本发明属于动物保健领域，具体涉及含有25-羟基维生素d3的乳液组合物及其制备方法。
背景技术：
：维生素d(例如麦角钙化醇d2和胆钙化固醇d3)是由其生物活性定义的一组脂溶性化合物，维生素d可促进骨的再吸收，也可调控心血管、免疫和肌肉系统的功能。流行病学研究发现了维生素d摄入及其对血压或葡萄糖代谢之间的关联。维生素d的活性受甲状旁腺激素的负反馈控制。维生素d缺乏在儿童中引起佝偻病，在成人中引起骨软化症。但在数月慢性摄入多于100倍推荐每日允许量(即5～15μg或200～600iu)维生素d后可能会发生毒性，大于375nmol/l25羟基维生素d的血药浓度下可发生血钙过多。对维生素d而言，毒性阈值是每日500～600mcg/kg体重，成人通常不应长期消耗多于rda的三倍。近年来，安全的维生素d上限水平被鉴定为至少250μg/天(10000iu)，这样的膳食补充剂的摄入已显示导致约200nmol/l25-羟基维生素d3的血药浓度。维生素d是一种激素原，其必须在肝中被羟基化，产生25-羟基维生素d3(25-ohd3)，其随后在肾和其他组织经历另外的羟基化，产生维生素d的活性激素形式——1,25-二羟基维生素d。1,25-二羟基维生素d被释放到血液中，1,25-二羟基维生素d和维生素d结合蛋白(dbp)结合，并被转运至目标组织。1,25-二羟基维生素d和维生素d受体之间的结合允许复合物在细胞核中发挥转录因子的作用。基于上述原因，将25-羟基维生素d3作为营养补充提供给动物是有益的。维生素d和25-羟基维生素d3的组合物已经在动物饲料中使用。专利us2005/0064018公开了向动物饲料添加25-羟基维生素d3和维生素d3的组合，来促进猪的骨强度。具体地，向猪饲料中添加约10μg/kg～100μg/kg的25-羟基维生素d3和约200iu/kg～4000iu/kg的维生素d3。专利us5695794公开了对家禽饲料添加25-羟基维生素d3和维生素d3的组合，来改善家禽胫骨软骨发育不良的影响。专利us5043170公开了维生素d3和1-α-羟基胆钙化固醇或1α，25-羟基胆钙化固醇的组合，用于在下蛋母鸡和老母鸡中改善蛋强度和腿强度。但是直接加入饲料中的25-羟基维生素d3在常规储存条件下并不稳定，储存过程中易于氧化，这种降解对动物饲料中的25-羟基维生素d3的剂量产生不利影响，因而需要提供在广泛的条件25-羟基维生素d3组合物稳定存在形式。中国专利cn1278690c公开了含有25-羟基维生素d3的组合物，剂型包括油组合物、乳液、微囊化油组合物。其中，其乳液剂型为微囊化油组合物没有喷雾干燥的状态，其粘度很高，不利于实际应用。而且在常规制备条件下25-羟基维生素d3不稳定，导致单位剂量的活性呈现时间依赖性损失，尤其在较高的温度下，活性成分易于降解，在使用的过程中这种降解对25-羟基维生素d3的剂量产生不利影响。中国专利201610070588.7公开了一种猪用速效补能复合维生素微乳液制剂，组合物中80％以上组成成分的中链甘油三脂成本较高，得到的是油包水型微乳液在稀释使用过程中会产生破乳致使用不便，储存过程中需要防止酸败，产品稳定性差，对产品的制备、贮存及运输条件要求更加苛刻。技术实现要素：本发明目的之一是提供含有25-羟基维生素d3的乳液组合物，通过优化乳化剂用量及比例，调节油相的种类及比例，制备更加稳定的水包油型乳剂剂型，使25-羟基维生素d3更加方便的应用于家禽及猪的饲料中，改善其骨密度或骨强度。本发明目的之二是提供含有25-羟基维生素d3的乳液组合物的制备方法，此制备方法制备的乳剂能够维持较好的制剂稳定性，可定剂量的分散于饮用水中，作为家禽及猪的营养补充剂。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：含有25-羟基维生素d3的乳液组合物，由以下质量百分比的组份组成：活性成分25-羟基维生素d30.001～5％、抗氧化剂0.5～1.5％、亲油性乳化剂2.0～2.8％、亲水性乳化剂4.0～5.0％、分散相油相溶剂5～10％和连续相水相溶剂65.0～90.0％。通过优化乳化剂用量及比例，调节水相、油相的种类及比例，制备更加稳定的水包油型乳剂剂型，使用时稀释25-羟基维生素d3的过程只需将本发明乳液组合物加入水中，直接稀释而不引起性状外观的改变，克服油包水型乳剂在稀释过程中会产生破乳而致使使用不便的缺陷，使用便利。而且本发明的水包油型乳化剂产品稳定性良好，便于制备、运输和贮存，更加适用于工业化应用。本发明的水相溶剂占组合物质量的65％以上，成本优势不言而喻。优选的，所述的乳液组合物通过乳化剂调节其亲水亲油值(hlb)为10～11。优选的，所述油相溶剂为中链甘油三脂、甘油二乙酸酯、甘油三乙酸酯、玉米油、芝麻油、豆油、杏仁油、花生油、桃仁油、菜籽油、棉籽油、葵花籽油、蓖麻油、橄榄油、氢化蓖麻油、椰子油中的一种或多种。优选的，所述亲油性乳化剂为单亚油酸甘油酯、乙二醇单硬脂酸酯、乙二醇单油酸酯、甘油三硬脂酸酯、甘油单硬脂酸酯、三甘油辛癸酸酯的一种或多种。优选的，所述亲水性乳化剂包括吐温-60、吐温-20、吐温-80、十二烷基硫酸钠、十二烷基硫酸钾、月桂酸异丙醇酰胺的一种或多种。优选的，所述的抗氧化剂为2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、乙二胺四乙酸、二丁基羟基甲苯、木糖醇、反丁烯二酸、α-生育酚、龙胆乙醇胺、抗坏血酸、抗坏血酸钠、没食子酸的一种或多种。优选的，所述25-羟基维生素d3结构式如式1所示：本发明还提供一种含有25-羟基维生素d3的乳液组合物的制备方法，包括如下步骤：(1)油相制备：在10～100℃水浴条件下，将抗氧化剂溶于油性分散相，搅拌5～60min，再加入25-羟基维生素d3，搅拌5～60min；(2)乳化剂制备：将亲油性乳化剂和亲水性乳化剂混合均匀；(3)初乳制备将步骤(2)制备的乳化剂加入步骤(2)制备的油相中，搅拌使之形成初乳，搅拌3～30min，使其成为初乳；(4)水处理水在水浴条件下维持与步骤(1)油相相同的温度，备用；(5)乳液制备将步骤(3)制备的初乳加入到步骤(4)的水中，使用高速剪切设备制备或者其他匀质设备制备乳液，剪切速度定为25000rpm，剪切合适的时间制备乳剂，制备完毕后放冷至室温。优选的，上述含有25-羟基维生素d3的乳液组合物制备过程中各组分及质量比为：优选的，所述乳液包装为将乳液装入1000ml的白色高密度聚乙烯瓶，封口。优选的，所述乳液的储存条件为组合物应贮存于低于15℃密封避光的条件下，有效期为十二个月。本发明还提供一种上述制备方法制备的含有25-羟基维生素d3的乳液组合物，乳液组合物为水包油型乳剂，性状为乳白色液体，在4000rpm15min离心条件下不发生分层现象。优选的，乳液组合物中25-羟基维生素d3的质量百分比为0.001～5％。本发明中还提供了上述含有25-羟基维生素d3的乳液组合物作为饲料添加剂的应用。相对于现有技术，本发明的有益效果是：(1)本发明通过优化乳化剂用量及比例，调节水相、油相的种类及比例，制备更加稳定的水包油型乳剂剂型，产品稳定性良好，便于制备、运输和贮存，更加适用于工业化应用。(2)本发明制备的乳液组合物使用时稀释25-羟基维生素d3的过程只需将本发明乳液组合物加入水中，直接发生稀释效果而不引起性状外观的改变，克服油包水型乳剂在稀释过程中会产生破乳而致使使用不便的缺陷，使用便利。(3)本发明的水相溶剂占组合物质量的65％以上，成本优势不言而喻。(4)此制备方法制备的乳剂能够维持较好的制剂稳定性，可定剂量的分散于饮用水中，使25-羟基维生素d3更加方便的应用于家禽及猪的饲料中，作为家禽及猪的营养补充剂，改善其骨密度或骨强度。具体实施方式应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本申请提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本申请所属
技术领域：
的普通技术人员通常理解的相同含义。需要注意的是，这里所使用的术语仅是为了描述具体实施方式，而非意图限制根据本申请的示例性实施方式。如在这里所使用的，除非上下文另外明确指出，否则单数形式也意图包括复数形式，此外，还应当理解的是，当在本说明书中使用术语“包含”和/或“包括”时，其指明存在特征、步骤、操作、器件、组件和/或它们的组合。术语解释部分：乳剂系，指互不相溶的两种液体混合，其中一相以液滴状态分散于另一相液体中形成的非均相液体制剂，属于热力学不稳定体系。一般来说乳剂由水相、油相和乳化剂组成，可分为油包水型、水包油型及复合乳液，其中水包油型乳剂可掩盖药物的不良臭味，并具有良好的水稀释特性，适用于油溶性好的药物活性成分。本发明涉及的25-羟基维生素d3，其信息及理化特性如下表1所示表1名称25-羟基维生素d3化学名称(3β,5z,7e)-9,10-secocholesta-5,7,10(19)-triene-3,25-diolmonahydrate分子式c27h44o2·分子量400.66熔点100～120℃性状白色至粉红色结晶性粉末溶解性不溶于水，可溶于乙腈、乙醇、dmso及其他有机溶剂实施例1：含有25-羟基维生素d3的乳液组合物组成成分如表2所示：表2组成成分处方量/g处方比例/％作用25-羟基维生素d31.5840.176活性成分中链甘油三酯63.07.00油分散相2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚9.01.00抗氧剂单亚油酸甘油酯21.92.44亲油性乳化剂吐温-6041.14.50亲水性乳化剂水763.484.8连续相合计约900g100--上述含有25-羟基维生素d3的乳液组合物采用以下工艺过程制备：1、油相制备：采用水浴锅维持70℃水浴温度，将中链甘油三脂加入到烧杯中，检测温度至70℃；向其中加入处方量2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚，采用磁力搅拌设备搅拌使之溶解，搅拌时间15min；加入处方量25-羟基维生素d3，搅拌使之溶解，搅拌时间10min。2、乳化剂制备将处方量的单亚油酸甘油酯和吐温-60混合均匀；3、初乳制备将处方量乳化剂倒入油相中，搅拌使之形成初乳，搅拌时间5min；4、水处理水相在水浴中维持70℃，备用；5、乳液制备将制备的初乳加入到处方量的水中，使用高速剪切设备制备乳液，剪切速度定为25000rpm，剪切合适的时间制备乳剂，制备完毕后放冷至室温6、包装将上述乳液装入1000ml的白色高密度聚乙烯瓶，封口。应贮存于低于15℃密封避光的条件下，有效期为十二个月。实施例1所制备的产品具有以下制剂特性如表3所示：表3制剂特性实施案例1性状乳白色液体外观稳定性4000rpm15min离心不出现分层密度～1.00g/mlph5.50装量900ml含量0.176％w/w实施例2含有25-羟基维生素d3的乳液组合物组成成分如表4所示：表4上述含有25-羟基维生素d3的乳液组合物采用以下工艺过程制备：1、油相制备：采用水浴锅维持70℃水浴温度，将中链甘油三脂加入到烧杯中，检测温度至70℃；向其中加入处方量2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚，采用磁力搅拌设备搅拌使之溶解，搅拌时间15min；加入处方量25-羟基维生素d3，搅拌使之溶解，搅拌时间60min。2、乳化剂制备将处方量的单亚油酸甘油酯和吐温-20与烧杯中混合均匀；3、初乳制备将处方量乳化剂倒入油相中，搅拌使之形成初乳，搅拌时间5min；4、水处理水相在水浴中维持70℃，备用；5、乳液制备将制备的初乳加入到处方量的水中，使用高速剪切设备制备乳液，剪切速度定为25000rpm，剪切时间为15min，制备完毕后放冷至室温6、包装将上述乳液装入1000ml的白色高密度聚乙烯瓶，封口。应贮存于低于15℃密封避光的条件下，有效期为十二个月。实施案例所制备的产品具有以下制剂特性如表5所示：表5制剂特性实施案例2性状乳白色液体外观稳定性4000rpm15min离心不出现分层密度～1.00g/mlph5.50装量900ml含量0.176％w/w实施例3稳定性测试：将实施案例1及实施案例2制备的样品放置在25℃，60％rh的条件下，考察其含量、性状、ph等项。稳定性结果如表6所示：表6结果显示，实施案例1及实施案例2均具有良好的稳定性，在加速25℃，60％rh的条件下，放置90天稳定。上述虽然对本发明的具体实施方式进行了描述，但并非对本发明保护范围的限制，所属领域技术人员应该明白，在本发明的技术方案的基础上，本领域技术人员不需要付出创造性劳动即可做出的各种修改或变形仍在本发明的保护范围以内。当前第1页12