专利名称：一种生脉注射制剂及其制备方法
技术领域：
本发明属于中药制药技术领域，具体涉及一种生脉注射制剂及其制备方法。
背景技术：
生脉注射制剂来源于古方生脉散，由人参、麦冬、五味子组成，具有益气养阴，复脉固脱，临床应用用于气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气短、四肢厥冷、汗出、脉欲绝及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克等具有上述证候者。
传统工艺提取人参，用50％-70％乙醇作为溶剂进行提取，我们通过大量的实验研究发现，利用高浓度乙醇进行提取可以提高人参皂苷的提取率，再利用水沉淀的方法，去除一些无效成分，使人参的有效部位得到充分利用。
5-羟甲基糠醛是葡萄糖等单糖化合物在高温或弱酸等条件下脱水产生的一个醛类化合物，该化合物对人体横纹肌和内脏有损害，本发明对5-羟甲基糠醛进行毒理实验的研究，验证了5-羟甲基糠醛在长期应用，对横纹肌和内脏确实有损害。中华人民共和国药品食品监督管理局注册司审评三部的张哲峰老师曾经提出，在药品中应控制5-羟甲基糠醛的含量，《中华人民共和国药典》(2000年版)对葡萄糖输液和中药蜜丸中的5-羟甲基糠醛的含量都有限量要求，充分说明该物质在药物应用中应该慎重！专利申请号为97107191.8的专利提出5-羟甲基糠醛在生脉注射制剂中的作用，在该专利中提到，5-羟甲基糠醛五味子和麦冬同时煎煮产生的量较大，查阅文献，我们得知5-羟甲基糠醛在酸性条件下，由葡萄糖等单糖分解产生的一种化合物，经过对麦冬和五味子的有效成分的分析，麦冬含有大量的多糖，在提取过程中会分解成很多小分子单糖，五味子在提取过程中，随着有效成分的溶出，提取液的PH值也逐渐变小(提取液为酸性)，如果将二者合并提取，根据以上原因，自然会产生大量的5-羟甲基糠醛，该专利在进行药理实验中，只是简单的对5-羟甲基糠醛作了有效性实验，即只做了该物质对心脑血管疾病的有效性实验，而对文献提到的5-羟甲基糠醛对横纹肌和内脏有损害未进行任何实验，这在药物研制过程中是不可取的，因此该专利把5-羟甲基糠醛作为生脉注射制剂的有效成分值得我们进一步探讨；生脉制剂中以人参作为君药，该药的研究已经有很多年，沈阳药科大学的姚新生教授、陈英杰教授对该药的研究了几十年，发表了上百篇文献，从现代药理已经证明人参中人参皂苷是其有效成分，因此，我们认为在研究生脉制剂过程中，应以人参皂苷作为制剂质量标准，同时控制5-羟甲基糠醛的含量；查阅生脉制剂专利，未发现其它专利对5-羟甲基糠醛进行限量要求。
药品标准号为WS3-B-2865-98的标准中采用了传统工艺乙醇提取人参的方法，对麦冬、五味子也采取了分别的提取的方法，但该方法没有控制PH值，因此，在加热的条件下，也会产生很多5-羟甲基糠醛。
发明内容
基于上述原因，本发明采用水提取人参的方法，在有效成分有一定提高的基础上，很好控制了生产成本；本发明采用分别提取麦冬和五味子的工艺，在提取过程中严格控制提取液的PH值，减少5-羟甲基糠醛的含量；得到的有效部位与药用辅料混合，制备成注射制剂，药理实验表明本发明各组制剂具有安全性高、药理作用更好的特点。
本发明通过以下技术方案实现的。
一.工艺制法(1)本发明原料药材配比重量份为人参4-6，麦冬14-16，五味子7-8；(2)人参用75-95％提取三次，第一、第二次分别为3小时，第三次2小时，合并提取液，减压浓缩回收乙醇至尽，加水至与药材比为1∶1(V/W)，静置，分离除去上层油，过滤，滤液浓缩到50℃相对密度1.15-1.20，70℃下真空干燥，得人参有效部位；麦冬、五味子分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次分别为45分钟、30分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(50℃热测)，加乙醇至含醇量为75％，放置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(50℃热测)，再加乙醇至含醇量为85％，放置，滤过，加40％氢氧化钠溶液调节pH值分别为7、9左右，放置，滤过，麦冬滤液加稀盐酸调PH至7左右，分别减压回收乙醇至膏状，相对密度分别为1.15-1.20、1.25-1.35(50℃热测)，70℃下真空干燥，分别得麦冬、五味子有效部位；(3)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成水针制剂；(4)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，加入葡萄糖，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成输液制剂；(5)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料赋形剂，干燥。制成粉针制剂；粉针剂的赋形剂为甘露醇、蔗糖、乳糖中的一种或几种混合物。
二.检测分析(1)人参皂苷的检测分析按照标准号为WS3-B-2865-98的含量测定项进行检测分析，结果见表1。
(2)5-羟甲基糠醛的检测分析按照《中华人民共和国药典》(2000年版，一部)中葡萄糖注射液中的5-羟甲基糠醛的检测方法，进行检测分析，得到的吸收度值，进行计算，换算成含量值，结果见表1。(将本发明的输液剂进行浓缩，浓缩到与水针剂相同体积，同样将本发明粉针剂完全溶解体积数与水针剂相同，以下含量比较均在此相同情况下进行。)表1各组制剂成分含量比较人参皂苷(以人参皂苷Rg1、Re计) 5-羟甲基糠醛含量组别mg/ml mg/ml专利申请号97107191.8制备的生脉0.13 152.3注射液市售生脉注射液0.14 143.6本发明生脉水针剂 0.17 3.9本发明输液剂 0.16 3.3本发明粉针剂 0.17 3.6结论本发明的各组制剂的有效成分含量均有所提高，而5-羟甲基糠醛的含量大大降低，充分说明本发明的工艺具有实际意义。
二.药理实施例实施例15-羟甲基糠醛的长期药理实验5-羟甲基糠醛的有效有效药理实验专利97107191.8中已经进行，本发明只是通过对大鼠进行长期药理实验，观察大鼠的各种情况，以认证5-羟甲基糠醛对横纹肌和内脏的损害。
实验药物5-羟甲基糠醛(北京乾露春科技有限公司实验室提供，沈阳药科大学天然药化实验室进行分析其纯度为95％以上)。
生理盐水实验动物wistar大鼠60只，体重(200±20)g，随机分成2组，每组30只，♀♂各半。
实验方法取大鼠，每日尾静脉给药和生理盐水，每日一次，(5-羟甲基糠醛组给药量150mg/ml，给药1ml，生理盐水给药量1ml)，连续给药180天，观察大鼠的死亡率，对死亡大鼠进行生理解剖，观察死亡大鼠的横纹肌和内脏，180天后，解剖没有死亡的大鼠，观察大鼠的横纹肌和内脏的情况。
实验结果见表2。
表2大鼠的死亡情况组别大鼠数 死亡数 死亡率(只) (只) (％)生理盐水30 1 3.35-羟甲基糠醛30 7 23.3对生理盐水死亡大鼠进行生理解剖，未发现其横纹肌和内脏损害，属于大鼠生活过程中意外死亡，而对5-羟甲基糠醛组死亡大鼠进行解剖，发现大鼠的横纹肌和内脏均有损伤，已经影响大鼠的生命活动，是造成大鼠死亡的直接原因；对180天仍然存活的大鼠进行解剖，发现生理盐水组大鼠横纹肌和内脏完好无损，在处死大鼠之前大鼠生命指症非常好，而对5-羟甲基糠醛组存活大鼠进行解剖，发现存活大鼠的横纹肌和内脏也都有不同程度的损伤，在处死大鼠之前，发现大鼠已经奄奄一息。
结论通过上述实验，我们应该充分认识到，一个有效成分在有效的情况下，一定要观察其生理毒性，因此，5-羟甲基糠醛虽然有一定的生物活性，但其也有很大的毒性，因此，不能把5-羟甲基糠醛作为生脉制剂的有效成分，相反，应该在生脉制剂中严格控制其含量；通过实验，每次用量低于5mg/ml，连续给大鼠应用240天，未发现大鼠死亡情况，进行生理解剖，未发现大鼠横纹肌和内脏出现任何异常。
实施例2对大鼠急性心肌缺血保护作用实验药物生脉注射液(吉林省集安益盛药业股份有限公司)；本发明生脉注射制剂(北京乾露春科技有限公司实验室提供)生理盐水(北京乾露春科技有限公司实验室提供)实验动物动物Wister大白鼠50只，雄性，体重(300±20)g，，分为5组，每组10只。
实验方法结扎大鼠的左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型。各组进行尾静脉给药(5.5g/kg给药)，20％乌拉坦(1g/kg，ip)麻醉，分离颈总动脉，并行气管插术，连接动物呼吸机。左侧第四肋间开胸，剪开心包，分离左冠状动脉前降支，平右心耳作结扎部位。取出心脏称重，-10℃冰冻30～50min，在心脏结扎线下，平行冠状沟将心室横切成5片，生理盐水冲洗后，置于pH值8.0磷酸缓冲液配制的浓度为1％的氯化三苯基四氮唑(TTC)溶液中，在38℃恒温水浴中染色10min，正常心肌染色成暗红色，梗死心肌染成灰黄色，剪去心肌片被染色的部分，把未被染色的缺血梗死区心肌称重，计算缺血范围(缺血梗死面积占全心重的百分比，结果见表3。
表3各组制剂对大鼠急性心肌缺血保护作用组别 心脏重(g)心脏梗死重(g)心脏梗死百分率(％)生理盐水 0.985 0.189 19.19生脉注射液 0.843 0.098 11.63**本发明生脉水针剂 0.865 0.064 7.40**[*]本发明输液剂 0.878 0.066 7.50**[*]本发明水针剂 0.891 0.066 7.40**[*]**P＜0.01；[*]P＜0.05，处理组与阳性对照组比较。
结论通过药理实验表明，本发明生脉注射制剂具有更好的药理作用。
三.制备实施例实施例1(1)本发明原料药材配比重量份为人参400克，麦冬1400克，五味子700克；(2)人参用75％提取三次，第一、第二次分别为3小时，第三次2小时，合并提取液，减压浓缩回收乙醇至尽，加水至与药材比为1∶1(V/W)，静置，分离除去上层油，过滤，滤液浓缩到50℃相对密度1.05-1.10，70℃下真空干燥，得人参有效部位16克；麦冬、五味子分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次分别为45分钟、30分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(50℃热测)，加乙醇至含醇量为75％，放置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(50℃热测)，再加乙醇至含醇量为85％，放置，滤过，加40％氢氧化钠溶液调节pH值分别为7、9左右，放置，滤过，麦冬滤液加稀盐酸调PH至7左右，分别减压回收乙醇至膏状，相对密度分别为1.15-1.20、1.25-1.35(50℃热测)，70℃下真空干燥，分别得麦冬、五味子有效部位分别为420克、12克；(3)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成水针制剂1000支；(4)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，加入葡萄糖，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成输液制剂1000瓶；(5)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料赋形剂甘露醇152克，干燥。制成粉针制剂1000瓶；实施例2(1)本发明原料药材配比重量份为人参600克，麦冬1600克，五味子800克；
(2)人参用95％提取三次，第一、第二次分别为3小时，第三次2小时，合并提取液，减压浓缩回收乙醇至尽，加水至与药材比为1∶1(V/W)，静置，分离除去上层油，过滤，滤液浓缩到50℃相对密度1.05-1.10，70℃下真空干燥，得人参有效部位24克；麦冬、五味子分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次分别为45分钟、30分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(50℃热测)，加乙醇至含醇量为75％，放置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(50℃热测)，再加乙醇至含醇量为85％，放置，滤过，加40％氢氧化钠溶液调节pH值分别为7、9左右，放置，滤过，麦冬滤液加稀盐酸调PH至7左右，分别减压回收乙醇至膏状，相对密度分别为1.15-1.20、1.25-1.35(50℃热测)，70℃下真空干燥，分别得麦冬、五味子有效部位分别为480克、15克；(3)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成水针制剂1000支；(4)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，加入葡萄糖，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成输液制剂1000瓶；(5)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料赋形剂蔗糖81克，干燥。制成粉针制剂1000瓶；实施例3(1)本发明原料药材配比重量份为人参500克，麦冬1500克，五味子750克；(2)人参用85％提取三次，第一、二次分别为3小时，第三次2小时，合并提取液，减压浓缩回收乙醇至尽，加水至与药材比为1∶1(V/W)，静置，分离除去上层油，过滤，滤液浓缩到50℃相对密度1.15-1.20，70℃下真空干燥，得人参有效部位20克；麦冬、五味子分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次分别为45分钟、30分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(50℃热测)，加乙醇至含醇量为75％，放置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(50℃热测)，再加乙醇至含醇量为85％，放置，滤过，加40％氢氧化钠溶液调节pH值分别为7、9左右，放置，滤过，麦冬滤液加稀盐酸调PH至7左右，分别减压回收乙醇至膏状，相对密度分别为1.15-1.20、1.25-1.35(50℃热测)，70℃下真空干燥，分别得麦冬、五味子有效部位分别为456克、13克；(3)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成水针制剂1000支；(4)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，加入葡萄糖，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成输液制剂1000瓶；(5)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料赋形剂乳糖111克，干燥。制成粉针制剂1000瓶；实施例4(1)本发明原料药材配比重量份为人参450克，麦冬1450克，五味子730克；(2)人参用80％提取三次，第一、二次分别为3小时，第三次2小时，合并提取液，减压浓缩回收乙醇至尽，加水至与药材比为1∶1(V/W)，静置，分离除去上层油，过滤，滤液浓缩到50℃相对密度1.15-1.20，70℃下真空干燥，得人参有效部位18克；麦冬、五味子分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次分别为45分钟、30分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(50℃热测)，加乙醇至含醇量为75％，放置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(50℃热测)，再加乙醇至含醇量为85％，放置，滤过，加40％氢氧化钠溶液调节pH值分别为7、9左右，放置，滤过，麦冬滤液加稀盐酸调PH至7左右，分别减压回收乙醇至膏状，相对密度分别为1.15-1.20、1.25-1.35(50℃热测)，70℃下真空干燥，分别得麦冬、五味子有效部位分别为435克、13.8克；(3)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成水针制剂1000支；(4)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，加入葡萄糖，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成输液制剂1000瓶；(5)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料赋形剂甘露醇和蔗糖133.2克，干燥。制成粉针制剂1000瓶；实施例5(1)本发明原料药材配比重量份为人参550克，麦冬1550克，五味子780克；(2)人参用80％提取三次，第一、二次分别为3小时，第三次2小时，合并提取液，减压浓缩回收乙醇至尽，加水至与药材比为1∶1(V/W)，静置，分离除去上层油，过滤，滤液浓缩到50℃相对密度1.15-1.20，70℃下真空干燥，得人参有效部位22克；麦冬、五味子分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次分别为45分钟、30分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(50℃热测)，加乙醇至含醇量为75％，放置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(50℃热测)，再加乙醇至含醇量为85％，放置，滤过，加40％氢氧化钠溶液调节pH值分别为7、9左右，放置，滤过，麦冬滤液加稀盐酸调PH至7左右，分别减压回收乙醇至膏状，相对密度分别为1.15-1.20、1.25-1.35(50℃热测)，70℃下真空干燥，分别得麦冬、五味子有效部位分别为465克、14.1克；(3)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成水针制剂1000支；
(4)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，加入葡萄糖，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成输液制剂1000瓶；(5)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料赋形剂甘露醇和乳糖、蔗糖共98.9克，干燥。制成粉针制剂1000瓶；
权利要求
1.一种生脉注射制剂，其特征在于它是由中药人参、麦冬、五味子得到的有效部位与药用辅料组成，其制剂组成为水针剂组成人参有效部位16-24重量份，麦冬有效部位420-480重量份，五味子有效部位12-15重量份，输液剂组成为人参有效部位16-24重量份，麦冬有效部位420-480重量份，五味子有效部位12-15重量份，粉针剂组成为人参有效部位16-24重量份，麦冬有效部位420-480重量份，五味子有效部位12-15重量份，药用辅料为81-152重量份；其特征还在于本发明各组制剂控制5-羟甲基糠醛的含量小于5mg/ml。
2.一种生脉注射制剂的制备方法，其特征包括以下步骤(1)本发明原料药材配比重量份为人参4-6，麦冬14-16，五味子7-8；(2)人参用75％-95％提取三次，第一、二次分别为3小时，第三次2小时，合并提取液，减压浓缩回收乙醇至尽，加水至与药材比为1∶1(V/W)，静置，分离除去上层油，过滤，滤液浓缩到50℃相对密度1.15-1.20，70℃下真空干燥，得人参有效部位；麦冬、五味子分别加水煎煮三次，第一次1小时，第二、三次分别为45分钟、30分钟，合并提取液，减压浓缩至相对密度为1.05-1.10(50℃热测)，加乙醇至含醇量为75％，放置，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20(50℃热测)，再加乙醇至含醇量为85％，放置，滤过，加40％氢氧化钠溶液调节pH值分别为7、9左右，放置，滤过，麦冬滤液加稀盐酸调PH至左右，分别减压回收乙醇至膏状，相对密度分别为1.15-1.20、1.25-1.35(50℃热测)，70℃下真空干燥，分别得麦冬、五味子有效部位；(3)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成水针制剂；(4)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水，加入葡萄糖，溶解完全，用葡甲胺调PH值，过滤，灭菌，检验，制成输液制剂；(5)取人参、麦冬有效部位与五味子有效部位混合，加入注射用水溶解完全，加入药用辅料赋形剂，干燥。制成粉针制剂；
3.根据权利要求2所述的粉针剂的赋形剂为甘露醇、蔗糖、乳糖中的一种或几种混合物。
全文摘要
本发明公开了一种生脉注射制剂及其制备方法，其特征在于它是由中药人参、麦冬、五味子中得到的有效部位与药用辅料混合，制备成注射制剂，其中人参提取采用高浓度乙醇提取的工艺，提高了人参皂苷的提取率；其特征还在于本发明采用麦冬、五味子分别提取的工艺，控制了本发明的各组制剂中的5－羟甲基糠醛的含量；药理实验表明，本发明的生脉注射制剂具有安全性高、药理作用更好的特点。
文档编号A61P9/10GK1628793SQ20041005733
公开日2005年6月22日 申请日期2004年8月27日 优先权日2004年8月27日
发明者张正生 申请人:张正生