木姜叶柯冲剂及制备方法与流程

本发明属于茶叶加工技术领域，具体涉及木姜叶柯冲剂及制备方法。

背景技术：

木姜叶柯具有高度甜味，其叶片在经过热水冲泡之后香气浓郁，色泽鲜艳，回味甘甜持久，风味独特，因此木姜叶柯又被称为“甜茶”。木姜叶柯最早记录见于《清水岩志》，甜茶是一种药食两用的植物，湖南怀化芷江侗族人民已有1000多年饮用甜茶的历史。在很早之前，甜茶的叶子被当地居民用作溃疡预防、促进利尿、退烧、清热以及解毒作用的中药。2017年，木姜叶柯通过卫计委审核，被正式批准为新食品原料，其作为原料用于食品、药品和化妆品行业，具有明显的抗高血糖、抗高血压、抗高血脂、抗氧化和抗肿瘤等功能。

木姜叶柯中含水量约30％，含有大量人体必需的氨基酸如谷氨酸、赖氨酸等，亦含有许多微量元素如钾、钠、镁等以及维生素如vc、ve等。也含有普通茶叶都有的萜类、咖啡碱类、茶多酚类，更含有大量的黄酮类物质。其中，咖啡碱含量比普通茶叶低，经常饮用木姜叶柯不会导致精神亢奋、失眠等副作用。此外，木姜叶柯中萜类和黄酮类物质含量较高，根皮苷(0.41～20.45％)、三叶苷(0.2～25.53％)、6”-o-乙酰基三叶苷、3”-o-乙酰基根皮苷，2”-o-乙酰基根皮苷以及根皮素是甜茶中主要的黄酮类物质。还有学者从甜茶中分离出了二氢查耳酮吡喃葡糖苷、β-胡萝卜苷、β-谷甾醇、槲皮素、木犀草素、槲皮苷、齐墩果酸等化合物。根皮苷具有比葡萄糖更高的亲和力，可以与肾脏葡萄糖转运蛋白(glut)结合，从而抑制肾脏中的葡萄糖吸收和肠道吸收来使血糖正常化并整体降低血糖。三叶苷对α-葡萄糖苷酶的强抑制活性和对α-淀粉酶的中等抑制活性使其成为治疗ⅱ型糖尿病的潜在抗糖尿病化合物，副作用少。在体外甜茶水提取物对人乳腺癌细胞有细胞毒性和细胞凋亡的作用，也可以抑制体内肿瘤的生长，其机制可能诱导或抑制相应基因的表达有关。此外，从甜茶叶中分离出的羽扇酮类三萜类化合物，显示出强的抗hiv和抗氧化活性。

木姜叶柯中，嫩叶含有大量三叶苷，而老叶中含有大量的根皮苷。人们多利用木姜叶柯嫩叶作为茶产品，老叶作为茶产品口感不佳，因此大多被废弃。现有的木姜叶柯饮料口感涩、有效成分含量低。

技术实现要素：

本发明旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本发明提出木姜叶柯冲剂及制备方法，所述木姜叶柯冲剂有效成分含量高，口感良好。

根据本发明第一方面实施例的木姜叶柯冲剂，所述木姜叶柯冲剂，包括以下重量份计的组分：

木姜叶柯提取物：85～90份，

酸味剂：2～3份，

陈皮粉：8～12份。

根据本发明实施例的木姜叶柯冲剂，至少具有如下技术效果：

木姜叶柯提取物提取自老叶和嫩叶，一方面充分利用了老叶资源，另一方面，嫩叶的加入，调和了口感，在后续加工过程的过滤中不易堵塞设备，且增加了三叶苷的含量。

有效成分含量高。木姜叶柯冲剂中，根皮苷含量达到30％，三叶苷含量达到30％。三叶苷是天然的甜味剂，三叶苷含量的提高，增加了产品自身的甜味，一方面利于糖尿病患者的使用；另一方面，对于非糖尿病患者，作为普通保健产品，可以改善记忆，维持血糖正常水平，并且还有抗感染的功效，同时，由于没有甜味剂的添加，不会增加体重，对减肥人士友好。

口感良好。加入极少量的天然酸味剂，改善了口感，对人体无害。

保健功效显著。陈皮的添加，除了可以进一步改善口感外，还增添了润肺止咳，降脂健脾，改善记忆，抑菌消炎的功效。能作为家庭日常保健品使用，适用人群广泛。不仅可以专门针对三高人群，还能作为家庭日常保健品使用，服用方便。

根据本发明的一些实施例，所述木姜叶柯提取物的提取方法步骤包括：

s1：将木姜叶柯老叶和嫩叶冷冻干燥后粉碎，得到木姜叶柯粉末；

s2：将步骤s1得到的木姜叶柯粉末用无水乙醇超声提取后固液分离，得到第一滤液和第一滤渣；

s3：向第一滤液中滴加水，至乙醇浓度为80％，静置后固液分离，得到第二滤液和第二滤渣；

s4：旋蒸步骤s3得到的第二滤液，即得所述木姜叶柯提取物。

步骤s1中，木姜叶柯老叶和嫩叶的质量比为(3～5)：1。

木姜叶柯老叶和嫩叶的质量比优选4：1，一方面充分利用了老叶资源，另一方面，嫩叶的加入，调和了口感，在后续加工过程的过滤中不易堵塞设备，且增加了三叶苷的含量。

根据本发明的一些实施例，所述冷冻干燥的温度为-45～-55℃。

-45～-55℃的冷冻干燥温度可以使木姜叶柯老叶中的酶因为低温被冻失活，防止有效物质根皮苷、三叶苷被相关的酶降解，以及结构被破坏，同时保留木姜叶柯中氨基酸等有效物质，从而保存茶香味，改善茶口感。

根据本发明的一些实施例，所述冷冻干燥的时间为20～30h。

20～30h的冷冻干燥时间可以使木姜叶柯老叶中的水分含量低于8％。

根据本发明的一些实施例，所述木姜叶柯粉末的粒径小于200目。

步骤s2中，将步骤s1得到的木姜叶柯粉末用无水乙醇超声提取，能够将木姜叶柯粉末中的有效物质充分提取出来。

根据本发明的一些实施例，超声提取的温度低于50℃。

低于50℃的超声提取温度，可以防止木姜叶柯中的有效成分被高温破坏。

木姜叶柯叶片中的酶在前期冷冻干燥的时候，已经失去活性或者降低活性，因此后续低温提取过程中，酶对有效物质根皮苷、三叶苷的影响小于温度的影响。

根据本发明的一些实施例，所述超声提取的功率为640w。

根据本发明的一些实施例，所述超声提取的时间大于15min。

超声提取的次数可以为3次，每次15min。

步骤s3中，向第一滤液中滴加水，至乙醇浓度为80％，静置后固液分离，得到第二滤液和第二滤渣，目的是为了析出叶绿素，去除叶绿素的木姜叶柯提取物抗氧化活性明显增强，能利于清除体内自由基，预防癌症，抗衰老等功效。

步骤s4中，旋蒸的条件为：温度为50℃，真空度为0.09mpa,转速68rpm。

根据本发明第二方面实施例的木姜叶柯冲剂的制备方法，所述制备方法步骤为：按配比称取所述木姜叶柯提取物、酸味剂和陈皮粉，混匀。

附图说明

图1是不同浓度木姜叶柯冲剂对pc12细胞增殖作用影响图。

具体实施方式

以下是本发明的具体实施例，并结合实施例对本发明的技术方案作进一步的描述，但本发明并不限于这些实施例。

实施例1

本例提供了一种木姜叶柯冲剂，包括以下重量份计的组分：

木姜叶柯提取物：85～90份，

酸味剂：2～3份，

陈皮粉：8～12份。

实施例2

本例提供了一种木姜叶柯提取物的提取方法，步骤包括：

s1：将木姜叶柯老叶和嫩叶冷冻干燥后粉碎，得到木姜叶柯粉末；

s2：将步骤s1得到的木姜叶柯粉末用无水乙醇超声提取后固液分离，得到第一滤液和第一滤渣；

s3：向第一滤液中滴加水，至乙醇浓度为80％，静置后固液分离，得到第二滤液和第二滤渣；

s4：旋蒸步骤s3得到的第二滤液，即得所述木姜叶柯提取物。

其中，步骤s1中，木姜叶柯老叶和嫩叶的质量比为(3～5)：1，优选4:1。冷冻干燥的温度为-45～-55℃。

冷冻干燥的时间为20～30h。木姜叶柯粉末的粒径小于200目。

步骤s2中，将步骤s1得到的木姜叶柯粉末用无水乙醇超声提取，能够将木姜叶柯粉末中的有效物质充分提取出来。超声提取的温度低于50℃。低于50℃的超声提取温度，可以防止木姜叶柯中的有效成分被高温破坏。超声提取的功率为640w。超声提取的时间大于15min。超声提取的次数可以为3次，每次15min。

步骤s3中，向第一滤液中滴加水，至乙醇浓度为80％，静置后固液分离，得到第二滤液和第二滤渣，目的是为了析出叶绿素，去除叶绿素的木姜叶柯提取物抗氧化活性明显增强，能利于清除体内自由基，预防癌症，抗衰老等功效。

步骤s4中，旋蒸的条件为：温度为50℃，真空度为0.09mpa,转速68rpm。

实施例3

本例提供了木姜叶柯冲剂的制备方法，所述制备方法步骤为：按配比称取所述木姜叶柯提取物、酸味剂和陈皮粉，混匀。

实施例4

本例根据实施例1提供的木姜叶柯冲剂配方，采用实施例2、3提供的方法，制备了六种木姜叶柯冲剂，编号为a～f，分别对应配方1～6，配方明细如下：

配方1：85％木姜叶柯提取物+3％柠檬酸/苹果酸+12％陈皮；

配方2：87％木姜叶柯提取物+3％苹果酸/柠檬酸+10％陈皮；

配方3：88％木姜叶柯提取物+3％(苹果酸2％+1％柠檬酸)+9％陈皮；

配方4：88％木姜叶柯提取物+3％(苹果酸1％+2％柠檬酸)+9％陈皮；

配方5：89％木姜叶柯提取物+2％(苹果酸1％+1％柠檬酸)+9％陈皮；

配方6：90％木姜叶柯提取物+2％(苹果酸1％+1％柠檬酸)+8％陈皮。

上述配方中，木姜叶柯提取物采用的提取原料为木姜叶柯老叶和嫩叶，老叶和嫩叶的质量比为4:1。木姜叶柯提取物的提取过程中，冷冻干燥的温度为-50℃，冷冻干燥的时间为24h。木姜叶柯粉末的粒径小于200目。超声提取的温度低于50℃。超声提取的功率为640w。超声提取的时间大于15min。超声提取的次数为3次，每次15min。旋蒸的条件为：温度为50℃，真空度为0.09mpa，转速68rpm。

对比例1

本例根据实施例4的配方1，制备了木姜叶柯冲剂a1。a1与a的区别在于木姜叶柯提取物的提取过程中，a1的木姜叶柯提取物的提取过程中未经冷冻干燥粉碎过程，直接将木姜叶柯老叶粉碎并进行后续步骤。

对比例2

本例根据实施例4的配方1，制备了木姜叶柯冲剂a2。a2与a的区别在于木姜叶柯提取物的提取过程中，a2的木姜叶柯提取物的提取过程中未经步骤s3去除叶绿素。

检测例1

本例测试了木姜叶柯冲剂a～f和a1、a2的有效成分含量及甜度，测试结果如表1所示。

表1

dpph抗氧化活性ic50(mg/ml)指清除dpph自由基一半需要的浓度，vc的ic50是0.069。从表1可以看出，木姜叶柯冲击a～f具有较高的抗氧化活性，抗氧化活性接近vc。而未经冷冻干燥处理的木姜叶柯冲剂a1和未去除叶绿色的木姜叶柯冲剂a2的抗氧化活性受到影响，抗氧化能力明显降低。

检测例2

将高分化的pc12细胞(具有交感神经元特征，广泛应用于神经系统体外研究)接种到96孔板中，并在37℃的dmem(4.5gl-1)培养基中孵育24小时。用木姜叶柯冲剂a样品处理细胞后，利用试剂盒继续在37℃下培养24小时，在450nm处测量细胞活力(细胞增殖)，结果如图1所示。用木姜叶柯冲剂样品处理细胞的方法为：将木姜叶柯冲剂用水溶解，稀释到不同浓度梯度，灭菌后，取100μl加入到细胞培养液中共同培养。

从图1可以看出，木姜叶柯冲剂在50μg/ml以上能明显促进高分化神经细胞pc12增殖，能对神经退性疾病有一定的改善作用，因此，木姜叶柯冲剂可用于改善记忆。

检测例3

本例考察了服用木姜叶柯冲剂对血糖的影响。在湖南芷江糖尿病疗养院，选取了两组共130位志愿者服用本发明实施例的木姜叶柯冲剂，每次服用12g，温水冲服，一日两次。

第一组志愿者为100位糖尿病患者。检测时间：餐前餐后，每周1次，持续6周。

结果显示，一般在2周左右，就能有效降低糖尿病患者血糖，在4周以后就能将血糖调整到正常水平。

第二组志愿者为30位非糖尿病患者。检测时间：餐前餐后，每周1次，持续6周

结果显示，不会影响正常人群的血糖水平

检测例4

本例测试了木姜叶柯冲剂的抗感染功效。

实验条件：

最小抑菌浓度(mic)测定

参照美国临床标准协会(clsi)m07-a9微量肉汤稀释法评估木姜叶柯冲剂的最低抑菌浓度(mic)。首先，将革兰氏阳性菌株(金黄色葡萄球菌，枯草芽孢杆菌)，革兰氏阴性菌株(大肠杆菌，铜绿假单胞菌)和真菌(白色念珠菌，非酿酒酵母)在37℃下生长24h。将100μl稀释的细菌培养物(约为1.5×106cfu/ml)转移到每个孔中，加入100μl用lb培养液稀释的木姜叶柯冲剂样品到第一个孔中，然后依次从前一个孔中吸取100μl到后一个孔中。37℃继续培养18h，观察不同浓度下菌落的生长情况，mic值定义为在37℃下孵育24°h后细菌菌株不可见生长的最低浓度，青霉素被用作阳性对照。

实验结果：

木姜叶柯冲剂具有较为广谱的抗菌活性，对革兰氏阳性，阴性和真菌具有中度抑制作用。这说明木姜叶柯冲剂具有一定抑菌作用，能有抗感染功效。

表1木姜叶柯冲剂的最小抑菌浓度mic(mg/ml)