对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法
【专利摘要】本发明公开了对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法。具体步骤如下：第一步：选取合适的菌株：将目的菌株，即腺普甲硫氨酸菌株进行活化以及单孢分离，然后选取目的数量十倍的单菌落；第二步：离心筛选：离心后，在离心瓶中选取相对较完整的菌株，数量最少为原来的二分之一；第三步：传代实验，然后在培养基中进行发酵培养，将传代比较稳定的挑选出来；第四步：用一疏基乙醇进行处理，还原菌株细胞壁中的胶原蛋白，以提高其原生质体的形成率；第五步：加入高浓度的稳渗液，然后考察期对再生和形成率的影响；第六步：加入甘露醇后烘烤，即可。所述酶解时间为120-130分钟。本发明的有益效果是，工艺简单，最终产物累积量高，而且分离提纯比较容易，分子稳定。
【专利说明】对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种生化实验的制备方法，具体来说，是指对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法。
【背景技术】
[0002]腺苷基甲硫氨酸，是指带有一个活化了的甲基，是一种参与甲基转移反应的辅酶，存在于所有的真核细胞中。研究表明定期食用S-腺苷基蛋氨酸可抗抑郁，肝脏疾病，和关节炎/关节疼痛。在美国市场上用SAM-e的名字按营养补品销售，有改善情绪、保养肝脏和舒适关节的功效。SAM在生物体所有细胞的代谢中均起重要作用，是体内100多种不同的甲基转移酶催化反应的甲基供体；也是合成谷胱甘肽(GSH)的转硫过程和合成多胺的转氨丙基过程的前体分子，并且还与多种酶的活性相关。来源充足的SAM是维持这些代谢途径正常运转的前提，有转甲基作用、转氨丙基作用、转硫作用。具有消炎、减轻疼痛及组织修复功能，对关节病疗效显著，具有明显促进软骨生成和减轻关节疼痛、僵硬和肿胀的功效，且与非类固醇抗炎药相比，既不抑制前列腺素合成，也不会操作胃肠道。欧洲已将SAMe作为治疗关节炎的处方药使用。
【发明内容】
[0003]为克服上述技术问题，我们提出了以下技术方案: 对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法，
第一步:选取合适的菌株:将目的菌株，即腺普甲硫氨酸菌株进行活化以及单孢分离，然后选取目的数量十倍的单菌落；
第二步:离心筛选:离心后，在离心瓶中选取相对较完整的菌株，数量最少为原来的二分之一;
第三步:传代实验，然后在培养基中进行发酵培养，将传代比较稳定的挑选出来；第四步:用一疏基乙醇进行处理，还原菌株细胞壁中的胶原蛋白，以提高其原生质体的形成率；
第五步:加入高浓度的稳渗液，然后考察期对再生和形成率的影响；
第六步:加入甘露醇后烘烤，即可。
[0004]本发明中，所述酶解时间为120-130分钟。
[0005]本发明的有益效果是，工艺简单，最终产物累积量高，而且分离提纯比较容易，分子稳定。
【具体实施方式】
[0006]对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法，
第一步:选取合适的菌株:将目的菌株，即腺普甲硫氨酸菌株进行活化以及单孢分离，然后选取目的数量十倍的单菌落；第二步:离心筛选:离心后，在离心瓶中选取相对较完整的菌株，数量最少为原来的二分之一;
第三步:传代实验，然后在培养基中进行发酵培养，将传代比较稳定的挑选出来；第四步:用一疏基乙醇进行处理，还原菌株细胞壁中的胶原蛋白，以提高其原生质体的形成率；
第五步:加入高浓度的稳渗液，然后考察期对再生和形成率的影响；
第六步:加入甘露醇后烘烤，即可。
[0007]所述酶解时间为120分钟。
[0008]以上所述，仅为本发明较佳的【具体实施方式】，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本【技术领域】的技术人员在本发明披露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖`在本发明的保护范围之内。
【权利要求】
1.对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法，其特征在于，第一步:选取合适的菌株:将目的菌株，即腺普甲硫氨酸菌株进行活化以及单孢分离，然后选取目的数量十倍的单菌落；第二步:离心筛选:离心后，在离心瓶中选取相对较完整的菌株，数量最少为原来的二分之一; 第三步:传代实验，然后在培养基中进行发酵培养，将传代比较稳定的挑选出来；第四步:用一疏基乙醇进行处理，还原菌株细胞壁中的胶原蛋白，以提高其原生质体的形成率；第五步:加入高浓度的稳渗液，然后考察期对再生和形成率的影响；第六步:加入甘露醇后烘烤，即可。
2.如权利要求1所述的对腺普甲硫氨酸菌的原生质体的制备方法，其特征在于，所述酶解时间为120-130分钟。
【文档编号】C12N1/14GK103642697SQ201310575466
【公开日】2014年3月19日 申请日期:2013年11月18日 优先权日:2013年11月18日
【发明者】于丹 申请人:于丹