部177、数码相机28、热转印印刷机机构21、磁力机构79、温度控制器82和盖移动机构86的CPU等集成电路。如图I、图2所示，上述检查盒式容器84被设置成能够通过手动从上述壳体12向该壳体12外拉出。需要说明的是，进行上述检查盒式容器84的温度控制的凹部96的容量例如为O. 2cc。上述自动检查部(85、19)具备分注器的注嘴头85和移动机构119，该移动机构119能够使上述注嘴头85相对于容纳在上述壳体12内的上述检查盒式容器84移动。上述分注器的上述注嘴头85具备X轴移动体81，其能够通过上述移动机构119、相对于容纳在壳体12内的上述检查盒式容器84沿着相当于其长度方向的X轴方向移动；Z轴移动体83，其被设置成能够相对于该X轴移动体81沿着上下方向由导柱111导引而移动。在上述X轴移动体81上，螺合有与上述Z轴移动体83连结的螺母部，可旋转式安装有使该Z轴移动体83沿着上下方向移动的后述的Z轴移动用滚珠丝杠113，并且安装有上述导柱111以及介由该导柱111安装的支撑板89。在该注嘴头85具备注嘴100，其被安装于上述Z轴移动体83，并通过设置在侧面的气体胶管101而与进行气体的吸引和排出的汽缸连通；电动机110，其用于驱动述汽缸内的活塞；以及滚珠丝杠112，其以可旋转方式安装。另外，安装在上述X轴移动体81上的上述支撑板89可旋转式支撑上述滚珠丝杠113，并且在其下侧，以能够沿着前后方向移动的方式分别支撑吸头拆装板118和磁石106，在所述吸头拆装板118上，为了将上述分注吸头25等吸头从上述注嘴100拆装，而形成有大于该注嘴100的直径且小于上述吸头的最粗部分的外径的U字状孔，所述磁石106被设置成能够与安装在上述注嘴100上的分注吸头25的细径管25a接触分离，能够从细径管25a的外部对细径管25a施加磁力并且除去磁力，在该支撑板89的上侧，驱动该吸头拆装板118的电动机108和驱动该磁石106的电动机109被安装于上述X轴移动体81。该磁石106和电动机109相当于磁力机构79。数码相机28藉由相机支撑板99安装在上述X轴移动体81上，使上述注嘴头85移动至能够拍摄容纳在该壳体12内的上述检查盒式容器84的上述封条94上的全部的检验体信息和检查信息的位置。使上述分注器的注嘴头85相对于容纳在上述壳体12内的上述检查盒式容器84·移动的移动机构119具备轨道44，其与上述注嘴头85的上述X轴移动体81配合，沿着上述检查盒式容器84的长度方向、即X轴方向进行导引；X轴移动用电动机58，其使该注嘴头85沿着X轴方向移动(参照图I);上述导柱111，其沿着上下方向、即Z轴方向导引上述X轴移动体83 ;上述Z轴移动用滚珠丝杠113 ;以及Z轴移动用电动机。需要说明的是，上述滚珠丝杠112及上述电动机110相当于吸引排出机构。此外，上述导柱111、上述Z轴移动用滚珠丝杠113、Z轴移动用电动机相当于移动机构内的Z轴移动机构。另外，本检验体检查装置80还包括作为写入机构的热转印印刷机机构21。关于该热转印印刷机机构21如前所述。上述盖移动机构86具备盖92，其用于覆盖上述凹部96的开口部；臂93，其被设置成一端具有该盖92，另一端由旋转轴进行轴支撑，能够通过该旋转轴旋转90度；旋转驱动部95，其设有驱动上述旋转轴的电动机。此外，该检验体检查装置80还可以使用注嘴100来实现该盖92的按压、振动或移动，所述注嘴100能够通过包含上述Z轴移动机构在内的移动机构119使上述盖92沿着Z轴方向、X轴方向、Y轴方向进行按压、振荡或移动，所述盖92密封上述检查盒式容器84的凹部96的开口部。即，通过包含上述Z轴移动机构在内的移动机构119驱动的上述注嘴100相当于盖密封时作用机构。此时，上述盖92优选相对于上述旋转轴由弹性力向Z轴方向赋能而被支持。如图9所示，上述温度控制器82具备温度控制块98，在其中央穿设有具有与上述检查盒式容器84的上述凹部96嵌合的形状和尺寸的尖头的嵌合孔作为上述凹部容纳孔；珀耳帖(Peltier)元件部97，其设有作为上述加热冷却部的珀耳帖元件，所述加热冷却部被设置成与上述温度控制块98接触；翅片103，其设置在该珀耳帖元件部97的下侧；风扇容纳框体102，其设置在该翅片103的下侧；并且从上述嵌合孔的底部通过上述珀耳帖元件部97再通过翅片103延伸的照射用光纤74a和6条受光用光纤74b中，该照射用光纤74a的一端与激发光用光源75b连接，上述受光用光纤74b的一端与光电倍增管72b连接，这些光纤74a、74b的另一端74c以上述照射用光纤为中心被捆扎在一起而其顶端位于作为上述凹部容纳孔的上述嵌合孔的底部。
在此，上述光纤74a，74b通过上述光测定部177的光纤容纳部174与内置在光电、光源部72的上述激发光用光源72a和上述光电倍增管72b连接。接着，对第3检验体检查装置80的动作进行说明。代替注嘴头15使用注嘴头85，代替注嘴30使用注嘴100，代替检查盒式容器14使用检查盒式容器84，除了这些点之外，与步骤SI至步骤S8中的说明相同。
在图6(D)的状态下，进行以下所示的处理。在此，说明对DNA或基因组进行温度控制并进行PCR处理时的动作。在上述检查盒式容器84的凹部22a内，例如容纳有从被检者采取的口腔粘膜等检验体。在凹部22b内，容纳有基因组提取用试剂。在凹部22c内，容纳有磁性粒子悬浊液。在凹部22d内，容纳有分离液。凹部22e为空。在凹部22f至凹部22i内，容纳有作为PCR用试剂的含引物溶液等及清洗液。在凹部22j内，容纳有矿物油(相当于本发明中的用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物)。另外，在吸头容纳部20内，容纳有2种分注吸头25、125、及穿孔用吸头27。在步骤S9中，使上述注嘴100移动、下降至容纳在上述吸头容纳部20的端部的分注吸头25的位置，由此使其安装到该注嘴100以用于基因组提取，并通过上述移动机构119将该分注吸头25移动至凹部22b，使用吸引排出机构吸引对应的提取用试剂。将该分注吸头25移动至容纳有上述检验体的凹部22a，并将吸引到该分注吸头25内的该液体向该凹部22a内排出。另外，将该分注吸头25移动至凹部22c，吸引磁性粒子悬浊液，将该分注吸头25移动至上述凹部22a并排出，如果有其它的提取所需的试剂，则使用该分注吸头25将它们移送并排出至上述凹部22a。容纳在凹部22a内的这些混合液通过反复进行吸引和排出而进行搅拌及孵育，反应，使提取的DNA与上述磁性粒子的表面结合来进行捕获。在步骤SlO中，使用上述磁力机构79，使上述磁石106接近该分注吸头25的细径管25a，由此对内部施加磁场，使上述磁性粒子吸附于上述细径管25a的内壁，从而分离DNA。 在步骤SI I中，通过上述移动机构119，使基因组提取用分注吸头25以在内壁上吸附有捕获了上述DNA的磁性粒子的状态移动，使其位于容纳有上述分离液的凹部22d，将该分注吸头25的尖端口部插入到该凹部22d内，以在内壁上吸附有上述磁性粒子的状态反复吸引排出，由此从上述磁性粒子分离上述DNA。使含有从磁性粒子分离的DNA的该DNA溶液排出并容纳在空的上述凹部22e内，然后将该基因组提取用分注吸头25以在内壁上吸附有上述磁性粒子的状态移送至上述吸头容纳部20的原来容纳位置，使用上述吸头拆装板118进行拆装。在步骤S12中，使该注嘴头85移动，使该注嘴头85的上述注嘴100移动至容纳在上述吸头容纳部20的正中间的位置上的新的PCR用分注吸头125，然后，通过Z轴移动机构使该注嘴100下降，由此使上述注嘴100插入并安装在容纳的PCR用分注吸头125的安装用开口部。在步骤S13中，使该注嘴头85移动，如图9所示，使上述臂93旋转90度，由此使上述盖92在打开凹部96的开口部后使上述凹部96的开口部向外部露出。然后，使用PCR用分注吸头125，吸引容纳在凹部22f至凹部22i的PCR用试剂、例如含以荧光物质标记的引物溶液，分注至上述凹部96内从而进行容纳。反复进行以上的工序，直到分注完所需试剂为止。在步骤S14中，对上述分注吸头125进行了清洗后，使上述注嘴头85移动，吸引容纳在上述凹部22e内的已提取的DNA液后分注到上述凹部96内。其后，使用该分注吸头125，移动至上述凹部22j，吸引上述矿物油(相当于本发明的用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物)，排出到上述凹部96内从而进行导入。在步骤S15中，使上述盖92旋转90度而覆盖上述凹部96的开口部。在步骤S16中，使上述注嘴100下降而使用Z轴移动机构来按压上述盖92。在步骤S17中，利用上述温度控制器82，对于上述凹部96进行按照PCR法的温度 控制。对于按照PCR法的温度控制而言，为了使所放入的双链检验体DNA变性成单链，而将上述凹部96的温度设定为94°C，接着，为了使单链DNA与引物进行退火或杂交，而将上述凹部96的温度设定为50°C至60°C。然后，为了在单链上合成与其互补的DNA链，将上述温度设定为74°C，孵育，将这样的操作设为I个循环，反复进行规定次数，例如进行约几分钟，进行这样的温度控制。此时，使用设置在上述温度控制块98的作为上述凹部容纳孔的嵌合孔内的光纤74a、74b，照射激发光，经由光纤74b接受所产生的荧光强度，由光电倍增管72b改变成电信号，而测定该荧光强度。在步骤S18中，该测定结果由上述板52的控制部分析，该测定结果被发送到上述热转印印刷机机构21，该测定结果作为上述检查信息的一种通过上述打印头21a被打印到上述封条24的备注栏中，并以数字显示。在步骤S19中，上述数码相机28根据来自上述板52的指示信号，对上述检查盒式容器84的封条94上的包括检验体信息和检查信息在内、作为图像数据进行拍摄。此时，上述控制部的分析部从该图像数据中搜索能够分析的数据，如果在该图像数据中，搜索出表示上述检查信息中所包含的上述检查内容的二维条码数据，则对该二维条码数据进行分析，得到分析数据，并且上述控制部的上述数据组合部将该分析数据和上述图像数据组合而作为能够输出的数据存储在存储器中。在步骤S20中，安装于上述注嘴100的上述分注吸头125移动至上述吸头容纳部20，使该分注吸头125移动至容纳该分注吸头125的位置的正上方，使上述吸头拆装板118的U字状槽接近上述注嘴100，然后使该注嘴100向上方移动，由此在上述吸头容纳部20的筒体20b中拆装该分注吸头125。在步骤S21中，当上述检验体检查结束时，通过手动从上述壳体12中拉出装填有上述检查盒式容器84的装填箱18，将贴合在该检查盒式容器84的上述封条94剥离，粘贴到另外准备的管理用衬纸等上保存，该检查盒式容器84自身被废弃，但是能够通过在该壳体12内再装填新的检查盒式容器84，进行新的检验体的检查。根据本实施方式，能够使用上述移动机构对盖92进行按压等，因此能够使上述凹部96的开口部的密封可靠，并且能够防止模糊清漆且容易打开盖92。图10、图11表示另一个(第4)的检验体检查装置180。需要说明的是，对于与图8所示的检验体检查装置80相同的结构，标注同一标号或不进行标注，并省略说明。
本检验体检查装置180与图8所示的第3检验体检查装置80的不同之处在于，在注嘴头185中具备注嘴200，其藉由气体胶管201与进行气体的吸引排出的汽缸连通、且能够安装分注吸头25等；注嘴支撑体183，其与能够沿着Z轴方向移动的Z轴移动体83联动，且安装有上述该注嘴200 ;测定用棒172，其安装于该注嘴支撑体183，并为了从具有透光性的盖192的上方进行光的测定，而在内部设有受光用光纤174a的端部和照射用光纤174b的端部，所述盖192覆盖检查盒式容器184的上述凹部96的开口部(参照图11)。本检验体检查装置180除此之外与第3检验体检查装置80不同，不具有盖移动机构86，取而代之的是，将盖192预先容纳于检查盒式容器184的吸头容纳部120，而不是上述载体封入吸头26，通过上述Z轴移动机构使上述注嘴200和上述测定用棒172下降，使盖192安装到上述注嘴200的顶端或上述测定用棒172的顶端，以在按压等时或测定时使用。因此，关于检查盒式容器184，在能够将盖192容纳于吸头容纳部120这一点上也不同。另外，如图11所示，关于光测定部277和温度控制器182，也与第3检验体检查装置的光测定部177和温度控制器82不同。 对于该光测定部277而言，在上述测定用棒172内设有上述受光用光纤174a的端部和照射用光纤174b的端部，并且该受光用光纤174a的另一个端部与光电元件172a连接，上述照射用光纤174b的另一个端部与光源部172b连接。另外，上述温度控制器182仅具备温度控制块198，在其中央穿设有具有与上述检查盒式容器184的上述凹部96嵌合的形状和尺寸的尖头的嵌合孔作为上述凹部容纳孔；珀耳帖元件部197，其设有作为上述加热冷却部的珀耳帖元件，所述加热冷却部被设置成与上述温度控制块198接触；翅片203，其设置在该珀耳帖元件部197的下侧；风扇容纳框体102,其设置在该翅片203的下侧，而在上述嵌合孔的底部未设置光纤的端部，并且光纤未通过翅片203等。图12、图13表示上述盖192。该盖192具备安装用开口部193，其能够安装上述测定用棒172和注嘴200 ;和嵌合部194，其与上述凹部96的开口部嵌合。根据本检验体检查装置，可以不设置盖移动机构而用盖密封凹部96的开口部，因此可以简化装置的构造。另外，可能会被检验体污染的盖由于容纳于检查盒式容器内而可以在检查终止后如吸头那样与检查盒式容器一起进行处理，因此可以进行安全性高的管理。接着，基于图14，对另一个(第5)检验体检查装置进行说明。本检验体检查装置280具备设置在例如长度250 400mm (X轴方向)、宽度140 200mm(Y轴方向)、高度300 500mm(Z轴方向)左右的壳体内的如下部件平行地并列排列的2个检测盒284，其排成一列地排列有容纳有作为检验体和该检验体的检查中所用的I种或2种以上的检查用器具的多种(在该例中为3种)吸头的吸头容纳部220a、220b、220c，且显示识别或管理该检验体的检验体信息和检查内容的检查信息被表示在作为可视记录介质的封条224上；平行地并列排列的2个检查盒式容器384，其由透光性部件形成，排成一列地设有容纳有或者能够容纳检验体和检验体的检查中所用的2种以上的试剂溶液等的多个(在该例中为10个)作为容纳部的凹部322，并且显示识别或管理该检验体的检验体信息和检查内容的检查信息被表示在作为可视记录介质的封条324上；自动检查部(285、289)，其用于使容纳于2个该检查盒式容器384的检验体与上述试剂反应得到规定的光学状态(例如，发光)；光测定部，其对作为由该自动检查部得到的检查结果而产生的上述发光进行测定；数码相机228 ;热转印印刷机机构，其能够将检查结果打印到上述检查盒式容器284、384的上述封条224、324的空白处；板，其设有用于控制该上述自动检查部(285、289)、光测定部、数码相机228和热转印印刷机机构的CPU等集成电路。标号285a个别地表示主要设有使上述注嘴230沿着Z轴方向移动的Z轴移动机构的单元。在此，就2个盒式容器284而言，作为上述检查用器具，多种(在该例中为3种)吸头、即分注吸头225、载体封入吸头226和穿孔用吸头227分别被容纳或能够容纳在吸头容纳部220a、220b，220c内。关于分注吸头225，由于已经安装于上述注嘴头285的注嘴230，因此上述容纳部220a为空。在该2个盒式容器284的基板284a上，设有吸头容纳部220a、220b，220c的开口部。在该基板284a的作为介质安装部的封条贴合区域，可拆装式粘贴有封条224，在该封条224上设有检验体信息栏224a和表示检查内容的检查信息栏224b。在此，在上述检验体信息栏224a上预先印刷有QR码，并且设有手写记入栏，在检查信息栏224b上预先印刷有检 查信息，并且设有手写记入栏或打印用空白处。同样地，在2个盒式容器384的基板384a上，设有10个容纳有试剂溶液或检验体溶液的凹部322a-322j。在该基板384a的作为介质安装部的封条贴合区域，可拆装式粘贴有封条324，在该封条324上设有检验体信息栏324a和表示检查内容的检查信息栏324b。在此，在上述检验体信息栏324a上预先印刷有QR码，并且设置有手写记入栏，在检查信息栏324b上印刷有检查信息，并且设有手写记入栏、打印用空白处。需要说明的是，上述检查盒式容器384可以以在其基板384a上容纳有上述试剂溶液(包含用于防止核酸扩增反应中核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物)的形态、以预包装试剂形式提供给用户。在上述预包装试剂中可以包含上述载体封入吸头226 (相当于本发明中的反应容器)等吸头。另外，排列在该检验体检查装置中的全部盒式容器284、384被用于同一检查时，关于检查信息具有共同内容。此外，排成一列(沿着X轴方向)的检查盒式容器284、384列具有共同检验体信息，但其他列的检查盒式容器284、384列对应不同的检验体时，具有与上述检验体信息不同的检验体信息。作为上述自动检查部(285、289)，设有2个注嘴230、230，在各注嘴230上分别可拆装式安装有分注吸头225，各分注吸头225按照能够沿着上述2列的盒式容器284、384移动的方式设置。需要说明的是，标号244a、244b是用于使注嘴头285沿着X轴方向移动的轨道，其属于移动机构289。需要说明的是，在此，数码相机228被设置成能够通过具有沿着X轴方向的旋转轴的旋转机构228a旋转一定角度，由此能够用I台来应对2列检查盒式容器284、384。此夕卜，对于上述光测定部、热转印印刷机机构、光测定部，也设置成能够沿着Y轴方向移动，由此能用I台应对2列的检查盒式容器，从而将装置规模形成得紧凑。根据本实施方式，可以将多个检查并行处理，因此能够进行效率好且迅速的处理。以上说明的各实施方式是为了更好地理解本发明而具体说明的并不限制其他方式。因此，可以在不改变发明的要旨的范围内进行变更。例如，在上述实施方式中，仅对DNA的情况进行了说明，但是在作为其它核酸的RNA等检查中当然也能够适用。此外，对于以上的说明中所用的数值、次数、形状、个数、量等也并不限于这些情况。另外，作为上述检查盒式容器的构成，关于应容纳的吸头、盖、棒等的种类、吸头、盖、棒的构造或个数、凹部的个数或容量、或者检验体信息和检查信息的内容等，示出了例子，这些可根据检验体或检查内容来适当改变。另外，以上的各构成要素、例如各注嘴头、各种吸头、各盖、各注嘴、各温度控制器、各光测定部、各检查盒式容器或磁力机构等可以适当变形并任意组合。例如，可以使用上述载体封入吸头，并且使用具有温度得以控制的凹部的检查盒式容器及上述温度控制器。此外，上述的试剂、检验体或处理工序示出了例子，当然也可以使用其他试剂、检验体或处理工序。在以上的例子中，仅对将I列或2列的检查盒式容器装填到检验体检查装置中并使用的情况进行了说明，但并不限于该情况，当然也可以适用3列以上的情况。另外，在装填2列的检查盒式容器而使用的情况下，并不限于该例子，当然也可以将第I检查盒式容器并排装填而使用。 实施例下面，基于实施例，详细说明本发明，但本发明并不限于这些实施例。〔实施例I〕防蒸发组合物I.蒸发防止用油(低温凝固型)的制备将在60_80°C下进行加热熔解的、所需量(0.5、0.75、1.00、1.25或1.5(^)的固体石蜡(石蜡和光特级、mp :44-460C )与液态石蜡(液体石蜡，Sigma特级)10. OOg混合，制备蒸发防止用油。在以下的实验中，使用该蒸发防止用油作为样品。另外确认到，固体石蜡和液态石蜡具备以下的性能。·在核酸扩增反应容器中，填充水(50 μ L)和固体石蜡或液态石蜡(50、100、
200μ L)，测定核酸扩增反应中的重量损失的结果，可以抑制水重量残存率至99 %±0. 3%。·不溶于水(完全分离)。 液相比重小于水。·不阻碍核酸扩增反应。·液相(单一成分)的分光透过率(520nm、25°C )为90%以上。·无荧光(特别是，检测光波长附近)。·不需要特殊的废弃。2.蒸发防止用油的熔解(凝固)判定2-1.基于目视的透明化(白浊化)的确认、以及通过抹刀等的接触的凝固的确认用以下的方法测量I中制备的低温凝固型蒸发防止用油的熔点(凝固点)。 在应用生物系统公司制PCR容器MicroAmp (以下，试样容器)中，注入水和A_1至A-5的5种蒸发防止用油各20uL。·将上述试样容器安装至适合其外形的加热块，在AS ONE公司制恒温装置上调节温度。·使温度从60°C每次下降5°C，通过目视以及抹刀等的接触评价在各温度域的试样的性状。将结果不于表I。表I中，S表不固体,L表不液体。蒸发防止用油(样品ID:A_1,A-2，A-3，A-4，A-5)在液态时不白浊，白浊时变成固体，由液体到固体的相变化急剧。
[表I]
.......................jj^liV'MiciOABp 8- ell''
样品 _備和光特级和光特级温度循环.60°C； 5分钟—30:C: I分钟—-5'C步釋(保持時间I分钟/各步骤> - I I, *-J=l 投入前重
m (η)容器等3 K) 15 30 25 . 30 O ° 总重量为I)
..A-1 ^pMK)P|[nnw>| !JotI[|— οο%ΓS~ ……L —]—~Γ~~[—Γ~~ L — —Γ~ ~~~
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Α-3 8~10.001；|()| 1,50001 13.1)0 ! 15. ) ! SS I S …~~~ L-L 〔实施例2〕核酸扩增反应容器的润湿张力对荧光检测造成的影响的验证为了验证防止核酸扩增反应中反应液的蒸发而使用的矿物油的、与反应容器内壁的润湿性对荧光检测造成的影响，进行了以下的实验。I.核酸扩增反应容器的制备通过用疏水疏油处理剂(株式会社Fluoro Technology)涂敷Roche公司制白色PCR管的内壁(膜厚Iym以下)，从而进行使容器内壁的润湿张力降低的处理。与未处理的容器一起，制备了容器内壁的润湿张力不同的2种核酸扩增反应容器。按照JISK6768中所规定的方法，评价矿物油(应用生物系统公司制)对该2种反应容器的润湿性，结果可以确认到，就未处理容器而言，矿物油润湿扩展，与此相对，处理品的内壁不沾矿物油。2.未处理容器的荧光测定在I中所制备的2种反应容器中，注入含有O. 5uM的荧光物质(FAM)的水溶液(荧光水溶液)20uL,测定圆形开口部内的突光强度分布。突光检测用在同轴进行激发480nm、检测520nm的光纤来进行，该光纤通过反应容器的圆形开口部的中心，沿着横穿开口部那样的X轴进行扫描。接着，在该反应容器中，注入矿物油(应用生物系统公司制)20uL，进行同样的荧光测定。将结果示于图16-1。如果使矿物油层叠在荧光水溶液的上层，则反应容器开口部面内的荧光强度分布产生变化，得到最大的荧光强度的区域(有效区域)显著减少。3.处理容器的荧光测定对于I中所制备的低润湿张力的容器，与2同样进行计测的结果示于图16-2。反应容器开口部面内的荧光强度分布随着矿物油注入没有大的变化，未发现未处理品中所见到的有效区域的减少。将本说明书中所引用的所有出版物、专利以及专利申请以参考的方式直接地引入本说明书。工业应用性本发明可应用于利用PCR进行基因分析的医学领域、农学领域、理学领域、药学领域等。标号说明I :反应容器2 反应溶液3:油性成分
4 :涂敷10、70、80、180、280 检验体检查装置14、84、184、284、384 检查盒式容器15、85、185、285 注嘴头17、77、177、277 光测定部24、94、224 封条25、125、225 分注吸头26、226载体封入吸头(固相内置吸头)
28、228数码相机30、100、200、230 注嘴92、192 盖
权利要求
1.一种组合物，其用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发， 所述组合物在反应中为液体，在反应终止后通过化学变化或温度变化成为固体。
2.一种组合物，其用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发，所述组合物的熔点为0-15°C。
3.一种组合物，其用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发，所述组合物的熔点为5-10°C。
4.一种核酸扩增方法，其包括将权利要求I至3中任一项所述的组合物层叠在核酸扩增反应溶液的上层的工序。
5.一种核酸扩增方法，其包括在核酸扩增反应终止后使权利要求I至3中任一项所述的组合物固化的工序。
6.一种核酸扩增方法，其使用如下组合下述反应容器和用于防止反应溶液的蒸发的组合物， 所述反应容器为防止核酸扩增反应容器中的反应溶液蒸发用的组合物与空气之间的界面形状呈水平或上凸的反应容器。
7.—种核酸扩增方法，其使用如下组合下述反应容器和用于防止反应溶液的蒸发的组合物， 所述反应容器为反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液的蒸发的组合物的表面张力的反应容器。
8.—种核酸扩增方法，其使用如下组合下述反应容器和用于防止反应溶液的蒸发的组合物， 所述反应容器为反应容器内壁的润湿张力小于用于防止反应溶液的蒸发的组合物的表面张力的80 %的反应容器。
9.一种核酸扩增用的预包装试剂，所述预包装试剂容纳用于防止反应溶液的蒸发的组合物，所述试剂包含权利要求I至3中任一项所述的用于防止反应溶液的蒸发的组合物。
10.一种核酸扩增用的预包装试剂，所述预包装试剂容纳反应容器和用于防止反应溶液的蒸发的组合物，其中，所述反应容器和用于防止反应溶液蒸发的组合物的组合为权利要求6至8中任一项所述的组合。
11.一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其能够在扩增及检测工序中，由用于防止蒸发的组合物密封核酸反应溶液，隔着该组合物光学地检测核酸的扩增。
12.—种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其能够在扩增及检测工序中，由用于防止蒸发的组合物密封核酸反应溶液，反应终止后使该组合物固化，防止反应溶液的泄漏、飞溅等。
13.—种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其可以利用权利要求I至3中任一项所述的用于防止反应溶液的蒸发的组合物，防止反应溶液的蒸发。
14.一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其中，作为反应容器和用于防止反应溶液的蒸发的组合物的组合，可以采用权利要求6至8中任一项所述的组合。
15.一种连续进行从检验体中提取核酸、扩增以及检测的装置，其可以容纳权利要求9或10所述的预包装试剂。
全文摘要
本发明提供一种不使用盖体或粘接封条而能够密封PCR反应容器的组合物。所述组合物为用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其在反应中为液体、在反应终止后通过化学变化或温度变化成为固体。所述组合物为用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其熔点为0-15℃。所述组合物为用于防止核酸扩增反应中的核酸扩增反应溶液的蒸发的组合物，其熔点为5-10℃。
文档编号C12M1/00GK102947448SQ20118002911
公开日2013年2月27日 申请日期2011年6月22日 优先权日2010年6月22日
发明者杉元崇纪, 上田哲也, 濑川修, 小饭塚道典, 田岛秀二 申请人:环球生物研究株式会社