含白皮杉醇组合物及含有该含白皮杉醇组合物的饮食品和化妆品的制作方法
【专利摘要】本发明的目的在于，提供一种来自天然物的、以较高的含有量含有白皮杉醇的含白皮杉醇组合物及该含白皮杉醇组合物的制备方法。从西番莲果种子中提取以0.0001～99.9质量％的含有量含有白皮杉醇的含白皮杉醇组合物。另外，在提取所述白皮杉醇时，将西番莲果种子粉碎后，添加从含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中选择的至少一种溶媒进行搅拌，从所述溶媒含有的西番莲果种子中提取白皮杉醇。这时，最好使用含水醇系溶媒及含水酮系溶媒两种溶媒进行阶段性提取。
【专利说明】含白皮杉醇组合物及含有该含白皮杉醇组合物的饮食品和化妆品
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种来自西番莲果(passion fruit)种子的含有白皮杉醇的含白皮杉醇组合物以及含有该含白皮杉醇组合物的饮食品和化妆品。
【背景技术】
[0002]下述非专利文献I中，记载了来自葡萄的多酚类化合物白藜芦醇(Resveratrol)及白皮杉醇(Piceatannol)具有抑制黑色素生成细胞生成黑色素的作用。但是，其作用效果的确认试验使用的是市售的试剂，且对于从葡萄等天然物中获取含有白皮杉醇等的组合物没有记载。
[0003]另外，下述专利文献I中记载了从虎杖(Reynoutria japonica Houtt.var.japnica)根的提取物中廉价地进行有选择性且有效的白藜芦醇的浓缩回收；下述专利文献2中记载了含有白藜芦醇的越橘提取物；下述专利文献3、4中记载了西番莲果(西番莲科，passiflora sp.)的提取物，特别是西番莲果的果皮的提取物，并记载了其提取物在食品、营养辅助食品、以及医学上的使用。
[0004]但是，上述文献的技术都是从天然物中获得的组合物，不能提供含有较高的白皮杉醇的物质。
[0005]先行技术文献
[0006]专利文献
[0007]专利文献1:日本特许公开2005 - 281179号公报
[0008]专利文献2:日本特许公开2009 - 13159号公报
[0009]专利文献3:日本特许公开2007 - 302659号公报
[0010]专利文献4:日本特许公布2007 - 531734号公报
[0011]非专利文献
[0012]非专利文献1:Takako Yokozawa and You Jung Kim, Piceatannol InhibitsMelanogenesis by Its Antioxidative Actions,Bio1gical&Pharmaceutical BulletinVol.30 (2007)N0.1lp2007 - 2011
[0013]从有关食品安全的一般观念出发，添加在功能性食品及健康食品等饮食品中的白皮杉醇，最好是来自天然物。但是，以住我们没有发现含有丰富的白皮杉醇的天然物，另外，从葡萄等天然物中仅能获取含有量非常低的组合物。
[0014]因此，本发明的目的在于，提供一种来自天然物的、含有较高的白皮杉醇的含白皮杉醇组合物及含有该含白皮杉醇组合物的饮食品和化妆品。
【发明内容】
[0015]本发明的发明人为达到上述目的，经过锐意研究，发现以往因毫无用途而被废弃的西番莲果种子中含有丰富的白皮杉醇，从而完成了本发明。[0016]即，本发明的含白皮杉醇组合物是从西番莲果种子中获得，其特征在于以大于10至99.9质量％的含有量含有白皮杉醇。
[0017]通过本发明的含白皮杉醇组合物，可以提供来自天然物的、以较高的含有量含有白皮杉醇的组合物。而且，由于是来自天然物的组合物，因而可以将其用于化妆品、医药品、以及功能性食品、健康食品等的饮食品中。
[0018]另外，本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法的特征在于，将西番莲果种子粉碎后，添加从含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中选择的至少I种溶媒进行搅拌，从该溶媒含有的西番莲果种子中提取白皮杉醇。
[0019]通过本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法，在从西番莲果种子中提取白皮杉醇时，由于使用含水醇系溶媒或含水酮系溶媒，因而可以以较高的生成率制备来自天然物的、以较高的含有量含有白皮杉醇的组合物。
[0020]在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，将西番莲果种子粉碎后，添加含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中的任一种溶媒进行搅拌，从该溶媒含有的西番莲果种子中提取白皮杉醇获得第I提取物，再在未作为所述提取物回收的残渣中，添加含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中的上述未选择的溶媒进行搅拌，从该溶媒含有的西番莲果种子中提取白皮杉醇获得第2提取物，随后将所述第I提取物和第2提取物混合。通过这种方式，使用多种溶媒进行阶段性的提取，因而可以以更高的生成率制备含有大量白皮杉醇的含白皮杉醇组合物。
[0021]在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，所述西番莲果种子最好是西番莲果的生的种子、或是将西番莲果的生的种子干燥后的种子。
[0022]另外，在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，所述含水醇系溶媒最好为含水乙醇，或，所述含水酮`系溶媒最好为含水丙酮。关于其含水率，含水乙醇最好为含有20~99.9体积％的乙醇；含水丙酮最好为含有20~99.9体积％的丙酮。通过这样的形态，可以提闻白皮杉醇的提取效率。
[0023]在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，所述在各溶媒中的搅拌，最好以超声波振动或振荡进行。通过这种形态，可以提高白皮杉醇的提取效率。
[0024]另外，在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，在提取后，最好通过减压蒸馏将溶媒去除。
[0025]另外，本发明还涉及一种饮食品，其中添加了从西番莲果种子中获得的、以
0.0001~99.9质量％的含有量含有白皮杉醇的含白皮杉醇组合物。
[0026]另外，本发明还涉及一种化妆品，其中添加了从西番莲果种子中获得的、以大于10至99.9质量％的含有量含有白皮杉醇的含白皮杉醇组合物。
[0027]通过本发明的含白皮杉醇组合物，可以提供来自天然物的、以较高的含有量含有白皮杉醇的组合物。而且，由于是来自天然物的组合物，因而可以应用于化妆品、医药品、以及功能性食品、健康食品等饮食品中。另外，通过本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法，作为从西番莲果种子中提取白皮杉醇的溶媒，使用的是含水醇系溶媒或含水酮系溶媒，从而可以以较高的生成率制备来自天然物的、含有大量白皮杉醇的组合物。另外，可以通过属于含水醇系溶媒或含水酮系溶媒的多种溶媒进行阶段性的提取，从而以更高的生成率进行制备。【专利附图】
【附图说明】
[0028]图1是表示从种子(A)果皮(B)及果肉(C)中提取的提取物的HPLC色谱的图表；
[0029]图2是表示在图1的HPLC分析中在41分附近溶出的成分的MS光谱图(A)及UV光谱图(B)的图表；
[0030]图3是表示白藜芦醇(Resveratrol，分子量228)的MS光谱图(A)及UV光谱图(B)的图表；
[0031]图4是表示白皮杉醇(Piceatannol，分子量244)的MS光谱图(A)及UV光谱图(B)的图表；
[0032]图5是表示乙醇(A)或丙酮(B)的含水率对白皮杉醇的提取效率的影响的图表。【具体实施方式】
[0033]本发明的含白皮杉醇组合物是从西番莲果种子中获得的组合物，以0.0001~99.9质量％的含有量含有白皮杉醇。其形状可以为液状、固状、半固状、凝胶状等，另外，西番莲果种子可以是该种子本身及将种子粉碎后的糊状物、或是将种子冻干粉碎后的粉末等的种子加工物。白皮杉醇的固态换算含有量，可以为0.0001~99.9质量％、更理想的是
0.01~50质量％、最理 想的是0.1~10质量％。
[0034]白皮杉醇(Piceatannol)以下述化学式(I)表达。
[0035][化I]
[0036]
[0037]上术化学式表达的白皮杉醇，是2个苯基以反式的烯基连接的结构，是反式的白皮杉醇，但在本发明中，白皮杉醇(Piceatannol)的概念，是在上述化学式中还包含2个苯基以顺式的烯基连接的结构的顺式白皮杉醇。
[0038]西番莲果是西番莲科西番莲属的植物,别名:鸡蛋果,果实酸甜可口，可作为水果直接食用，也可将其榨取果汁饮用，或添加至果冻、糕点等饮食品中增加味道。西番莲果的种子较硬，在榨取果汁等时需要将其从果实中去除，即使将果实的种子一同加入饮食中，也会因其外皮过硬难以消化而被直接排泄。本发明是在发现以往因毫无用途而被废弃的西番莲果种子中含有丰富的白皮杉醇的基础上的发明。另外，本发明中使用的西番莲果种子，由以往的食用西番莲果的经验可以证明，即使将其添加在功能性食品及健康食品等饮食品中，也不会存在安全性的问题。
[0039]本发明的含白皮杉醇组合物，最好是将例如生的、或是干燥后的西番莲果种子粉碎后，使用不同溶媒进行提取的方法获得。为了提高提取效率，也可适当对西番莲果种子实施酸或碱分解、酶分解等化学处理后再进行提取。另外，通过下述说明的本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法，可以以较高的生成率获得含有大量白皮杉醇的组合物，因此最好使用该方法获取。
[0040]下面对本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法进行说明。
[0041]在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，首先将西番莲果种子粉碎。西番莲果种子可以使用生的、或是干燥后的西番莲果种子，为了提高提取效率，也可适当对西番莲果种子实施酸或碱分解、酶分解等化学处理后再进行提取。粉碎处理可以使用通用的粉碎机进行。另外，由于西番莲果种子中油分较多，粉碎后可能会呈糊状。
[0042]随后，在粉碎后的西番莲果种子中添加从含水醇系溶媒及含水酮系溶媒中选择的至少一种溶媒进行搅拌，从该溶媒中提取白皮杉醇。
[0043]含水醇系溶媒可以使用乙醇、甲醇、丙醇等含水溶媒，其中最好使用含水乙醇。另外，含水酮系溶媒可以使用丙酮、丁酮、二乙基甲酮、氯丙酮等含水溶媒，其中最好使用含水丙酮。
[0044]关于其含水率，含水乙醇可以为包含20~99.9体积％的乙醇，更理想的是包含40~99.9体积％的乙醇，最理想的是包含60~80体积％的乙醇；含水丙酮可以为包含20~99.9体积％的丙酮，更理想的是包含40~99.9体积％的丙酮，最理想的是包含60~80体积％的丙酮。如果超出上述 范围，可能会导致提取效率下降。另外，为了将含水溶媒的含水率表述简单化，以下将例如含水20体积％的80体积％乙醇表述为“80%含水乙醇”，将例如含水30体积％的70体积％乙醇表述为“70%含水乙醇”，再例如将含水30体积％的70体积％丙酮表述为“70%含水丙酮”。
[0045]在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，在上述各溶媒中的搅拌，最好使用超声波振动或振荡进行。这样可以让已粉碎并与上述各溶媒接触的西番莲果种子有效振动，从而可以提高从西番莲果种子向上述各溶媒中提取白皮杉醇的提取效率。超声波振动可以使用通用的超声波装置进行。另外，振荡也可以使用通用的振荡装置进行。
[0046]另外，在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，提取后，最好使用减压蒸馏法去除上述溶媒。这样组合物中就不会包含有机溶媒，作为向功能性食品及健康食品等饮食品中添加的食品材料，可以符合其安全性的标准等。
[0047]在本发明的含白皮杉醇组合物的制备方法中，可以通过多种溶媒进行阶段性的提取。这样可以以更高的生成率制备含有大量白皮杉醇的含白皮杉醇组合物。
[0048]具体是，例如将西番莲果种子粉碎后，添加所述含水醇系溶媒及所述含水酮系溶媒中的任一种溶媒进行搅拌，从该溶媒中提取白皮杉醇获得第I提取物。通过离心等方式将提取物和未被作为提取物回收的残渣分离，在残渣中添加所述溶媒中未被选择的另一种溶媒进行搅拌，从该溶媒中提取白皮杉醇获得第2提取物。随后将所述第I提取物和第2提取物混合。当然，该第2提取物也可单独作为西番莲果种子的提取物进行利用。
[0049]另外，西番莲果种子由于接受了通过所述含水醇系溶媒或所述含水酮系溶媒的第I提取处理，其结构等的特性因提取而变得更加适宜，所以在接下来的第2提取处理时，无论使用所述含水醇系溶媒或所述含水酮系溶媒、还是使用此外的其它溶媒，均可期待其提取效率得到改善。而且，如后述的实施方式所述，所述含水醇系溶媒或所述含水酮系溶媒的提取效率是基于其含水，所以在用水或水溶性溶媒对西番莲果种子进行第I提取处理后，在接下来的第2提取处理时，无论使用所述含水醇系溶媒或所述含水酮系溶媒、还是使用此外的其它溶媒，均可期待其提取效率得到改善。
[0050]通过上述方法获得的西番莲果种子的提取物，可直接或将其浓缩的液体状的物质作为含白皮杉醇组合物。也可通过冷冻干燥或喷雾干燥将其粉末化，将粉末状的物质作为含白皮杉醇组合物。另外，本发明不限于这些形态。可将提取物中所含的不溶物适当通过过滤等方式去除，也可将不溶物再粉碎，形成微细粒子状。
[0051]另外，对于按上述方法获得的西番莲果种子的初次提取物，可以通过离子交换、尺寸排阻色谱法、HPLC法、凝胶过滤、膜分离等方法，将白皮杉醇按指标进行分级、精制后，将其作为含白皮杉醇组合物。 [0052]具体是，例如后述的实施所示，将从西番莲果种子中提取的组合物在下述条件下使用HPLC法，白皮杉醇在41分附近被溶出。另外，对该溶出部分通过质量分析装置进行质谱(mass spectrum)测定，负离子模式的信号呈m/z243。
[0053][HPLC 条件]
[0054].柱:Mightysil RP - 18GP150 - 4.6 径 4.6mm、长 150mm (关东化学株式会社)
[0055].柱温度:40°C
[0056].溶出条件:流速lml/min,0%甲醇一30%甲醇(60min)
[0057].UV 检测:280nm
[0058]这样，在本发明中，以上述示例的白皮杉醇的物性为指标进行适当分级、精制，从而可以制备提高了白皮杉醇的含有量的、来自西番莲果种子的含白皮杉醇组合物。
[0059]本发明的含白皮杉醇组合物，根据需要可添加药物学容许的基质或载体，形成片剂、颗粒剂、散剂、液剂、粉末、颗粒、胶囊剂、胶状剂等的形态用于医药，此外，还可形成软膏剂、乳霜剂、凝胶、面膜、化妆水、保湿品等形态用于化妆品。
[0060]另外，本发明的含白皮杉醇组合物，还可添加至特定保健用食品、营养辅助食品、功能性食品等以供摄取。这样的食品例如有巧克力、饼干、□香糖、糖果、曲奇饼、果冻、压缩饼干等的糕点类食品；谷类食品；粉末饮料、清凉饮料、乳饮料、营养饮料、碳酸饮料、凝胶饮料等的饮料；冰淇淋、冰糕等的冰点。另外，荞麦面、面食、面条、挂面等的面类也是很好的例子。另外，特定保健用食品及营养辅助食品等可以是粉末、颗粒、胶囊、糖浆、片剂、糖衣剂等的形态。
[0061]实施例
[0062]下面通过实施例对本发明进行具体说明，但本发明的范围并不以这些实施方式为限。
[0063]<试验例1> [西番莲果中的白皮杉醇的检测及同定]
[0064]将西番莲果分为果皮、果肉、种子3个部位，分别进行冷冻干燥，用粉碎机(商品名"sampIemiI型式SK - M”，协立理工株式会社)粉碎后，用80%含水乙醇对各部位进行提取。远心后取上层清液，用蒸发器浓缩后，进行冷冻干燥形成粉末。将该粉末溶于水即为提取物。随后，将各个固态的浓度进行稀释，种子提取物稀释至0.01g/ml，果皮提取物或果肉提取物稀释至0.lg/ml，并各取5 μ I进行HPLC分析。
[0065]HPLC的分析条件如下:
[0066].柱:Mightysil RP - 18GP150 - 4.6 径 4.6mm，长 150mm (关东化学株式会社制)
[0067].柱温度:40°C[0068].溶出条件:流速lml/min，0%甲醇一30%甲醇(60min)
[0069].UV 检测:280nm
[0070]图1A~图1C表示的是上述各提取物的HPLC色谱。其结果如图1A所示，种子提取物在41分附近达到峰。与此相比，果皮及果肉的提取物，虽然注入的固态浓度是种子提取物的10倍，但在41分附近未确认峰。
[0071]接下来，对种子提取物在上述保持时间41分附近溶出的成分是什么物质进行下述的同定。
[0072]首先，使用HPLC/质量分析装置(THERMO ELECTRON株式会社制，装置名称“Thermo -LCQ -MS/MS”)测定其质谱(图2A)。通过阳极、阴极两种离子模式进行确认，在阴极发现了良好的离子，所以使用其数据。其结果是，主要信号m/z243为(Μ - H)_，其它峰m/2279属于(]?+2!120-!0_，111/^487属于(]\^2-!0_。因此决定了分子量为244。另外，取UV光谱，作为入max,观察到220nm、304nm、322nm (图2B)。
[0073]这些质谱及UV光谱的结果，与花生皮所含的多酹-白藜芦醇(Resveratrol,
分子量228)类似(参照图3A、B)。另外，还另行确认了向吸附多酚的树脂聚乙烯吡咯烷酮(PVPP:polyvinylpolypyrrolidone)的吸附。另外，上述41分附近的峰与相同HPLC条件下的白藜芦醇的保持时间相比 ，向反相柱的保持时间较短。综上所述，上述种子提取物在保持时间41分附近溶出的成分，是比白藜芦醇大I个分子量的羟基的、下述式(I)所示的白皮杉醇(Piceatannol,分子量244)。
[0074][化2]
[0075]
【权利要求】
1.一种含白皮杉醇组合物，其特征在于: 从西番莲果种子中获得，以大于10至99.9质量％的含有量含有白皮杉醇。
2.一种饮食品，其特征在于: 添加了以0.0001~99.9质量％的含有量含有从西番莲果种子中获得的白皮杉醇的含白皮杉醇组合物。
3.一种化妆品，其特征在于: 添加了以大于10至99.9质量％的含有量含有从西番莲果种子中获得的白皮杉醇的含白皮 杉醇组合物。
【文档编号】A23L1/29GK103751156SQ201310312550
【公开日】2014年4月30日 申请日期:2009年4月3日 优先权日:2009年4月3日
【发明者】松井悠子, 龟井优德, 杉山谦吉 申请人:森永制果株式会社