以罗汉果苦果、落地果为原料合成甜味皂苷的方法
【专利摘要】本发明公开了一种以罗汉果苦果、落地果为原料合成甜味皂苷的方法，包括以下步骤：1)取罗汉果苦果或落地果，破碎，加水或45%～55%体积的乙醇提取，提取液过大孔树脂柱层析，得到罗汉果苦味皂苷，其中罗汉果苷Ⅱ和/或苷Ⅲ的含量≥50%；2)取罗汉果苦味皂苷溶于水中，加入淀粉和环糊精葡萄糖基转移酶，于60～65℃条件下酶催化反应至完全，灭酶活，过滤，收集滤液；3)所得滤液过大孔树脂柱或硅胶柱层析，水洗，收集30～40%体积的乙醇洗脱液；或者是将滤液直接过氧化铝柱或活性炭柱，收集流出液；将收集的30～40%体积的乙醇洗脱液或流出液浓缩、干燥，即得。本发明从根本上解决罗汉果生长过程中的苦果和落地果问题。
【专利说明】以罗汉果苦果、落地果为原料合成甜味皂苷的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于食品化学领域，具体涉及一种以罗汉果苦果、落地果为原料合成甜味 皂苷的方法。
【背景技术】
[0002] 罗汉果（Siraitia grosvenorii (Swingle) C. Jeffrey)，原产桂北山区，用其成熟 干果泡制的饮品味甜清新、风味独特，是广西著名的药食两用特产。其甜味成分罗汉果皂苷 (mogrosides)已被提取并开发成为高级的甜味剂使用。罗汉果甜苷的甜度达到蔗糖的约 300倍，其甜味纯正无后苦味，并且热量几乎为零，因而作为功能性无糖甜味剂现已广泛应 用于保健食品及饮料添加行业，具备极佳的市场开发前景。
[0003] 罗汉果皂苷是一类葫芦烷型的四环三萜皂苷，目前已经从罗汉果中提取出了二十 多种不同的天然罗汉果皂苷成分，不同罗汉果皂苷的区别主要是苷元3位和24位连接的葡 萄糖链结构不同，通过分析罗汉果皂苷的结构与味觉的关系可以发现：苷元本身是苦味的， 而苷元的3位和24位连接的葡萄糖残基总数为1?3个时是苦味（苦苷）或无味的，连接 4?6个葡萄糖残基则是甜味的（甜苷），其口味的苦与甜是由苷元所连接的葡萄糖残基数 目所决定的，而糖链上葡萄糖残基相互连接的不同位置只能改变皂苷的相对甜度。罗汉果 皂苷的结构式如下所示：
[0004]
【权利要求】
1. 以罗汉果苦果、落地果为原料合成甜味皂苷的方法，其特征在于包括以下步骤： 1) 苦味皂苷的制备：取罗汉果苦果或落地果，破碎，加水或45%?55%体积的乙醇提 取，提取液过大孔树脂柱层析，水洗树脂柱至流出液无色，然后用70?90%体积的乙醇 洗脱，洗脱液回收乙醇，干燥，得到罗汉果苦味皂苷，其中罗汉果苷II和/或苷III的含量 ^ 50% ； 2) 酶催化反应：取罗汉果苦味皂苷溶于水中，加入罗汉果苦味皂苷重量1?4倍的淀 粉，再按400?650U/g罗汉果苦味皂苷的量加入环糊精葡萄糖基转移酶，于60?65°C条件 下酶催化反应至完全，灭酶活，反应液过滤，收集滤液； 3) 后处理：所得滤液过大孔树脂柱或硅胶柱层析，水洗，乙醇梯度洗脱，收集30? 40%体积的乙醇洗脱液；或者是将滤液直接过氧化铝柱或活性炭柱，收集流出液；将收集的 30?40%体积的乙醇洗脱液或流出液浓缩、干燥，得到罗汉果甜味皂苷混合物。
2. 根据权利要求1所述的用环糊精葡萄糖基转移酶催化罗汉果苦味皂苷合成甜味皂 苷的方法，其特征在于：步骤1)中，所述大孔树脂为聚苯乙烯型。
3. 根据权利要求1所述的用环糊精葡萄糖基转移酶催化罗汉果苦味皂苷合成甜味皂 苷的方法，其特征在于：步骤2)中，所述的淀粉选自糊精、水溶性淀粉、马铃薯淀粉和玉米 淀粉中的一种或两种以上的组合。
4. 根据权利要求1所述的用环糊精葡萄糖基转移酶催化罗汉果苦味皂苷合成甜味皂 苷的方法，其特征在于：步骤2)中，所述环糊精葡萄糖基转移酶的加入量为550?650U/g 罗汉果苦味皂苷。
5. 根据权利要求1所述的用环糊精葡萄糖基转移酶催化罗汉果苦味皂苷合成甜味皂 苷的方法，其特征在于：步骤3)中，所述大孔树脂为聚苯乙烯型。
【文档编号】C12P33/00GK104059959SQ201310089329
【公开日】2014年9月24日 申请日期:2013年3月20日 优先权日:2013年3月20日
【发明者】王磊, 刘金磊, 卢凤来, 杨子明, 李典鹏, 宋云飞, 李元元 申请人:广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所, 桂林莱茵生物科技股份有限公司