专利名称：：包括蛋白质的稳定冻干配制剂；检定药包的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种以冻干产物的形式提供的和含有活性成分蛋白质的药理上可接受的配制剂。这一配制剂在25℃下是稳定的，并能通过添加溶剂重新以液体形式构成。它能对人或对动物以胃肠外的方式给药，或者用在检定药包。公所周知，该配制剂在冻干过程中对蛋白质的降解有显著的效果，以及对它们在冻干形式下的稳定性有高的影响。影响这些参数的各种配方变化因素主要是PII，所存在的盐的量，赋形剂的类型和量，所选防冻剂的类型，以及冷冻、升华和脱水操作所选择的温度、压力和时间。这些不同的变化因素影响了冻干产物的物理状态，即玻璃状无定形态，软无定形态、结晶态或这些状态的兼有。这些变化因素中的每一个的作用均已分别加以研究过，但它们的协同效应仍然很难解释(PikalMJ.，DellermanKM.，RoyML.RigginMN.，配方变化因素(Formulationvariables)对冻干人体生长激素的稳定性的影响，Pharm，Research，1991，8，No.4，427—436)。关于氨基酸和多元醇对将要冻干的溶液的性能或已冻干产物的性能的影响的文献提要可以得出以下结论。与氨基酸、甘露糖醇、结晶相或无定形相的存在相关的优点和缺点列在如下与氨基酸的存在相关的优点。有人曾阐述过，冻干产物中甘氨酸的存在会在冻干操作的冷冻阶段诱发存在于溶液中的分子的结晶(KoreyDJ，schwartzJB赋形剂在低压冻干过程中对药物化合物的结晶的影响，J，ParenteralSci.Tech.，1989，43，2，80—83)。这种活性成分的结晶(对于蛋白质的情况它仍然是不太可能的)有可能提高其稳定性。结晶形式的丙氨酸具有在升华和脱水过程中防止冻干产物塌陷的优点和使得制备出具有较大的比表面积的冻干产物，从而能实现更快速的脱水(PikalMJ.，蛋白质的冻干，Biopharm.26—30，1990年10月)。与氨基酸的存在相关的缺点在欲冻干的溶液中加入氨基酸对糖或对多元醇一般会具有降低糖的玻璃化转变温度的作用(teBooy，MPWMderuiterRA.，deMeereALJ.，由于示差扫描量热法评估冻干的含蔗糖配制剂的物理稳定性，Pharm.Research.，1992，9，109—114)。目前，玻璃化温度的降低是冻干产物不稳定的代名词(FranksF.，Freeze—drying；Fromempiricismtopredict—ability，Crvo—letters.1990，11，93—110)。与甘露糖醇的存在相关的优点蛋白质周围无定形甘露醇的存在能够保证在冻干过程中键合到蛋白质的非结晶水的存在，从而防止蛋白质的变性。此外，多元醇的存在能够通过疏水性的相互作用稳定蛋白质，不致于发生热降解(BackJF.OakenfullD.，smithMB.，在糖类和多元醇存在下提高的蛋白质热稳定性，Biochemistry，1979，18，23，5191—96)。与甘露糖醇的存在相关的缺点已有人报道，甘露糖醇不能在37℃下保持酶的活性，而乳糖却能够(FordAW，DawsonPJ.，Theeffectofcarbohydrateadditivesinthefreeze—dryingofalkalinephosphatase，J.Pharm.pharmacol.，1993，45(2)，86—93)。与结晶相的存在相关的优点在冷冻溶液中结晶的溶解物(溶质)的存在是在脱水过程中稳定蛋白质的方式(CarpenterJF.&CroweJH.，在脱水过程中由有机溶解物稳定蛋白质的方式，Cryobiology，1988，25，459—470)。与结晶相的存在相关的缺点有人曾阐述过，冻干蛋白质活性的损失直接与防冻分子的结晶度有关(IzutsuKL，YoshiokaS.，teraot.，因结晶而降低的防冻剂稳定蛋白质的效果，Pharm，Research.1993，10，No.8，1232—1237)。在含蛋白质的药物产品的配制剂中，应避免赋形剂结晶，其依据是(HermanskyM.，PesakM.，Lyophilizationofdrugs.VIAmorphousandCristallineformsCesk.Farm.，1993，42，(2)，95—98)。与无定形相的存在相关的优点无定形状态添加剂的存在将某些酶的活性与添加剂浓度成正比地稳定下来，根据(IzutsuKL，YoshiokaC.，teraeT.，因结晶而降低的防冻剂稳定蛋白质的效果，Pharm.Research.1993，10，No.8，1232—1237)。赋形剂的防冻效果归因于所得冻干产物中甘氨酸的无定形状态(PikalMJ.，DellermannKM.，RoyML.RigginMN.，配方变化因素对冻干人体生长激素的稳定性的影响，Pharm.Research.，1991，8，No.4,427—436)。与无定形相的存在相关的缺点在固体无定形单独存在下，在冷冻过程中冻干产物在比玻璃化转变温度高的温度下塌陷。在软无定形相中，与在结晶相中相比，化学降解反应具有更快速的动力学速度。总之，关于赋形剂对稳定蛋白质的效果的科学文献总结能够发现它们的性能的相反性息。没有可以普通接受的关于冻干产物的结构和其稳定性之间的关系的理论。同样，多元醇和氨基酸(单独的或结合的)的作用根据一组可概括的性能来说没有进行描述，但是根据所研究的蛋白质和所使用的赋形剂的量来说已观察到相反的结果。因此，现十分惊奇地发现，在甘露糖醇和丙氨酸之间存在对于稳定冻干蛋白质的协同效应。曾经已有说明，这种协同效应仅仅存在于这两种赋形剂中每一种的较浓区域。最佳效果被定义比值R，而R表示存在于冻干产物中的甘露糖醇质量/丙氨酸质量之比，为0.1—1，尤其为0.2—0.8。此外，曾经已说明过，R为0.1—1该冻干产物由无定形相和结晶相组成，无定形相主要由甘露糖醇和蛋白质组成，结晶相主要由丙氨酸组成。设想的假定是R为0.1—1形成的无定形相在冷冻过程中防止蛋白质冻坏，结晶相加固冻干产物的结构并防止它塌陷。正是这种在共存的无定形相和结晶相之间的奇特协同效应稳定了冻干蛋白质。因而本发明描述了产生这种效应的优选R比值。因此，本发明涉及一种冻干药物剂型，它含有有效量的生物活性蛋白质、已调节到为稳定蛋白质所需要的最佳PH的缓冲液、丙氨酸和甘露糖醇，后两种赋形剂的质量比值R(甘露糖醇质量/丙氨酸质量)为0.1—1。包含在该配制剂中的蛋白质在冻干形式下保持稳定。所得冻干产物的溶解是快速的和完全的，冻干产物的结构没有被破坏或没有塌陷，且其水含量适于维持蛋白质的活性。本
技术领域：
中熟练人员所周知的其它药理上可接受的赋形剂可以引入这一配制剂，例如助溶剂，防腐剂、抗氧剂或螯合剂。因此，本发明的目的在于得到含蛋白质的稳定冻干产物，该蛋白质在冷冻过程中通过主要由蛋白质和甘露糖醇组成的无定形固相来防冻，这一无定形相在冷冻溶液升华和脱水之后共存于所得到的冻干产物中，而结晶相主要由丙氨酸组成。根据本发明进行配制用的生物活性蛋白质可以是糖基化的或非糖基化的，天然的，合成的，半合成的或重组体多肽，它们在临床或实验室实践中使用。更具体地说，该蛋白质例如可以是激素，如生长激素，优选人体生长激素(hGH)，促黄体(生成)激素(LH—RH)，促性腺激素。该蛋白质也可以是酶，例如，血检溶解酶比如尿激酶、Prourokinase、链激酶、葡萄球菌激酶、组织纤维蛋白溶酶原活化剂(tPA)或酶比如膦酸酯酶、硫酸酯酶、酰基转移酶、单胺氧化酶、尿酸氧化酶。同样，根据本发明配制的蛋白质可以是细胞分裂素，例如白细胞间素(interleukin)—2(IL—2)，白细胞间素—4(IL—4)，白细胞间素—6(IL—6)或白细胞间素—13(IL—13)。根据本发明的另一类蛋白质例如包括抗体、免疫球蛋白、抗毒素。多肽类如缩胆囊肽(CCK)、SubstanceP、神经激肽A、神经激肽B、神经紧张素(neurotensin)、神经多肽Y、血管扩张素、bombesin可以根据本发明用来进行配制。生物活性蛋白质优选是hGII(人体生长激素)、尿酸氧化酶或白细胞间素—13。人体生长激素是由在半胱氨酸53和165和半胱氨酸182和189之间具有2个二硫(化)桥键的191氨基酸的单一多肽链组成的蛋白质。尿酸氧化酶是将尿酸氧化成尿囊素的酶，它是从Aspergillusflavus的生物量提取的(Laboureur等人，Bull.Soc.Chim.Biol.1968，50，811—825)提取的。它曾用来冶疗hyperuricemias达20年以上。给这种蛋白质编密码的CDNA最近已被克隆化并在E.coli中表征(LEGOUXR等人，J.ofBiol.chem.，1992，267，12，8565—8570)，AspergillusflavusandSaccharomycescerevisiae。该酶是具有分子量在32,000区域的等同亚单元的四聚体。由301氨基酸的单一多肽链组成的单体没有二硫(化)桥键，并在N—终止端被乙酰化。白细胞间素—13是由带2个二硫(化)桥键的112氨基酸的单一多肽链组成的细胞活素(Minty等人，Nature，1993，362，248—250)。无定形(甘露糖醇＋蛋白质)相与结晶丙氨酸相的共存的实现与用来调节溶液PH的缓冲剂的存在和浓度无关，但是，与上述定义的R比值有关。为了推出蛋白质配制剂(公众能得到，作为治疗剂)，将它们配制成足够稳定的形式以便在配制时和使用时之间的这段时间保持它们的生物活性则是十分重要的。例如，hGH曾以各种方式如在下述专利或专利申请中所描述的那些方式进行配制；US5，096，885，WO89/09614，WO92/17200，Au—30771/89，WO93/19773，WO93/19776。根据本发明的配制剂可在室温下保藏，而目前在市场上购买的含这些蛋白质的配剂制剂必须在2℃—8℃范围内的温度下保藏。在绝大多数情况下，药物剂型是冻干、冷冻或在溶液中。它含有蛋白质，缓冲剂，甘氨酸，精氨酸，甘露糖醇，锌，表面活性剂，葡聚糖，EDTA，或其它赋形剂，但从来没有质量比R在0.1—1之间的丙氨酸/甘露糖醇结合物。冻干或冷冻形式是用来保持分子的生化完整性和生物活性。该冻干配制剂应该在使用之前通过添加药理上可接受的消毒溶剂如蒸馏水，氯化钠水溶液(0.9％)或葡萄糖水溶液(5％)或者任何其它生理上可接受的溶剂，含或不含抗菌防腐剂如苄醇、苯酚或间甲苯酚，来重新构成。在室温下一直稳定直到被重新构成为止的配制剂在hGH为瓶装形式或采用多次剂量笔形式的情况下对于流动(ambulatory)治疗来说是特别理想的。如此制备的配制剂也可引入检定药包。因此，本发明是冻干产物的优选组合物。这一冻干产物是从溶液开始，通过冻干得到的。这一配制工艺包括混合、溶解、过滤和冻干步骤。待冻干溶液的组成如下蛋白质，用来调节PH的药理上可接受的缓冲剂，丙氨酸，甘露糖醇，注射用水，其中质量比R(甘露糖醇的质量/丙氨酸的质量)在0.1—1之间。待冻干溶液按以下方式制备蛋白质溶液在凝胶过滤柱上获得，它含有将其PH保持在适合于稳定蛋白质的区域内的缓冲剂。所需量的缓冲剂、丙氨酸、甘露糖醇和水被加入到这一溶液中，以便稳定所有的赋形剂。该溶液经无菌过滤，并被分配到容器(优选小玻璃瓶或安瓿)中。溶液的冻干按如下进行该溶液随后进行一冷冻循环，然后升华和脱水(它适应于待冻干的体积和适应于含有溶液的容器)。优选地，在SMH15或SMJ100或SMH2000型的Usifroid冷冻机(法国)中选择接近—2℃/分钟的冷冻速度。调控冻干产物的脱水的时间、温度和压力，作为待冻干溶液体积和冻干产物中所需残留水量的函数。关于制备可注射配制剂的技术的全部信息对于本
技术领域：
的熟练人员来说在Remington′sPharmaceuticalSciences，1985，17版中或在WilliamNA&PolliGP，TheLyophilizationofPharmaceuticals一篇文献综述，J.ParenteralSci.Tech.，1984，38，(2)，48—59或者在FranksF.，Freeze—dryingfromempiricismtopredictability，cryo—Letters，1990，11，93—110中可以获取。从而得到冻干产物，其中丙氨酸处在结晶形式而甘露糖醇处在无定形形式。该冻干产物可在25℃下保藏，而不会损害它所含的蛋白质的生物活性。为了说明本发明，选择hGH或尿酸氧化酶作为蛋白质的例子进行评价。因此，含有作为生物活性蛋白质的hGH或尿酸氧化酶和含有各种浓度下的磷酸盐缓冲剂的几种溶液，对于含hGH(在4IU/0.5nd)的溶液来说PH＝7，而对于含尿酸氧化酶(在30EAU/ml，甘露糖醇单独的，丙氨酸单独的或丙氨酸/甘露糖醇混合物)的溶液来说PH＝8，经制备好，进行冻干和分析。在下表1和2的例子中将详细地描述这些组合物。分析方法以及稳定时间和温度也在下面有描述。表1下表1表明所研究的含尿酸氧化酶的配方的组成EAU指酶活性单位表2下表2表明所研究含hGH的配方的组成U指国际单位用来测定不同参数的分析方法如下。二聚体和较高分子量的相关物质的含量二聚体和较高分子量的相关物质的含量是使用SUPEROSE12柱(Pharmacia，Ref.17—0538—01)由排阻色谱法(SEC—HPLC)测定的。产物用PH＝7.0的磷酸铵缓冲液(1.38g磷酸二氢铵在1升水中，用流速为0.4毫升/分钟的浓氢氧化铵调节PH＝7.0)洗脱。在220nm下进行检测(这一含量在分析结果中注明为低聚物＋聚合物的百分数)。还可以由在EuropeanPharmacopociamonograph(欧洲药典专论)“Somatropinepourpreparationinjectable”(SomatropinforinjectablePreparation)ofJanuary1994中所描述的方法测定二聚体和较高分子量的物质的含量。由反相色谱法进行蛋白质滴定分析以mg/每个小玻璃瓶表示，使用C18—300柱—25cm，直径4.6mm(SYNCHROM，ref.CR103—25)由反相色谱法进行测定。产物在35分钟内以梯度方式进行洗脱，流动相从75体积的水(0.1％三氟乙酸(TFA)(V/V)和25体积的丙烯腈(0.08％TFA(V/V)到30体积的水(0.1％TFA)和70体积丙烯腈(0.08％TFA)连续流过。流速是1毫升/分钟，在200nm下进行检测。尿酸氧化酶的酶催活性的分析根据LegouxR，delpechBruno，dumontx，GuillemotJC.RamondP，ShireD，CaputD，FerraraP，LoisonG，J.Biol.chem，1992，267(12)，8565—8570，通过监测尿酸在292nm处消失，在恒温在30℃的比色杯中由光谱法测定尿酸氧化酶的酶催活性(表示为EAU)。重新构成的溶液的浊度在PerkinElmer554光谱仪中，在500nm下由光谱法(Ph.Eur.2(I)V619)测定溶解在溶液中的含hGH的冻干产物的浊度。结果以吸收单位X1000给出。溶解在溶液中的含尿酸氧化酶的冻干产物的浊度是在RatioHach18900—00浊度计的协助下测定的。浊度结果以如下方法所定义的NephelometricTurbidityUnits(NTU)表示AmericanPublicHealthAssociation测定水和废水的标准方法。根据欧洲药典(II)V.6的方法，通过待分析样品与对比悬浮液的比较，还可测定乳白色度。冻干产物的感官判据这些判据是用目测的并注意冻干产物的颜色，其结构(塌陷或没有塌陷)，以及注意现察在冻干产物的结皮和屑粒之间的可能的相转移。对粉末的X—射线衍射分析对冻干产物的X—射线衍射分析是在SIEMENSD500TT衍射仪中进行的，光源CuKal；发生器40KV，25mA，backmonochromator(逆光单色仪)；缝1/1/1/0.16/0.6；在派热克期(硬质玻璃)台架上抽样；扫描区域4°—40°/每分钟，2倍布喇格θ角。示差热分析通过示差热分析对冻干产物的研究是在下述条件下进行的装置DSC7PerkinElmer；校准物铟和铅；样品大小在50微升盘中5—10毫克之间；起始温度10℃；加热速度10℃/分钟；终温300℃。hGH的脱酰胺形式脱酰胺形式的百分数是使用阴离子交换柱(PHARMACIAmono—QHR5/5，ref.17—0546—01)由阴离子交换色谱法(AEX—HPLC)测定的。使用以下方案，用溶液A(13.8g)磷酸二氢铵在1000毫升水中用浓氢氧化铵调PH＝7)和水(作为溶液B)进行洗脱5％溶液A2分钟，然后经5分钟过渡到15％溶液A，经20分钟过渡到50％溶液A，最后经5分钟过渡到100％溶液A并将该后一种溶液保持5分钟。hGH的洗脱(tR大约15分钟)和脱酰胺形式的洗脱被调控在220nm。流速为1毫升/分钟。使用这些不同的方法得到的分析结果叙述如下。二聚体和较高分子量的相关物质的含量溶解在0.5ml水中的含4国际单位(IU)hGH的冻干产物的低聚物＋高聚物的含量经测定作为R比例的函数(图1)。图1表明溶液的低聚物＋高聚物的最低含量是当R在0.1—1之间时获得的，该数值0.1是从曲线上内推的。借助于另外的例子，hGH在4IU和8IU的两批样被检测在25℃下和在35℃下的稳定性。在6个月的保藏期后它们的稳定性良好。下表3和4表明，与EuropeanPharmacopoeiaStandards(欧洲药典标准)相比，脱酰胺形式的低聚物和高聚物的百分含量。在这些表中，R＝0.45。表3批料，4IU/瓶*在给定该分析方法精确度的时间内滴定没有显著变化(±5％)表4批料，8IU/瓶<在给定该分析方法精确度的时间内滴定没有显著变化(±5％)尿酸氧化酶的酶催活性的分析在35℃下1个月之后，测定溶解于1ml水中的含30EAU尿酸氧化酶的冻干产物的酶催活性，作为R比例的函数(cf.图2)。图2表明，当R在0.4—1之间时，在35℃下在1个月之后，保持了尿酸氧化酶的初始酶催活性。借助于另外的例子，对于R＝0.45或R＝0.67的配方，在25℃下3个月后仍然保持良好的稳定性(剩余活性接近时间0的活性的100％)。重新构成的溶液的浊度测定溶解于0.5ml水中的含4IUhGH的冻干产物的浊度，作为R比例的函数(cf.图3)。图3表明，该溶液的最低浊度是当R在0—1.5之间时得到的。测定溶解于1ml水中的含30EAU尿酸氧化酶的冻干产物的浊度，作为R比例的函数(cf.图4)。图4表明溶液最低浊度是当R在0.2—1之间时获得的。冻干产物的感官判据测定含4IUhGh或30EAU尿酸氧化酶或者不含蛋白质的每一种冻干产物的感官判据，以及磷酸盐缓冲剂的各种含量，作为R比值的函数，并提供在表5中。表5表明，当R在0.125—1.7之间时冻干产物表现出满意的感官判据。这些特性作为时间的函数并不发生变化。表5作为比值R(甘露糖醇质量/丙氨酸质量)的函数的冻干产物和结晶了的赋形剂的感官判据。width="556">R感官判据结晶赋形剂(X—射线衍射)+∞106.46954.01421.7051.4021.251.09710.6670.456破裂(或塌陷)破裂(或塌陷)破裂(或塌陷)破裂(或塌陷)破裂(或塌陷)破裂(或塌陷)好好好好好好好甘露糖醇甘露糖醇—丙氨酸甘露糖醇—丙氨酸甘露糖醇—丙氨酸甘露糖醇—丙氨酸甘露糖醇—丙氨酸甘露糖醇—丙氨酸甘露糖醇—丙氨酸甘露糖醇—丙氨酸甘露糖醇—丙氨酸丙氨酸丙氨酸丙氨酸</table><p>表5续<p>X—射线衍射对含丙氨酸/甘露糖醇混合物(R从0至＋∞变化)的所得冻干产物的粉末进行X—射线衍射分析的结果在表5中给出。所得衍射图表明，当R在0—1之间时，只出现丙氨酸晶格的线；此外，衍射图的基线的偏移表示存在由甘露糖醇组成的无定形相。R越大，因为甘露糖醇的缘故，无定形相越多。当R＞1时，甘露糖醇也结晶。当R在0—1之间时，所得到的无定形相由甘露糖醇组成和结晶相由丙氨酸组成。示差热分析测定含4IUhGH或30EAU尿酸氧化酶或不含蛋白质的冻干产物的玻璃化转变温度，以磷酸盐缓冲剂的各种含量，作为R比值的倒数的函数(cf.图5)。图5表明，当1/R＞1，即R在0—1之间时，得到含丙氨酸和甘露糖醇的混合物的冻干产物的最高玻璃化转变温度。正是冻干产物的玻璃化转变温度表示出稳定冻干产物的最高温度。因此，当R在0—1之间时，达到了稳定冻干产物的最高温度。脱酰胺形式对于4IU和8IU两批样所得到的结果仅显示出极小的变化，与欧洲药典的somatropinmonograph标准相比较而言，则是很容易接受。这些结果使人能够联想到，这一配方在25℃下充分稳定。总之，已经证明，对于冻干产物所评估的每一种性能在R值的某一间隔均表现出最佳值，它们可以按以下方式总结每一分析判据(％低聚物＋高聚物，hGH稳定性，在35℃下1个月后尿酸氧化酶的酶催促活性，hGH溶液浊度，尿酸氧化酶溶液浊度，冻干产物的外观，丙氨酸单独的晶体，最高玻璃化转变温)定义了每种性能的特定最佳间隔。为了获得可接受的配制剂，它义R的优选间隔，即0.1＜R＜1。下面的实施例说明本发明，但不能限制本发明。实施例1注射用的溶于0.5ml水中的含4IUhGH的冻干产物的组合物实施例2注射用的溶于1ml水中的含8IUhGH的冻干产物的组合物实施例3注射用的溶于1ml水中的含18IUhGH的冻干产物的组合物实施例4注射用的hGH的冻干产物(8IU/1ml)特性验证测试<tablesid="table14"num="014"><tablewidth="1048">脱酰胺形式二聚体和相关的物质馏分形式(cutforms)相关的蛋白质阴离子交换＜6.5％1.0％1.0％1.5％2.2％1.5％1.95％3.3％排阻色谱法＜6.0％1.0％0.75％1.5％1.7％0.8％1.2％2.2％电泳＜2.0％＜2.0％＜2.0％＜2.0％＜2.0％＜2.0％＜2.0％2.0％电泳一致一致一致一致一致一致一致一致</table></tables>实施例4续1(1)存在于对比物中的人工痕量或hGH低聚物的痕量除外，不存在另外的(吸收)带(2)n.s.＝未研究5注射用的hGH的冻干产物(4IU/0.5ml)<特性测试实施例5续1<t>重新构成的溶液<>(1)存在于对比物中的人工痕量或hGH低聚物的痕量除外，不存在另外的(吸收)带(2)n.s.＝未研究实施例618IU的hGH在5℃下稳定1年后的分析结果对于全部结果，R＝0.45实施例718IU的hGH在25℃下稳定3个月的分析结果对于全部结果R＝0.45实施例8尿酸氧化酶的冻干产物的组合物(30EAU/瓶)<实施例8续1在给定该分析方法的精确度时间内滴定没有显著变化(±10％)在35℃下1个月和在5℃、25℃和35℃下3个月时，尿酸氧化酶实施例9冻干产物的稳定性的结果实施例9续1实施例9续2(*)在给定该分析方法的精确度的时间内滴定没有显著变化(±10％)权利要求1.一种稳定的、冻干的和药理上可接受的配制剂，它包括蛋白质、缓冲剂、丙氨酸和甘露糖醇，其中比值R二甘露糖醇质量/丙氨酸质量是在0.1—1之间。2.根据权利要求1的配制剂，其中该蛋白质是激素、酶或细胞分裂素。3.根据权利要求1的配制剂，用来重新构成一种可注射的溶液。4.根据权利要求1的配制剂，用来重新构成一种溶液，该溶液可以经皮下、静脉、肌肉内的方式注射入人体或动物体。5.根据权利要求2的配制剂，其中激素是hGH。6.根据权利要求2的配制剂，其中酶是尿酸氧化酶。7.根据权利要求2的配制剂，其中细胞分裂素是白细胞间素(Interlenkin)—13。8.根据权利要求1的配制剂，其中丙氨酸处在结晶的形式和甘露糖醇处在无定形的形式。9.根据权利要求1的配制剂，其特征在于冻干产物由无定形相和结晶相组成，无定形相主要由甘露糖醇和蛋白质组成，结晶相主要由丙氨酸组成。10.根据权利要求2的配制剂，其中缓冲剂是磷酸盐缓冲剂。11.检定药包，其特征在于它包括根据权利要求1的配制剂。全文摘要本发明的主题是一种稳定的冻干的和药理上可接受的配制剂，它包括蛋白质、缓冲剂、丙氨酸和甘露糖醇，其中甘露糖醇的质量和丙氨酸的质量之比在0.1-1之间。该蛋白质尤其是具有生物活性的蛋白质，如激素，特别是hGH、酶或细胞分裂素。本发明的主题还是一种包括前面定义的配制剂的检定药包(assaykit)。文档编号C12Q1/26GK1116522SQ9510479公开日1996年2月14日申请日期1995年5月4日优先权日1994年5月4日发明者A·贝约尔,T·布鲁尔,P·杜平,P·福尔申请人:萨诺费公司