专利名称：一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法
技术领域：
本发明涉及一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，属于农业种植肥料的领域，尤其是微生物制剂培养技术领域。
背景技术：
嗜酸乳杆菌是乳酸菌家族中重要的一员，属于乳杆菌属的革兰氏阳性杆菌，广泛存在于动物的肠道中。嗜酸乳杆菌能分泌抗生物素类物质(嗜酸乳菌素(acidolin)、嗜酸杆菌素(acidophilin)、乳酸菌素(Iaetocidon)),对肠道致病菌产生拮抗作用，具有调节肠道菌群平衡、维护肠道健康和提高机体免疫力等功能，被认为是最理想的替代抗生素的益生菌。此外，嗜酸乳杆菌具有极强的耐酸、耐盐和耐胆汁能力，能在其它乳酸菌不能生长的酸性、高盐环境中生长繁殖，可以利用葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖进行同型发酵，除产生DL型乳酸外，发酵代谢物中还包括细菌素、维生素、小肽等，能提高钙、磷、铁的利用率，促进铁和维生素D的吸收，减少胆固醇的吸收，具有增强消化吸收、促进动物生长的功效。嗜酸乳杆菌有复杂的营养要求，比较难培养。目前国内外所报道的嗜酸乳杆菌的发酵培养基主要为牛奶加葡萄糖、蛋白胨、酵母浸膏等或完全由葡萄糖、蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸出物再加上其他物质组成，保持厌氧状态培养。用普通的培养基，如只用牛奶加葡萄糖或蔗糖，培养效果较差，菌数较少；而蛋白胨、牛肉浸膏、酵母浸出物等原材料较昂贵，用这种方法生产嗜酸乳杆菌成本一般比较高。
发明内容
本发明的目的，是为了克服传统嗜酸乳杆菌培养方法存在的发酵规模小、成本高的缺点，提供一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法。本发明的目的主要通过以下技术方案来实现一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于包括如下步骤I)备好菌种，该菌种由黑曲霉孢子和嗜酸乳杆菌组成，黑曲霉孢子、嗜酸乳杆菌的重量比例为8 9I;将黑曲霉孢子和嗜酸乳杆菌分别存放；2)备好培养基，该培养基由米糠、豆柏、NaCl和麸皮组成，各物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠30 35 %、豆柏15 20%、NaCl 0. 8 I %和麸皮44 54. 2%，将各物质组份混和后搅拌均匀；3)固体发酵，将培养基倒入固体发酵罐中，按培养基0. 5 1%。重量比例接入黑曲霉孢子，按培养基60% 70%重量比例加入水，相对湿度保持在50% 60%，不间断供入过滤空气，每小时换气量为发酵罐体积的50% 60% ;发酵24小时后，按培养基1%重量比例接入嗜酸乳杆菌，保持相对湿度与供气量不变，再培养48小时；4)产品分装，将培养物从发酵罐中移出，通过50°C流化床干燥处理10小时，再粉碎后分装得到成品。
本发明的目的还可以通过采取如下技术方案达到实现本发明目的的一种技术改进方案是步骤I)中，黑曲霉孢子的较佳含量可以为I X 1010个/克、嗜酸乳杆菌的较佳含量可以为I X 109个/克。实现本发明目的的一种技术改进方案是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠32%、豆柏17%、NaCl 0. 9%和麸皮50. 1%，将各物质组份混和后搅拌均匀。实现本发明目的的一种技术改进方案是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠30%、豆柏20%、NaCl 0. 8%和麸皮49. 2%，将各物质组份混和后搅拌均匀。
实现本发明目的的一种技术改进方案是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠35%、豆柏15%、NaCl 1%和麸皮49%，将各物质组份混和后搅拌均匀；实现本发明目的的一种技术改进方案是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠30%、豆柏15%、NaCl 0. 8%和麸皮54. 2%,将各物质组份混和后搅拌均匀。实现本发明目的的一种技术改进方案是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠30%、豆柏15%、NaCl 0. 8%和麸皮54. 2%,将各物质组份混和后搅拌均匀。本发明具有如下有益效果I、本发明由于采取了经申请人反复试验及验证的特定配比的组方，因此，可以较为理想的规模化培养，实现了工业化固体发酵，实现低成本、规模化培养，具有成本低、生产效率高的有益效果，可以大大满足市场需求。2、采用本发明所述方法培养出来的产品，可以用作畜禽动物饲料添加剂，具有提高动物采食量、调理肠道、预防腹泻、加快生长等功效。
具体实施例方式具体实施例I本实施例I所述嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，包括如下步骤I)备好菌种，该菌种由黑曲霉孢子和嗜酸乳杆菌组成，黑曲霉孢子、嗜酸乳杆菌的重量比例为8 9I;将黑曲霉孢子和嗜酸乳杆菌分别存放；2)备好培养基，该培养基由米糠、豆柏、NaCl和麸皮组成，各物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠32%、豆柏17%、NaCl 0. 9%和麸皮50. 1%，将各物质组份混和后搅拌均匀；3)固体发酵，将培养基倒入固体发酵罐中，按培养基0. 5 1%。重量比例接入黑曲霉孢子，按培养基60% 70%重量比例加入水，相对湿度保持在50% 60%，不间断供入过滤空气，每小时换气量为发酵罐体积的50% 60% ;发酵24小时后，按培养基1%重量比例接入嗜酸乳杆菌，保持相对湿度与供气量不变，再培养48小时；4)产品分装，将培养物从发酵罐中移出，通过50°C流化床干燥处理10小时，再粉碎后分装得到成品。
本实施例中，步骤I)中，黑曲霉孢子的较佳含量可以为1X1010个/克、嗜酸乳杆菌的较佳含量可以为I X 109个/克。本实施例的应用效果对20公斤仔猪应用结果表明，在饲料中添加2%。本产品，连续使用I个月，与对照组相比，生长速度提高12. 7%，饲料系数下降7. 9%，腹泻发生率下降61. 3%。具体实施例2:
本实施例2的特点是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠30%、豆柏20%、NaCl 0. 8%和麸皮49. 2%，将各物质组份混和后搅拌均匀。其余方法步骤同具体实施例I。具体实施例3 本实施例3的特点是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠35%、豆柏15%、NaCl I %和麸皮49%，将各物质组份混和后搅拌均匀。其余方法步骤同具体实施例I。具体实施例4 本实施例4的特点是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠30%、豆柏15%、NaCl 0.8%和麸皮54. 2%，将各物质组份混和后搅拌均匀。其余方法步骤同具体实施例I。具体实施例5 本实施例5的特点是步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量可以为米糠30%、豆柏15%、NaCl 0.8%和麸皮54. 2%，将各物质组份混和后搅拌均匀。其余方法步骤同具体实施例I。
权利要求
1.一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于 1)备好菌种，该菌种由黑曲霉孢子和嗜酸乳杆菌组成，黑曲霉孢子、嗜酸乳杆菌的重量比例为8 9 I ;将黑曲霉孢子和嗜酸乳杆菌分别存放； 2)备好培养基，该培养基由米糠、豆柏、NaCl和麸皮组成，各物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠30 35 %、豆柏15 20%、NaCl 0. 8 I %和麸皮44 54. 2%，将各物质组份混和后搅拌均匀； 3)固体发酵，将培养基倒入固体发酵罐中，按培养基0.5 1%。重量比例接入黑曲霉孢子，按培养基60 % 70 %重量比例加入水，相对湿度保持在50 % 60 %，不间断供入过滤空气，每小时换气量为发酵罐体积的50% 60% ;发酵24小时后，按培养基I %重量比例接入嗜酸乳杆菌，保持相对湿度与供气量不变，再培养48小时； 4)产品分装，将培养物从发酵罐中移出，通过50°C流化床干燥处理10小时，再粉碎后分装得到成品。
2.根据权利要求I所述的一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于步骤I)中，黑曲霉孢子的较佳含量为I X 1010个/克、嗜酸乳杆菌的较佳含量为1X109个/克。
3.根据权利要求I或2所述的一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠32%、豆柏17%, NaCl 0. 9 %和麸皮50. I %，将各物质组份混和后搅拌均匀。
4.根据权利要求I或2所述的一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠30%、豆柏20 %、NaCl 0. 8 %和麸皮49. 2 %，将各物质组份混和后搅拌均匀。
5.根据权利要求I或2所述的一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠35%、豆柏15%, NaCl I %和麸皮49 %，将各物质组份混和后搅拌均匀。
6.根据权利要求I或2所述的一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠30%、豆柏15%, NaCl 0. 8%和麸皮54. 2%，将各物质组份混和后搅拌均匀。
7.根据权利要求I或2所述的一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于步骤2)所述的培养基，该培养基的物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠30%、豆柏15%, NaCl 0. 8%和麸皮54. 2%，将各物质组份混和后搅拌均匀。
全文摘要
本发明涉及一种嗜酸乳杆菌的规模化培养方法，其特征在于1)备好菌种，该菌种由黑曲霉孢子和嗜酸乳杆菌组成，黑曲霉孢子、嗜酸乳杆菌的重量比为8～9∶1；2)备好培养基，该培养基由米糠、豆粕、NaCl和麸皮组成，各物质组份在培养基中的质量百分含量为米糠30～35％、豆粕15～20％、NaCl 0.8～1％和麸皮44～54.2％，将各物质组份混和后搅拌均匀；3)固体发酵，将培养基倒入固体发酵罐中，按培养基0.5～1‰重量比例接入黑曲霉孢子，按比例加入水，不间断供入过滤空气，发酵24小时后，按培养基1％重量比例接入嗜酸乳杆菌，保持相对湿度与供气量不变，再培养48小时。本发明实现了工业化固体发酵，实现低成本、规模化培养，具有成本低、生产效率高的有益效果。
文档编号C12N1/20GK102618470SQ201210093090
公开日2012年8月1日 申请日期2012年3月31日 优先权日2012年3月31日
发明者孙建新, 张金燕, 徐中文 申请人:广东绿百多生物科技有限公司