一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种水母活性胶原蛋白水解产1物的提取工艺，包括水母预处理工序、水母活性胶原蛋白制取工序和水母活性胶原蛋白水解物制取工序，取水母伞盖经过水洗、浸泡、清洗、除水、分块和冷干预处理后进入水母活性胶原蛋白制取工序，将预处理好的水母伞盖经过粉碎、碱浸、清洗和酶反应后进行离心分离和膜分离，得到水母活性胶原蛋白，水母活性胶原蛋白经过一次酶促反应、二次酶促反应和离心分离后进行膜浓缩，得到水母活性胶原蛋白水解物。本发明解决了水母胶原蛋白水解产物工业化生产难题，提出水母胶原蛋白水解产物工业化生产路线及关键工艺参数和设备，为水母胶原蛋白的大规模利用找到解决方案，从而可以将水母应用于医用、化妆品生产等。
【专利说明】一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种胶原蛋白水解产物，具体是一种水母活性胶原蛋白水解产物的提 取工艺。
【背景技术】
[0002] 水母胶原蛋白由3条α肽链组成，不利于人体吸收，其水解产物可用于化妆品制 备和医用，但国内外研究报道的水母胶原蛋白及其水解产物的提取方法较为复杂，且主要 用于实验室研究，无法满足工业生产时大量提取水母胶原蛋白水解产物的要求。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种能够大规模工业化生产的水母活性胶原蛋白水解产 物的提取工艺，以解决上述【背景技术】中提出的问题。
[0004] 为实现上述目的，本发明提供如下技术方案： 一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺，包括水母预处理工序、水母活性胶原蛋 白制取工序和水母活性胶原蛋白水解物制取工序，取水母伞盖经过水洗、浸泡、清洗、除水、 分块和冷干预处理后进入水母活性胶原蛋白制取工序，将预处理好的水母伞盖经过粉碎、 碱浸、清洗和酶反应后进行离心分离和膜分离，得到水母活性胶原蛋白，水母活性胶原蛋白 经过一次酶促反应、二次酶促反应和离心分离后进行膜浓缩，得到水母活性胶原蛋白水解 物。
[0005] 作为本发明进一步的方案：所述水母预处理工序，包括如下步骤：（1)将水母的伞 盖和触角分开，取水母伞盖部分作为原料；（2)对水母伞盖进行整洗，将水母伞盖沉入漂洗 槽中，去除大块污物和大颗粒污物，整洗至水母伞盖表面无异物；（3)将整洗后的水母伞盖 放入浸泡槽中浸泡11?13h，不断补充自来水；（4)将浸泡后的水母伞盖用去离子水淋洗 1?2min ; (5)将精洗后的水母伞盖装入滚筒甩干机中脱水1?3min，去除表面剩余水份后 将水母伞盖切割成小于5cmX 5cm的小块；（6)将切割成小块的水母放入低于-20°C的冷藏 干燥器中，冷藏23?25h后备用。
[0006] 作为本发明进一步的方案：所述水母活性胶原蛋白制取工序，包括如下步骤：（1) 将冷干后备用的水母投入研磨机研磨至粒径为45?60目；（2)将研磨后的水母投入碱浸 罐，加入18?22V/W的0. lmol/L的NaOH溶液，水母在碱浸罐中浸泡47?49h并进行混合 搅拌；（3)将碱浸后的水母用去离子水淋洗3?5min ; (4)将清洗后的水母投入酶反应罐进 行混合搅拌；（5)将酶反应后的产物泵入离心分离机离心1?2min后静置，抽取上清液泵 入膜分离器，取浓缩液，即得到水母活性胶原蛋白，在3?5°C的环境下保存。
[0007] 作为本发明再进一步的方案：所述水母活性胶原蛋白水解物制取工序，包括如 下步骤：（1)将水母活性胶原蛋白投入碱性酶反应罐进行一次酶促反应，加入碱性蛋白酶 prope. E，反应阶段起始pH值为7. 8?8. 2,温度为45?55°C，反应时间为2. 5?3. 5h ; (2)将一次酶促反应的产物物引入二次酶反应罐进行二次酶促反应，加入胰蛋白酶，加入 0. 05mol/L的NaOH溶液，反应起始阶段pH值为7. 3?7. 8,温度为40?50°C，反应时间为 2. 5?3. 5h ; (3)将二次酶促反应的产物进行离心分离2?4min，取上层液体进行膜浓缩， 得到水母活性胶原蛋白水解物；（4)将切割成小块的水母放入低于-20°C的冷藏干燥器中， 冷干后放入低于_20°C的冷藏干燥器中环境中存储。
[0008] 与现有技术相比，本发明的有益效果是： 本发明解决了水母胶原蛋白水解产物工业化生产难题，提出水母胶原蛋白水解产物工 业化生产路线及关键工艺参数和设备，为水母胶原蛋白的大规模利用找到解决方案，从而 可以将水母应用于医用、化妆品生产等。
【专利附图】
【附图说明】
[0009] 图1为本发明中水母预处理工序图。
[0010] 图2为本发明中水母活性胶原蛋白制取工序图。
[0011] 图3为本发明中水母活性胶原蛋白水解物制取工序图。
【具体实施方式】
[0012] 下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完 整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于 本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他 实施例，都属于本发明保护的范围。
[0013] 请参阅图1?3,本发明实施例中，一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺， 包括水母预处理工序、水母活性胶原蛋白制取工序和水母活性胶原蛋白水解物制取工序， 取水母伞盖经过水洗、浸泡、清洗、除水、分块和冷干预处理后进入水母活性胶原蛋白制取 工序，将预处理好的水母伞盖经过粉碎、碱浸、清洗和酶反应后进行离心分离和膜分离，得 到水母活性胶原蛋白，水母活性胶原蛋白经过一次酶促反应、二次酶促反应和离心分离后 进行膜浓缩，得到水母活性胶原蛋白水解物。
[0014] 实施例1 一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺，包括水母预处理工序、水母胶原蛋白制 取工序和水母胶原蛋白水解物制取工序。水母预处理工序，包括如下步骤：（1)将水母的伞 盖和触角分开，取水母伞盖部分作为原料；（2)对水母伞盖进行整洗，将水母伞盖沉入漂洗 槽中，去除大块污物和大颗粒污物，整洗至水母伞盖表面无异物；（3)将整洗后的水母伞盖 放入浸泡槽中浸泡Ilh ; (4)将浸泡后的水母伞盖用去离子水淋洗Imin ; (5)将精洗后的水 母伞盖装入滚筒甩干机中脱水lmin，去除表面剩余水份后将水母伞盖切割成3cmX 3cm的 小块；（6)将切割成小块的水母放入低于-20°C的冷藏干燥器中，冷藏23h后备用。
[0015] 水母活性胶原蛋白制取工序，包括如下步骤：（1)将冷干后备用的水母投入研磨 机研磨至粒径为45目；（2)将研磨后的水母投入碱浸罐，加入18V/W的0. lmol/L的NaOH溶 液，水母在碱浸罐中浸泡47h并进行混合搅拌；（3)将碱浸后的水母用去离子水淋洗3min ; (4)将清洗后的水母投入酶反应罐进行混合搅拌；（5)将酶反应后的产物泵入离心分离机 离心Imin后静置，抽取上清液泵入膜分离器，取浓缩液，即得到水母活性胶原蛋白，在：TC 的环境下保存。
[0016] 水母活性胶原蛋白水解物制取工序，包括如下步骤：（1)将水母活性胶原蛋白投 入碱性酶反应罐进行一次酶促反应，加入碱性蛋白酶prope. E，反应阶段起始pH值为7. 8， 温度为45°C，反应时间为2. 5h ; (2)将一次酶促反应的产物物引入二次酶反应罐进行二次 酶促反应，加入胰蛋白酶，，加入〇. 〇5mol/L的NaOH溶液，反应起始阶段pH值为7. 3,温度 为40°C，反应时间为2. 5h ; (3)将二次酶促反应的产物进行离心分离2min，取上层液体进行 膜浓缩，得到水母活性胶原蛋白水解物；（4)将切割成小块的水母放入-22°C的冷藏干燥器 中，冷干后放在-22 °C的环境中存储。
[0017] 实施例2 一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺，包括水母预处理工序、水母胶原蛋白制 取工序和水母胶原蛋白水解物制取工序。水母预处理工序，包括如下步骤：（1)将水母的 伞盖和触角分开，取水母伞盖部分作为原料；（2)对水母伞盖进行整洗，将水母伞盖沉入漂 洗槽中，去除大块污物和大颗粒污物，整洗至水母伞盖表面无异物；（3)将整洗后的水母 伞盖放入浸泡槽中浸泡12h，不断补充自来水；（4)将浸泡后的水母伞盖用去离子水淋洗 I. 5min ; (5)将精洗后的水母伞盖装入滚筒甩干机中脱水2min，去除表面剩余水份后将水 母伞盖切割成4cmX 4cm的小块；（6)将切割成小块的水母放入-20°C的冷藏干燥器中，冷藏 24h后备用。
[0018] 水母活性胶原蛋白制取工序，包括如下步骤：（1)将冷干后备用的水母投入研磨 机研磨至粒径为50目；（2)将研磨后的水母投入碱浸罐，加入20V/W的0. lmol/L的NaOH溶 液，水母在碱浸罐中浸泡48h并进行混合搅拌；（3)将碱浸后的水母用去离子水淋洗4min ; (4) 将清洗后的水母投入酶反应罐进行混合搅拌；（5)将酶反应后的产物泵入离心分离机 离心I. 5min后静置，抽取上清液泵入膜分离器，取浓缩液，即得到水母活性胶原蛋白，在 4°C的环境下保存。
[0019] 水母活性胶原蛋白水解物制取工序，包括如下步骤：（1)将水母活性胶原蛋白投 入碱性酶反应罐进行一次酶促反应，加入碱性蛋白酶prope. E，反应阶段起始pH值为8,温 度为50°C，反应时间为3h ; (2)将一次酶促反应的产物物引入二次酶反应罐进行二次酶促 反应，加入胰蛋白酶，加入0. 05mol/L的NaOH溶液，反应起始阶段pH值为7. 5,温度为45°C， 反应时间为3h ; (3)将二次酶促反应的产物进行离心分离3min，取上层液体进行膜浓缩，得 到水母活性胶原蛋白水解物；（4)将切割成小块的水母放入-20°C的冷藏干燥器中，冷干后 放在_20°C的环境中存储。
[0020] 实施例3 一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺，包括水母预处理工序、水母胶原蛋白制 取工序和水母胶原蛋白水解物制取工序。水母预处理工序，包括如下步骤：（1)将水母的伞 盖和触角分开，取水母伞盖部分作为原料；（2)对水母伞盖进行整洗，将水母伞盖沉入漂洗 槽中，去除大块污物和大颗粒污物，整洗至水母伞盖表面无异物；（3)将整洗后的水母伞盖 放入浸泡槽中浸泡13h，不断补充自来水；（4)将浸泡后的水母伞盖用去离子水淋洗2min ; (5) 将精洗后的水母伞盖装入滚筒甩干机中脱水3min，去除表面剩余水份后将水母伞盖切 割成5cmX 5cm的小块；（6)将切割成小块的水母放入-24°C的冷藏干燥器中，冷藏25h后备 用。
[0021] 水母活性胶原蛋白制取工序，包括如下步骤：（1)将冷干后备用的水母投入研磨 机研磨至粒径为60目；（2)将研磨后的水母投入碱浸罐，加入22V/W的0. lmol/L的NaOH溶 液，水母在碱浸罐中浸泡49h并进行混合搅拌；（3)将碱浸后的水母用去离子水淋洗5min ; (4)将清洗后的水母投入酶反应罐进行混合搅拌；（5)将酶反应后的产物泵入离心分离机 离心2min后静置，抽取上清液泵入膜分离器，取浓缩液，即得到水母活性胶原蛋白，在5°C 的环境下保存。
[0022] 水母活性胶原蛋白水解物制取工序，包括如下步骤：（1)将水母活性胶原蛋白投 入碱性酶反应罐进行一次酶促反应，加入碱性蛋白酶prope.E，反应阶段起始pH值为8. 2， 温度为55°C，反应时间为3. 5h ; (2)将一次酶促反应的产物物引入二次酶反应罐进行二次 酶促反应，加入胰蛋白酶，加入〇. 〇5mol/L的NaOH溶液，反应起始阶段pH值为7. 8,温度为 50°C，反应时间为3. 5h ;(3)将二次酶促反应的产物进行离心分离4min，取上层液体进行 膜浓缩，得到水母活性胶原蛋白水解物；（4)将切割成小块的水母放入-24°C的冷藏干燥器 中，冷干后放在-24°C的环境中存储。
[0023] 本发明解决了水母胶原蛋白水解产物工业化生产难题，提出水母胶原蛋白水解产 物工业化生产路线及关键工艺参数和设备，为水母胶原蛋白的大规模利用找到解决方案， 从而可以将水母应用于医用、化妆品生产等。
[0024] 对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在 不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论 从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权 利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有 变化囊括在本发明内。不应将权利要求中的任何附图标记视为限制所涉及的权利要求。
[0025] 此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包 含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当 将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员 可以理解的其他实施方式。
【权利要求】
1. 一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺，其特征在于，包括水母预处理工序、水 母活性胶原蛋白制取工序和水母活性胶原蛋白水解物制取工序，取水母伞盖经过水洗、浸 泡、清洗、除水、分块和冷干预处理后进入水母活性胶原蛋白制取工序，将预处理好的水母 伞盖经过粉碎、碱浸、清洗和酶反应后进行离心分离和膜分离，得到水母活性胶原蛋白，水 母活性胶原蛋白经过一次酶促反应、二次酶促反应和离心分离后进行膜浓缩，得到水母活 性胶原蛋白水解物。
2. 根据权利要求1所述的一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺，其特征在于， 所述水母预处理工序，包括如下步骤：（1)将水母的伞盖和触角分开，取水母伞盖部分作为 原料；（2)对水母伞盖进行整洗，将水母伞盖沉入漂洗槽中，去除大块污物和大颗粒污物， 整洗至水母伞盖表面无异物；（3)将整洗后的水母伞盖放入浸泡槽中浸泡11?13h，不断 补充自来水；（4)将浸泡后的水母伞盖用去离子水淋洗1?2min ; (5)将精洗后的水母伞 盖装入滚筒甩干机中脱水1?3min，去除表面剩余水份后将水母伞盖切割成小于5cmX 5cm 的小块；（6)将切割成小块的水母放入低于-20°C的冷藏干燥器中，冷藏23?25h后备用。
3. 根据权利要求1所述的一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺，其特征在于， 所述水母活性胶原蛋白制取工序，包括如下步骤：（1)将冷干后备用的水母投入研磨机研 磨至粒径为45?60目；（2)将研磨后的水母投入碱浸罐，加入18?22V/W的0. lmol/L的 NaOH溶液，水母在碱浸罐中浸泡47?49h并进行混合搅拌；（3)将碱浸后的水母用去离子 水淋洗3?5min ; (4)将清洗后的水母投入酶反应罐进行混合搅拌；（5)将酶反应后的产物 泵入离心分离机离心1?2min后静置，抽取上清液泵入膜分离器，取浓缩液，即得到水母活 性胶原蛋白，在3?5°C的环境下保存。
4. 根据权利要求1所述的一种水母活性胶原蛋白水解产物的提取工艺，其特征在于， 所述水母活性胶原蛋白水解物制取工序，包括如下步骤：（1)将水母活性胶原蛋白投入碱 性酶反应罐进行一次酶促反应，加入碱性蛋白酶prope. E，反应阶段起始pH值为7. 8? 8. 2,温度为45?55°C，反应时间为2. 5?3. 5h ; (2)将一次酶促反应的产物物引入二次酶 反应罐进行二次酶促反应，加入胰蛋白酶，加入0. 05mol/L的NaOH溶液，反应起始阶段pH 值为7. 3?7. 8,温度为40?50°C，反应时间为2. 5?3. 5h ; (3)将二次酶促反应的产物进 行离心分离2?4min，取上层液体进行膜浓缩，得到水母活性胶原蛋白水解物；（4)将切割 成小块的水母放入低于_20°C的冷藏干燥器中，冷干后放入低于_20°C的冷藏干燥器中环 境中存储。
【文档编号】C12P21/06GK104212864SQ201410415356
【公开日】2014年12月17日 申请日期:2014年8月22日 优先权日:2014年8月22日
【发明者】于金明, 单永, 杨书通, 王磊 申请人:青岛龙宫海洋牧场生态修复工程有限公司