生理活性饲料添加剂及其制备方法

专利名称:生理活性饲料添加剂及其制备方法
发明领域本发明涉及用于饲料添加剂的组合物及其制备方法。
发明背景生理活性物质是根本上控制生物活体健康的因子。即使当活体维持它们的内环境稳态时，它们也可能因调节了生理活性物质而受到疾病的攻击，而且从所述疾病状态康复不可避免地受到它们食用的饲料的影响。尽管这些物质是非常重要的因子，但它们的价值并未得到完全证实。据信饲料的价值更多地体现在质量上而非数量上。但是，本文中“质量”一词并不仅仅指通常由化学分析所测定的饲料中所含成分的含量和组成。原因可以是，任何两种饲料即使从这类分析值来看彼此相同，但当它们分别被活体摄入后，比较其在活体内的功能指征时，它们也可能表现出完全不同的作用方式。这种差异源自饲料中各种成分存在的状态的不同，即这些成分是以简单物质的形式存在还是以有效功能性结构的形式存在。
从功能的角度看，饲料具有三大类功能，第一功能可限定为饲料中营养成分在活体内体现出的功能，这对于维持生命具有根本的重要性。与此相反，第三功能是指控制生物节律的功能，刺激神经系统和使神经系统镇静的功能，控制免疫系统的功能，等等。因此病理状态的表达和控制，所述病理状态的康复以及健康状态的维持都源自饲料的第三功能。
尽管现有技术中的饲料开发仅限于对营养方面的强调，但目前的饲料开发已经显示出考虑各种方面的倾向。
本发明涉及一种用于功能性饲料添加剂的组合物。更具体地，本发明提供了一种用于饲料添加剂的组合物，其可改善活体的存活率，还能使活体对抗各种疾病的抗性最大化，机制是刺激活体的代谢，从而增强免疫、抗应激和抗疲劳的效应等，但无需添加任何单独的、昂贵的、药理活性纯物质。本发明用于饲料添加剂的组合物的特征在于，它无需添加单独的抗真菌制剂和抗生素，因此较为环保并能产生稳定的牲畜产品。
在世界牲畜产业领域，具有稳定功能的牲畜产品的需求量很大。在韩国，包括猪和家禽的饲养产业在内的牲畜产业领域也经受着与牲畜疾病所致死亡和生产力下降等相关的问题。因此，在现有技术中开发出了用于牲畜的各种功能性饲料。如韩国专利公开号95-009944(题为“用于动物饲料和饮料的添加剂，其包含遗传霉素与林可霉素或绿林肯霉素的混合物”)公开了包含抗生素混合物的动物饲料添加剂，这些抗生素混合物包含遗传霉素与林可霉素或绿林肯霉素，因此能强化动物对传染病的预防和治疗，使肥育(fattening)动物的体重增加，并增加饲料的有效系数。
韩国Laid-open专利公开号1994-701670公开了改进动物饲料之效力和刺激动物生长的方法，其特征在于使动物口服维及尼霉素和糖肽抗生素衍生物的组合物。
同一时间的韩国专利公开号1995-009945公开了含有由遗传霉素和林可霉素组成的混合物的、用于饮料或动物饲料的泌乳配方(lactatingformulation)，它可预防和治疗猪的痢疾和大肠杆菌病，预防地方性肺炎而使猪的体重增加，以及降低幼猪的死亡率。
已登记的韩国专利173053(公开号1999-173053)公开了用于饲料的抗生素组合物，它包含氯化氯四环素或氯化氧四环素，一定量的细菌和一种干发酵液，这种干发酵液是通过使含有能产生氯四环素或氧四环素之细菌菌株的发酵液酸化，用金属离子或铵离子使氯四环素或氧四环素成盐，然后使该混合物干燥而制备得到的。
但由于上述饲料添加剂的缺点在于它们主要由药物和生长激素等组成，有可能增强饲养牲畜对这类药物的耐受性，从而在对牲畜过量供应后诱导药物滥用。基于这样的原因，它们会带来食品安全性方面的问题，因为上述有害物质在饲养牲畜体内的积累将使得人类在摄取由这些牲畜产生的产品时，间接摄入这些同样对人类有害的物质。
因此，从食品卫生角度将绝对优先考虑生产力的提高和质量的稳定性，它们也是牲畜产业领域中价格竞争力和质量改进所要求的。牲畜产业也逐渐转变为大规模生产，而在有限空间内大规模饲养的比例已越来越成为经济考虑的重点。因此，逆转由于大规模饲养引起的牲畜疾病的方法，以及对生产力的改进都是目前有待解决的重要问题。而且，生产力降低可能源于多种因素，包括营养状况的失衡，营养效力的失衡，饲养条件如饲养环境，等等。此外，从食品卫生的角度来看能伤害消费者的药物的使用将逐渐减少，并最终迫切需要用另一种安全的用于饲料的物质来代替。
本发明人为了解决这类问题进行了长期的深入研究，并因此开发出一种用于饲料添加剂的组合物，以及制备该组合物的方法。所述组合物能安全地增强天然免疫力，从而增强对各种疾病的抵抗力，还能平稳地显示其功能从而提高生产力，这是通过刺激由各种饲养条件所引起的应激的减少以及从疲劳状态中恢复来提高生产力。
同时，现有技术中已知用于制备饲料添加剂的方法局限于制备微生物发酵型饲料的方法，其中将一定量的经过培养的微生物制剂接种在已经灭菌的米麸等之上，然后在受控制的条件下发酵一定时间。这种制备发酵饲料的方法不能满足经济、有效的功能性发酵型饲料添加剂所要求的条件，因为所接种的微生物必需经过有效培养，且纯培养必需有灭菌步骤。解决这些问题的关键是确保在未灭菌的米麸上的发酵条件，即，无需任何单独的灭菌过程，也不必增加发酵微生物的数量。
由于上述饲料添加剂有缺陷，即它们主要由药物和生长激素等组成，有可能增强饲养牲畜对这类药物的耐受性，从而在对牲畜的供应量超过最佳量后诱导药物滥用。基于这样的原因，它们会带来食品安全性方面的问题，因为上述有害物质在饲养牲畜体内的积累将使得人类在摄取由这些牲畜产生的产品时，间接摄入这些同样对人类有害的物质。
因此，本发明人将兴趣放在用于饲料添加剂的组合物上，该组合物能作为饲料起作用，其通过增强免疫力而改善抗病性从而代替给药而预防疾病，还能通过促进正常代谢，使得尽可能多地吸收所消化的饲料中的营养，并刺激这些营养的利用，从而提高生产力。本发明人由此开始研究和开发这类组合物。
为了这些目的，本发明人制备了用于生理活性饲料添加剂的组合物，其包含镁化合物，锰化合物，锌化合物和钙化合物，它们在活体的细胞中向矿物成分一样具有活性。通过实验，本发明人开发了一种用于功能性发酵添加剂的组合物，其具有能提高对抗兽医学疾病的免疫力和刺激对营养成分的吸收的生物学活性，以及抗疲劳和抗应激的活性。
根据本发明，可提供用于饲料添加剂的组合物，该组合物能通过增强牲畜的自身免疫力，并在不添加昂贵的功能性物质的前提下使抗应激和抗疲劳的活性最大化，而提高牲畜的存活率，还能通过使牲畜对抗各种兽医学疾病的自身免疫力最大化而提高生产力和经济价值。

发明内容
为了达到上述目的，本发明人进行了最为认真和广泛的研究，由此开发了一种用于饲料添加剂的组合物，它可如下制备将经研磨处理的酵母，镁化合物，锰化合物，钙化合物，锌化合物以及发酵糖与米麸或麦麸均匀混合；使该混合物微需氧发酵；再添加经研磨处理的酵母和细粉状、经加工的石粉；然后使该混合物老化(aging)。
具体地，本发明用于饲料添加剂的组合物可如下制备将5-10g经研磨处理的酵母，0.05-0.15g镁化合物，0.05-0.15g锰化合物，0.05-0.15g钙化合物，0.01-0.05g锌化合物以及10-50g发酵糖与1000g米麸或麦麸均匀混合；使该混合物于微需氧条件下30-45℃嗜温发酵，然后55-75℃嗜热发酵；再添加50-300g经研磨处理的酵母和50-150g经加工的细石粉；然后使该混合物老化。
在制备上述用于饲料添加剂的组合物的过程中，嗜温发酵和嗜热发酵的方式是，使指定成分与1000g米麸或麦麸均匀混合，再使所得混合物在微需氧条件下发酵6-10天，期间首先是嗜温发酵，然后是嗜热发酵，水含量控制在25-35％。接着，将所混合的发酵组合物进一步与经研磨处理的酵母和经加工的石粉混合，然后使整个混合物老化，以制备本发明用于饲料添加剂的组合物。如上所述，微需氧条件是指将氧化还原电势维持在-100～150mV的水平，而发酵是通过先进行嗜温发酵再进行嗜热发酵来完成，其中第一步嗜温发酵是在30-45℃实施3-5天，第二步嗜热发酵是在55-75℃实施3-5天。
实施本发明的最佳模式更具体地，本发明的用于饲料添加剂的组合物用如下方法制备
(a)将5-10g经研磨处理的酵母，0.05-0.15g镁化合物，0.05-0.15g锰化合物，0.01-0.05g锌化合物，0.05-0.15g钙化合物以及10-50g发酵糖与1000g米麸或麦麸均匀混合；(b)使步骤(a)所混合的组合物于30-45℃嗜温发酵3-5天，然后55-75℃嗜热发酵3-5天，期间控制该混合组合物中的水含量为25-35wt％并将氧化还原电势维持在-100～150mV；(c)添加50-300g经研磨处理的酵母和50-150g细粉状、经加工的石粉；然后使该混合物老化。
本发明用于饲料添加剂的组合物是一或多种选自氯化镁(MgCl2)和硫酸镁(MgSO4)的化合物。无论所述添加剂成分是以单个化合物的形式使用还是以两种或更多种组分的组合物的形式使用，都同样能实现本发明的目的。
上述组合物中所用锰化合物是一或多种选自氯化锰(MnCl2)和硫酸锰(MnSO4)的化合物。钙化合物是一或多种选自碳酸钙(CaCO3)，氯化钙(CaCl2)和硫酸钙(CaSO4)的化合物。
锌化合物是一或多种选自氧化锌(ZnO)和硫酸锌(ZnSO4)的化合物。
上述经处理的酵母可选择使用酿造酵母(brewers’s yeast)或面包酵母(bakers’yeast)，该酵母优选已经过加工，并以颗粒大小达100-300目的粉末形式来使用。
上述发酵糖可选择使用一或多种选自葡萄糖或其等效副产物，蔗糖或其等效糖蜜，果糖或其等效副产物，以及麦芽糖或其等效副产物的物质。
上述粉末状加工型石粉可选择使用一或多种选自沸石，蛭石和绢云母的石粉。优选使用经过1000℃以上高温煅烧并具有100-350目的颗粒大小加工型石粉。
无论所选择使用的各种化合物是以单个化合物的形式使用还是以两种或更多种组分的组合物的形式使用，都同样能毫无困难地实现本发明的目的。但优选组合物中各种化合物以等摩尔比的用量使用。
本发明通过以下实施例更具体地举例说明。本领域技术人员能明确理解，这些实施例仅用于具体解释本发明，而不能以任何方式限制本发明的范围。
实施例制备用于饲料添加剂的具有生理活性功能的组合物将含有7.5g经研磨和灭活处理的酵母，0.1g氯化镁(MgCl2)，0.1g硫酸锰(MnSO4)，0.03g氧化锌(ZnO)，0.1g碳酸钙(CaCO3)以及30g蔗糖的组合物与1000g米麸均匀混合并进一步混合，期间控制水含量为30％。然后在-100～100mV的条件下使该混合物于30-40℃嗜温发酵3天，接着65-75℃嗜热发酵3天。将该发酵混合物进一步与220g经研磨和灭活处理的酵母和75g经加工的石粉混合，然后使整个混合物老化，以便获得具有本发明的生理活性功能的饲料添加剂(1)。
对比实施例制备作为普通(general)添加剂的组合物将1000g米麸控制在水含量为30％，在-100～100mV的条件下于30-40℃嗜温发酵3天，接着65-75℃嗜热发酵3天，获得添加剂(2)。
试验1肠道免疫由于在小肠膜表面的派伊尔氏淋巴集结(Peyer’s patch)处活化的免疫细胞产生细胞产生型细胞因子，包括IL-6和粒细胞巨噬细胞-集落刺激因子，因此它们可控制白细胞和其它造血细胞以及骨髓细胞的生长、迁移和分化，从而控制免疫反应或炎性反应。本项试验是用C3H/HeJ小鼠(6-8周龄，得自Dae Han Laboratory Animals)通过派伊尔氏淋巴集结法(Peyer’s patchmethod)测量小肠的免疫活性。更具体地，从C3H/HeJ小鼠的小肠分离派伊尔氏淋巴集结组织，将试验组和对照1组、对照2组的试验样品分别与派伊尔氏淋巴集结细胞反应并与所述细胞一起培养。随后，将从C3H/HeJ小鼠胫骨收集的骨髓细胞与上述所得混合物反应并再次一起培养，其中骨髓细胞的生长速率用Alamar Blue法经分光光度计测定并相互比较，用生物化学方法分析由试验样品诱导的小肠免疫活性。试验组使用本发明实施例章节中制备的饲料添加剂，对照1组接受对比实施例中制备的添加剂，对照2组仅接受经研磨处理的、灭活的酵母(得自韩国Oriental Brewery Co.，Ltd的酿造酵母或得自韩国的Genico的面包酵母)。试验组的小肠免疫活性以LPS(脂多糖)为阳性对照进行测定，然后与对照1组和对照2组的结果进行比较。
表1小肠免疫活性


如以上表1的结果所示，本项试验中的阳性对照显示出6,900的小肠免疫活性，试验组显示出7,000的略高一点的活性，而对照1组和对照2组分别显示出5,700和5,900的小肠免疫活性。因此可得出结论，本发明的饲料添加剂与对照组相比具有相对较高的小肠免疫活性。此外还可知，本发明的添加剂与已报道具有小肠免疫活性的LPS具有同等水平的小肠免疫活性。
试验2巨噬细胞活性在免疫系统中，巨噬细胞是与先天性免疫和获得性免疫这两种免疫系统都有关的一种免疫细胞。它们是细胞免疫系统中的重要免疫细胞，可通过诸如以下机制来活化免疫系统通过将导入机体的外源物质消化、连续分解并加工而将抗原提呈给淋巴细胞，分泌能控制整个免疫系统的特定物质，以及产生能杀伤其它细胞和组织的物质。巨噬细胞活性可通过使用实施例所述方法制备的试验样品进行比较分析，但其中使用ICR小鼠(5-8周龄，Dae Han Laboratory Animals)作为试验动物。在这项测定巨噬细胞活性的试验中，将小鼠腹膜渗出物中的细胞在指定条件下保温以制备巨噬细胞单层，使该单层与试验样品反应以活化巨噬细胞。然后，用ELISA仪测定巨噬细胞溶酶体酶的吸光度，对相对活性进行比较分析。
表2巨噬细胞活性


根据本项试验的结果，试验组的巨噬细胞活性显示出相对值为170，比LPS阳性对照的活性略低，但它们之间不具有显著性差异(P＜0.05)。但是，对照1组和对照2组分别显示出较低的相对活性126和123。可见，本发明的发酵添加剂与已报道具有巨噬细胞活性的LPS具有同等水平的巨噬细胞活性。
从以上试验实施例可发现，本发明的添加剂可大大增强活体的小肠免疫活性和巨噬细胞活性，从而增强对抗疾病的抗性，因此，将本发明的饲料添加剂提供给牲畜，可使牲畜在不使用任何抗生素物质的前提下预防各种疾病。
试验3抗应激效应用5周龄Sprague-Dawley大鼠(


，体重约180g)实施Brekhman和Dardymov的制动(immobileized)(限制性)应激分析方法(PharmacologicalInvestigation of Glycosides from Ginseng and Eleutherococcus，Lloydia 32，46-51(1969))来测定抗应激效应。本项试验中用于试验组和对照组的试验样品根据实施例和对比实施例章节所述方法制备。每种试验样品以1g/kg体重的量每日一次连续口服8天。每种试验样品使用3或4只大鼠。从给与试验样品后的第6天开始，将大鼠置于宽5cm长12cm的封闭小笼中，再固定在45°的斜面上以诱导应激48小时。在最后一次给与试验样品的3小时后，将大鼠用乙醚轻度麻醉，经手术取出血液、肾上腺、胸腺、脾脏和甲状腺，分别称重，然后与对照组中的相应组织或器官进行比较。
表3给与添加剂对大鼠中固定应激指标的影响


注释)1)相同的上标字母表示在p＞0.05的水平上不具有显著性。
2)试验2组喂以本发明的饲料添加剂的试验大鼠
3)对照3组喂以对比实施例中的普通饲料添加剂的试验大鼠4)对照4组喂以经研磨和灭活处理的酵母的试验大鼠Brekhman和Dardymov已报道当诱导应激时，引起肾皮质激素分泌的变化，导致对肝脏、胸腺细胞、肾脏产生影响，并导致多种器官之间下丘脑激素等的分泌，并最终诱导肾上腺、胸腺、脾脏和甲状腺重量的改变。
如上表所示，通过应激使与应激激素的产生密切相关的器官以及使免疫系统相对于无应激的对照组产生显著改变，从而观察到脾脏、胸腺和甲状腺重量的显著下降和肾上腺重量的增加。因此认为，本项试验使用的制动应激方法非常有效。
通过口服每种试验样品8天(1g/kg体重/天)，然后进行制动应激来检查对各种器官的影响。结果发现，所有试验样品都诱导了脾脏、胸腺和甲状腺重量的显著增加，恢复到器官的正常值。可看出，这样的结果与抗疲劳效应的结果一致。
同时，试验2组显示出在脾脏、胸腺和甲状腺中明显的抗应激效应，对照3组(在对照2组中使用的粉末状、经灭活处理的酵母)显示出在肾上腺、脾脏和甲状腺中的抗应激效应，对照4组(在对照1组中使用的已经发酵的米麸添加剂)显示出在脾脏、胸腺和甲状腺中的显著恢复效应。总之，试验2组和对照2组显示出针对应激的较高恢复效应，对照3组显示出仅次于它们的恢复效应。
这种结果说明，本发明的添加剂提供了一种在动物体内阻止应激的效应和使动物从应激状态恢复的效应。
试验4抗疲劳效应用5周龄ICR小鼠(
，体重约25g)实施一种测试受迫游泳的能力的方法，从而测定抗应激效应。在测试游泳运动的能力时，所有的运动能力都在相同条件下测试，以便使小鼠的体质活力(physical activity)以及实验数据的偏差最小。此外，在34℃的恒温水中，在流速为8L/min的动力学强度下，将游泳时间用水流测试仪(water-flowing apparatu ss)测试两次以排除干扰而仅测试小鼠的游泳能力(Matsumoto等，1996)。在控制每组中平均游泳时间相同(4-5只小鼠/组)的条件下，每日口服给与每种试验样品(1g/kg体重)共15天，期间，以3-4天的间隔，4次测试达到最大体力极限的游泳时间。本文中，将游泳时间的极限定义为小鼠不再能游泳的时间点，它是经肉眼观察到小鼠落入水中且7秒钟后仍无法回到水面的状态。从开始游泳的时间点到这一极限点之间的时间即为游泳运动维持的时间。
表4抗疲劳效应小鼠的游泳维持时间(单位min)


注释)1)试验3组喂以本发明的饲料添加剂的试验大鼠2)对照5组喂以对比实施例中的普通饲料添加剂的试验大鼠3)对照6组喂以经研磨和灭活处理的酵母的试验大鼠将每种试验样品(1g/kg体重)每日一次连续口服给药15日，期间以3-4天的间隔测试受迫游泳运动的能力4次，其方式是在流速为8L/min的动力学强度下，用水流测试仪排除干扰而仅测试小鼠的游泳能力(Matsumoto等，1996)。结果，不管给与何种添加剂的对照组在运动时间上几乎不显示任何显著的增加，而给与了试验样品的试验3组、对照5组以及对照6组显示出递增倾向，且于给药的一周后具有显著的增加倾向。所有试验样品在15天的给药之后都具有抗疲劳效应。尤其，试验3组相对于对照5组和对照6组，在给药的1周后显示出非常显著的增加倾向。
从中可认识到，这种增强对受迫游泳的耐受能力的功能提示了抑制应激的效应，且进一步与增强免疫力的效应密切相关。
如以上具体所述，可以肯定本发明用于饲料添加剂的组合物具有增强牲畜对抗各种兽医学疾病的免疫力和刺激对营养的吸收的生物学活性，还具有抗应激和抗疲劳的活性，其中所述组合物是从包含经研磨处理的酵母，镁化合物，锰化合物，钙化合物，锌化合物以及发酵糖的主要成分与米麸或麦麸通过发酵和老化方法而制备。
权利要求
1.一种用于发酵饲料添加剂的组合物，其可通过如下方法制备将5-10g经研磨处理的酵母，0.05-0.15g镁化合物，0.05-0.15g锰化合物，0.05-0.15g钙化合物，0.01-0.05g锌化合物以及10-50g发酵糖与1000g米麸或麦麸均匀混合；使该混合物于微需氧条件下30-45℃嗜温发酵，然后55-75℃嗜热发酵；再添加50-300g经研磨处理的酵母和50-150g细粉状、经加工的石粉；然后使该混合物老化。
2.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述镁化合物是一或多种选自氯化镁(MgCl2)和硫酸镁(MgSO4)的化合物。
3.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述锰化合物是一或多种选自氯化锰(MnCl2)和硫酸锰(MnSO4)的化合物。
4.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述钙化合物是一或多种选自碳酸钙(CaCO3)，氯化钙(CaCl2)和硫酸钙(CaSO4)的化合物。
5.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述锌化合物是一或多种选自氧化锌(ZnO)和硫酸锌(ZnSO4)的化合物。
6.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述经研磨处理的酵母选自酿造酵母或面包酵母。
7.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述经处理的酵母已经加工为颗粒大小达100-300目的粉末。
8.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述发酵糖是一或多种选自葡萄糖或其等效副产物，蔗糖或其等效糖蜜，果糖或其等效副产物，以及麦芽糖或其等效副产物的物质。
9.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述粉末状加工型石粉是一或多种选自沸石，蛭石和绢云母的石粉。
10.权利要求
1的用于发酵饲料添加剂的组合物，其特征在于所述粉末状加工型石粉的颗粒大小为100-350目，且已经经过1000℃以上高温煅烧。
11.一种制备用于发酵饲料添加剂的组合物的方法，包括以下步骤(a)将5-10g经研磨处理的酵母，0.05-0.15g镁化合物，0.05-0.15g锰化合物，0.01-0.05g锌化合物，0.05-0.15g钙化合物以及10-50g发酵糖与1000g米麸或麦麸均匀混合；(b)使步骤(a)所得混合组合物于30-45℃嗜温发酵3-5天，然后55-75℃嗜热发酵3-5天，期间控制该混合组合物中的水含量为25-35wt％并将氧化还原电势维持在-100～150mV；(c)添加50-300g经研磨处理的酵母和50-150g细粉状、经加工的石粉；然后使该混合物老化。
专利摘要
本发明涉及用于饲料添加剂的组合物及其制备方法。本发明的组合物如下述制备:将5－10g经研磨处理的酵母,0.05－0.15g镁化合物,0.05－0.15g锰化合物,0.01－0.05g锌化合物,0.05－0.15g钙化合物,以及10－50g发酵糖与1000g米麸或麦麸均匀混合;使混合物于30－45℃嗜温发酵3－5天,然后于55－75℃嗜热发酵3－5天,期间控制混合组合物中的水含量为25－35wt%并将氧化还原电势维持在－100～150mV;添加50－300g颗粒大小为100－300目的经研磨的酵母和50－150g粉末状、经加工的颗粒大小为100－350目的石粉,然后使整个混合物老化。本发明用于饲料添加剂的组合物具有增强免疫力、抗疲劳和抗应激的生物学活性,而无需添加任何单独的药物材料,因此可作为牲畜的饲料添加剂和鱼类繁殖的饲料添加剂。
文档编号A23K1/16GKCN1381187SQ02105175
公开日2002年11月27日 申请日期2002年2月25日
发明者高钟浩, 徐亨周 申请人:尼尔生物科技株式会社导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan