一种摇瓶培养基的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种摇瓶培养基的配制方法，特别是一种四环素的摇瓶培养基的配制方法，该培养基的配制方法是：先用玉米淀粉和淀粉酶制备成液化糖，然后依次加入黄豆饼粉、酵母粉、(NH4)2SO4、NaSO4、MgSO4.7H2O、K2HPO4.3H2O，定容并用碱性试剂调节pH，最后灭菌可得摇瓶培养基。本发明在四环素传统摇瓶培养基的基础上，通过先制备液化糖，再加入其他培养基原材料的配制方法，使用本发明的培养基进行四环素摇瓶发酵时，发酵的效价较传统培养基提高20～25％。
【专利说明】一种摇瓶培养基的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明属于生物发酵医药【技术领域】，特别是涉及一种四环素摇瓶培养基的制备方法。
【背景技术】
[0002]四环素具有抗菌谱宽、急性、毒性低、副作用小的优点，虽然在医药方面的直接用量并不大，但它以其抑菌、促生长、饲料利用率高及其在肌体内残留量低等优点，在畜牧业上大量用作饲料添加剂；此外通过化学改造可以制备或者发明具有高的临床价值且疗效更为优越的半合成抗生素，近年来四环类抗生素在抗肿瘤、抑制骨吸收、促进骨形成等方面的研究，拓宽了这类产品在医药方面的应用范围。目前，在我国四环素菌种选育中，其性能的优劣由摇瓶培养发酵液生产抗生素效价的高低来判定。所以摇瓶培养基的优劣直接影响着发酵水平的表达。
[0003]四环素摇瓶配制中，原材料种类单一。配制时淀粉用开水糊化，配制培养基质量与糊化时水的温度、加水量关系密切；并且培养基灭菌后，淀粉配比越高越黏稠，接种后菌种调整期过长容易造成摇瓶批次间差异波动大，影响摇瓶发酵质量及效价。
【发明内容】
[0004]本发明的目的就在于提供一种四环素摇瓶培养基的配制方法，提高摇瓶效价，降低摇瓶效价波动的配制方法。
[0005]1、向100ml的烧杯中加入60克的玉米淀粉和700毫升的饮用水，加入0.06克的淀粉酶，将烧杯置于电磁炉上，加热并搅拌，温度升至70?80°C时，保温10?15分钟，即可制得液化糖。
[0006]2、将20克黄豆饼粉、10克酵母粉、5.0克(NH4)2S04、6.0克NaS04、1.2克MgSO4.7H20、3.0克K2HPO4.3H20、分别用饮用水溶解后加入液化糖中，定容至1000毫升，调节至PH7.0?7.2，分装摇瓶，118?121°C灭菌30min。
[0007]3、将四环素菌株接到摇瓶培养基中，培养160小时后，经检测发酵单位较利用传统摇瓶培养基提高20?25%。
【具体实施方式】
[0008]实施例:对比案例
将传统摇瓶培养基分装摇瓶，118?121°C灭菌30min。将四环素菌株接到摇瓶培养基中，培养160小时后，经检测发酵单位效价17000u/ml。
[0009]实施例1
向100ml的烧杯中加入60克的玉米淀粉和700毫升的饮用水，加入0.06克的淀粉酶，将烧杯置于电磁炉上，加热并搅拌，温度升至70?80°C时，保温10?15分钟，即可制得液化糖。将20克黄豆饼粉、10克酵母粉、5.0克(NH4)2SO4、6.0克NaSO4U.2克MgSO4.7H20、3.0克K2HPO4.3H20、分别用饮用水溶解后加入液化糖中，定容至1000毫升，调节至PH7.0?7.2，分装摇瓶，118?121°C灭菌30min。将四环素菌株接到摇瓶培养基中，培养160小时后，经检测发酵单位为20570u/ml，比对比实验提高21%。
【权利要求】
1.一种摇瓶培养基的制备方法，特别是一种四环素摇瓶培养基的制备方法，该方法首先用玉米淀粉和淀粉酶制得液化糖，然后将黄豆饼粉、酵母粉、(NH4)2S04、NaS04、MgS04.7H20、K2HP04.3H20分别用饮用水溶解后加入液化糖中，定容并调节pH至7.0?7.2，分装摇瓶，118?121°C灭菌30min。
2.按照权利要求1所述的摇瓶培养基的制备方法，其特征是在摇瓶培养基制备过程中，先制备液化糖，然后在液化糖中加入其他摇瓶培养基原材料。
【文档编号】C12P29/00GK104342476SQ201310312482
【公开日】2015年2月11日 申请日期:2013年7月24日 优先权日:2013年7月24日
【发明者】张燕玉, 孙瑞君, 陈卓, 王惠 申请人:宁夏启元药业有限公司