食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基，主要用于食物中毒致病性厌氧菌的增菌培养。克服了以往培养基的不足，能快速准确检测食物中毒致病性厌氧菌。食物中毒致病性厌氧菌的毒素，经酶激化后显示毒力，便于进行测毒动物试验，可弥补疱肉培养基的不足。培养基清澈，方法简单，使用方便，结果可靠。
【专利说明】食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基
[0001]【技术领域】本发明涉及一种食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基，其主要成分是胰酪蛋白胨、蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、硫乙醇酸钠、蒸馏水、1.5%胰蛋白酶(1:250)溶液按比例混合经加温、溶解、混合、冷却、分装、高温灭菌等工艺而成。主要用于食物中毒致病性厌氧菌的增菌培养。
[0002]【背景技术】随着食物中毒致病微生物研究的进展，国内外对培养基的研究也在不断的发展中。生物实验工作者发明一种能克服上述培养基不足的，专用于食物中毒致病性厌氧菌增菌培养。已有培养基剂品种很多，不具有切实可靠的方法；对培养成分有破坏作用，亦影响其物理性状。本发明的目的在于提供一种能克服上述培养基不足的新型产品，用于食物中毒致病性厌氧菌的中和增菌培养。本发明的食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基克服了上述的不足，快速检测食物中毒致病性厌氧菌的毒素，经酶激化后显示毒力，便于进行测毒动物试验，可弥补其他培养基的不足。方法简单，使用方便，结果可靠。
[0003]
【发明内容】
本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经加温、溶解、混合、冷却、高温灭菌、分装、等工艺而成一种食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基。
[0004]本发明选择的配方如下(克、ml /每升蒸馏水):胰酪蛋白胨30-40 ;蛋白胨4.0-5.0 ;酵母浸粉10-15 ;葡萄糖6.0-7.0 ;硫乙醇酸钠1.6-1.8 ； 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液65 mL。蒸懼水1000mLo
[0005]酿成的培养基呈黄色透明液体。将食物中毒致病性厌氧菌48 h培养物，稀释成1:1000菌悬液，接种0.01 mL，应能生长。食物中毒致病性厌氧菌的毒素，经酶激化后显示毒力，便于进行测毒动物试验，可弥补疱肉培养基的不足。
[0006]本发明产品的制备方法是:
(0.将胰酶消化液加温到80`°C，用200 g/L氢氧化钠溶液调至PH7.0—7.2 ；
(2)将蛋白胨、酵母浸粉、、硫乙醇酸钠、蒸懼水1000mL加入内浸液、煮沸IOmin后,用磷酸氢二钠、磷酸二氢钾，调pH为8.0 — 8.2，过滤透明，113°C 30 min高压灭菌备用；
(3).配制250g/L葡萄糖，IlO0C 20 min灭菌；分装于无菌瓶内；
(4)2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液65 mL。种菌前按1% (V/V)无菌操作加入。
[0007]本发明具有以下优点:食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基克服了以往培养基的不足，能快速准确检测食物中毒致病性厌氧菌。食物中毒致病性厌氧菌的毒素，经酶激化后显示毒力，便于进行测毒动物试验，可弥补疱肉培养基的不足。培养基清澈，方法简单，使用方便，结果可靠。
[0008]【具体实施方式】下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明:
按照下表所列数据(克、ml /每升蒸馏水)及其所述步骤进行配置:
配方一:
胰酪蛋白胨30-40 ;蛋白胨4.0-5.0 ;酵母浸粉10-15 ;葡萄糖6.0-7.0 ;硫乙醇酸钠
1.6-1.8; 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液 65 mL。蒸馏水 1000mL
配方二:胰酪蛋白胨30-38 ;蛋白胨4.5-5.0 ;酵母浸粉12-15 ;葡萄糖6.5-7.0 ;硫乙醇酸钠1.7-1.8; 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液 65 mL。蒸馏水 1000mL
配方三:
胰酪蛋白胨32-40 ;蛋白胨4.0-4.5 ;酵母浸粉10-13 ;葡萄糖6.0-6.5 ;硫乙醇酸钠
1.6-1.7; 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液 65 mL。蒸馏水 lOOOmL。
【权利要求】
1.本发明涉及一种食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基，其特征在于具有如下配方(克、ml /每升蒸馏水):胰酪蛋白胨30-40 ;蛋白胨4.0-5.0 ;酵母浸粉10-15 ;葡萄糖6.0-7.0 ；硫乙醇酸钠1.6-1.8 ； 2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液65 mL ;蒸馏水1000mL。
2.—种权利要求1所述食物中毒致病性厌氧菌增菌培养基的制备方法，其特征在于具有如下的步骤: (1)将胰酶消化液加温到80°C，用200g/L氢氧化钠溶液调至ρΗ7.0—7.2 ； (2)将蛋白胨、酵母浸粉、、硫乙醇酸钠、蒸懼水1000mL加入内浸液、煮沸IOmin后,用磷酸氢二钠、磷酸二氢钾，调pH为8.0 — 8.2，过滤透明，113°C 30 min高压灭菌备用； (3)配制250g/L葡萄糖，IlO0C 20 min灭菌；分装于无菌瓶内； (4)2.0%胰蛋白酶(1:250)溶液65 mL，种菌前按1% (V/V)无菌操作加入。
【文档编号】C12Q1/04GK103667413SQ201210354266
【公开日】2014年3月26日 申请日期:2012年9月21日 优先权日:2012年9月21日
【发明者】于丽霞 申请人:青岛道合生物科技有限公司