本发明涉及一种肽的分离方法，特别是涉及一种从冬虫夏草中运用生物酶解技术对小分子活性肽的提取方法。
背景技术：
冬虫夏草又名虫草，是一种名贵滋补药材，其营养成分高于人参，可入药，也可食用，是上乘的佳肴，具有很高的营养价值。冬虫夏草可以增强机体的免疫力，滋补肺肾，对肺癌、肝癌等有明显的抑制作用。在临床上对肺虚久咳，气喘，肺结核咯血，盗汗，肾虚腰膝酸痛，阳痿遗精，神经衰弱及化疗、放疗后的红细胞下降都有疗效。
长久以来，人们大多通过原草研磨、煲汤等方式服用冬虫夏草，不仅耗时费力，还会因人体机能不同产生不易吸收等问题。目前市面上的冬虫夏草产品主要有胶囊粉、口服液、压制含片等，这些制剂中含有大量杂质，虽然其包含虫草中发挥作用的有效成分：虫草素、虫草酸、虫草多糖等，而物理加工冬虫夏草却很难做到这些有效成分的精细化提取。
技术实现要素：
本发明是为了解决以上技术问题，而提供了一种虫草肽的提取方法，该方法能够将冬虫夏草中的各种营养素运用生物酶解方式进行小分子的转化和提取，极大的保留了虫草中的有效成分，经过从大分子到小分子的转化，具有极高的消化吸收性和利用率。
虫草肽是将优质冬虫夏草经特殊的植物蛋白酶降解萃取后制成的，其分子量均在1000道尔顿以下，可直接被人体吸收利用，有效的保证了人体对虫草中营养素的补充。
本发明涉及一种虫草肽的提取方法，所述提取方法包括以下步骤：
一、原料破壁：取虫体完整的冬虫夏草用清水浸泡1～3h，然后用清洗机冲洗15～25min，用破壁机破壁，得到虫草粉；
二、浸泡：将步骤一所得虫草粉加水搅拌，升温至60～80℃，保温并继续搅拌7～9h，过滤，得滤液；重复步骤二三次，合并三次所得滤液即为提取液；
三、排汤：将提取液转入灭菌后的汤储罐中(此时汤温在44-45℃左右)；
四、水解：将提取液转入水解罐，升温至100～120℃保持10min灭菌，降温至58～62℃并保持，加入碱液调整pH值至中性，加入植物蛋白酶制剂水解6h，酶解结束后升温至90～100℃保温15～20min灭酶活，得到水解液；
五、过滤：将步骤四所得水解液静置，粗过滤至清液储罐，然后用板框过滤器循环过滤1h，得到清液；
六、浓缩：利用真空浓缩器将步骤五所得清液浓缩至浓度11～13°Bé；
当浓缩液澄清时，将浓缩液喷雾干燥，即制得虫草肽；
当浓缩液混浊时，先将浓缩液进行板框过滤或用管式离心机分离至澄清；然后喷雾干燥，即制得虫草肽；
其中，所述步骤一中清水与冬虫夏草的质量比为1～2:1。
优选地，所述步骤一中破壁机破壁时，破壁机转速为45000～65000r/min，破壁时间为6min。
优选地，所述步骤二在夹层反应罐中进行。
优选地，所述步骤三中采用真空抽提罐将提取液转入汤储罐中。
优选地，所述步骤四中的碱液为NaOH溶液。
优选地，所述步骤五中粗过滤为依次采用桶式过滤器、两级板框过滤器过滤。
优选地，所述步骤六中喷雾干燥的参数为：进风温度100℃，出风温度85℃。
虫草肽可调节人体免疫系统平衡，增加免疫系统细胞、组织数量，促进抗体产生，增加吞噬、杀伤细胞数量、增强其功能。
虫草肽还具有多种药理作用，对急性病毒性心肌炎有明显保护作用，对血小板减少及血小板超微结构的损伤均有明显的保护作用，具有较强的扩张冠状动脉并增加冠脉流量的功能，能抑制血栓形成，调节支气管平滑肌，减轻老年慢性支气管炎、哮喘、肺气肿、肺心病等症状，延缓复发时间，对结核杆菌等引起肺部感染的病菌有强烈抑制和杀灭作用，且虫草酸和虫草多糖能修复已受损的肺泡细胞，对体液免疫功能有增强或减弱的双向调节作用，对肝脏的保护和防治。
本发明虫草肽的提取方法与现有技术不同之处在于：
1.本发明的方法为将冬虫夏草生物酶解提取而得到的虫草肽，不含任何化学成分与激素，对人体没有任何毒副作用，极大的保留了虫草中的有效成分，虫草素、虫草酸、虫草多糖含量极高，是十分纯净的营养物质。
2.采用本发明的方法制得的虫草肽无需搅拌即可迅速溶于水，水溶液清亮透明，为淡黄色透明液体，不会析出任何杂质和沉淀物。因此，本发明的方法制备得到的虫草肽利用率可达到96％。
具体实施方式
通过以下实施例对本发明的虫草肽的提取方法作进一步的说明。
实施例1
本实施例的虫草肽的提取方法按以下步骤进行：
一、原料破壁：取虫体完整的冬虫夏草用清水浸泡1h，然后用清洗机冲洗25min，用破壁机破壁，得到虫草粉；破壁机转速为50000r/min，破壁时间为6min；
二、浸泡：将步骤一所得虫草粉在夹层反应罐中加水搅拌，升温至75℃，保温并继续搅拌7h，过滤，得滤液；重复步骤二三次，合并三次所得滤液即为提取液；
三、排汤：将提取液用真空抽提罐转入灭菌后的汤储罐中(此时汤温在44-45℃左右)；
四、水解：将提取液转入水解罐，升温至115℃保持10min灭菌，降温至58℃并保持，加入NaOH溶液调整pH值至中性，加入植物蛋白酶制剂水解6h，酶解结束后升温至100℃保温15min灭酶活，得到水解液；
五、过滤：将步骤四所得水解液静置，依次采用桶式过滤器、两级板框过滤器过滤进行粗过滤，然后转移至清液储罐，然后用板框过滤器循环过滤1h，得到清液；
六、浓缩：利用真空浓缩器将步骤五所得清液浓缩至浓度12°Bé；
此时浓缩液混浊，先将浓缩液进行板框过滤或用管式离心机分离至澄清；然后喷雾干燥，即制得虫草肽；
其中，步骤一中清水与冬虫夏草的质量比为1:1；
喷雾干燥的参数为：进风温度100℃，出风温度85℃。
实施例2
本实施例的虫草肽的提取方法按以下步骤进行：
一、原料破壁：取虫体完整的冬虫夏草用清水浸泡3h，然后用清洗机冲洗15min，用破壁机破壁，得到虫草粉；破壁机转速为60000r/min，破壁时间为6min；
二、浸泡：将步骤一所得虫草粉在夹层反应罐中加水搅拌，升温至65℃，保温并继续搅拌9h，过滤，得滤液；重复步骤二三次，合并三次所得滤液即为提取液；
三、排汤：将提取液用真空抽提罐转入灭菌后的汤储罐中(此时汤温在44-45℃左右)；
四、水解：将提取液转入水解罐，升温至110℃保持10min灭菌，降温至62℃并保持，加入NaOH溶液调整pH值至中性，加入植物蛋白酶制剂水解6h，酶解结束后升温至90℃保温20min灭酶活，得到水解液；
五、过滤：将步骤四所得水解液静置，依次采用桶式过滤器、两级板框过滤器过滤进行粗过滤，然后转移至清液储罐，然后用板框过滤器循环过滤1h，得到清液；
六、浓缩：利用真空浓缩器将步骤五所得清液浓缩至浓度13°Bé；
此时浓缩液澄清，将浓缩液喷雾干燥，即制得虫草肽；
其中，步骤一中清水与冬虫夏草的质量比为1:1；
喷雾干燥的参数为：进风温度100℃，出风温度85℃。
实施例3
本实施例的虫草肽的提取方法按以下步骤进行：
一、原料破壁：取虫体完整的冬虫夏草用清水浸泡1h，然后用清洗机冲洗20min，用破壁机破壁，得到虫草粉；破壁机转速为55000r/min，破壁时间为6min；
二、浸泡：将步骤一所得虫草粉在夹层反应罐中加水搅拌，升温至70℃，保温并继续搅拌8h，过滤，得滤液；重复步骤二三次，合并三次所得滤液即为提取液；
三、排汤：将提取液用真空抽提罐转入灭菌后的汤储罐中(此时汤温在44-45℃左右)；
四、水解：将提取液转入水解罐，升温至100℃保持10min灭菌，降温至60℃并保持，加入NaOH溶液调整pH值至中性，加入植物蛋白酶制剂水解6h，酶解结束后升温至95℃保温18min灭酶活，得到水解液；
五、过滤：将步骤四所得水解液静置，依次采用桶式过滤器、两级板框过滤器过滤进行粗过滤，然后转移至清液储罐，然后用板框过滤器循环过滤1h，得到清液；
六、浓缩：利用真空浓缩器将步骤五所得清液浓缩至浓度11°Bé；
此时浓缩液澄清，将浓缩液喷雾干燥，即制得虫草肽；
其中，步骤一中清水与冬虫夏草的质量比为2:1；
喷雾干燥的参数为：进风温度100℃，出风温度85℃。
实施例4
本实施例的虫草肽的提取方法按以下步骤进行：
一、原料破壁：取虫体完整的冬虫夏草用清水浸泡2h，然后用清洗机冲洗22min，用破壁机破壁，得到虫草粉；破壁机转速为65000r/min，破壁时间为6min；
二、浸泡：将步骤一所得虫草粉在夹层反应罐中加水搅拌，升温至80℃，保温并继续搅拌8h，过滤，得滤液；重复步骤二三次，合并三次所得滤液即为提取液；
三、排汤：将提取液用真空抽提罐转入灭菌后的汤储罐中(此时汤温在44-45℃左右)；
四、水解：将提取液转入水解罐，升温至100℃保持10min灭菌，降温至58℃并保持，加入NaOH溶液调整pH值至中性，加入植物蛋白酶制剂水解6h，酶解结束后升温至100℃保温20min灭酶活，得到水解液；
五、过滤：将步骤四所得水解液静置，依次采用桶式过滤器、两级板框过滤器过滤进行粗过滤，然后转移至清液储罐，然后用板框过滤器循环过滤1h，得到清液；
六、浓缩：利用真空浓缩器将步骤五所得清液浓缩至浓度13°Bé；
此时浓缩液混浊，先将浓缩液进行板框过滤或用管式离心机分离至澄清；然后喷雾干燥，即制得虫草肽；
其中，步骤一中清水与冬虫夏草的质量比为1:1；
喷雾干燥的参数为：进风温度100℃，出风温度85℃。
实施例5
本实施例的虫草肽的提取方法按以下步骤进行：
一、原料破壁：取虫体完整的冬虫夏草用清水浸泡3h，然后用清洗机冲洗18min，用破壁机破壁，得到虫草粉；破壁机转速为45000r/min，破壁时间为6min；
二、浸泡：将步骤一所得虫草粉在夹层反应罐中加水搅拌，升温至60℃，保温并继续搅拌7h，过滤，得滤液；重复步骤二三次，合并三次所得滤液即为提取液；
三、排汤：将提取液用真空抽提罐转入灭菌后的汤储罐中(此时汤温在44-45℃左右)；
四、水解：将提取液转入水解罐，升温至120℃保持10min灭菌，降温至62℃并保持，加入NaOH溶液调整pH值至中性，加入植物蛋白酶制剂水解6h，酶解结束后升温至90℃保温18min灭酶活，得到水解液；
五、过滤：将步骤四所得水解液静置，依次采用桶式过滤器、两级板框过滤器过滤进行粗过滤，然后转移至清液储罐，然后用板框过滤器循环过滤1h，得到清液；
六、浓缩：利用真空浓缩器将步骤五所得清液浓缩至浓度11°Bé；
此时浓缩液澄清，将浓缩液喷雾干燥，即制得虫草肽；
其中，步骤一中清水与冬虫夏草的质量比为2:1；
喷雾干燥的参数为：进风温度100℃，出风温度85℃。
以上实施例将冬虫夏草生物酶解提取而得到的虫草肽，不含任何化学成分与激素，对人体没有任何毒副作用，极大的保留了虫草中的有效成分，虫草素、虫草酸、虫草多糖含量极高，是十分纯净的营养物质。
经验证，以上实施例的方法制得的虫草肽无需搅拌即可迅速溶于水，水溶液清亮透明，为淡黄色透明液体，不会析出任何杂质和沉淀物。因此，本发明的方法制备得到的虫草肽利用率可达到96％。
虽然以上描述了本发明的具体实施方式，但是本领域的技术人员应当理解，这些仅是举例说明，本发明的保护范围是由所附权利要求书限定的。本领域的技术人员在不背离本发明的原理和实质的前提下，可以对这些实施方式作出多种变更或修改，但这些变更和修改均落入本发明的保护范围。