专利名称：一种柴胡皂苷的制备方法
技术领域：
本发明属于中药提取物的制备方法，具体地说，涉及柴胡皂苷的制备方法。
背景技术：
柴胡为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根，有“北柴胡”和“南柴胡”之分，具有解表、退热、舒肝解郁功能，主治感冒发热、寒热往来、胸胁腹痛等症。柴胡皂苷是柴胡的主要有效成分之一，具有皮质酮激素样作用，抑制Na+、K+-ATP酶的活性，具有免疫调节作用，抗血小板活性因子的功能，有明显的抗炎、解热、镇痛作用，药理实验研究表明柴胡皂苷可使热刺法所致发热家兔1.5小时后体温恢复正常或更低，随后又上升至正常。目前，柴胡皂苷的提取多采用水提醇沉法，提取效率不高，提取分离时易发生化学变化，生理活性大大降低，因此，研究更加有效而稳定的柴胡皂苷的提取分离方法具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工艺更加合理、质量可控的柴胡皂苷制备方法。
本发明通过下述技术方案予以实施。
本发明的柴胡皂苷的制备方法，按顺序包括如下步骤(1)取柴胡或柴胡提取挥发油后的残渣，加入溶剂，将溶液调至碱性后再进行提取，得提取液；(2)提取液上大孔型碱性阴离子交换柱，先用碱水和纯水冲洗，冲洗液弃去，再用含水乙醇洗脱，洗脱液浓缩，即得柴胡皂苷。
步骤(1)所述溶剂为水或者含水乙醇；所述溶液调至碱性为调pH值9～14，可用NaOH或者KOH或者Na2CO3或者NaHCO3调节pH值。
步骤(1)所述提取液可进一步除杂，水提取液可用醇沉方法除杂，醇提取液可用水沉方法除杂。
步骤(2)所述大孔型碱性阴离子交换柱优选大孔型弱碱性阴离子D392、D380、D382、D371交换柱，或者大孔型强碱性阴离子D201交换柱；碱水可为1～3％NaOH或者KOH或者Na2CO3；所述含水乙醇为40～95％乙醇。
用本发明方法制备的柴胡皂苷的总皂苷含量为60％～98％，柴胡总皂苷含量测定参照文献(天津药学，2001年10月，13(5)60)。所制备的柴胡皂苷可单独或者与柴胡挥发油合用，或者其他活性成分合用，与任何一种或一种以上药剂学上辅料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、聚乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸、羟丙基-β-环糊精等混合制成的各种剂型，例如，可制成注射剂、片剂、缓释片、滴丸、颗粒剂、粉针剂、胶囊剂、微粒剂。优选剂型为粉针剂、滴丸剂、胶囊剂。
与现有技术相比，本发明的柴胡皂苷提取方法的提取效率高，提取分离时柴胡皂苷不易发生降解，柴胡皂苷含量高，可保持更高的生理活性。
具体实施例方式
参考下列实施例将更易于理解本发明，给出实施例是为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
实施例一取柴胡药材，粉碎，加水煮沸提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的6倍水量和0.7％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍水量和0.3％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍水量；侧逆流循环提取，沸后分别保持1.5、1、1小时；药液合并冷至室温，过滤，滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D392交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得柴胡总皂苷(总皂苷含量68.2％)。
实施例二取柴胡提取挥发油后的残渣，粉碎，加水超声提取四次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍水量和0.9％药材量的NaHCO3，第二次为药材量的4倍水量和0.5％药材量的NaHCO3，第三次和第四次为药材量的3倍水量；药液合并冷至室温，过滤，药液滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D380交换柱(南开大学化工厂)，用1.5倍树脂床体积的2.5％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再4倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用8倍树脂床体积的65％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得柴胡总皂苷(总皂苷含量72.3％)。
实施例三取柴胡提取挥发油后的残渣，加50％乙醇回流提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍50％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍50％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍50％乙醇量；侧逆流循环回流提取，回流开始后分别保持1.5、1、1小时；药液过滤并合并滤液，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，过滤，滤液上已经处理好的大孔型强碱性阴离子D201交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得柴胡总皂苷(总皂苷含量71.4％)。
实施例四取柴胡药材，粉碎，加水煮沸提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的6倍水量和0.7％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍水量和0.3％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍水量；侧逆流循环提取，沸后分别保持1.5、1、1小时；药液合并冷至室温，浓缩药液至药材量2倍体积，加乙醇使含醇量达70％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水溶解，滤过；滤液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D382交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的70％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得柴胡总皂苷(总皂苷含量85.4％)。
实施例五取柴胡提取挥发油后的残渣，加水超声提取四次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍水量和0.9％药材量的NaHCO3，第二次为药材量的4倍水量和0.5％药材量的NaHCO3，第三次和第四次为药材量的3倍水量；药液合并冷至室温，浓缩药液至药材量2倍体积，加乙醇使含醇量达80％，静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇至无醇味，加水溶解，滤过；滤液上已经处理好的大孔型强碱性阴离子D201交换柱(南开大学化工厂)，用1.5倍树脂床体积的2.5％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再4倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用8倍树脂床体积的85％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得柴胡总皂苷(总皂苷含量87.2％)。
实施例六取柴胡药材，粉碎，加70％乙醇超声提取三次并控制酸碱度，第一次为药材量的5倍70％乙醇量和1％药材量的Na2CO3，第二次为药材量的4倍70％乙醇量和0.5％药材量的Na2CO3，第三次为药材量的4倍70％乙醇量；药液合并冷至室温，过滤，滤液70℃下减压浓缩至无醇味后，浓缩液加水稀释至药材药液比为1∶1.5，离心，上清液上已经处理好的大孔型弱碱性阴离子D371交换柱(南开大学化工厂)，用2倍树脂床体积的2％NaOH溶液冲洗，冲洗液弃去；再3倍纯水冲洗，水冲洗液弃去；用7倍树脂床体积的75％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至稠膏(50℃下相对密度为1.28～1.33)，用动态带式干燥设备干燥，得柴胡总皂苷(总皂苷含量86.6％)。
实施例七取柴胡挥发油，缓慢加入羟丙基-β-环糊精饱和水溶液中，在50～60℃保温条件下充分搅拌均匀，冷藏过夜，滤过，滤液60℃以下干燥，得柴胡挥发油包合物，备用；取柴胡挥发油包合物25g，实施例四的柴胡皂苷185g，混合均匀，加入卵磷脂和甘露醇各195g，适量注射用水，加热使溶解后，调pH值至6.5～7.0，加注射用水至总体积，搅拌10分钟，冷至室温后，无菌滤过；滤液灌装于西林瓶中，冷冻干燥，压塞、加盖，即得粉针剂1000瓶。
实施例八取实施例七的柴胡挥发油包合物30g、实施例一的柴胡皂苷170g，与80g微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，600℃干燥30～45分钟，整粒，加入10g滑石粉，混匀，充于胶囊中，即得。
实施例九取实施例七的柴胡挥发油包合物40g、实施例三的柴胡皂苷160g，与700g聚乙二醇-6000混合均匀，熔融，滴入低温液体石蜡中，选丸，除液体石蜡，即得。
权利要求
1.一种柴胡皂苷的制备方法，按顺序包括如下步骤(1)取柴胡或柴胡提取挥发油后的残渣，加入溶剂，将溶液调至碱性后再进行提取，得提取液；(2)提取液上大孔型碱性阴离子交换柱，先用碱水和纯水冲洗，冲洗液弃去，再用含水乙醇洗脱，洗脱液浓缩，即得柴胡皂苷。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的溶剂为水或者含水乙醇。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的将溶液调至碱性为调pH值9～14。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，用NaOH、KOH、Na2CO3或者NaHCO3调节溶液pH值。
5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)得到提取液后，进一步除杂，水提取液用醇沉方法除杂，或者醇提取液用水沉方法除杂。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的大孔型碱性阴离子交换柱为大孔型弱碱性阴离子D392交换柱、大孔型弱碱性阴离子D380交换柱、大孔型弱碱性阴离子D382交换柱、大孔型弱碱性阴离子D371交换柱或者大孔型强碱性阴离子D201交换柱。
7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中的碱水为1～3％NaOH、1～3％KOH或者1～3％Na2CO3。
8.根据权利要求1或2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)和步骤(2)中的含水乙醇为40～95％乙醇；
9.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，它按顺序包括如下步骤(1)取柴胡或柴胡提取挥发油后的残渣，加入水或40～95％乙醇，将溶液调至碱性为调pH值9～14，加热或超声提取2～4次，合并提取液，滤过；滤液进一步除杂，水提取液用醇沉方法除杂，醇提取液则用水沉方法除杂，得到除杂后的澄清液；(2)澄清液上大大孔型弱碱性阴离子D392交换柱、大孔型弱碱性阴离子D380交换柱、大孔型弱碱性阴离子D382交换柱、大孔型弱碱性阴离子D371交换柱或者大孔型强碱性阴离子D201交换柱，先用1～3％NaOH、1～3％KOH或者1～3％Na2CO3冲洗，再用纯水冲洗，冲洗液弃去，然后用40～95％乙醇洗脱，洗脱液浓缩，干燥，即得柴胡皂苷。
10.一种柴胡有效部位粉针剂的制备方法，包括如下步骤取柴胡挥发油与羟丙基-β-环糊精包合物和权利要求1或9所述方法得到的柴胡皂苷，混合均匀，加入卵磷脂和甘露醇以及适量注射用水，加热使溶解后，调pH值至6.5～7.0，加注射用水至规定容积，搅拌，冷置，滤过，滤液冷冻干燥，即得。
全文摘要
本发明公开了一种中药提取物的制备方法，具体地说，是柴胡皂苷的制备方法。该方法按顺序包括如下步骤(1)取柴胡或柴胡提取挥发油后的残渣，加入溶剂，将溶液调至碱性后再进行提取，得提取液；(2)提取液上大孔型碱性阴离子交换柱，先用碱水和纯水冲洗，冲洗液弃去，再用含水乙醇洗脱，洗脱液浓缩，即得柴胡皂苷。本发明的柴胡皂苷提取方法的提取效率高，提取分离时柴胡皂苷不易发生降解，柴胡皂苷含量高，可保持更高的生理活性。
文档编号A61K125/00GK101084948SQ200610014209
公开日2007年12月12日 申请日期2006年6月8日 优先权日2006年6月8日
发明者杨悦武, 叶正良, 郑永锋, 李旭 申请人:天津天士力之骄药业有限公司