本发明涉及海产品加工技术领域，特别涉及一种海参提取物的制备方法。
背景技术：
海参属棘皮动物门海参纲动物，具有较高的食用及药用价值，是一种名贵的海洋滋补品。全世界约有1100多种，可食用海参约40种。海参中含有多种活性成分，如多糖、蛋白、皂苷等。海参体壁是海参主要食(药)用部位，其主要构成为上皮组织和真皮结缔组织。海参真皮结缔组织的细胞间充填着胶原等纤维成分和蛋白聚糖，以及其他糖蛋白等无定形间质，即细胞外基质。因此，蛋白质是海参最主要成分。海参体内含有18种氨基酸，有8种是人体自身不能合成的必需氨基酸。海参多糖主要存在于海参体壁中，少量存在于内脏及性腺中，是海参的重要组成部分，具有治疗动脉血栓、降血脂、防治动脉粥样硬化疾病、调节机体免疫力、保护肠黏膜、抗胃溃疡作用。
新鲜海参易发生自溶现象，不宜运输和贮藏，因此促使了海参加工产业的发展。目前，市场上流通最多的是干海参制品。因此，以干海参为原料高效提取其中蛋白、多糖，已经成为海参深度开发利用的重要方向。我国共有约140多种海参，约20种可食用海参，海参资源丰富，常见的有：仿刺参、花刺参、糙海参、海地瓜等。北方仿刺参价格昂贵，食用品质上乘，但不适合作为工业上提取海参蛋白、多糖的原料。我国南方热带海域海参资源丰富，以花刺参产量最大，食用价值相对较高，是海参精深加工优良资源。
目前，一般以冷水长时间泡发后的海参提取海参蛋白或多糖。单独采用冷水泡发的缺点是时间过长，一般2天-3天，汁液流失严重，且在夏季泡发容易腐败变质，不适合工业化生产；而以干海参粉碎后直接提取蛋白或多糖得率较低，原料利用率低，且产品盐含量较高，不适合做为功能性食品配料。因此，需要一种以干花刺参为原料，提取活性成分的方法。
技术实现要素：
有鉴于此，本发明提供了一种海参提取物的制备方法。该制备方法可显著提高蛋白和多糖的提取率。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种海参提取物的制备方法，以干海参为原料，其制备方法包括预处理、酶解处理和加热提取，预处理包括冷水泡发、煮制、剪切、均质的步骤。
作为优选，煮制为：将经冷水泡发后的湿海参浸入相当于湿海参15～20倍重量的90～95℃水中，以90～95℃的温度煮制40～60分钟，停止加热后继续泡发8～12小时。
优选地，煮制为：将经冷水泡发后的湿海参浸入相当于湿海参20倍重量的95℃水中，以95℃的温度煮制45分钟，停止加热后继续泡发10小时。
作为优选，剪切为：将经煮制的海参制成肉糜，加入相当于肉糜3～5倍重量的水，以8000～10000rpm的速率剪切5～10分钟，调节pH值至7.5～8.0。
优选地，剪切为：将经煮制的海参制成肉糜，加入相当于肉糜5倍重量的水，以8000rpm的速率剪切5分钟，调节pH值至7.5。
在本发明提供的实施例中，调节pH值采用的试剂为0.2％Na2CO3溶液。
在本发明中，采用高压均质机对物料进行均质。
作为优选，均质的温度为55℃，压力为25MPa，均质的次数为2～3次。
优选地，均质的次数为2次。
作为优选，冷水泡发的用水量为干海参重量的20～30倍，泡发温度为10～15℃，泡发时间为20～24小时。
优选地，冷水泡发的用水量为干海参重量的25倍，泡发温度为12℃，泡发时间为24小时。
作为优选，酶解处理为：采用水解蛋白酶对均质后的肉糜进行酶解。
作为优选，水解蛋白酶的用量为肉糜重量的0.8％～1％。
优选地，水解蛋白酶的用量为肉糜重量的0.8％。
作为优选，水解蛋白酶为NS37071蛋白酶与木瓜蛋白酶的混合物。
作为优选，NS37071蛋白酶与木瓜蛋白酶的重量比为3:2～4:1。
优选地，NS37071蛋白酶与木瓜蛋白酶的重量比为4:1。
作为优选，酶解的温度为55℃，酶解时间为3～5小时。
优选地，酶解的温度为55℃，酶解时间为4小时。
作为优选，加热提取为：在100～105℃条件下加热40～60分钟，离心，得到上清液。
优选地，加热提取为：在100℃条件下加热55分钟，离心，得到上清液。
在本发明提供的实施例中，加热提取之后还包括：在55℃条件下浓缩至固形物浓度为30％～35％，加入相当于固形物含量10％的麦芽糊精，经喷雾干燥，得到海参提取物。
作为优选，在冷水泡发与煮制之间还包括清洗的步骤。
作为优选，清洗为：冷水泡发结束后，用湿海参重量15～20倍的去离子水清洗湿海参3～4次。
优选地，清洗为：冷水泡发结束后，用湿海参重量20倍的去离子水清洗湿海参4次。
在本发明提供的实施例中，以干花刺参为原料进行提取。
本发明提供了一种海参提取物的制备方法。以干海参为原料，其制备方法包括预处理、酶解处理和加热提取，预处理包括冷水泡发、煮制、剪切、均质的步骤。本发明具有的技术效果为：本发明通过冷水泡发、高温煮制、高速剪切、高压均质的预处理方法，酶解处理方法，高温提取方法联合处理，制备得到高蛋白、高多糖含量、低盐的海参提取物，大大提高了其蛋白质、多糖提取率，所得海参提取物中蛋白质含量>74％，多糖含量>18％，盐含量<4％，水分含量<3％；海参提取物得率>55％，蛋白质提取率>88％，多糖提取率>90％。
具体实施方式
本发明公开了一种海参提取物的制备方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供了一种海参提取物的制备方法，具体包括：
(1)冷水泡发：采用干海参重量20～30倍的去离子水低温浸泡花刺参；低温浸泡时，保持泡发温度10～15℃，泡发20～24小时。
(2)清洗：低温浸泡结束后，用湿海参重量15～20倍的去离子水清洗湿海参3～4次。
(3)高温煮制：将花刺参投入湿海参重量15～20倍的温度为90～95℃的去离子水中，高温煮制40～60分钟。
(4)高温泡发：停止加热，用余热继续泡发8～12小时，收集发好的海参。
(5)物理预处理：用绞肉机将发好的海参绞成肉糜，加入肉糜重量3～5倍的去离子水，高速剪切5～10分钟，剪切速率为8000～10000rpm，用0.2％Na2CO3溶液调节pH值至7.5～8.0，于55℃、25MPa均质2～3次。
(6)酶解：按肉糜重量0.8％～1％的加酶量，加入复配比例为3:2～4:1的NS37071蛋白酶与木瓜蛋白酶，55℃酶解3～5小时。
(7)加热后处理：酶解处理后，酶解液带渣于100～105℃加热40～60分钟，离心去渣，得上清液。
(8)浓缩与喷雾干燥：55℃减压浓缩至固形物浓度为30～35％，加入固形物含量10％的麦芽糊精，喷雾干燥而得花刺参提取物。
采用本发明提供的制备方法，所得海参提取物中蛋白质含量>74％，多糖含量>18％，盐含量<4％，水分含量<3％。海参提取物得率>55％，蛋白质提取率>88％，多糖提取率>90％。
本发明提供的海参提取物的制备方法中所用试剂和仪器均可由市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1
本实施例提取工艺如下：
(1)冷水泡发：采用干海参重量25倍的去离子水低温浸泡花刺参；低温浸泡时，保持泡发温度12℃，泡发24小时。
(2)清洗：低温浸泡结束后，用湿海参重量20倍的去离子水清洗湿海参4次。
(3)高温煮制：将花刺参投入湿海参重量20倍的温度为95℃的去离子水中，高温煮制45分钟。
(4)高温泡发：停止加热，用余热继续泡发10小时，收集发好的海参。
(5)物理预处理：用绞肉机将发好的海参绞成肉糜，加入肉糜重量5倍的去离子水，高速剪切5分钟，剪切速率为8000rpm，用0.2％Na2CO3溶液调节pH值至7.5，于55℃、25MPa均质2次。
(6)酶解：按肉糜重量0.8％的加酶量，加入复配比例为4:1的NS37071蛋白酶与木瓜蛋白酶，55℃酶解4小时。
(7)加热后处理：酶解处理后，酶解液带渣于100℃加热55分钟，离心去渣，得上清液。
(8)浓缩与喷雾干燥：55℃减压浓缩至固形物浓度为30-35％，加入固形物含量10％的麦芽糊精，喷雾干燥而得花刺参提取物。
所得海参提取物中蛋白质含量为74.5％，多糖含量为18.5％，盐含量为3.5％，水分含量为2.9％。海参提取物得率为55.5％，蛋白质提取率为90％，多糖提取率为95％。
对比例1
与实施例1相比，本对比例冷水泡发的时间长，且缺少高温煮制、高温泡发、物理预处理和加热后处理的步骤，提取工艺如下：
(1)冷水泡发：采用干海参重量25倍的去离子水低温浸泡花刺参；低温浸泡时，保持泡发温度12℃，泡发40小时。
(2)清洗：低温浸泡结束后，用湿海参重量20倍的去离子水清洗湿海参4次。
(3)酶解：按肉糜重量0.8％的加酶量，加入复配比例为4:1的NS37071蛋白酶与木瓜蛋白酶，55℃酶解4小时。
(4)浓缩与喷雾干燥：55℃减压浓缩至固形物浓度为30-35％，加入固形物含量10％的麦芽糊精，喷雾干燥而得花刺参提取物。
所得海参提取物中蛋白质含量为72％，多糖含量为16.5％，盐含量为6.0％，水分含量为3.2％。海参提取物得率为38.2％，蛋白质提取率为68％，多糖提取率为75％。
通过将实施例1与对比例1进行比较，海参提取物得率显著提高，蛋白质、多糖提取率显著提高，盐含量显著降低，提取效率显著增加，说明该方法是一种高效提取花刺参蛋白、多糖的方法。
实施例2
本实施例提取工艺如下：
(1)冷水泡发：采用干海参重量20倍的去离子水低温浸泡花刺参；低温浸泡时，保持泡发温度15℃，泡发20小时。
(2)清洗：低温浸泡结束后，用湿海参重量15倍的去离子水清洗湿海参4次。
(3)高温煮制：将花刺参投入湿海参重量15倍的温度为94℃的去离子水中，高温煮制40分钟。
(4)高温泡发：停止加热，用余热继续泡发8小时，收集发好的海参。
(5)物理预处理：用绞肉机将发好的海参绞成肉糜，加入肉糜重量4倍的去离子水，高速剪切8分钟，剪切速率为10000rpm，用0.2％Na2CO3溶液调节pH值至7.8，于55℃、25MPa均质3次。
(6)酶解：按肉糜重量0.9％的加酶量，加入复配比例为3:2的NS37071蛋白酶与木瓜蛋白酶，55℃酶解3小时。
(7)加热后处理：酶解处理后，酶解液带渣于102℃加热60分钟，离心去渣，得上清液。
(8)浓缩与喷雾干燥：55℃减压浓缩至固形物浓度为30-35％，加入固形物含量10％的麦芽糊精，喷雾干燥而得花刺参提取物。
所得海参提取物中蛋白质含量为75％，多糖含量为19％，盐含量为3％，水分含量为2.8％。海参提取物得率为56％，蛋白质提取率为89％，多糖提取率为98％。
实施例3
本实施例提取工艺如下：
(1)冷水泡发：采用干海参重量30倍的去离子水低温浸泡花刺参；低温浸泡时，保持泡发温度10℃，泡发23小时。
(2)清洗：低温浸泡结束后，用湿海参重量18倍的去离子水清洗湿海参3次。
(3)高温煮制：将花刺参投入湿海参重量18倍的温度为90℃的去离子水中，高温煮制60分钟。
(4)高温泡发：停止加热，用余热继续泡发12小时，收集发好的海参。
(5)物理预处理：用绞肉机将发好的海参绞成肉糜，加入肉糜重量3倍的去离子水，高速剪切10分钟，剪切速率为9000rpm，用0.2％Na2CO3溶液调节pH值至8.0，于55℃、25MPa均质3次。
(6)酶解：按肉糜重量1％的加酶量，加入复配比例为3:1的NS37071蛋白酶与木瓜蛋白酶，55℃酶解5小时。
(7)加热后处理：酶解处理后，酶解液带渣于105℃加热40分钟，离心去渣，得上清液。
(8)浓缩与喷雾干燥：55℃减压浓缩至固形物浓度为30-35％，加入固形物含量10％的麦芽糊精，喷雾干燥而得花刺参提取物。
所得海参提取物中蛋白质含量为75.5％，多糖含量为18.3％，盐含量为3.0％，水分含量为2.9％。海参提取物得率为56.5％，蛋白质提取率为89.5％，多糖提取率为94％。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。