专利名称：将人参多糖和提取物分离的人参提取方法及人参多糖应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种将人参多糖和提取物分离的人参提取方法及人参多糖应用。
背景技术：
人参作为名贵传统滋补中药材，人参大补元气，固脱生津，安神。早在远古时期就已被应用于临床，《(神农本草经》中将人参列为上品，曰“主补五脏，安精神，止惊悸，除邪气，明目，开心益智。”人参中含有多种糖类，包括单糖、低聚糖和多糖。这些多糖由人参淀粉和人参果胶两部分组成，药理活性部分主要是人参果胶。从人参根中提取的人参多糖，80％是人参淀粉，经淀粉酶脱去淀粉后的人参果胶主要有半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖残基。
人参多糖为中药人参的活性成份，为高分子葡聚糖。从药理分析及临床应用情况看，对恶性肿瘤有较好的作用。实验表明，人参多糖能诱生细胞毒因子，对肿瘤细胞有杀伤和抑制作用，其细胞毒因子主要包括肿瘤坏死因子和干扰素-γ。肿瘤坏死因子是由激活的巨噬细胞/单核细胞系统产生的多功能蛋白分子，在机体内起着重要的生理作用。在体内肿瘤坏死因子可以通过3种途径发挥抗肿瘤作用直接杀伤肿瘤细胞；作用于肿瘤血循环，导致肿瘤组织血供减少，从而影响肿瘤的生长；激活机体免疫系统的抗肿瘤作用。同时，肿瘤坏死因子还可介导炎性过程，减少网膜组织间皮细胞溶纤维蛋白活性，进而使网膜表面纤维蛋白增多，减少组织外渗。干扰素是细胞在受到刺激物作用后合成并释放出的蛋白性淋巴因子。其作用为直接抗病毒作用；增强主要组织相容性抗原和肿瘤相关抗原的表达；增强自然杀伤细胞(NK)的细胞毒作用；增强抗体依赖性细胞的细胞毒作用；直接的抗细胞增殖作用和抗血管生成作用。
人参多糖抗癌及提高机体免疫力的临床研究1、人参多糖抗癌功效人参多糖能诱生内源性肿瘤坏死因子(TNF)，对肿瘤细胞有杀伤和抑制作用，对正常小鼠及荷瘤小鼠机体免疫功能有增强和激活作用。
人参多糖对小S180鼠肉瘤有明显的抑制作用；对环磷酰胺化疗有明显的抑瘤增效作用；对环磷酰胺化疗所致的白细胞总数减少，有明显的升白作用；并能明显提S180高肉瘤荷瘤小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能，促进血清溶血素(IgM)生成，具有增强非特异免疫功能和体液免疫功能的作用。
通过对受7.5～8.5Gy X线一次全身照射小鼠预防给药试验，表现人参对受照动物有减轻造血系统损伤、促进造血功能恢复的抗辐射损伤作用。
人参多糖对D-氨基酸半乳糖所致的肝损伤具有明显的保护作用。其作用机制是稳定和加强肝细胞膜保护肝细胞线粒体及维持肝组织cAMP/cGMP比值的相对稳定。
2、人参多糖的免疫调节作用，治疗病毒性流感。
人参多糖能显著增强单核吞噬细胞系的功能。每天按不同剂量给小白鼠灌服GPS 1次，连续给药3次，末次给药后24h进行吞噬功能测定，结果GPS可明显增加巨噬细胞的吞噬指数。GPS能促进抗体和补体的形成，可以显著增加血清补体和血清IgG的含量。GPS对免疫器官的作用，小鼠注射GPS后，脾脏及胸腺重量较对照组显著增加。
人参提取物的活性成分和药理研究人参提取物中主要含有人参皂苷，如人参皂苷Ro、Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rg1，此外，人参提取物中还含精氨酸、天冬氨酸等18种氨基酸。
人参提取物中主要含有人参皂苷，人参皂苷具有抗缺氧、抗疲劳和抗衰老作用，可改善和增强记忆力。人参具有双向调节免疫调节作用，降脂以及具有抗心律失常、抗心肌缺血等作用。人参皂苷可改善和增强记忆功能。动物实验表明，人参皂苷(500、100mg·Kg+，PO×Td)对M-胆碱阻滞剂造成的记忆获得不良有明显的桔抗作用，说明其有拟胆碱样作用，同时，人参皂苷对环已酰亚胺(1gc)所致记忆巩固即长期记忆缺损有明显的改善作用。
试验研究发现，人参皂苷(50、100mg·kg-1，ip×3d)能明显降低阿霉素诱导的大鼠全血和心肌组织中丙二醛(MDA)含量，保护SOD及GSH-PX活性，表明人参皂苷有抗氧化作用；人参皂苷(250mg-1·L)对由黄膘吟氧化酶诱发的大鼠培养心肌细胞氧化损伤具有保护作用。人参皂苷(50、100mg·kg-1，iV)可明显增强麻醉犬心肌血流量，降低冠脉阻力，减少心肌耗氧量及心肌耗氧指数；人参皂苷(50、100mg·kg-1，ig×7d)能明显减少异丙肾上腺素心肌损伤大鼠心肌坏死程度，降低血清CK和乳酸脱氢酶(LDH)活性及游离脂酸(FFA)水平；人参皂苷(25、50mg·kg-1，iv)能明显降低麻醉犬动脉血压、左室压及左室压最大上升速率，亦能明显减轻心肌梗塞犬左室舒张期末压的增加及心脏指数的减少，也使左室压最大下降速率的降低明显减轻。
多糖的传统工艺一直采用是水提醇沉的生产工艺，成本高，提取的多糖颜色深，其有效成分半乳糖醛酸的含量较低，并且多糖以外的提取物被弃掉，造成很大的浪费。
发明内容
本发明需要解决的技术问题就在于克服现有技术的缺陷，提供一种将人参多糖和人参提取物分离的人参提取方法，它采用先醇提，后水提，再进行醇沉，将醇提、水提和醇沉工艺进行了有机的结合，生产出的多糖颜色浅褐色，其有效成分半乳糖醛酸含量在30％以上，比传统方法要高出10％以上。同时将醇提液回收乙醇，浓缩、干燥得到人参提取物，使人参提取多糖的副产物得到了充分的开发利用。
为解决上述问题，本发明采用如下技术方案本发明一种将人参多糖和人参提取物分离的提取方法，该方法包括下列步骤1)、将人参用50％-85％的乙醇进行醇提，得滤液和料渣；2)、滤液进行真空干燥，得人参提取物；3)、对料渣用水提取，对水提取物进行喷雾干燥，得人参多糖。
本发明所述醇提方法为在人参原料药中加入原料药重量8倍量的重量浓度为50％-85％的乙醇，70～80℃提取3-3.5小时，离心过滤，得滤液和料渣。
本发明所述滤液真空干燥方法为将滤液浓缩至80℃时相对密度1.12，进行真空干燥，得人参提取物，其中人参皂苷含量在30％以上。
本发明所述料渣用水提取和喷雾干燥方法为加入料渣重量15倍量的水，95～100℃提取3-4小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.28-1.30，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.08-1.12，喷雾干燥，得人参多糖，其中用80％-85％的乙醇提取的半乳糖醛酸含量在30％以上，用50％-80％的乙醇提取的多糖的半乳糖醛酸含量在12％-30％之间。
本发明制备的人参多糖能够治疗病毒性流感、提高免疫力和具有抗癌作用。
本发明采用先醇提，后水提，再进行醇沉，将醇提、水提和醇沉工艺进行了有机的结合，生产出的多糖颜色浅褐色，有效成分半乳糖醛酸含量根据需要生产不同含量的产品。同时将醇提液回收乙醇，浓缩、干燥得到人参提取物，使人参提取多糖的副产物得到了充分的开发利用。
本发明主要利用人参多糖和人参提取物的理化性质，采用醇提和水提相结合的生产工艺，将人参多糖和人参提取物进行有效的分离。
本发明提取方法简单，容易操作，分离效果好，出品率高，能够成批量大规模生产。
具体实施例方式
实施例11、在人参原料药中加入原料药重量8倍量的重量浓度为80％的乙醇，70℃提取3小时，离心过滤，得滤液和料渣。
2、将滤液浓缩至80℃时相对密度1.12，进行真空干燥，得人参提取物，其中人参皂苷含量在30％以上。
3、加入料渣重量15倍量的水，95℃提取3小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.28，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.08，喷雾干燥，得人参多糖，其中半乳糖醛酸含量在30％以上。
实施例21、在人参原料药中加入原料药重量8倍量的重量浓度为85％的乙醇，80℃提取3.5小时，离心过滤，得滤液和料渣。
2、将滤液浓缩至80℃时相对密度1.12，进行真空干燥，得人参提取物，其中人参皂苷含量在30％以上。
3、加入料渣重量15倍量的水，100℃提取3-4小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.30，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.12，喷雾干燥，得人参多糖，其中半乳糖醛酸含量在30％以上。
实施例31、在人参原料药中加入原料药重量8倍量的重量浓度为83％的乙醇，75℃提取3.3小时，离心过滤，得滤液和料渣。
2、将滤液浓缩至80℃时相对密度1.12，进行真空干燥，得人参提取物，其中人参皂苷含量在30％以上。
3、加入料渣重量15倍量的水，98℃提取4小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.29，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.10，喷雾干燥，得人参多糖，其中半乳糖醛酸含量在30％以上。
实施例41、在人参原料药中加入原料药重量8倍量的重量浓度为50％的乙醇，75℃提取3.3小时，离心过滤，得滤液和料渣。
2、将滤液浓缩至80℃时相对密度1.12，进行真空干燥，得人参提取物，其中人参皂苷含量在30％以上。
3、加入料渣重量15倍量的水，98℃提取4小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.29，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.10，喷雾干燥，得人参多糖，其中半乳糖醛酸含量为12％-30％之间。
实施例51、在人参原料药中加入原料药重量8倍量的重量浓度为60％的乙醇，75℃提取3.3小时，离心过滤，得滤液和料渣。
2、将滤液浓缩至80℃时相对密度1.12，进行真空干燥，得人参提取物，其中人参皂苷含量在30％以上。
3、加入料渣重量15倍量的水，98℃提取4小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.29，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.10，喷雾干燥，得人参多糖，其中半乳糖醛酸含量为12％-30％之间。
实施例61、在人参原料药中加入原料药重量8倍量的重量浓度为70％的乙醇，75℃提取3.3小时，离心过滤，得滤液和料渣。
2、将滤液浓缩至80℃时相对密度1.12，进行真空干燥，得人参提取物，其中人参皂苷含量在30％以上。
3、加入料渣重量15倍量的水，98℃提取4小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.29，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.10，喷雾干燥，得人参多糖，其中半乳糖醛酸含量在12％-30％之间。
本发明实施例1-6制备的人参多糖能够治疗病毒性流感、提高免疫力和具有抗癌作用。
实施例7 本发明提取的人参多糖的检验方法 紫外分光光度法1、标准溶液的制备精密称取半乳糖醛酸对照品100mg，置100ml容量瓶中加水溶解，并稀释至刻度，摇匀，再精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
2、供试溶液的制备精密称取本发明实施例1-6所制备的成品50mg，置100ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀即得。
3、测定方法精密量取供试品溶液1ml，蒸馏水1ml，分别置于10ml容量瓶中，分别加浓硫酸6ml，置水浴中加热20分钟，冷却，再分别加0.1％咔唑无水乙醇0.2ml，置沸水浴中10分钟，在水浴中冷却，加水稀释至刻度，摇匀。在530nm波长处测定供试品溶液的吸收度。计算即得。
本发明实施例1、2、3所制备的成品中人参多糖含量(以D-半乳糖醛酸计)为32.10％、32.22％、31.25％。例4、5、6所制备的成品中人参多糖含量(以D-半乳糖醛酸计)为13.5％、20.62％、27.36％。
本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下得出的其他任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种将人参多糖和提取物分离的人参提取方法，其特征在于该方法包括下列步骤1)、将人参用50％-85％的乙醇进行醇提，得滤液和料渣；2)、滤液进行真空干燥，得人参提取物；3)、对料渣用水提取，对水提取物进行喷雾干燥，得人参多糖。
2.如权利要求1所述的将人参多糖和提取物分离的人参提取方法，其特征在于所述醇提方法为在人参原料药中加入原料药重量8倍量的重量浓度为50％-85％的乙醇，70～80℃提取3-3.5小时，离心过滤，得滤液和料渣。
3.如权利要求2所述的将人参多糖和提取物分离的人参提取方法，其特征在于所述乙醇的重量浓度为50％-80％。
4.如权利要求2所述的将人参多糖和提取物分离的人参提取方法，其特征在于所述乙醇的重量浓度为80％-85％。
5.如权利要求3所述的将人参多糖和提取物分离的人参提取方法，其特征在于所述滤液真空干燥方法为将滤液浓缩至80℃时相对密度1.12，进行真空干燥，得人参提取物，其中人参皂苷含量在30％以上。
6.如权利要求3所述的将人参多糖和提取物分离的人参提取方法，其特征在于所述料渣用水提取和喷雾干燥方法为加入料渣重量15倍量的水，95～100℃提取3-4小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.28-1.30，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.08-1.12，喷雾干燥，得人参多糖，其中半乳糖醛酸含量为12％-30％。
7.如权利要求4所述的将人参多糖和提取物分离的人参提取方法，其特征在于所述料渣用水提取和喷雾干燥方法为加入料渣重量15倍量的水，95～100℃提取3-4小时，离心过滤后将滤液浓缩至80℃下相对密度1.28-1.30，用重量浓度为95％的乙醇调药液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇；沉淀物加水溶解，再用重量浓度为95％的乙醇调水溶液酒精度达到90％，醇沉12小时，提取上清液并回收乙醇，合并两次提取的上清液，再进行硅藻土过滤，并溶解稀释至相对密度为1.08-1.12，喷雾干燥，得人参多糖，其中半乳糖醛酸含量为30％以上。
8.由权利要求6或7制备的人参多糖的应用，其特征在于所述人参多糖能够治疗病毒性流感、提高免疫力和具有抗癌作用。
全文摘要
本发明公开了一种将人参多糖和人参提取物分离的人参提取方法，该方法包括下列步骤1)将人参用50％－85％的乙醇进行醇提，得滤液和料渣；2)滤液进行真空干燥，得人参提取物；3)对料渣用水提取，对水提取物进行喷雾干燥，得人参多糖。它采用先醇提，后水提，再进行醇沉，将醇提、水提和醇沉工艺进行了有机的结合，生产出的多糖颜色浅褐色，其有效成分半乳糖醛酸含量在13％－30％以上，比传统方法要高出10％以上。同时将醇提液回收乙醇，浓缩、干燥得到人参提取物，使人参提取多糖的副产物得到了充分的开发利用。
文档编号A61P31/00GK1821275SQ20061007271
公开日2006年8月23日 申请日期2006年4月7日 优先权日2006年4月7日
发明者刘莉, 张立建, 张福营 申请人:吉林省宏久生物科技股份有限公司