专利名称：珠子参有效成分制剂及制备方法
技术领域：
本发明涉及中药的有效成分制剂及制备方法，具体涉及珠子参有效成分制剂及制备方法。
珠子参(Panax japonicus subsp.elegantior var.major)是五加科人参属植物，产于东喜马拉雅至我国西部山区，我国主要分布在陕西秦岭、云南横断山脉(丽江)及四川一些海拔较高的山区。珠子参在我国民间有长期的药用历史，其根有舒筋活络、补血止血、祛痰镇痛等功效。现代化学、药理研究证明，该品主含三萜皂甙类化合物，其中以齐墩果烷型的人参甙Ro及竹节参甙Ⅳa含量较高，它具有抗炎，增强肾上腺皮质系统功能，既可作治疗用，也可作为一种滋补强身剂。经动物筛选发现，该品提取物具有显著的镇静和抗疲劳作用。目前国内多以煎药配方为主，尚未见主含珠子参的药物或保健食品问世。
珠子参生药中总皂甙含量一般在5％-10％之间，常法提取可用水或醇，但其提取物的皂甙含量一般只能在10％-30％之间，作为药品使用，生药或常法提取的浸膏中有效成分含量波动太大，显然不利于疾病的治疗和用药安全。
本发明的目的是要填补目前市场空白，提供一种有效成分含量稳定，方便服用，疗效确切的珠子参有效成分制剂。
本发明珠子参有效成分制剂是由30～70％提取物和70～30％药用辅料组成的医学上可接受的各类制剂，如片剂、胶囊、口服液、注射剂等。其中提取物中含珠子参总皂甙为40～90％。
本发明所述的药用辅料为常用的药用辅料如微晶纤维素，硫酸钙，磷酸氢钙，淀粉，羟丙纤维素，糊精，硬脂酸镁，白碳黑，滑石粉、水、蔗糖、阿斯巴甜、柠檬酸、氯化钠、维生素C、丙二醇、丙三醇等。
本发明所述的珠子参总皂甙主含人参甙Ro和竹节参甙Ⅳa。
本发明另一目的是公开上述珠子参有效成分制剂的制备方法。
本发明公开的珠子参有效成分制剂的制备包括1、总提取物制备将干燥的串珠状珠子参破碎，用原生药重量5-30倍量的水或亲水性溶剂，加热回流提取或渗漉法提取，热提2-3次，每次1-3小时，渗漉1次，时间48-96小时，然后经真空部分浓缩，使提取液体积减半，静置，过滤，滤液通过一高分子材料为载体的层析柱，再用水及水一醇混合液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥后得到疏松的淡黄色总皂甙。
2、珠子参有效成分制剂制备取总提取物30～70％与70～30％药用辅料混匀后，按常规的制剂方法制得医学上可接受的各类制剂，如片剂、胶囊、口服液、注射剂等。
本发明所述的亲水性溶剂为脂肪族低级醇或低级酮等。
本发明所述用于柱层析的高分子材料为大孔树脂、聚酰胺、纤维素等，这些既可单独使用也可混合使用。
本发明所述用于柱层析洗脱液的水-醇混合溶剂中醇为脂肪族低级醇，水∶醇的比例为1-99∶99-1的任意比例。
高含量的珠子参总皂甙可以制成注射剂，其提取物的浓度一般控制在每1ml含2-20mg之间。
用本发明珠子参有效成分制剂进行急性毒性试验及对小鼠镇静抗疲劳作用的试验，显示珠子参总皂甙毒性低，镇静抗疲劳作用较强。一、实验材料1、受试药物珠子参总皂甙含皂甙60％，由上海市中药研究所提供，批号981118。人参总皂甙含皂甙30％，由上海市中药研究所提供，批号990401。戊巴比妥钠(Soidium Pentolazlital)广州南方化玻公司进口分装产品，分装日期1996年10月30日。
2、实验动物ICR小鼠，♂，体重18～22g。由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，动物生产合格证号沪动合证字153号。实验条件温度22±2℃，湿度65～75％，不锈钢笼具分笼饲养，饲以鼠用固体高压料。实验前禁食12小时，不禁水。二、实验方法1、与小鼠戊巴比妥钠催眠协同作用试验ICR小鼠50只，按体重随机分成5组，每组10只。受试药物组分别灌服珠子参总皂甙40、100、250mg/kg，另设阳性对照组分别灌服人参总皂甙500mg/kg，空白对照组灌服等容积蒸馏水，连续灌服14d。灌胃体积均为20ml/kg。在第14d灌服药物后1小时，每鼠ip戊巴比妥钠36mg/kg，观察并记录15’内翻正反射消失的动物只数、动物入睡阈值和睡眠持续时间。
2、小鼠体重变化观察试验ICR小鼠50只，按体重随机分成5组，每组10只。受试药物组分别灌服珠子参总皂甙40、100、250mg/kg，另设阳性对照组分别灌服人参总皂甙500mg/kg，空白对照组灌服等容积蒸馏水，连续灌服14d。灌胃体积均为20ml/kg。第15d称小鼠体重，记录并比较用药组小鼠体重与对照组的差异。
3、小鼠游泳抗疲劳试验ICR小鼠50只，按体重随机分成5组，每组10只。受试药物组分别灌服珠子参总皂甙40、100、250mg/kg，另设阳性对照组分别灌服人参总皂甙500mg/kg，空白对照组灌服等容积蒸馏水，连续灌服16d。灌胃体积均为20ml/Kg。在第16d灌服药物后1小时，每鼠尾部负重1g，置于30℃水温的水池中，观测并记录其入水游泳至死亡的时间。水池放置小鼠每组各2只。以小鼠无力游泳至水面，并在水下连续抽搐3次者为小鼠死亡时间。
4、小鼠急性毒性试验预试验ICR小鼠18只，按体重随机分成3组，每组6只，♀♂各半，分别灌服珠子参总皂甙1250、2500、5000mg/kg，给药后连续观察7天。
一次性灌服最大耐受量试验根据预试验结果，取ICR小鼠20只，♀♂各半，分别一次性灌服珠子参总皂甙5000mg/kg，灌胃体积为40ml/kg。给药后自由饮食，每天上、下午各观察一次，连续观察7天。
四、实验结果1、对与小鼠戊巴比妥钠催眠协同作用的影响(见表1)珠子参总皂甙100、250mg/kg剂量组和人参总皂甙500mg/kg剂量组对小鼠戊巴比妥钠所致小鼠入睡阈值的降低、睡眠持续时间的延长、翻正反射消失率的提高均有一定的正向活性。其中珠子参总皂甙100、250mg/Kg剂量组的入睡阈值的降低和翻正反射消失率的提高与相应的空白对照组比，均具有统计学显著意义(P＜0.05)。
表1．珠子参总皂甙对与小鼠戊巴比妥钠催眠协同作用的影响(N=8)
与空白对照组比*P＜0.2**P＜0.1***P＜0.052、对小鼠体重变化的影响(见表2)珠子参总皂甙100、250mg/kg剂量组对小鼠体重变化无明显影响。人参总皂甙各剂量组对小鼠体重有一定的增加作用，与空白对照组比，统计学处理P＜0.1，但无显著性意义。
表2 珠子参总皂甙对小鼠体重变化的影响(N=10)
与空白对照组比**P＜0.13、对小鼠游泳抗疲劳作用的影响(见表3)珠子参总皂甙低中剂量组对小鼠游泳时间有一定的提高作用。其中100mg/kg与空白对照组相比，统计学处理有显著性意义(P＜0.05)。珠子参总皂甙250mg/kg剂量组、人参总皂甙500mg/kg剂量组有一定提高小鼠游泳时间的作用，但统计学处理无显著性意义。
表3 珠子参总皂甙对小鼠游泳时间的影响(N=10)
与空白对照组比***P＜0.054、对小鼠最大耐受量的影响(见表4)预实验珠子参总皂甙1250、2500、5000mg/kg剂量组♀♂动物均未见死亡。
一次性灌服最大耐受量试验ICR小鼠20只，♀♂各半，一次性灌服珠子参总皂甙5000mg/kg，给药后连续观察7天，小鼠无一死亡，也未见有明显的毒副作用。表4珠子参总皂甙5000mg/kg一次性灌服对小鼠最大耐受量的试验
五、实验结果1、珠子参总皂甙100、250mg/g剂量组对小鼠戊巴比妥钠所致小鼠入睡阈值的降低、翻正反射消失率的提高具有明显的作用(P＜0.05)。
2、珠子参总皂甙40、100、250mg/kg剂量组对小鼠体重变化无明显影响。
3、珠子参总皂甙100mg/kg剂量组对小鼠游泳时间有一定的提高作用。
4、珠子参总皂甙一次性灌服对小鼠的最大耐受量为5000mg/kg。
六、试验结论珠子参总皂甙毒性较小，最大耐受量为5000mg/kg，而其镇静作用较强，最佳有效剂量为100mg/kg，对抗疲劳亦有一定的提高作用。
本发明提供的高含量珠子参总皂甙制剂及制备方法克服了由生药或粗浸膏所制得的制剂质量不稳定诸因素(如生药的染菌问题，粗提物杂质多，易霉变等)，提高了珠子参制剂内在质量，从而保证药物的临床使用安全和疗效能确保药物使用安全并提高疗效，这对于提高中药的内在质量具有重要意义。另外本发明与溶剂法萃取纯化工艺相比较，溶剂耗量小，制备周期短，费用低，并适合于工业生产。
实施例11kg破碎的珠子参，加水10kg浸泡过夜，回流1.5小时，过滤，残渣用水8kg加热回流1小时，合并提取液，60℃下真空浓缩至约8L，静置，过滤，滤液过大孔树脂(C1400型、0.5kg)柱，；用95％乙醇洗脱，洗脱液经浓缩，干燥，得到提取物80g，其总皂甙含量60％。
实施例22kg珠子参，加水16kg浸泡过夜，次日加热回流2小时，过滤，残渣用水16kg加热回流1.5小时，合并滤液，60℃下真空浓缩至约15L，静置，过滤，滤液过大孔树脂。(DA201型、1kg)柱，分别以水，20％乙醇，40％乙醇，80％乙醇各2kg梯度洗脱，收集40％-80％的洗脱液，浓缩，干燥，得到提取物140g，其总皂甙含量80％。
实施例30.5kg珠子参粉，加20％乙醇2kg浸泡过夜，然后用同浓度的乙醇15kg连续渗漉3天，渗漉液在60℃下真空浓缩至10L，过滤，滤液过大孔树脂(C1400型、0.5kg)柱，分别用水，20％乙醇，30％乙醇，60％乙醇，95％乙醇各0.5kg梯度洗脱。收集30％-60％的乙醇洗脱液，浓缩，干燥，得到提取物25g，其总皂甙含量90％。
实施例4取实施例1制得的提取物1000g(皂甙含量60％)，分别加入微晶纤维素，硫酸钙，淀粉，羟丙纤维素，硬脂酸镁，白碳黑各206,200,170,70,15,5g，经混匀后，压片，制成素片，经薄膜包衣，制成品，每片片重350mg，内含原料药200mg。
实施例5取实施例3制得的提取物(皂甙含量为90％)100g，加注射用水使成20L，滤过，灌封，灭菌，即得每ml含原料药5mg的注射剂。
权利要求
1.一种珠子参有效成分制剂，其特征在于该制剂是由30～70％提取物和70～30％药用辅料组成的医学上可接受的各类制剂，其中提取物中含珠子参总皂甙为40～90％。
2.一种如权利要求1所述的珠子参有效成分制剂，其特征在于其中所述的医学上可接受的各类制剂为片剂、胶囊、口服液、注射剂。
3.一种如权利要求1所述的珠子参有效成分制剂的制备方法，其特征在于该制剂由下述方法制得(1)总提取物制备将干燥的串珠状珠子参破碎，用原生药重量5-30倍量的水或亲水性溶剂，加热回流提取或渗漉法提取，热提2-3次，每次1-3小时，渗漉1次，时间48-96小时，然后经真空部分浓缩，使提取液体积减半，静置，过滤，滤液通过一高分子材料为载体的层析柱，再用水及水一醇混合液洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，干燥后得到疏松的淡黄色总皂甙提取物；(2)珠子参有效成分制剂制备取总提取物30～70％与70～30％药用辅料混匀后，按常规的制剂方法制得医学上可接受的各类制剂，如片剂、胶囊、口服液、注射剂等。
4.一种如权利要求3所述的珠子参有效成分制剂的制备方法，其特征在于其中所述的亲水性溶剂为脂肪族低级醇或低级酮等。
5.一种如权利要求3所述的珠子参有效成分制剂的制备方法，其特征在于其中所述的用于柱层析的高分子材料为大孔树脂、聚酰胺、纤维素等，它们既可单独使用也可混合使用。
6.一种如权利要求3所述的珠子参有效成分制剂的制备方法，其特征在于其中所述的用于柱层析洗脱液的水-醇混合溶剂中醇为脂肪族低级醇，水∶醇的比例为1-99∶99-1的任意比例。
全文摘要
本发明涉及珠子参有效成分制剂及制备方法。本发明珠子参有效成分制剂是由30～70%提取物和70～30%药用辅料组成的医学上可接受的各类制剂。其中提取物中含珠子参总皂甙为40～90%。本发明提供的高含量珠子参总皂甙制剂及制备方法克服了由生药或粗浸膏所制得的制剂质量不稳定诸因素,提高了珠子参制剂内在质量,从而保证药物的临床使用安全和疗效能确保药物使用安全并提高疗效。本发明与溶剂法萃取纯化工艺相比较,溶剂耗量小,制备周期短,费用低,并适合于工业生产。
文档编号A61K31/70GK1320441SQ0011542
公开日2001年11月7日 申请日期2000年4月21日 优先权日2000年4月21日
发明者张国明, 黄德杰 申请人:上海市中药研究所