纳豆发酵花粉的生产方法与流程

文档序号:12140506阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种纳豆发酵花粉的生产方法,其特征在于以黄豆为营养原料对纳豆芽孢杆菌进行扩增培养,并以此培养物为基础加入花粉进行花粉发酵,具体包括固体发酵法和液体发酵法两种:

1)固体发酵法,包括下述步骤:

1a、纳豆芽孢杆菌培养液的制备——分别选取多个品牌的纳豆原料,对各品牌纳豆原料分别用普通营养琼脂平板分离纯化得到相应的多种纳豆菌株,用纤维蛋白平板法分别测定各纳豆菌株产生纳豆激酶的能力,选出产纳豆激酶能力最强的个体,-70℃冰箱保存菌种,作为生产菌种;将生产菌种接种于LB液体营养培养基,35℃~40℃,每分钟150~200转摇床培养16~24小时过夜,获得纳豆芽孢杆菌种培养液;

1b、将黄豆用水浸泡12~24小时过夜,115℃~130℃高压灭菌20~30分钟,以高压后黄豆软糯为准,冷却至40℃;

1c、在高压后软糯黄豆上按2%~10%的质量比例接入液体培养过夜的纳豆芽孢杆菌,搅拌均匀后,培养8~24小时,培养温度为20℃~40℃,至黄豆表面生长有灰白色菌膜;

1d、将花粉隔水蒸30分钟,冷却至室温,然后将冷却后的花粉与表面生长有灰白色菌膜的黄豆按1:1~10的质量比例拌和,继续发酵24~48小时;

1e、收集发酵的黄豆和花粉的混合物,真空冰冻干燥36~48小时,真空要求≤10Pa,真空冰冻干燥起始温度为-30~-50℃,真空冰冻干燥12小时后,每小时升温5℃,温度升至25℃后维持至完全干透为止,获得干燥菌体;

1f、用冷循环粉碎机将干燥菌体粉碎成50~100目的细粉,包装,制得产品;

2)液体发酵法,包括下述步骤:

2a、纳豆芽孢杆菌培养液的制备——分别选取多个品牌的纳豆原料,对各品牌纳豆原料分别用普通营养琼脂平板分离纯化得到相应的多种纳豆菌株,用纤维蛋白平板法分别测定各纳豆菌株产生纳豆激酶的能力,选出产纳豆激酶能力最强的个体,-70℃冰箱保存菌种,作为生产菌种;将生产菌种接种于LB液体营养培养基,35℃~40℃,每分钟150~200转摇床培养16~24小时过夜,获得纳豆芽孢杆菌种培养液;

2b、将黄豆与水按1:2~5的质量比例浸泡16~24小时,浸泡液匀浆或磨浆,以总质量的1%~5%添加甘油或葡萄糖或麦麸,115℃~130℃高压灭菌20~30分钟,冷却至40℃;

2c、在高压后黄豆浆液中按2%~5%的质量比例接入液体培养过夜的纳豆芽孢杆菌,通入无菌空气,溶氧量大于10%,以100~200转/分搅拌液体至均匀后,培养6~12小时,培养温度为30℃~42℃;

2d、将花粉置于水中以100℃煮沸15~25分钟,将花粉煮液加到上述已培养6~12小时的黄豆浆液中,至花粉煮液占总液体量的10%~60%,继续发酵24小时;

2e、收集发酵液,真空冰冻干燥36~48小时,真空要求≤10Pa,真空冰冻干燥起始温度为-30~-50℃,真空冰冻干燥12小时后,每小时升温5℃,温度升至25℃后维持至完全干透为止,获得干燥菌体;

2f、用冷循环粉碎机将干燥菌体粉碎成50~100目的细粉,包装,制得产品。

2.根据权利要求1所述的纳豆发酵花粉的生产方法,其特征在于步骤1a和步骤2a中所选取的纳豆原料为日本产的“纳豆生活”牌纳豆、“山大美味”牌的纳豆和极小粒纳豆、中国北京产的“日本风味燕京”牌纳豆。

3.根据权利要求1所述的纳豆发酵花粉的生产方法,其特征在于所述的花粉为油菜花粉、松花粉、茶花粉、枣花粉、荞麦花粉、玉米花粉、荷花花粉、党参花粉、益母草花粉、虞美人花粉、芝麻花粉、蒲公英花粉、菊花花粉、板栗花粉、五味子花粉、葵花蜂花粉、桃花花粉、哈密瓜花粉、洋槐花粉、山楂花花粉、野玫瑰花粉中的一种或多种组合。

4.根据权利要求1所述的纳豆发酵花粉的生产方法,其特征在于发酵产物的真空冰冻干燥采用真空冰冻干燥机进行,真空冰冻干燥的起始温度为-50℃,抽真空达到真空度后,逐渐升温至20℃~35℃后维持至干透为止。

5.根据权利要求1所述的纳豆发酵花粉的生产方法,其特征在于步骤1b和步骤2b中所用的高压灭菌温度为121℃。

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