一种基于菌草的茶树菇培养基以及茶树菇液体菌种制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种基于菌草的茶树菇培养基，包括以下重量份组分：菌草120?122、胡罗卜粉70?80、酵母自溶粉90?92、蜂皇浆100?102、槐糖脂1?2、丙酸钙1.2?1.4、植物氢化油0.2?0.3、纳米级电气石粉5.6?6、细菌纳米纤维素5?6等。本发明结合酶解菌草以及胡罗卜粉、蜂皇浆、酵母自溶粉为主料制备茶树菇液体培养基，为茶树菇母种以及扩培提供了丰富的营养；在液体培养基的制备过程中，借助纳米级电气石粉电激处理时的灭菌功效，辅助液体培养基的灭菌，相对传统的灭菌，操作简单，能耗少；同时加入纳米电气石粉和纳米纤维素营养以及载体物质，可以提高菌丝球分布的稳定性，是高质量的茶树菇液体菌种。
【专利说明】
一种基于菌草的茶树菇培养基以及茶树菇液体菌种制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及液体菌种技术领域，尤其涉及一种基于菌草的茶树菇培养基以及茶树菇液体菌种制备的方法。
【背景技术】
[0002]茶树菇生产过程中，液体菌种具有固体菌种所不可比拟的优势，液体菌种具有生产周期短，菌龄短而一致，纯度高、活力强，接种简便快捷，易实行工厂化、规模化、标准化生产等优点。现在，越来越多的人都在研究和使用液体菌种，而液体菌种的推广和使用也是实现食用菌工厂化、规模化、标准化的必然趋势。但是液体菌种也存在着自身的缺陷和不足:
1、液体菌种萌发点多生长速度快，但是穿透力不强，培养料过粗菌丝不易吃透培养料，菌丝将沿着培养料表面快速生长，培养料内部菌丝量很少，严重影响了菌种产量和质量的问题；
2、常规的液体菌种虽然解决了固体菌种存在的一些问题，能明显缩短栽培周期、增强菌种活力和抗逆性、降低菌种污染率、使得菌种质量整齐度提高，但仍存在例如发酵得到的液体菌种中菌球的密度、大小、均匀度等物理特性不是很理想等不足，如果用搅拌剪切的方法将菌球打碎，得到的菌种均匀度会更理想，但是，高速搅拌粉碎和打浆的剪切力对菌种伤害极大，对菌种整体的质量影响较为严重。开发分布均匀且具有更小粒径菌丝球的高质量的液体菌种具有重要意义。公开号CN105309194A《食用菌微粒液体菌种生产新技术》提供了一种菌丝球粒径在0.5mm的食用菌微粒液体菌种，采用的增加食用菌液体菌种培养液通气量，使通气量在1: 0.6—0.9V/V.min为适宜，同时在通气发酵罐内装置搅拌器使培养液涡流运动延长气泡的运动路线的技术操作方法，该生产微粒液体菌种的方法是从生产工艺上进行改进，并没有液体菌种培养基方面进行改进，实施起来技术难度要求高;公开号CN105130516A《分子级生物培养基制作方法》提到了分子级生物培养基营养成分可以快速全面的被吸收，促进液体菌种的生长，但是并没有提到分子级生物培养基对液体菌种菌丝球直径大小的影响。发展一种基于液体菌种培养基原材料成分改进液体菌种菌丝球直径改善食用菌菌种产量和质量的技术，具有重要的意义。
[0003]细菌纳米纤维素是自然界的丰富的可再生产物之一，细菌纳米纤维素是纤维素的物理最小结构单元，是指直径1-1OOnm之间的纤维，细菌纳米纤维素质轻，生物相容性好，可降解、可再生，反应活性高，且具有杨氏模量高，聚合度高，洁净度高，强度高，比表面积大等优势。将细菌纳米纤维素作作为食用菌液体菌种培养基原材料，对食用菌液体菌种的菌丝球分布以及直径具有一定的影响，进而起到改善食用菌菌种质量的作用。
【发明内容】
[0004]本发明目的就是为了弥补已有技术的缺陷，提供一种基于菌草的茶树菇培养基以及茶树菇液体菌种制备方法。
[0005]本发明是通过以下技术方案实现的:
一种基于菌草的茶树燕培养基，包括以下重量份组分:菌草120-122、胡罗卜粉70-80、酵母自溶粉90-92、蜂皇浆100-102、磷酸二氢钾0.4-0.5、硫酸镁0.3-0.4、石膏粉0.3-0.4、槐糖脂1-2、丙酸钙1.2-1.4、植物氢化油0.2-0.3、羟甲基纤维素钠0.2-0.3、纤维素酶2-3、轻质碳酸钙8-9、纳米级电气石粉5.6-6、细菌纳米纤维素5-6、适量的水。
[0006]—种采用上述的培养基制备茶树菇液体菌种的方法，包括以下步骤:
(I )、将一半纳米级电气石粉和水按照0.lg/L混合，通电激发制备无菌水备用;将植物氢化油、羟甲基纤维素钠的总量和无菌水按lg/L混合在30°C搅拌溶解得溶液一;将磷酸二氢钾、硫酸镁、石膏粉、槐糖脂、丙酸钙的总量和无菌水按4g/L混合搅拌溶解得溶液二;将菌草放入超微粉碎机中粉碎处理30min，之后加入纤维素酶以及轻质碳酸钙以及总重量12-13倍的水混合搅拌均匀后在45°C下搅拌酶解50min，将该酶解液中加入胡罗卜粉、酵母自溶粉、蜂皇浆混合搅拌溶解，并在进行98°C进行巴氏灭菌灭酶1min，得溶液三;将另一半纳米电气石粉和细菌纳米纤维素以及总重量3-4倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用；
(2 )、将溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；
(3)、将茶树菇母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为PH5.2-5.5、接种量12%、温度28-30°C、摇床转速105r/min、培养13-14h，得茶树菇液体菌种一；
(4)、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合均匀得复合培养基，并放置到无菌培养瓶中，将步骤(3 )得到的茶树菇液体菌种一按30%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度28-30°C，培养23-24h即得。
[0007]本发明的优点是:
本发明结合酶解菌草以及胡罗卜粉、蜂皇浆、酵母自溶粉为主料制备茶树菇液体培养基，为茶树菇母种以及扩培提供了丰富的营养;在液体培养基的制备过程中，借助纳米级电气石粉电激处理时的灭菌功效，辅助液体培养基的灭菌，相对传统的灭菌，操作简单，能耗少；同时;茶树菇液体菌种的制备采用了液体发酵以及扩培两阶段，第二阶段的培养基中加入纳米电气石粉和纳米纤维素营养以及载体物质，避免了杂菌的污染，同时给茶树菇种提供了良好的营养物质和生存环境，可以提高菌丝球分布的稳定性，避免了液体菌种使用前通过对菌丝球的机械粉碎造成的损失，是高质量的茶树菇液体菌种。
【具体实施方式】
[0008]一种基于菌草的茶树菇培养基，包括以下重量份组分:菌草120、胡罗卜粉70、酵母自溶粉90、蜂皇浆100、磷酸二氢钾0.4、硫酸镁0.3、石膏粉0.3、槐糖脂1、丙酸钙1.2、植物氢化油0.2、羟甲基纤维素钠0.2、纤维素酶2、轻质碳酸钙8、纳米级电气石粉5.6、细菌纳米纤维素5、适量的水。
[0009]—种采用上述的培养基制备茶树菇液体菌种的方法，包括以下步骤:
(I )、将一半纳米级电气石粉和水按照0.lg/L混合，通电激发制备无菌水备用;将植物氢化油、羟甲基纤维素钠的总量和无菌水按lg/L混合在30°C搅拌溶解得溶液一;将磷酸二氢钾、硫酸镁、石膏粉、槐糖脂、丙酸钙的总量和无菌水按4g/L混合搅拌溶解得溶液二;将菌草放入超微粉碎机中粉碎处理30min，之后加入纤维素酶以及轻质碳酸钙以及总重量12倍的水混合搅拌均匀后在45°C下搅拌酶解50min，将该酶解液中加入胡罗卜粉、酵母自溶粉、蜂皇浆混合搅拌溶解，并在进行98 °C进行巴氏灭菌灭酶1min，得溶液三;将另一半纳米电气石粉和细菌纳米纤维素以及总重量3倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用;
(2 )、将溶液三保持20 0C、溶液二保持25 0C、溶液一保持30 V，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用；
(3)、将茶树菇母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为pH5.2、接种量12%、温度28 °C、摇床转速105r/min、培养13h，得茶树菇液体菌种一；
(4)、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合均匀得复合培养基，并放置到无菌培养瓶中，将步骤(3 )得到的茶树菇液体菌种一按30%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度28°C，培养23h即得。
【主权项】
1.一种基于菌草的茶树菇培养基，其特征在于，包括以下重量份组分:菌草120-122、胡罗卜粉70-80、酵母自溶粉90-92、蜂皇浆100-102、磷酸二氢钾0.4-0.5、硫酸镁0.3-0.4、石膏粉0.3-0.4、槐糖脂1-2、丙酸钙1.2-1.4、植物氢化油0.2-0.3、羟甲基纤维素钠0.2-0.3、纤维素酶2-3、轻质碳酸钙8-9、纳米级电气石粉5.6-6、细菌纳米纤维素5-6、适量的水。2.—种采用权利要求1所述的培养基制备茶树菇液体菌种的方法，其特征在于，包括以下步骤: (I )、将一半纳米级电气石粉和水按照0.lg/L混合，通电激发制备无菌水备用；将植物氢化油、羟甲基纤维素钠的总量和无菌水按lg/L混合在30°C搅拌溶解得溶液一;将磷酸二氢钾、硫酸镁、石膏粉、槐糖脂、丙酸钙的总量和无菌水按4g/L混合搅拌溶解得溶液二;将菌草放入超微粉碎机中粉碎处理30min，之后加入纤维素酶以及轻质碳酸钙以及总重量12-13倍的水混合搅拌均匀后在45°C下搅拌酶解50min，将该酶解液中加入胡罗卜粉、酵母自溶粉、蜂皇浆混合搅拌溶解，并在进行98°C进行巴氏灭菌灭酶1min，得溶液三;将另一半纳米电气石粉和细菌纳米纤维素以及总重量3-4倍的水混合搅拌均匀并采用高温蒸汽灭菌，得溶液四备用； (2)、将溶液三保持20°C、溶液二保持25°C、溶液一保持30°C，先将溶液一加入到溶液二中混合搅拌均匀得复合液，在将该复合液加入到溶液三中混合搅拌均匀得营养液，并调整pH，此后对该营养液进行通电激发处理30min得液体培养基备用； (3)、将茶树菇母种在无菌环境中先接种到一半的液体培养基上进行液体发酵，发酵条件为PH5.2-5.5、接种量12%、温度28-30°C、摇床转速105r/min、培养13-14h，得茶树菇液体菌种一； (4)、将剩余一半的液体培养基以及溶液四无菌混合均匀得复合培养基，并放置到无菌培养瓶中，将步骤(3 )得到的茶树菇液体菌种一按30%的接种量在无菌环境中接种到该培养瓶中，温度28-30°C，培养23-24h即得。
【文档编号】C12N1/14GK106047719SQ201610472477
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年6月27日
【发明人】柯家厚
【申请人】合肥福泉现代农业科技有限公司