低分子量五味子多糖及其制备方法和用途的制作方法

文档序号:410020阅读:566来源:国知局
专利名称:低分子量五味子多糖及其制备方法和用途的制作方法
技术领域
本发明属于医药技术领域,涉及一种低分子量五味子多糖的制备方法及其在抗肝癌和提高机体免疫力方面的应用。
背景技术
恶性肿瘤是世界公认的对人类健康危害最严重的疾病之一,其危害程度仅次于心血管疾病。据国际癌症研究机构GL0B0CAN 2008统计报告报道(Jemal,A.,Bray, F.,Center, M. M. , Ferlay, J. , Ward,E., Forman,D.. Global Cancer Statistics. CA A CancerJournal for Clinicians. 2011,61 (2) ,69-90 ;GL0B0CAN 2008, Cancer Incidence andMortality Worldwide :International Agency for Research on Cancer ;Available at http://globocan. iarc. fr/.), 2008年,全球有1270万新发癌症病例,760万人死于癌症, 预测2030年,癌症死亡病例预计上升72%,死亡人数由2008年的760万上升至1300万人。可见,恶性肿瘤已是当今世界影响社会发展的重大问题之一。肝癌是常见的恶性肿瘤疾病,据统计(GL0B0CAN 2008, Cancer Incidence and Mortality Worldwide :InternationalAgency for Research on Cancer ;Available at http: //globocan. iarc. fr/. ) 2008 年全球有69. 4万人死于肝癌,其死亡率在全球范围内排第三位,且肝癌的发病率有增长趋势。治疗肿瘤的药物很多,但由于肿瘤细胞与正常组织细胞间缺少根本性的代谢差异,大多数抗肿瘤药在抑制或杀伤肿瘤细胞的同时也会对机体的某些正常细胞、组织和器官造成损害,对人体产生毒性,在很大程度上制约了药物的使用。因此,研究开发高效低毒抗肿瘤药物是当前研究的重点课题之一。多糖是一种天然高分子化合物,具有抗肿瘤、免疫调节、抗氧化等多种活性,且毒性低、安全性高,有着很好的抗肿瘤药物应用前景(庞春红.多糖药理作用研究进展.浙江中医药大学学报,2011,35(4) :639-640.)。于荣敏等申请了专利“一种具有抗肿瘤作用的红豆杉多糖的制备方法及用途”(申请号200910192993. 6),发现不同浓度的红豆杉多糖溶液对多种癌细胞(人乳腺肿瘤细胞MCF-7、人纤维瘤细胞HT1080、人宫颈癌细胞Hela、人慢性髓性细胞K562、人前列腺癌细胞PC3、人肝癌细胞SMMC7721、人急性早幼粒白血病细胞HL-60)均具有抑制作用,且抑制作用与浓度呈线性关系。朱振元等申请的专利“一种具有抗肿瘤活性的水溶性低分子虫草多糖及其制备方法和用途”(申请号200910070325. 6),发现该多糖对人肝癌细胞株Bel-7204和人胃癌细胞株SGC-7901的增殖有显著地抑制效果,对植入小鼠体内的S180肿瘤细胞的生长具有明显的抑制作用,并可提高机体免疫功能。五味子为木兰科五味子(Schisandra chinensis (Turcz. )Baill,俗称北五味子)或华中五味子(S. sphenanthera Rehd. et Wils,俗称南五味子)的干燥成熟果实,因其果实甘、酸、辛、苦、咸五味,故名五味子,又名五梅子、玄及、会及、山花椒等。具有收敛固涩、益气生津和补肾宁心之功效,用于久咳虚喘、梦遗滑精、遗尿尿频、久泻不止、自汗、盗汗、津伤口渴和心悸失眠等症,为中医常用滋阴强肾药,广泛应用于肝炎、神经衰弱等病的治疗。五味子资源丰富,含有木脂素、多糖、挥发油等多种活性成分,是一种开发前景广阔的药食兼用的中药材。多糖作为五味子中重要活性成分之一,现代药理学研究表明,其具有抗肿瘤、免疫促进、升白细胞、保肝、抗衰老和降血糖等多种药理作用(闻舒,仰榴青,赵婷,赵江丽,邹艳敏.五味子多糖的最新研究进展[J].江苏大学学报,(医学版),2009,19 (4)366-368.),已成为人们关注的焦点。朱蓓薇等申请的专利“五味子活性成分多糖的制备方法”(申请号200710159047. 2),提供了一种从五味子中提取活性成分多糖的方法。于赫等研究发现五味子粗多糖具有体内抗肿瘤活性,且可提高荷瘤小鼠的机体免疫。(于赫,李冀,齐彦.五味子多糖对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其免疫学机理初探.中医药信息,2010,27 (2) :26-27 ;于赫,李冀,王艳杰.五味子多糖对H22荷瘤小鼠血清IL-2、IL-10和VEGF表达的干预作用研.中医药学报2010,38 (2) :39-41 ;于赫,李冀,李淑莲五味子多糖对H22荷瘤小鼠血清Zn、Se水平变化的于预作用研究.中医药信息,2010,27 (3) :25-26.)。许河玉等发现一种纯五味子多糖(含量60. 3mg/g)可在细胞水平上有效地抑制survivin表达,增加细胞的凋亡率(许珂玉,肖建英.味子多糖对甲状腺癌细胞株SW579凋亡及survivin表达的影.吉林大学学报,2011,37 (2) :279-284.)。本发明人对五味子多糖进行分离纯化,确定多糖组分的结构特征,研究五味子多糖纯化组分体内抗肝癌(HepG-2)活性。但目前有关五味子多糖纯化组分体内抗人肝癌细胞H印G-2的研究未见国内外文献报 道,也未见相应专利公开。

发明内容
基于以上背景技术中存在的不足,本发明的目的在于提供一种具有肿瘤治疗作用的中草药有效部位-低分子量五味子多糖组分的制备方法与其药物应用。一、本发明的第一个目的在于提供一种低分子量五味子多糖组分(SCPPll)。—种低分子量五味子多糖(SCPPll),该多糖分子量为3. 4X IO3Da ;单糖组成为甘露糖(man)葡萄糖(glu)半乳糖(gal) = I 11.38 3. 55 ;该多糖具有a -糖苷键和P -糖苷键;该多糖具有(I — 3)-a _glucan(葡聚糖);该多糖具有三股螺旋结构。二、本发明的第二个目的在于提供上述低分子量五味子多糖组分(SCPPll)的制备方法,按照下述步骤进行(I)五味子粗多糖的提取方法将原料水洗,60°C烘干,粉碎,并置索氏提取器中,石油醚(馏程60-90°C)脱脂15h,过滤,滤渣60°C烘干,备用;脱脂五味子粉末以料液比I : 8-1 12,在温度80-100°C水中提取3-5h,提取1-3次,合并上清液,上清液经浓缩后,加入乙醇醇沉,使得多糖的浓缩液中乙醇浓度为80%,所得沉淀离心、经冷冻干燥24-48h后得五味子粗多糖;取五味子粗多糖适量,复溶后使用三氯乙酸法除蛋白,除蛋白后的糖液透析冻干,得到脱蛋白五味子多糖。(2)低分子量五味子多糖的制备取脱蛋白五味子多糖,用适量水溶解,离心除去不溶物,上清液通过DEAE-52离子交换柱进行分离;逐步以0-0. 2mol/L的NaCl水溶液洗脱,用硫酸-苯酚法绘制洗脱曲线,根据洗脱曲线分别收取合并洗脱液,其中Omol/L NaCl水溶液(即水)的洗脱液经浓缩、透析后,上葡聚糖凝胶柱,以0. lmol/L NaCl水溶液洗脱,根据洗脱曲线收取合并洗脱液,经浓缩、透析、冻干得低分子量五味子多糖。
三、本发明的第三个目的在于提供低分子量五味子多糖组分(SCPPll)作为抗肝癌药物和提高机体免疫功能保健品中的应用。四、根据本发明,该多糖主要以口服的给药形式使用,口服给药形式主要有片剂、胶囊和颗粒剂等。该发明的优点是本发明是以中药五味子为原料,经石油醚脱脂、热水浸提、过滤、浓缩、醇沉、离子交换层析等工艺制备而成,操作简单,成本低廉;体内抗肝癌(HepG-2)活性研究表明,该水溶性低分子量五味子多糖组分可显著抑制肿瘤增长,并且毒性低,可显著提高小鼠自身免疫和体内抗氧化活性;该多糖组分可作为抗肝癌药物和提高机体免疫功能保健品。


图I 是 SCPPll 的 IR 谱图; 图2 是 SCPPll 的 13C-NMR 谱图;图3是SCPPlI-Congo red复合物的最大吸收波长变化趋势图;图4是SCPPlI对荷瘤小鼠分泌TNF- a和IL-2的影响,其中(a)对TNF- a的影响;(b)对IL-2的影响。
具体实施例方式实施例I将原料水洗,60°C烘干,粉碎,并置索氏提取器中,石油醚(馏程60-90°C)脱脂15h,过滤,滤渣60°C烘干,备用。称取IOOg脱脂五味子粉末,置于圆底烧瓶中,按料液比I 8、浸提时间3h、浸提温度80°C,在热水浴中回流浸提I次,冷却后离心,合并上清液;上述清液经减压浓缩,加入4倍体积95%乙醇进行沉淀,使得多糖的浓缩液中乙醇浓度为80%,所得沉淀经离心、冷冻干燥24h后得五味子粗多糖样品粉末;取五味子粗多糖适量,复溶后使用三氯乙酸法除蛋白,降蛋白后的糖液透析冻干,得到脱蛋白五味子多糖。实施例2将原料水洗,60°C烘干,粉碎,并置索氏提取器中,石油醚(馏程60-90°C )脱脂15h,过滤,滤渣60°C烘干,备用。称取IOOg脱脂五味子粉末,置于圆底烧瓶中,按料液比I 10、浸提时间4h、浸提温度90°C,在热水浴中回流浸提2次,冷却后离心,合并上清液;上述清液经减压浓缩,加入4倍体积95 %乙醇进行沉淀,使得多糖的浓缩液中乙醇浓度为80%,所得沉淀经离心、冷冻干燥36h后得五味子粗多糖样品粉末;取五味子粗多糖适量,复溶后使用三氯乙酸法除蛋白,降蛋白后的糖液透析冻干,得到脱蛋白五味子多糖。实施例3将原料水洗,60°C烘干,粉碎,并置索氏提取器中,石油醚(馏程60-90°C )脱脂15h,过滤,滤渣60°C烘干,备用。称取IOOg脱脂五味子粉末,置于圆底烧瓶中,按料液比I 12、浸提时间5h、浸提温度100°C,在热水浴中回流浸提3次,冷却后离心,合并上清液;上述清液经减压浓缩,加入4倍体积95%乙醇进行沉淀,使得多糖的浓缩液中乙醇浓度为80%,所得沉淀经离心、冷冻干燥48h后得五味子粗多糖样品粉末;取五味子粗多糖适量,复溶后使用三氯乙酸法除蛋白,降蛋白后的糖液透析冻干,得到脱蛋白五味子多糖。
实施例4五味子多糖的制备步骤一、脱蛋白五味子多糖的纯化I、实验材料I. I药品与试剂脱蛋白五味子多糖;DEAE-52纤维素交换树脂,英国Whatman公司;sephadex G-100,英国 Whatman 公司。Dextran T-10, T-40, T-70, T-500, T-2000 和 Blue Dextran T-2000, Pharmacia 公司 。I. 2 仪器UV-7502PC可见分光光度计,上海茂欣仪器有限公司层析柱1. 6cmX 50cm,上海沪西分析仪器厂有限公司DHL-A电脑恒流泵,上海沪西分析仪器厂有限公司DBS-100电脑自动分部收集器,上海沪西分析仪器厂有限公司2、实验方法称取上述实施例1-3中制备的脱蛋白五味子多糖200mg,溶于IOmL蒸馏水中,充分溶解后离心,将上清液滴加到DEAE-52层析柱中,0-0. 2mol/L的NaCl水溶液进行洗脱,使用DHL-A恒流泵,控制流速lmL/min,用自动分部收集器收集。6min收集一管,每管收集6mL,收集液每管用苯酚-硫酸法跟踪检测,以蒸馏水为空白,于490nm的波长下测定吸光度,直到不再有糖检出。根据洗脱曲线,合并各洗脱峰的洗脱液,其中水洗脱液部分减压浓缩,冻干,上述步骤所得多糖组分上葡聚糖凝胶柱,用0. Imol/LNaCI水溶液洗脱,使用DHL-A恒流泵,控制流速0. 3mL/min,用分部自动收集器收集,每管收集3mL,收集液每管用苯酹-硫酸法跟踪检测,以蒸馏水为空白,于490nm的波长下测定吸光度,直到不再有糖检出。绘制洗脱曲线,合并洗脱峰的洗脱液,用蒸馏水透析72h,减压浓缩,冻干得到五味子多糖组分(SCPPll)。3、实验结果得到水溶性低分子量五味子多糖组分(SCPPll)。步骤二、水溶性低分子量五味子多糖的物化性质及结构特征I、实验材料I. I药品与试剂五味子多糖;氯化钠、硫酸、三氯乙酸、苯酚、氢氧化钠、盐酸、醋酸钠、盐酸羟胺、肌醇、吡唆、醋酸酐、葡萄糖、鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、高碘酸钠、刚果红等均为分析纯。I. 2 仪器LC-10AVP高效液相色谱系统,日本岛津TSK-GEL G4000PW (7. 5 X 300mm),TOSOH 公司预柱TSK-GUARDCOLUMN PffH(7. 5 X 75mm),TOSOH 公司ALPHA2-4冷冻干燥设备,德国CHRIST公司PHS-2C型酸度计,上海分析仪器厂R-200型旋转蒸发器,瑞士 Biichi公司
GC 2010气相色谱系统,日本岛津RTS-5 气相毛细管柱,(30mX0. 32mm)NEXUS 670智能型傅立叶红外光谱仪,美国尼高利公司核磁共振仪,Braker2、实验方法2. I分子量的测定按照多糖的常规方法,以分子量已知的T-10,T-40, T-70, T-500和T-2000为标准,LC-10AVP岛津高效液相色谱系统,色谱柱为TSK-GEL G4000Pff(7. 5 X 300mm),流动相为0. 003mol/L的醋酸钠溶液,流速0. 8mL/min ;检测器SHIMADZU RID-10A,温度25°C。多糖溶 液过0. 45 ii m的滤膜,进样10 u L02. 2单糖组成分析精密称取多糖样品5mg于安瓿瓶中,用2mol/L的硫酸溶液溶解,封口,100°C烘箱中加热水解8h后,水解液加碳酸钡中和至中性,以4000r/min离心除去BaSO4沉淀,上清液冷冻干燥。水解产物经乙酰化后用岛津GC 2010气相色谱系统分析。2.3IR 测定取Img经干燥的多糖样品,与100 200mg经干燥的KBr粉末在玛瑙研钵中轻轻研磨均匀(在红外灯下操作)。经压片机压成薄片,于NEXUS 670智能型傅立叶红外光谱仪测定获得红外光谱图。2.4NMR 测定取多糖样品20mg经D2O交换3次后,溶于0. 5mLD20中,用BRUKER400型核磁共振仪,13C-NMR (100MHz,温度 673. 2K)(参见图 2)。2. 5刚果红实验称取五味子多糖组分5mg,加入2mL蒸懼水和2mL80 u mol/L的刚果红试剂,之后逐渐加入lmol/L的NaOH溶液,使混合液的浓度从0逐渐提高到0. 5mol/L(0、0. 1,0. 15,0. 2、0. 25,0. 3,0. 35,0. 4,0. 45,0. 5mol/L),并用紫外可见光谱仪扫描,测定各碱性梯度下最大吸光值(参比为2mL蒸馏水和2mL80 u mol/L的刚果红试剂,逐渐加入lmol/L的NaOH溶液,使混合液的浓度从0逐步提高到0. 5mol/L),以NaOH浓度为横坐标,最大吸收波长为纵坐标绘图。3、实验结果SCPPll分子量为3. 4 X IO3DatjSCPPll由甘露糖,葡萄糖和半乳糖组成,其摩尔比为甘露糖葡萄糖半乳糖=I 11.38 3. 55。五味子多糖在3395011^2927011^13840^1和1025-1152CHT1处均出现强吸收峰,(为糖的特征吸收峰,其中3395cm—1为-OH伸缩振动峰、2927CHT1和1384CHT1分别为亚甲基的C-H伸缩振动峰和C-H弯曲振动峰、1025-1152CHT1为吡喃糖环的振动峰)852(31^1和893CHT1特征吸收峰表明,SCPPll同时具有a-糖苷键和运-糖苷键;855011_1和931011_1特征吸收峰表明,50 11具有(I — 3) - a-glucan。图2为五味子多糖的 13C-NMR 谱图,5 104ppm, 6 102ppm, 6 99ppm, 3 95ppm 和 S91ppm 为异头碳的化学位移,表明SCPPll同时具有a-糖苷键和¢-糖苷键;S77 70ppm之间的峰为未发生取代的C2、C3、C4、C5的化学位移;3 61和5 60ppm为未发生取代的C6的化学位移。另外,170 180ppm未见碳信号,表明其不含糖醛酸,与红外和组成分析结果一致。图3为SCPPll与刚果红形成了络合物的最大吸收波长变化,络合物的最大吸收波长较刚果红的最大吸收波长红移。当NaOH浓度升高时,络合物的最大吸收波长急剧下降,说明高浓度的NaOH破坏了多糖的螺旋结构,使其解体为单股线团,而导致最大吸收波长下降,推测SCPPll具有三螺旋结构。试验一五味子多糖组分体内抗肝癌OfepG-2)活性研究I仪器、材料与试剂I. I 仪器Spectra Max I9O 酶标仪,美国 molecular device 公司Sigma 1-13高速台式离心机,Sigma公司数控恒温水浴锅,巩义市英峪予华仪器厂 HSS-I型恒温浴槽,江苏金坛医疗仪器厂,中国BS124S型电子天平,北京赛多利斯仪器系统有限公司匀浆机,德国IKA公司I. 2材料与试剂I. 2. I实验动物ICR小鼠,雌性,体重20±2g,清洁级,购于扬州大学比较医学中心,合格证编号SCXK(苏)2007-0001。实验前检疫3d,饲养温度为21±1°C,湿度为60±5%。1.2. 2实验试剂与药品五味子多糖(自制);5_氟脲嘧啶;生理盐水;苦味酸;IL-2酶联免疫试剂盒;TNF_ a酶联免疫试剂盒;丙二醛(MDA)试剂盒;超氧化物岐化酶(SOD)试剂盒;南京建成生物工程研究所;冰醋酸、CaCl2等都为市售分析纯。I. 3统计学处理数据用SPSS15.0统计软件进行处理。结果用S 表示,两组间差异采用t_检验;多组间差异采用单因素方差分析(One-way AN0VA)。P < 0. 05有统计学意义。2实验方法2. I荷瘤小鼠瘤株的保种、传代及移植瘤模型建立(I)瘤株的保种取体重20土 2g的昆明小鼠2 3只,每只接0. 2ml,腹腔接种Ifeps腹水瘤瘤株,定期每7 9天传一代。(2)腋下移植瘤模型的建立取腹腔传代7天且生长良好的H印s腹水瘤小鼠,脱颈椎处死,75 %乙醇消毒动物皮肤,在无菌条件下,剪开小鼠腹腔,吸取生长良好的腹水,观察腹水颜色(腹水为乳白色无絮状沉淀物者为佳,血性腹水则不可用)并用台盼蓝染色法观察活细胞数(活细胞数> 98% );腹水用生理盐水稀释,吹打混匀,细胞计数板计数,调整细胞数为2X IO7个活细胞/mL ;取昆明种小鼠,右侧腋部皮肤常规酒精消毒,持ImL注射器于小鼠右腋下皮下注射0. 2mL瘤细胞悬液,制成局灶性肿瘤模型。2. 2实验分组与给药50只雌性小鼠于实验前适应喂养3天,接种后次日将其随机分为5组,每组10只,设正常组、模型组、阳性对照组(5-Fu)、SCPPll高、低两个剂量组;接种24h后开始给药,每天I次,连续10d。(灌胃量均为0. 2mL/只,腹腔注射0. Iml/只)分组、剂量和给药途径如下正常组健康小鼠,每天灌胃相同剂量的生理盐水(0. 2mL/10g/d, i. g) +腹腔注射生理盐水(0. lmL/10g/d, i. p),自由进食和饮水;模型组接种小鼠,每天灌胃相同剂量的生理盐水(0. 2mL/10g/d, i. g) +腹腔注射生理盐水(0. lmL/10g/d, i. p),自由进食和饮水;
5-氟尿喃唳组接种小鼠,每天灌胃相同剂量的生理盐水(0. 2mL/10g/d, i. g) +腹腔注射相同剂量的5-Fu(25mg/kg/d,i. p),自由进食和饮水;五味子多糖给药组接种小鼠,分高、低两个剂量组,①SCPPll-H每天分别灌胃相同剂量五味子多糖(200mg/kg/d, i. g/),自由进食和饮水;②SCPPll-L每天分别灌胃相同剂量五味子多糖(50mg/kg/d, i. g/),自由进食和饮水;2. 3相关考察指标2. 3. I、动物生长状况每日观察动物一次,观察动物精神状况、行为和毛色有无异常,称重并记录以了解动物体重变化情况(O、14天称重)。2. 3. 2、器官指数和抑瘤率末次给药后次日,禁食8h,称体重,摘眼球取血后处死;取出瘤块、胸腺、脾脏、心、肝、肾,经生理盐水洗涤后用滤纸吸干,称重。按下式计算抑瘤率和各脏器指数抑瘤率(%) = (C-T)/CX 100%式中C为模型对照组平均瘤重,T为实验组平均瘤重。脏器指数=脏器重量(mg) /体重(g)2. 3. 3、血液学指标末次给药24小时候后眼球取血0. 5 lmL,收集血液于抗凝管(紫色EDTA_K2 ;血常规(血液细胞分析)中,充分混匀后,于4°C冰箱储存,备用。进行血常规分析。2. 3. 4、血液生化指标末次给药24h后摘眼球取血0. 5 lmL,收集血液,放置4h后离心,3000r/min离心15min,取血清置于4保存,备用。测定谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)。酶联免疫试剂盒测定血清中IL-2和TNF-a的含量。2. 3. 5、对心肝肾组织中SOD和MDA的影响心、肝、肾各取150-400mg左右置于IOml离心管中,加入7ml生理盐水,制成5%的组织匀浆,经3000rpm/min离心后,取上清液,用试剂盒测定丙二醛(MDA)和超氧化物岐化酶(SOD)的含量。2. 3. 6、数据统计数据用SPSS15. 0统计软件进行处理。结果用S 表示,用组间one-way ANOVA检验比较各给药组与对照组之间的显著性。P < 0. 05有统计学意义。3、实验结果
3. I SCPPll对H印G-2荷瘤小鼠肿瘤生长的影响表I SCPPll对IfepG-2荷瘤小鼠抗肿瘤活性的影响
权利要求
1.一种低分子量五味子多糖,其特征在于该多糖分子量为3. 4X IO3 Da ;单糖组成为甘露糖(man):葡萄糖(glu):半乳糖(gal) = I : 11.38 : 3. 55 ;该多糖具有a -糖苷键和¢-糖苷键;该多糖具有(I —3) - a -葡聚糖(glucan);该多糖具有三股螺旋结构。
2.权利要求I所述的一种低分子量五味子多糖的制备方法,其特征在于按照下述步骤进行 (I)五味子粗多糖的提取方法 将原料水洗,60°C烘干,粉碎,并置索氏提取器中,馏程60-90°C石油醚脱脂15 h,过滤,滤渣60 °C烘干,备用; 脱脂五味子粉末以料液比1:8-1:12,在温度80-100°C水中提取3-5h,提取I_3次,合并上清液,上清液经浓缩后,加入乙醇醇沉,使得多糖的浓缩液中乙醇浓度为80%,所得沉淀离心、经冷冻干燥24-48h后得五味子粗多糖;取五味子粗多糖适量,复溶后使用三氯乙酸法除蛋白,降蛋白后的糖液透析冻干,得到脱蛋白五味子多糖; (2)低分子量五味子多糖的制备 取脱蛋白五味子粗多糖,用适量水溶解,离心除去不溶物,上清液通过DEAE-52离子交换柱进行分离;逐步以0-0.2 mol/L的NaCl水溶液洗脱,用硫酸-苯酚法绘制洗脱曲线,根据洗脱曲线分别收取合并洗脱液,其中0 mol/L NaCl水溶液即水的洗脱液经浓缩、透析后,上葡聚糖凝胶柱,以0.1 mol/L NaCl水溶液洗脱,根据洗脱曲线收取合并洗脱液,经浓缩、透析、冻干得低分子量五味子多糖。
3.权利要求I所述的一种低分子量五味子多糖在制备抗肝癌药物中的应用。
4.权利要求I所述的一种低分子量五味子多糖在制备提高机体免疫功能的保健品中应用。
全文摘要
本发明公开了低分子量五味子多糖及其制备方法和用途,属于医药技术领域。该多糖组分的分子量为3.4×103Da;单糖组成为甘露糖︰葡萄糖︰半乳糖=1︰11.38︰3.55;具有(1→3)-α–glucan(葡聚糖)和三螺旋结构。本发明的SCPP11多糖组分的体内抗肝癌活性表明,其具有显著地抗肝癌(HepG-2)活性,可显著抑制肝癌的生长,并与5-Fu相比,该多糖组分毒性低,可显著增强小鼠自身免疫能力和体内抗氧化活性。本发明水溶性低分子量五味子多糖活性成分明确,质量可控,可用作抗肝癌药物或提高机体免疫功能的保健品。
文档编号A23L1/09GK102757510SQ201210132340
公开日2012年10月31日 申请日期2012年4月28日 优先权日2012年4月28日
发明者仰榴青, 任月娜, 吴向阳, 李芳 , 茆广华, 赵婷, 邹烨 申请人:江苏大学
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