一种促进奶牛泌乳的饲料及其制备方法与流程

文档序号:11535584阅读:312来源:国知局
一种促进奶牛泌乳的饲料及其制备方法与流程
本发明属于动物饲料加工
技术领域
,具体涉及一种促进奶牛泌乳的饲料及其制备方法。
背景技术
:随着我国乳业的迅猛发展,乳牛总量不断增加,但由于整体饲养水平的偏低及生产能力的落后,目前奶牛业普遍存在产乳量低、奶牛发病率高等严重问题,不能充分的发挥奶牛生产潜力,致使养牛效益出现隐性流失。所以,很有必要开发促进奶牛泌乳的饲料来改变现状,从而达到更高的奶牛饲养效益。现有技术中,促进奶牛泌乳的饲料主要是在饲料中添加微量元素组合添加剂或者中药提取成分。如申请号为“cn201510311742.0”的专利公开了一种奶牛泌乳期饲料添加剂,由以下重量份数的原料常规工艺配制而成:维生素a0.5-0.7份、维生素d30.01-0.02份、维生素e6-10份、烟酸14-18份、硫酸亚铁12-20份、硫酸铜3-4份、硫酸锌11-19份、硫酸锰11-19份、1%碘化钾15-25份、1%亚硒酸钠3-7份、1%氯化钴2-10份、石粉895-910份。由于泌乳奶牛对微量元索的需要量不是固定的,随生长与产奶阶段(产奶量)而变化,且有些微量元素如钼、氟等也很少发生缺乏症,不需要额外补充。但在生产中,由于奶牛饲养者对微量元素的认识不足或是商家的误导,在奶牛日粮中过量、过长时间使用微量元素的现象时有发生,这样不但造成微量元素在奶牛体内大量蓄积,通过牛奶或牛肉进入人体,进而对人体健康造成危害;另一方面,这类微量元素随粪尿等排泄到环境中,又会造成环境污染,影响人类健康。如高剂量的铜、锌,通过粪便排出体外,可造成土壤板结,污染水源,使水质恶化。高铜还可造成动物肝脏铜蓄积,从而使其食用价值下降,甚至对人体产生毒害作用,对生态环境也是一个潜在的威胁。另外,奶牛一些微量元素的需要量和中毒剂量范围相差很小,如果添加量达到中毒剂量,往往会导致奶牛出现疾病。因此,奶牛养殖中,绝不可滥用微量元素添加剂。以中药提取有效成分作为奶牛饲料添加剂,相对较为安全可靠。如申请号为“cn200710143609.4”的专利公开了一种饲料添加剂及其生产方法,包括如下重量份的组份:改性蒙脱石400-1000,杜仲提取物50,白芨提取物50,甘草提取物50,葡萄糖氧化酶5-50,双乙酸钠40-100,聚乙烯聚吡咯烷酮(pvp)10-60克;生产工艺:(a)原料准备,以备用:按照如下重量份秤取原料改性蒙脱石600,双乙酸钠50,葡萄糖氧化酶20,杜仲提取物50,白芨提取物50,甘草提取物50,聚乙烯聚吡咯烷酮(pvp)20;配制改性蒙脱石,以备用:(1)取蒙脱石30g,干燥后过筛孔径为0.250mm筛。(2)将过筛的蒙脱石加入100ml1mol/lcx的季铵盐溶液中,放入60℃恒温水中振荡1h,再离心,倾去上清液。(3)再加入100ml1mol/lcx季铵盐溶液,重复上述(2)的过程。(4)用100ml蒸馏水洗涤沉淀物1次,离心,倾去上清液,将产物于105℃烘干,磨碎,过孔径为0.250mm筛,便制成改性蒙脱石。(b)杜仲提取物与白芨提取物、甘草提取物进行第一次混合,得到一次混合物;(c)在一次混合物中加入葡萄糖氧化酶进行第二次混合,得到二次混合物;(d)在二次混合物中加入双乙酸钠第三次混合,得到三次混合物;(e)在三次混合物中加入聚乙烯聚吡咯烷酮(pvp),得到四次混合物:(f)在第四次混合物中加入改性蒙脱石,即得到成品。但是药提取有效成分在提取过程中,会造成大量有效成分的流失,同时还存在生产工艺复杂、成本增高的问题。技术实现要素:针对在泌乳奶牛饲料中添加微量元素存在的系列问题,以及添加中药提取有效成分存在的大量有效成分的流失、生产工艺复杂、成本增高的问题,本发明提供了一种利用中草药青贮发酵和二次发酵,具有催乳功效,同时具有健脾、理气、增强奶牛免疫力功效的低成本绿色饲料。该饲料的主要成分为附子的副产品。附子是毛茛科、乌头属植物aconitumcarmichaelidebx的子根,通常作为回阳救逆、补火助阳,散寒止痛的中药。而在现实生产中,通常挑选生长良好的乌头子根作为中药,将其副产品茎叶和须根都丢弃掉,这就造成了资源的浪费。据研究发现,附子的茎叶和须根中也含有一定量的药效成分。所以,本发明利用青贮的附子茎叶和须根来代替附子作为饲料,从而降低成本并达到废弃资源再利用的目的。一种促进奶牛泌乳的饲料,包括以下重量份的原料:附子20-25份、甘草20-25份、苍术2-3份、陈皮2-3份、厚朴2-3份、半夏2-3份、桔梗2-3份、王不留2-8份、云苓2-3份、乳酸菌培养液0.4-0.5份、马克斯克鲁维酵母菌培养液0.3-0.5份、大豆10-15份、苜蓿秸秆粉15-20份、维生素e0.1-0.5份。优选地,包括以下重量份的原料:附子25份、甘草25份、苍术2份、陈皮2份、厚朴2份、半夏2份、桔梗2份、王不留2份、云苓2份、乳酸菌培养液0.5份、马克斯克鲁维酵母菌培养液0.3份、大豆10份、苜蓿秸秆粉15份、维生素e0.1份。优选地,所述乳酸菌培养液是将乳酸片球菌按2%接种量接种于液体mrs培养基中培养,在30-37℃条件下培养得到至对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的乳酸菌培养液;所述马克斯克鲁维酵母菌培养液是将马克斯克鲁维酵母菌按2%接种量接种于液体马铃薯培养基中培养,在35-38℃条件下培养得到至对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的马克斯克鲁维酵母菌培养液。优选地,所述附子为附子的茎叶或者须根,所用甘草为甘草的茎或须根。上述任一种所述的促进奶牛泌乳的饲料的制备方法,包括以下步骤:步骤1,制备附子和甘草的混合物a:分别将附子和甘草晾晒至水分达到50-60%,然后铡切成片段,混合均匀,得混合物a;步骤2,制备乳酸菌培养液和马克斯克鲁维酵母菌培养液:取乳酸片球菌,按2%接种量接种于液体mrs培养基中培养,在30-37℃条件下培养得到至对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的乳酸菌培养液;取马克斯克鲁维酵母菌,按2%接种量接种于液体马铃薯培养基中培养,在35-38℃条件下培养得到至对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的马克斯克鲁维酵母菌培养液;步骤3,乳酸发酵:将步骤2制备好的乳酸菌培养液与步骤1获得的混合物按1:100混合均匀,然后用膜包裹严实,恒温发酵,得发酵物b;步骤4,制备混合物d:取晾干的苍术、陈皮、厚朴、半夏、桔梗、王不留、云苓,混合并粉碎,过80-120目筛,得混合物d;步骤5,二次发酵:将步骤4得到的混合物d和步骤3得到的发酵物b混合,得到混合物d,将混合物d接入马克斯克鲁维酵母菌培养液,用膜包裹严实,恒温发酵,得发酵物e;步骤6,添加大豆、苜蓿:将大豆、苜蓿粉碎,过80-120目筛,与发酵物e混合,搅拌,得到本发明的饲料。优选地,所述步骤1中铡切成片段的长度1-3cm。优选地,所述步骤3中恒温发酵的条件为:35-38℃恒温条件下发酵20-25天。优选地,所述步骤5中混合物d与马克斯克鲁维酵母菌培养液的量比为1:49;所述恒温发酵是在40-45℃恒温条件下发酵10-15天。优选地,所述步骤6中搅拌速度为1000-3000r/min,搅拌时间为10-15min与现有技术相比,本发明的有益效果:(1)本发明经过附子和甘草青贮、乳酸发酵,使附子和甘草的功效相互融合辅助,从而可以使附子毒性降低,并使饲料色泽、口感更好;(2)本发明利用马克斯克鲁维酵母的二次发酵,使各药物药性相合增强其功效,同时采用酵母菌生物夺氧,促使乳酸菌快速生长繁殖并和酵母一起发酵产生代谢产物,即抑制了其它杂菌的生长,又有效地改善了饲料的品质,同时减少了干物质的损失,还增加了蛋白含量,从而提高了适口性和消化率;(3)本发明中添加大豆、苜蓿是遮盖了其饲料中草药味,从而使饲料口感更好、香味更足;同时大豆、苜蓿营养丰富,改善乳汁质量,提高乳汁产量;(4)本发明利用附子、甘草的副产品,从而达到废弃物再利用的目的,使其生产成本更低、更容易被奶农接受。附图说明图1是本发明二次发酵前后有效成分比较结果一;图2是本发明二次发酵前后有效成分比较结果二;图3是实施例2-4不同配方饲料品质基本评价比较结果。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明做进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。实施例1:一种促进奶牛泌乳的饲料,包括以下重量份的原料:附子22份、甘草22份、苍术3.5份、陈皮3.5份、厚朴3.5份、半夏3.5份、桔梗3.5份、王不留8份、云苓2.5份、乳酸菌培养液0.4份、马克斯克鲁维酵母菌培养液0.5份、大豆12份、苜蓿秸秆粉18份、维生素e0.5份。上述原料配比的促进奶牛泌乳的饲料的制备方法,包括以下步骤:(1)分别将附子和甘草的须根或者茎叶晾晒至水分达到50%-60%,铡切成1-3cm的片段,混合均匀,得混合物a。(2)取乳酸片球菌,按2%接种量接种于液体mrs培养基中培养,在35℃条件下培养得到至对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的乳酸菌培养液;取马克斯克鲁维酵母菌,按2%接种量接种于液体马铃薯培养基中培养,在37℃条件下培养得到至对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的马克斯克鲁维酵母菌培养液;(3)称取步骤(2)制备好的乳酸菌培养液与步骤(1)获得的混合物a按1:100混合均匀,用膜包裹严实,35℃恒温,发酵22天,得发酵物b。(4)将晾干的苍术、陈皮、厚朴、半夏、桔梗、王不留、云苓粉碎,过100目筛,得混合物d。(5)将混合物d和发酵物b混合,得到混合物d,将混合物d按1:49接入马克斯克鲁维酵母菌培养液,用膜包裹严实,在42℃恒温,发酵13天,得发酵物e。(6)将大豆、苜蓿粉碎,过120目筛,与发酵物e混合,搅拌速度为2000r/min,搅拌时间为12min,得到本发明的饲料。为了更好地说明本发明各原料之间的协同作用效果,以及本发明制备方法的工艺特点,下面通过实验的方法来进行验证。实验1:乳酸发酵前后,混合物a和发酵物b有效成分和毒性的检测1.1实验方法:1.1.1甘草有效成分测定方法对照品溶液的制备取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量,精密称定,加70%乙醇分别制成每lml含甘草苷20μg、甘草酸铵0.2mg的溶液,即得(甘草酸重量=甘草酸铵重量/1.0207)。供试品溶液的制备取混合物a和发酵物b分别(过三号筛)约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%乙醇100ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250w,频率40khz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各l0μl,注入液相色谱仪,测定,即得。1.1.2附子有效成分和毒性测定方法对照品溶液的制备取新乌头碱对照品、次乌头碱对照品、乌头碱对照品、苯甲酰新乌头原碱对照品、苯甲酰乌头原碱对照品、苯甲酰次乌头原碱对照品适量,精密称定,加异丙醇-二氯甲烷(1:1)混合溶液制成每lml各含10μg的混合溶液,即得。供试品溶液的制备取混合物a和发酵物b分别(过三号筛)约2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加氨试液3ml,精密加入异丙醇-乙酸乙酯(1:1)混合溶液50ml,称定重量,超声处理(功率300w,频率40khz,水温在25℃以下)30分钟,放冷,再称定重量,用异丙醇-乙酸乙酯(1:1)混合溶液补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液25ml,40℃以下减压回收溶剂至干,残渣精密加入异丙醇-二氯甲烷(1:1)混合溶液3ml溶解,过滤,取续滤液,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪,测定,即得。1.2实验结果:表1发酵前后有效成分比较结果发酵前含量发酵后含量甘草苷(mg/g)14.3±1.117.4±1.3*甘草酸(mg/g)25.1±1.527.8±2.1新乌头碱(μg/g)812.1±12.991±6.4**次乌头碱(μg/g)215.2±9.846±1.2**乌头碱(μg/g)316.4±10.252±12.1**苯甲酰新乌头原碱(μg/g)23±1.495±5.8**苯甲酰乌头原碱(μg/g)27±1.698±6.7**苯甲酰次乌头原碱(μg/g)16±1.179±4.5**表中“*”表示与发酵前相比较实验组在p<0.05有显著性差异;“**”表示与发酵前相比实验组在p<0.01有极显著差异。附子的毒性成分主要双酯型生物碱(新乌头碱、次乌头碱、乌头碱),双酯型生物碱对人体的毒性主要表现为抑制呼吸和致心律失常作用,生物碱致心律失常的机理是促使心肌细胞na+通道开放,加速na+内流,促使细胞去极化,从而引起心律失常。通常运用甘草作为附子的解毒增效剂。甘草具有解附子毒性的作用。从中医理论来说,甘草味甘能和,调和附子药性以解毒,能调和附子偏温之性,防辛散太过.使之归以平和;其味甘能缓,缓和附子峻猛以解毒;其味甘能补,扶正固本,甘草与附予配伍辛甘化阳,阳气充足,增强机体耐受性丽解毒:甘草为可阴可阳之药,甘温多为扶阳,缓急多为益阴的结果。从西医理论来说,甘草降低附子毒性的成分大多认为是甘草酸。甘草酸分子中含多个羧基,具有较强的酸性,可与附子中的多种生物碱发生沉淀反应,生成不溶于水的大分子络合物,从而降低药液中酯型生物碱量。同时,甘草酸在体内的水解产物葡萄糖醛酸为机体解毒的重要物质之一。葡萄糖醛酸能与体内的带羟基或羧基的化合物结合,生成葡萄糖醛酸苷衍生物经尿排出体外。它能与乌头类物碱的羟基结合,生成低毒或无毒的葡萄糖醛酸络合物而由尿排出。甘草对附子的增效作用主要表现在两者各成分之间的协同作用。发酵可以长期保存饲料及其营养物质,同时,微生物的活动使青贮饲料带有芳香酸甜的味道,提高了家畜的适口性。并且,通过参考文献,发现发酵可以使附子的双酯型生物碱(新乌头碱、次乌头碱、乌头碱)转化为单酯型生物碱(苯甲酰新乌头碱、苯甲酰次乌头碱、苯甲酰乌头碱),从而使附子的毒性降低,并且发酵可以使附子和甘草的功效相互融合辅助。所以,本发明先用乳酸菌发酵甘草和附子。发酵前后有效成分比较结果:由表1中可知,甘草有效成分(甘草苷、甘草酸)明显增多,附子的双酯型生物碱(新乌头碱、次乌头碱、乌头碱)含量明显降低,单酯型生物碱(苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱)明显增多,其含量均符合《中国药典》标准。实验2:二次发酵前后,有效成分比较2.1实验方法:2.1.1甘草、附子有效成分测定同上2.1.2苍术素含量测定对照品溶液的制备取苍术素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含20μg的溶液,即得。供试品溶液的制备取混合物d和发酵物e分别(过三号筛)约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50ml,密塞,称定重量,超声处理(功率250w,频率40khz)1小时,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。2.1.3橙皮苷含量测定对照品溶液的制备取橙皮苷对照品适量,精密称定,加甲醇制成每lml含0.4mg的溶液,即得。供试品溶液的制备取混合物d和发酵物e分别约lg,精密称定,置索氏提取器中,加石油醚(6090ml),加热回流23小时,弃去石油醚,药渣挥干,加甲醇80ml再加热回流至提取液无色,放冷,滤过,滤液置100ml量瓶中,用少量甲醇分数次洗涤容器,洗液滤人同一量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl注入液相色谱仪,测定,即得。2.1.4厚朴酚和和厚朴酚含量测定对照品溶液的制备取厚朴酚对照品、和厚朴酚对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每lml含厚朴酚40μg和厚朴酚24μg的溶液,即得。供试品溶液的制备取混合物d和发酵物e分别(过三号筛)约0.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25ml,摇匀,密塞,浸渍24小时,滤过,精密量取续滤液5ml,置25ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。测定法分别精密吸取上述两种对照品溶液各4μl与供试品溶液4μl,注入液相色谱仪,测定,即得。2.1.5桔梗皂苷d的含量测定对照品溶液的制备取桔梗皂苷d对照品适量,精密称定,加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液,即得。供试品溶液的制备取混合物d和发酵物e分别(过二号筛)约2g,精密称定,精密加入50%中醇50ml,称定重量,超声处理(功率250w,频率40khz)30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇上蒸干,残渣加水20ml,微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次20ml,合并正丁醇液,用氨试液50ml洗涤,弃去氨液,再用正丁醇饱和的水50ml洗涤,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇3ml使溶解,加硅胶0.5g拌匀,置水浴上蒸干,加于硅胶柱100120目,10g,内径为2cm,用二氯甲烧-甲醇(9:1)混合溶液湿法装柱上,以三氯甲烷-甲醇(9:1)混合溶液50ml洗脱,弃去洗脱液,再用三氯甲烷-甲醇-水(60:20:3)混合溶液100ml洗脱,弃去洗脱液,继用三氯甲烷-甲醇-水(60:29:6)混合溶液100ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液10μl,供试品溶液10μl,注入液相色谱仪,测定,用外标两点法对数方程计算,即得。2.1.6王不留行黄酮苷含量测定对照品溶液的制备取王不留行黄酮苷对照品适量,精密称定,加70%甲醇制成每lml含0.lmg的溶液,即得。供试品溶液的制备取混合物d和发酵物e分别(过三号筛)约1.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入70%甲醇50ml,称定重量,超声处理(功率250w,频率33khz)30分钟,放冷,再称定重量,用70%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各l0μl,注入液相色谱仪,测定,即得。2.1.7乳酸含量的测定标准曲线的绘制分别配置乳酸标准液1、2、3、4、5、6μg·ml-1,在比色管中分别加入乳酸标准液1ml、4.0%硫酸铜溶液0.05ml,再加入浓硫酸6ml,反应5min,冷却至20℃以下后,再分别于各比色管中加入1%碱溶性羟基联苯溶液0.05ml,混合均匀,在室温下放置6-8h,过夜,在570nm下进行比色测定,绘制出标准曲线。样品测定1g发酵饲料溶解于100ml蒸馏水中,4000rpm离心10min,取上清液1ml,按标准曲线测定样品中乳酸含量(%)。2.1.8低聚多糖含量的测定对照品溶液的制备准确称取甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖标准品0.5g,用50%乙醇溶液溶解并定容至10ml,配制成浓度为50mg/ml的标准储备液,即得。供试品溶液称取饲料样品1g于100ml的烧杯中,加入25ml50%乙醇溶液,于超声波振荡器中超声萃取20min后,转移至50ml容量瓶中,50%乙醇溶液定容至刻度,混匀,取上清液,以0.45μm滤膜过滤,滤液供分析用。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl,注入液相色谱仪,测定,即得。2.1.9蛋白含量的测定样品处理称取1g试样,准确至0.0002g,放入凯氏烧瓶中,加入硫酸铜0.4g,无水硫酸钾6g,硒粉0.004g,与试样混合,再加浓硫酸12.5ml,在消煮炉上小心加热,待样品焦化,泡沫消失,加强火力,至溶液澄清后,再加热至少1h。将上述消煮液冷却,无损失地转入100ml容量瓶中,冷却后定容为试样分解液,取20ml2%硼酸溶液,加混合指示剂2滴,使半微量蒸馏装置的末端浸入此溶液,准确移取试样分解液10ml注入反应室中,塞好入口玻璃塞,再加入10ml40%naoh溶液,小心提起玻璃塞使之流入反应室,塞好玻璃塞,并在入口处加水密封好,防止漏气,蒸馏,自吸收液变为蓝色开始计时,4分钟后,使冷凝管末端离开吸收液面,再蒸馏1分钟,用蒸馏水洗净冷凝管末端,洗液均流入吸收液。滴定吸收氨后的吸收液立即用0.02mol/l的标准溶液滴定,溶液由蓝色变成灰红色为终点,记录所耗标准溶液的体积,算出蛋白质含量。2.2实验结果微生物在生长代谢过程中产生纤维素酶、木质素酶、脂酶等多种酶类。酶是具有高度催化效率的生物催化剂,它使复杂的生物化学反应下迅速完成。微生物有着强大的分解转化能力,并能产生丰富的次生代谢产物。发酵中药具有的优点:(1)充分提高药物有效成分的含量,卫生部药品检验所实验表明,发酵中药只需要1/28的量,便可与普通水提物一份的量发挥等同药效;(2)起到减毒增效的作用;(3减小药物分子量。药物进入机体后一些不能被直接利用的有效活性组分,通过微生物降解成小分子活性物质而被吸收利用。小分子活性物质由于更易于通过血脑屏障与机体细胞蛋白结合,所以比大分子物质有更高活性。药代动力学研究证明,苷类成分在肠道内难以吸收,大多数需经肠道细菌酶分解为分子量更小的苷元而发挥疗效。图1是二次发酵前后有效成分比较结果一,图1中,“*”表示与对照组相比较实验组在p<0.05有显著性差异,“**”表示与对照组相比实验组在p<0.01有极显著差异。由图1可知:二次发酵前后,双酯型生物碱(新乌头碱、次乌头碱、乌头碱)含量极显著的减少,阿拉伯糖和木糖含量极显著增多,单酯型生物碱(苯甲酰次乌头碱)、橙皮苷、厚朴酚、鼠李糖和半乳糖含量显著增多。图2是二次发酵前后有效成分比较结果二,图2中,“*”表示与对照组相比较实验组在p<0.05有显著性差异,“**”表示与对照组相比实验组在p<0.01有极显著差异。由图2可知:二次发酵前后,乳酸、蛋白质、甘草酸、甘草苷都有所增多。其中乳酸含量在发酵前后有显著差异,蛋白质含量在发酵前后有极显著差异。对照组为奶牛场正在用的饲料,配方(重量份):玉米48;豆饼20;麸皮22;酵母5;食盐2;碳酸氢钙1;添加剂2;其中添加剂为烟酸、蛋氨酸锌和维生素b的组合。实施例2:一种促进奶牛泌乳的饲料,包括以下重量份的原料:附子25份、甘草25份、苍术2份、陈皮2份、厚朴2份、半夏2份、桔梗2份、王不留2份、云苓2份、乳酸菌培养液0.5份、马克斯克鲁维酵母0.3份、大豆10份、苜蓿秸秆粉15份、维生素e0.1份。上述原料配比的促进奶牛泌乳的饲料的制备方法,包括以下步骤:(1)分别将附子和甘草的须根或者茎叶晾晒至水分达到60%,铡切成1cm的片段,混合均匀,得混合物a。(2)取乳酸片球菌活化菌液,按2%接种量接种于mrs培养基中,37℃条件下培养24小时,得到对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的乳酸菌培养液;取马克斯克鲁维酵母菌活化液,按2%接种量接种于马铃薯培养基中,38℃条件下培养28小时,得到对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml马克斯克鲁维酵母菌培养液。(3)称取步骤(2)制备好的乳酸菌培养液与步骤(1)获得的混合物按1:100混合均匀,用膜包裹严实,37℃恒温,发酵25天,得发酵物b。(4)将晾干的苍术、陈皮、厚朴、半夏、桔梗、王不留、云苓粉碎,过120目筛,得混合物d。(5)将混合物d和发酵物b混合,得到混合物d,将混合物d按1:49接入马克斯克鲁维酵母菌培养液,用膜包裹严实,在45℃恒温,发酵15天,得发酵物e。(6)将大豆、苜蓿粉碎,过120目筛,与发酵物e混合,搅拌速度为3000r/min,搅拌时间为15min,得到本发明的饲料。实施例3:一种促进奶牛泌乳的饲料,由以下重量份的原料组成:附子20份、甘草20份、苍术3份、陈皮3份、厚朴3份、半夏3份、桔梗3份、王不留5份、云苓3份、乳酸菌培养液0.4份、马克斯克鲁维酵母0.46份、大豆15份、苜蓿秸秆粉20份、维生素e0.2份。上述原料配比的促进奶牛泌乳的饲料,包括以下步骤:(1)分别将附子和甘草的须根或者茎叶晾晒至水分达到50%,铡切成3cm的片段,混合均匀,得混合物a。(2)取乳酸片球菌活化菌液,按2%接种量接种于mrs培养基中,30℃条件下培养24小时,得到对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的乳酸菌培养液;马克斯克鲁维酵母菌活化液,按2%接种量接种于马铃薯培养基中,35℃条件下培养28小时,得到对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的马克斯克鲁维酵母菌培养液。(3)称取步骤(2)制备好的乳酸菌培养液与步骤(1)获得的混合物按1:100混合均匀,用膜包裹严实,38℃恒温,发酵20天,得发酵物b。(4)将晾干的苍术、陈皮、厚朴、半夏、桔梗、王不留、云苓粉碎,过80目筛,得混合物d。(5)将混合物d和发酵物b混合,得到混合物d,将混合物d按1:49接入马克斯克鲁维酵母菌培养液,用膜包裹严实,在40℃恒温,发酵10天,得发酵物e。(6)将大豆、苜蓿粉碎,过120目筛,与发酵物e混合,搅拌速度为1000r/min,搅拌时间为10min,得到本发明的饲料。实施例4:本实施例是作为实施例2的对比例,将实施例2饲料原料中的用马克斯克鲁维酵母培养液替代,其它原材料的量比与实施例2相同;制备方法中去除了乳酸菌培养液制备的过程,乳酸菌培养液发酵的过程用马克斯克鲁维酵母培养液发酵代替,其它步骤与实施例2相同。目的是用单一的菌发酵饲料与用实施例2的两种菌发酵饲料进行效果对比。具体如下:一种促进奶牛泌乳的饲料,包括以下重量份的原料:附子25份、甘草25份、苍术2份、陈皮2份、厚朴2份、半夏2份、桔梗2份、王不留2份、云苓2份、马克斯克鲁维酵母0.8份、大豆10份、苜蓿秸秆粉15份、维生素e0.1份。上述原料配比的促进奶牛泌乳的饲料的制备方法,包括以下步骤:(1)分别将附子和甘草的须根或者茎叶晾晒至水分达到60%,铡切成1cm的片段,混合均匀,得混合物a。(2)取马克斯克鲁维酵母菌,按2%接种量接种于马铃薯培养基中,38℃条件下培养28小时,得到对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml马克斯克鲁维酵母菌培养液。(3)称取步骤(2)制备好的马克斯克鲁维酵母菌培养液与步骤(1)获得的混合物按1:100混合均匀,用膜包裹严实,37℃恒温,发酵25天,得发酵物b。(4)将晾干的苍术、陈皮、厚朴、半夏、桔梗、王不留、云苓粉碎,过120目筛,得混合物d。(5)将混合物d和发酵物b混合,得到混合物d,将混合物d按1:49接入马克斯克鲁维酵母菌培养液,用膜包裹严实,在45℃恒温,发酵15天,得发酵物e。(6)将大豆、苜蓿粉碎,过120目筛,与发酵物e混合,搅拌速度为3000r/min,搅拌时间为15min,得到促进奶牛泌乳的饲料。实施例5:本实施例是作为实施例2的对比例,将实施例2饲料原料中的马克斯克鲁维酵母培养液用乳酸菌培养液替代,其它原材料的量比与实施例2相同;制备方法中去除了马克斯克鲁维酵母培养液制备的过程,马克斯克鲁维酵母培养液发酵的过程用乳酸菌发酵代替,其它步骤与实施例2相同。目的是用单一的菌发酵饲料与用实施例2的两种菌发酵饲料进行效果对比。具体如下:一种促进奶牛泌乳的饲料,包括以下重量份的原料:附子25份、甘草25份、苍术2份、陈皮2份、厚朴2份、半夏2份、桔梗2份、王不留2份、云苓2份、乳酸菌培养液0.8份、大豆10份、苜蓿秸秆粉15份、维生素e0.1份。上述原料配比的促进奶牛泌乳的饲料的制备方法,包括以下步骤:(1)分别将附子和甘草的须根或者茎叶晾晒至水分达到60%,铡切成1cm的片段,混合均匀,得混合物a。(2)取乳酸片球菌,按2%接种量接种于mrs培养基中,37℃条件下培养24小时,得到对数生长期为0.6×108cfu/ml-1.0×108cfu/ml的乳酸菌培养液。(3)称取步骤(2)制备好的乳酸菌培养液与步骤(1)获得的混合物按1:100混合均匀,用膜包裹严实,37℃恒温,发酵25天,得发酵物b。(4)将晾干的苍术、陈皮、厚朴、半夏、桔梗、王不留、云苓粉碎,过120目筛,得混合物d。(5)将混合物d和发酵物b混合,得到混合物d,将混合物d按1:49接入乳酸菌培养液,用膜包裹严实,在45℃恒温,发酵15天,得发酵物e。(6)将大豆、苜蓿粉碎,过120目筛,与发酵物e混合,搅拌速度为3000r/min,搅拌时间为15min,得到促进奶牛泌乳的饲料。下面通过实验3对实施例2-5不同配方、不同制备条件制备的饲料的基本评价、实施效果以及对牛免疫力的比较。实验3不同配方饲料基本评价、实施效果以及对牛免疫力的比较3.1不同配方饲料品质基本评价3.1.1实验方法:3.1.1.1干物质含量的测定根据gostr52838-2007测定;3.1.1.2酸性木质素含量的测定根据gb/t20805-2006测定;3.1.1.3酸性洗涤纤维(adf)含量的测定根据gb/t20805-2006测定;3.1.1.4粗蛋白(cp)含量测定根据gb/t6432-1994测定;3.1.1.5粗纤维(cf)含量测定根据gb/t6434-2006测定;3.1.1.6中性洗涤纤维(adf)含量的测定根据gb/t20806-2006测定;3.1.2实验结果:常规奶牛粗饲料营养成分含量的多少是评定粗饲料品质的最基本指标,主要包括干物质(dm)、粗纤维(cf)、中性洗涤纤维(ndf)、酸性洗涤纤维(adf)、酸性洗涤木质素(adl)、粗蛋白(cp)等。ndf与瘤胃容积充满度及日粮采食量有关,其含量与能量浓度成负相关,粗饲料中高的ndf含量可限制牛的采食量及其对粗饲料的能量利用效率,ndf含量越高,粗饲料品质越低。粗饲料adf含量与其有机物消化率(omd)呈负相关,adf含量越高,粗饲料品质越低。cp含量的变化可反映粗饲料在制备过程中养分的损失情况,但考虑到瘤胃微生物对蛋白质的作用,必须考虑饲粮蛋白质在瘤胃内的降解情况。图3是实施例2-5不同配方饲料品质基本评价比较结果。图3中,肩标不同小写字母表示差异显著(p<0.05);肩标不同大写字母表示差异极显著(p<0.01);肩标相同字母或无字母标注表示差异不显著(p>0.05)。从图3中可知:不同配方饲料品质基本评价相互比较,本发明各实施配方各物质含量和对照存在明显差异,同时实施例2的饲料中干物质、粗蛋白含量最多,粗纤维、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、酸性洗涤木质素含量最低。3.2实施效果实验:选择100头健康的奶牛,随机分为五组,每天为300克/头,试验期为60天。产奶量采用实际称量的方法,即每天早中晚3次称重产奶量并做记录。实验结果见表2:表2实验牛奶产量统计结果表2中,牛奶按4元/公斤价格收购。从表2中可知:实施例2的配方最佳,产奶量最多。3.3不同配方饲料对牛免疫力的影响在正试期第50天早晨,空腹采集试验牛静脉血液20ml,室温下静置30min,待血清析出后,低温3000r/min离心15min,制得血清样品待用。采用试剂盒测定总蛋白(bca法)、白蛋白(溴甲酚绿法)、谷丙转氨酶/谷草转氨酶(赖氏法);试剂盒法测定免疫球蛋白a、g、m(iga、igg、igm)、总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶和丙二醛浓度。所有操作均严格按照试剂盒使用说明书进行。实验结果见表3:表3不同配方饲料对牛血清免疫功能参数的影响表中,同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(p<0.05);肩标不同大写字母表示差异极显著(p<0.01);肩标相同字母或无字母标注表示差异不显著(p>0.05)。从表3中可知:与其他组相比较,吃实施例2配方所配的饲料的牛,血清中总蛋白、白蛋白、iga、igg、igm含量最多,谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量最低,说明实施例2配方所配的饲料对提高牛免疫力效果最佳。表4不同配方饲料对牛血清抗氧化参数的影响表中,同行数据肩标不同小写字母表示差异显著(p<0.05);肩标不同大写字母表示差异极显著(p<0.01);肩标相同字母或无字母标注表示差异不显著(p>0.05)。血清中总蛋白含量反应了机体对蛋白的吸收状况,以及与体液免疫的关系。白蛋白是构成血浆胶体渗透压的主体和血液中水溶性较低物质的运输载体,对肝脏在蛋白代谢中起着重要作用。谷丙转氨酶和谷草转氨酶是反映肝脏和心脏功能的重要标志,如果活性过高,说明肝脏和心脏有可能被损害。免疫球蛋白是人类及高等动物受抗原刺激后体内产生的能与抗原发生特异性作用的一类蛋白质,又称抗体,对机体免疫力具有重要作用,免疫水平的高低间接反映了机体对疾病的抵抗能力。总抗氧化能力是衡量机体抗氧化系统功能状况的综合性指标,可代表和反映机体酶类和非酶类抗氧化机制的综合效应及机体自由基代谢状况,可用来评价抗氧化能力的高低。不同配方饲料对牛免疫力的影响:从表3中可知:吃本发明实施例2和3配方所配的饲料的牛,其血清中总蛋白、白蛋白、iga、igg、igm含量明显高于吃对照组农场现用饲料的牛的相应指标;其谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量明显低于吃对照组农场现用饲料的牛的相应指标。与其他组相比较,吃实施例2配方所配的饲料的牛,其血清中总蛋白、白蛋白、iga、igg、igm含量最多,谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量最低,说明实施例2配方所配的饲料对提高牛免疫力效果最佳。同时,也可以看出,吃原料配方中采用单一的菌发酵的实施例4和实施例5的牛,其血清中总蛋白、白蛋白、iga、igg、igm含量高于吃对照组农场现用饲料的牛的相应指标,但是低于吃实施例2和实施例3的配方所配的饲料的牛的相应指标;其谷草转氨酶、谷丙转氨酶含量高于吃对照组农场现用饲料的牛的相应指标,但是低于吃实施例2和实施例3的配方所配的饲料的牛的相应指标。从表4中可知:吃本发明实施例2和3配方所配的饲料的牛,其血清中总抗氧化能力、总超氧化酶能力明显高于吃对照组农场现用饲料的牛的相应指标;其丙二醛含量明显低于吃对照组农场现用饲料的牛的相应指标。与其他组相比较,吃实施例2配方所配的饲料的牛,血清中总抗氧化能力、总超氧化酶能力最强,丙二醛含量最低,说明实施例2配方所配的饲料对提高牛免疫力效果最佳。同时,也可以看出,吃原料配方中采用单一的菌发酵的实施例4和实施例5的牛,其血清中总抗氧化能力、总超氧化酶能力高于吃对照组农场现用饲料的牛的相应指标,但是低于吃实施例2和实施例3的配方所配的饲料的牛的相应指标;其丙二醛含量低于吃对照组农场现用饲料的牛的相应指标,但是高于吃实施例2和实施例3的配方所配的饲料的牛的相应指标。从以上大量的实验结果证明,本发明的促进奶牛泌乳的饲料的原料配比及其制备的饲料对促进奶牛泌乳有明显的效果。以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属
技术领域
的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明的保护范围。当前第1页12
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