专利名称：一种含有桑叶总碱浸膏的制剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种含有桑叶总碱浸膏，含有它的制剂及其制备方法，该制剂具有明显的降血糖及改善糖耐量作用。
本发明的高含量桑叶总碱浸膏经药理研究证明具有明显的降血糖及改善糖耐量作用。
本发明的另一目的是提供本发明所述的高含量桑叶总碱浸膏的制备方法。
高含量桑叶总碱的制备方法未见文献报道，本发明的高含量桑叶总碱浸膏的制备方法中一些步骤是在研究总碱化学成分时运用过的，本发明除了运用这些步骤外还采用一些重要的步骤来提高浸膏中总碱的含量，具体的步骤是将桑叶粗粉用水或含水亲水性溶剂提取，经浓缩、絮凝、柱色谱分离精制、干燥后制得高含量桑叶总碱浸膏，其中絮凝步骤具有重要作用。
本发明的高含量桑叶总碱浸膏是通过以下方法制备的将桑叶(50kg)粉成粗粉，过20目筛，用500L的水或含水亲水性溶剂加热回流提取，或冷浸渗漉法提取，热提2-3次，每次1-3小时，或冷提1次，48-96小时，然后提取液减压浓缩为比重1.12-1.20，加入原生药量的1-5倍量水溶解，静置，调节pH3～5，加入絮凝剂壳聚糖4L，静置12h，上清夜通过强酸型离子交换树脂为载体的柱色谱，用水洗脱至无色，倒出树脂，加入碱溶液闷置4h后，将树脂用亲水性溶剂甲醇回流提取2次，每次2h，收集提取液，于低于60C的条件下减压浓缩、干燥后得高含量桑叶总碱浸膏182g。所述制备方法可用以下步骤描述a.将干桑叶粉碎成粗粉，用水或含水亲水性溶剂提取，b.提取液浓缩，加水溶解，静置，调节pH到3～5，加入絮凝剂，静置，c.上清液通过离子交换树脂为载体的柱色谱，用水洗脱至无色，倒出树脂，加入碱溶液闷置4h后，将树脂用亲水性溶剂回流提取(2h×2)，收集提取液，d.减压浓缩、得浸膏。
本发明的高含量桑叶总碱浸膏的制备方法中所述的亲水性溶剂为脂肪族低级醇或低级酮。
其中所述的絮凝剂为明胶、海藻酸钠、琼脂、壳聚糖及其衍生物，ZTC1+1等，优选壳聚糖。
其中所述的碱水溶液中的碱为挥发性的碱，可以为二乙氨、三乙氨、吡啶等，优选为氨水，水和碱的混合比例为水∶氨＝99-1∶1-99(体积比)的任意比例。
本发明的高含量桑叶总碱浸膏的制备方法操作简便，无苛刻的设备要求，宜于规模型工业化生产。
本发明的高含量桑叶总碱浸膏，在制备成药剂时可加入药物可接受的载体，所述药物可接受的载体可以是甘露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、土温80、琼脂、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β-环糊精、磷脂类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。
本发明的高含量桑叶总碱浸膏可通过常规方法制成中药制剂，该制剂可以是任何可药用的剂型，这些剂型包括片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、滴剂、贴剂。本发明的制剂，优选的是口服剂型，如胶囊剂、片剂、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂、丹剂、膏剂等，优选的是胶囊剂。
本发明的制剂每剂中可含有桑叶总碱浸膏10-600mg，所述每剂指，每一制剂单位，或每次服用剂量，若为每一制剂单位可指每粒胶囊，或每片、每袋、每丸、每一安瓶等。
在使用时根据病人的情况确定用法用量，如可每日服三次，每次1-20剂，如1-20粒或片。
对本发明的浸膏进行了以下药效学实验证明其有益效果。一、对正常小鼠血糖的影响试验材料1、药物桑叶总碱，用实施例1方法制备，试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度。
2、动物NIH小鼠，18-22g，♀、♂各半。
3、血糖测定试剂盒，由四川迈克生物技术有限公司生产，批号20020306。
试验方法与结果1、单次给药对血糖的影响小鼠，30只，空腹12h后，按动物性别均衡随机分为3组，每组10只，♀、♂各半，分别灌胃给予下列药物(1)正常对照组(蒸馏水)；(2)桑叶总碱低剂量组(40mg/kg)；(3)桑叶总碱高剂量组(100mg/kg)。给药体积按20ml/kg，给药1h后动物眼球取血，用葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖值。结果见表1。
表1桑叶总碱(单次给药)对正常小鼠血糖值的影响(n＝10，X±SD)剂量 血糖值组别(mg/kg)(mmol/L)正常对照组 - 1.797±0.566桑叶总碱40 0.655±0.536**桑叶总碱100 0.929±0.904*
与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01(t检验)2、多次给药对血糖的影响小鼠，20只，♀、♂各半，空腹12h后，测定血糖，根据血糖值及动物性别均衡随机分为2组，分别灌胃给予下列药物(1)正常对照组(蒸馏水)；(2)桑叶总碱(80mg/kg)。连续给药7天，给药体积按20ml/kg，第7天给药前空腹12h，给药后1h动物取血，用怡成血糖测试仪测定动物血糖值。结果见表2。
表2桑叶总碱(多次给药)对正常小鼠血糖值的影响(n＝10，X±SD)剂量 药前血糖值 药后血糖值变化率组别(mg/kg) (mmol/L)(mmol/L) (％)正常对照组- 4.74±0.89 4.95±0.85 +6.9±22.4桑叶总碱 804.67±1.05 3.56±1.17** -22.9±21.4与正常对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01(t检验)。
结论1、单次给药，桑叶总碱(40，100mg/kg)，具有明显的降低血糖的作用。
2、多次给药，桑叶总碱(80mg/kg)，具有降低血糖的作用。二、对自发性高血糖小鼠血糖的影响试验材料1、药物桑叶总碱，用实施例1方法制备。试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度。
2、动物NOD小鼠，体重20-30g，24只，♀、♂各半，由北京大学医学部实验动物中心提供，许可证编号SCXK11-00-0004。
3、测定仪器怡成血糖测试仪及测定试纸，由北京怡成生物电子技术有限公司研制。
试验方法与结果小鼠，24只，空腹12h后，测定血糖值，根据血糖水平和性别，将动物均衡随机分为3组，每组8只，♀、♂各半，分别灌胃给予下列药物(1)对照组(蒸馏水)，(2)桑叶总碱低剂量组(50mg/kg)，(3)桑叶总碱高剂量组(150mg/kg)，给药体积按20ml/kg，给药1h后，动物取血，用怡成血糖测试仪测定空腹血糖值。结果见表3。
表3桑叶总碱对自发性高血糖小鼠血糖的影响(n＝8，X±SD)剂量 药前血糖 药后血糖 变化率组别(mg/kg)(mmol/L) (mmol/L)(％)对照组- 8.61±1.51 8.99±1.42 +5.0±9.5桑叶总碱 50 8.48±1.38 7.83±1.41 -7.1±12.5桑叶总碱 150 8.79±1.76 8.20±1.20 -5.6±8.3药物组与对照组比较，差异无显著性意义P＞0.05(t检验)。
结论桑叶总碱，对自发性高血糖小鼠血糖无明显影响。三、对链脲霉素诱发小鼠高血糖的影响试验材料1、药物桑叶总碱，用实施例1方法制备，试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度。
2、动物NIH小鼠，体重18-22g，♀、♂各半。
3、主要试剂链脲霉素，美国Sigma公司产品。造模前用柠檬酸缓冲液(PH＝4.0)，于低温下配制。
4、仪器怡成血糖测试仪及测定试纸，由北京怡成生物电子技术有限公司研制。
试验方法与结果小鼠，40只，随机分42组，每组10只，♀、♂各半，(1)对照组(蒸馏水)；(2)高血糖模型组(蒸馏水)；(3)桑叶总碱低剂量组(50mg/kg)；(4)桑叶总碱高剂量组(150mg/kg)。除正常对照组外，其余各组腹腔注射链脲霉素(200mg/kg)，72h后测血糖(空腹12h)，然后将(2)-(4)组，根据血糖值均衡调整组别。同时按以上剂量灌胃给予试验药物，连续7天，第7天给药前空腹12h，于末次给药后1h测定血糖。结果见表4。
表4桑叶总碱对链脲霉素诱发小鼠高血糖的影响(n＝10，X±SD)
剂量 药前血糖 药后血糖变化率组别(mg/kg) (mmol/L) (mmol/L) (％)正常对照组-4.73±1.01 4.86±1.02 +3.1±7.8高血糖模型组 -9.34±2.23##9.49±2.04##+2.1±5.8桑叶总碱 50 9.60±2.68 7.59±2.41 -21.3±5.5桑叶总碱 150 9.76±2.60 7.39±1.80*-23.8±7.8与正常对照组比较##P＜0.01；与模型组比较*P＜0.05，**P＜0.01(t检验)。
结论小鼠腹腔注射链脲霉素，可使血糖升高，而给予桑叶总碱后，具有降血糖的作用。其中剂量为(150mg/kg)与模型组比较，差异具有显著性意义。四、对小鼠口服蔗糖的糖耐量试验试验材料1、药物桑叶总碱，用实施例1方法制备，试验前用蒸馏水配制成所需要的浓度。
2、动物NIH小鼠，18-22g，♀、♂各半。
3、主要试剂蔗糖，分析纯，广州化学试剂厂生产，批号960202。
4、仪器怡成血糖测试仪及测定试纸，由北京怡成生物电子技术有限公司研制。
试验方法与结果小鼠，20只，随机分为2组，每组10只，♀、♂各半，分别灌胃给予下列药物(1)对照组(蒸馏水)；(2)桑叶总碱组(80mg/kg)，给药体积为20ml/kg，动物空腹12h后，测定血糖，然后按以上剂量给药，且药物中含蔗糖0.25g/ml。用怡成血糖测试仪测定给蔗糖后0.5h，1h，2h血糖值。试验结果见表5。
表5桑叶总碱对糖耐量试验结果(n＝10，X±SD)剂量 血糖值(mmol/L)变化率(％)组别(mg/kg) 0h 0.5h1h2h 0.5h 1h 2h正常对照 4.66± 7.72± 8.10± 5.08±69.0±78.0± 11.3±-组 1.01 1.05 0.97 0.79 18.4 23.0 16.7
4.50±6.73± 7.18±4.68±56.2±69.2±桑叶总碱80 5.6±9.31.18 1.01*0.75*1.08 31.7 43.1与正常对照组比较*P＜0.05(t检验)。
结论桑叶总碱，剂量为80mg/kg能抑制小鼠口服蔗糖后血糖值的升高。
口服液[处方]桑叶总碱浸膏100g制成口服液1000支[制法]将桑叶总碱浸膏100g，溶解于水，加入适量矫味剂，灭菌，灌装即可。
权利要求
1.一种桑叶总碱浸膏，其特征在于，含有药物有效成分脱氧野尻霉素，
2.权利要求1的浸膏，其特征在于，在该浸膏中桑叶总碱的含量不少于70％，脱氧野尻霉素的含量不少于50％。
3.权利要求2的浸膏的制备方法，其特征在于，经过以下步骤，a.将干桑叶粉碎成粗粉，用水或含水亲水性溶剂提取，b.提取液浓缩，加水溶解，静置，调节pH到3～5，加入絮凝剂，静置，c.上清液通过离子交换树脂为载体的柱色谱，用水洗脱至无色，倒出树脂，加入碱溶液闷置4h后，将树脂用亲水性溶剂回流提取(2h×2)，收集提取液，d.减压浓缩、得浸膏。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的亲水性溶剂为脂肪族低级醇或低级酮。
5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的絮凝剂选自明胶、海藻酸钠、琼脂、甲壳素及其衍生物，ZTCl+1、壳聚糖。
6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的碱溶液中的碱为挥发性的碱，选自二乙氨、三乙氨、吡啶，氨水，水和碱的混合比例为水∶氨＝99-1∶1-99(体积比)的任意比例。
7.用权利要求2的浸膏制备的药物制剂。
8.权利要求7的药物制剂是任何可药用的剂型。
9.权利要求8的药物制剂是片剂、胶囊剂、口服液、口含片、颗粒剂、冲剂、丸剂、散剂、混悬剂、粉剂、溶液剂、滴剂、滴丸剂。
10.用权利要求3的浸膏制备一种治疗糖尿病的药物。
全文摘要
本发明涉及一种含有桑叶总碱浸膏的制剂及其制备方法，该浸膏中的桑叶总碱含量不少于70％，脱氧野尻霉素的含量不少于50％，该制剂具有明显的降血糖及改善糖耐量作用。
文档编号A61P3/00GK1430964SQ03101988
公开日2003年7月23日 申请日期2003年1月30日 优先权日2003年1月30日
发明者洪春力 申请人:洪春力