应激活化蛋白激酶系统的调节方法

专利名称：：应激活化蛋白激酶系统的调节方法应激活化蛋白激酶系统的调节方法发明领域本发明涉及可用于治疗多种纤维化疾病的化合物和方法，包括那些与激酶p38活性增强相关的疾病。
背景技术：
：已经认识到大量的慢性和急性疾病与炎症反应的微扰有关。一般认为大量细胞因子参与该反应，包括IL-1、IL-6、IL-8和TNFa。看起来这些细胞因子调节炎症的活性可能与某种酶对细胞信号转导途径的活化有关，该酶为MAP激酶家族成员，一般称作p38，还称作SAPK、CSBP和RK。已经对几种p38抑制剂，例如NPC31169、SB239063、SB203580、FR-167653和吡非尼酮，进行了体外和/或体内测试，发现其有效调节炎症反应。仍需要安全有效的药物来治疗各种炎症，例如炎症性肺纤维化。发明概述在一个实施方案中，提供一种调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的方法，该方法包括使化合物与p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)接触，其中所述化合物表现出的抑制p38y的ICso在约10pM至约500[jM的范围内；其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的IC50至少是抑制p38yMAPK的IC5o的2倍、5倍或10倍。在另一个实施方案中，提供一种调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的方法，该方法包括使化合物与p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)接触，其中所述化合物表现出的和P制p38yMAPK的IQo值在约10pM至约500pM的范围内；其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso值在约10pM至约1500pM的范围内。在另一个实施方案中，提供治疗或预防受试者的疾病状态的方法，包括鉴别处于纤维化疾病的风险之中或患有纤维化疾病的受试者；将化合物以治疗或预防纤维化疾病的有效量给予受试者；其中所述化合物表现出的4卬制p38y的ICso在约10pM至约500(xM的范围内；其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的IC50至少是抑制p38yMAPK的ICso的2倍、5倍或10倍。在另一个实施方案中，提供鉴定药物活性化合物的方法，包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38aMAPK的抑制；测定该文库中的多个化合物对p38yMAPK的抑制；从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约500(iM的范围内；以及其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso至少是抑制p38yMAPK的IC5o的2倍、5倍或10倍。在另一个实施方案中，提供鉴定药物活性化合物的方法，包括提供化合物文库；20测定该文库中的多个化合物对p38yMAPK的抑制；从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC5o在约10pM至约500jaM的范围内；其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso至少是抑制p38yMAPK的IC5q的2倍、5倍或10倍。在另一个实施方案中，提供鉴定药物活性化合物的方法，包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38aMAPK的抑制；从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的1(:50在约10pM至约1500(iM的范围内；其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的IC50至少是抑制p38yMAPK的IC5o的2倍、5倍或10倍。在一个实施方案中，提供调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的方法，该方法包括使化合物与p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)接触，其中所述化合物表现出的抑制p38Y的IC5o在约100nM至约1000jiM的范围内；其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的1(:50是抑制p38yMAPK的IC5o的至少2倍。在另一个实施方案中，提供治疗或预防受试者的疾病状态的方法，包括鉴别处于纤维化疾病的风险之中或患有纤维化疾病的受试者；将化合物以治疗或预防纤维化疾病的有效量给予受试者；其中所述化合物表现出的抑制p38y的IC5o在约100pM至约1000^M的范围内；以及其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的IQ()是抑制p38yMAPK的ICso的至少10倍。在另一个实施方案中，提供鉴定药物活性化合物的方法，包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38otMAPK的抑制；测定该文库中的多个化合物对p38yMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约5mM的范国内；以及其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso是抑制p38yMAPK的IC5Q的至少10倍。在另一个实施方案中，提供鉴定药物活性化合物的方法，包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38yMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38丫MAPK的IC50在约10pM至约5(iM的范围内；以及其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso是抑制p38yMAPK的IC5Q的至少10倍。在另一个实施方案中，提供鉴定药物活性化合物的方法，包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38aMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约10pM至约5[iM的范围内；以及其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的1。50是抑制p38yMAPK的IC5Q的至少10倍。在以上的某些实施方案中，所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的1(:50在约10pM至约5nM的范围内。在其它实施方案中，所述化合物表现出的抑制p38YMAPK的IC5o在约100nM至约500pM的范围内。在以上的某些实施方案中，所述化合物不选自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>在另一个实施方案中，提供具有结构式I的化合物:CI式l;其中R选自H、卤素、氰基、硝基、羟基、任选取代的C,.6烷基、任选取代的(:3.7环烷基、任选取代的CMO烷基环烷基、任选取代的<:2.6烯基、任选取代的Cw烷氧基、任选取代的Cs幻o芳基、任选取代的吡p定基、任选取代的嘧咬基、任选取代的噻吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的嗯唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基(optionallysubstitutedsulphonamido)、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基(optionallysubstitutedamido)、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基甲酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡嗪基、任选取代的p达唤基、任选取代的吡。各基、任选取代的噻吩基、任选取代的噻唑基、任选取代的嗨唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异嗯唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的全啉基、任选取代的异会啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的笨并呋喃基、任选取代的巧|咪基和任选取代的苯并咪唑基；或所述化合物的药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或前体药物。在一个实施方案中，式I化合物表现出的抑制P38y的IC:在约10pM至约5nM的范围内。另一个实施方案提供具有结构式II的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage26</formula>式n其中114选自H、卣素、氰基、硝基、羟基、任选取代的C,.6烷基、任选取代的(33.7环烷基、任选取代的CMo烷基环烷基、任选取代的(:2.6烯基、任选取代的Q-6烷氧基、任选取代的C6幻o芳基、任选取代的吡咬基、任选取代的嘧c先基、任选取代的噻喻基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的嗯唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基曱酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡溱基、任选取代的p达溱基、任选取代的吡咯基、任选取代的瘗吩基、任选取代的噻唑基、任选取代的噁唑基、《壬选取代的咪唑基、任选取代的异噁唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的查啉基、任选取代的异全啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的巧l咮基和任选取代的苯并咪唑基；或所述化合物的药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或前体药物。在一个实施方案中，式II化合物表现出的抑制p38y的ICso在约10pM至约5(iM的范围内。在另一个实施方案中，提供具有结构式III的化合物其中112选自H、卤素、氰基、硝基、羟基、任选取代的C"6烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的C^o烷基环烷基、任选取代的(:2.6烯基、任选取代的Q-6烷氧基、任选取代的C6或,o芳基、任选取代的吡。定基、任选取代的嗜咬基、任选取代的噻吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的嗯唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基曱酰基、任选取代的疏醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡嗪基、任选取代的p达"秦基、任选取代的吡卩各基、任选取代的瘗吩基、任选取代的蓬唑基、任选取代的嗨唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异噁唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的会啉基、任选取代的异全啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并瘗唑基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的。引咮基和任选取代的苯并咪唑基；和113选自H、卣素、氰基、硝基、羟基、任选取代的C,.6烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的Q.K)烷基环烷基、任选取代的(:2-6烯基、任选取代的Cw烷氧基、任选取代的C6幻。芳基、任式m选取代的吡咬基、任选取代的嘧咬基、任选取代的P塞吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基甲酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡嗪基、任选取代的哒噪基、任选取代的吡，各基、任选取代的噻吩基、任选取代的噻唑基、任选取代的嚼唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异嗯唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的会啉基、任选取代的异喹啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的吲哚基和任选取代的苯并咪唑基；或所述化合物的药学上可接受的盐、酯、溶剂化物或前体药物。在一个实施方案中，式III化合物表现出的抑制p38Y的IC5o在约10pM至约5jiM的范围内。在一个实施方案中，式III化合物不是l-(5-叔丁基-2-对曱苯基-211-吡唑-3-基)-3-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)萘-l-基]脲(BIRB796)。另一个实施方案提供具有结构式IV的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>其中R5和R6各自独立地选自H、闺素、^、硝基、羟基、任选取代的Q—6烷基、任选取代的C3-7环烷基、任选取代的CMo烷基环烷基、任选取代的C2-6烯基、任选取代的C,-6烷氧基、任选取代的C6或K)芳基、任选取代的吡吱基、任选取代的嘧梵基、任选取代的噻吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的石危脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基甲酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的石风、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡溱基、任选取代的哒嗪基、任选取代的吡咯基、任选取代的噻吩基、任选取代的噻唑基、任选取代的嗨唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异嗯唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的喹啉基、任选取代的异喹啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并噻峻基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的吲哚基和任选取代的苯并咪唑基；或所述化合物的药学上可接受的盐、酉旨、溶剂化物或前体药物。在一个实施方案中，式IV化合物表现出的抑制p38y的ICso在约10pM至约5iaM的范围内。在一个实施方案中，式IV化合物不是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage29</formula>其中X为N。这些和其它实施方案在下文有更详细的描述。附图简述图1图示了在未诱导的细胞中随给予细胞的不同慢病毒颗粒(包括多种编码shRNA的慢病毒颗粒)变化的胶原水平。图2图示了在用TGF-P诱导的细胞中随给予细胞的不同慢病毒颗粒(包括多种编码shRNA的慢病毒颗粒)变化的胶原水平。优选实施方案的详述现已发现，通过4吏用针对p38ot也具有抑制活性的有效p38Y激酶抑制剂化合物，可以对治疗与激酶p38活性增强有关的各种疾病实现高疗效。此外，业已发现，通过修饰p38a抑制剂，使得该修饰产生针对p38y的抑制活性，可实现降低激酶p38y和激酶p38a这二者的活性，同时不将激酶p38a的活性减低至这样的程度在给予患有与激酶p38活性增强有关的疾病的受试者时观察到不希望有的副作用。因此，在一个实施方案中，提供通过使化合物与p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)接触来调节应激活化激酶(SAPK)系统的方法。优选的化合物表现出的4十对p38yMAPK的ICso在约10pM至约5的范围内，优选抑制p38yMAPK的IC5o在约50pM至约1|aM的范围内，更优选抑制p38yMAPK的IC50在约50pM至约200nM的范围内。优选的化合物表现出的针对p38a的ICso值还不低于其针对p38y的IC5o值2倍。"促分裂原活化蛋白、激酶(mitogen曙activatedproteinkinase:MAPK)"是进化上保守的丝氨酸/苏氨酸激酶，参与调节许多细胞事件。在哺乳动物细胞内已鉴定出若干MAPK组，包括胞外信号调节激酶(ERK)、p38和SAPK/JNK。一4殳认为MAPK被其特异性MAPK激酶(MAPKK)激活ERK被MEK1和MEK2激活，p38被MKK3和MKK6激活，而SAPK/JNK被SEK1(也称作MKK4)和MKK7(SEK2)激活。这些MAPKK还可以被诸如Raf、MLK、MEKK1、TAK1和ASK1的多种MAPKK激酶(MAPKKK)激活。—般认为MAPK网络包括至少12个克隆的、高度保守的、指向脯氨酸的丝氨酸-苏氨酸激酶，该激酶在被细胞应激(氧化性应激、DNA损伤、热或渗透压^f木克、紫外辐射、局部缺血-再灌注)、外源物质(茴香霉素、亚砷酸钠、脂多糖、LPS)或促炎细胞因子TNF-a和IL-ip激活时，可以进行磷酸化并激活细胞质或细胞核内的其它激酶或核蛋白，例如转录因子(参见Underwood等，2001iespfr/es31:342-345中的图1)。p38MAPK本文所用的"p38MAPK"是应激活化蛋白激酶家族的一员，包括至少4种异构体(oc、(3、y、5)，其中几种祐L认为对炎症反应和组织重塑的关键过程很重要(Lee等，2000/附mM"o//zflrmaco/.47:185-201)。单核细胞和巨噬细胞中的主要激酶p38a和p38P与p38y(骨骼肌)或p38S(睾丸、胰腺、前列腺、小肠，以及唾液腺、垂体和肾上腺)相比似乎更广泛地表达。已鉴定出许多p38MAP激酶底物，包括其它激酶(MAPKAPK2/3、PRAK、MNK1/2、MSK1/RLPK、RSK-B)、转录因子(ATF2/6、肌细胞增强因子2、核转录因子-卩、CHOP/GADD153、Elkl和SAP-1A1)和胞质蛋白(微管去稳蛋白(stathmin))，其中有许多在生理学上都是很重要的。Jiang,Y.等，1996/历o/271:17920-17926中报道，p38P的特征为与p38a密切相关的372个氨基酸的蛋白。p38a和p38(3这二者均被促炎细胞因子和环境应力激活，p38(3优先被MAP激酶激酶6(MKK6)激活，并优先激活转录因子2(ATF2)。Kumar，S.等，1997所oc/7ew所o;/z"WesOww235:533-538和Stein,B.等，1997/祝o/C7zew272:19509-19517中报道了p38卩的第二个异构体p38|32，其含有364个氨基酸，与p38a具有73%同一性。一般认为p38p被促炎细胞因子和环境应力激活，尽管与p38a的更普遍的组织表ii^目比，第二个31报道的p38p异构体p3邓2似乎优先在中枢神经系统(CNS)、心脏和骨骼肌内表达。而且，一般认为活化转录因子-2(ATF-2)作为p38p2的底物比作为p38a的底物更好。Li，Z.等，1996B/oc/zemAop/y^Ccwm228:334-340中报道了p38y的鉴定，Wang，X.等，1997J历o/.C7zew272:23668-23674和Kumar,S.等，19975z'oc/zew放op/^AasComw235:533-538中报道了p385的鉴定。基于其组织表达模式、底物利用、对于直接和间接刺激的响应以及对激酶抑制剂的敏感性，这两个p38异构体(y和5)代表了MAPK家族的独特亚类。一般认为p38a和(3是密切相关的，但是与y和5有差异，Y和5彼此间更密切相关。通常，p38MAP激酶途径被细胞表面受体(例如受体酪氨酸激酶、趋化因子或G蛋白偶联受体)直接或间接激活，而这些细胞表面受体已被与关联受体结合的特定配体(例如细胞因子、趋化因子或脂多糖(LPS))激活。随后，p38MAP激酶被残基苏氨酸180和酪氨酸182上的磷酸化作用激活。在〖敫活后，p38MAP激酶可以使包括蛋白激酶在内的其它胞内蛋白磷酸化，并且可以移位至细胞核，在该处其磷酸化并活化转录因子，导致促炎细胞因子的表达以及促进炎症反应、细胞粘附和蛋白水解降解的其它蛋白的表达。例如，在诸如巨噬细胞和单核细胞的骨髓系细月包中，IL-lj3和TNFa均响应于p38激活而被转录。这些和其它细胞因子随后的翻译和分泌引发相邻组织内以及通过白细胞浸渗的局部或系统性炎症反应。尽管该反应为针对细胞应激的生理反应的正常组成部分，但急性或慢性细胞应激导致促炎细胞因子的过量表达、不受控表达或者过量且不受控表达。这又导致组织损伤，经常引起疼痛和虛弱。在肺泡巨噬细胞中，p38抑制剂SB203580对p38激酶的抑制减少了细胞因子基因产物。一般认为炎性细胞因子(TNF-a、IFN-y、IL-4、IL-5)和趋化因子(IL-8、RANTES、嗜酸性粒细胞趋化因子)能够调节或支持慢性呼吸道炎症。呼吸道炎症的很多潜在介质的产生和作用似乎依赖于应激活化MAP激酶系统(SAPK)或p38激酶级联(Underwood等，2001iay/z>/es31:342-345)。许多环境刺激对p38激酶途径的激活，导致了对识别的炎症介质(其产生被认为是受到翻译调节的)的精细加工。另外，有多种炎症介质可激活p38MAPK，p38MAPK然后可激活包括其它激酶或转录因子的MAPK下游耙标，由此产生放大肺内炎症过程的潜力。p38类MAP激酶的下游底物p38a或p38B的蛋白激酶底物:MAP激酶活化蛋白激酶2(MAPKAPK2或M2)、MAP激酶相互作用蛋白激酶(MNK1)、p38调节/活化激酶(PRAK)、促分裂原活化激酶和应激活化激酶(MSK:RSK-B或RLPK)。d38激活的转录因子:激活转录因子(ATF)-l、2和6、SRF辅助蛋白l(Sapl)、CHOP(可诱使生长停滞和DNA损伤的基因153或GADD153)、p53、C/EBP(3、肌细胞增强因子2C(MEF2C)、MEF2A、MITF1、DDIT3、ELK1、NFAT和高迁移率族蛋白(HBP1)。其它类型的p38底物:cPLA2、Na+ZH^交换蛋白异构体-1、t蛋白、角蛋白8和微管去稳蛋白。由p38途径调节的基因:c画jun、c-fos、junB、IL-1、TNF、IL-6、IL-8、MCP-1、VCAM-1、iNOS、PPARy、环加氧酶(COX)-2、胶原酶-1(MMP-1)、胶原酶-3(MMP-13)、HIV-LTR、Fgl-2、脑钠肽(BNP)、CD23、CCK、胞质磷酸烯醇丙酮酸羧激酶、细胞周期调节蛋白Dl、LDL受体(Ono等，2000Ce〃w/arS/g"a〃/"g12:1-13)。p38活化的生物学结果p38与炎症—般认为，急性和慢性炎症对许多疾病的发病起主导作用，所述疾病例如类风湿性关节炎、哞喘、慢性阻塞性肺病(COPD)和急性呼吸窘迫综合征(ARDS)。p38途径的活化在以下几项中可能起核心作用(l)例如IL-ip、TNF-a和IL-6的促炎细胞因子的产生；(2)诱导例如COX-2的酶，COX-2控制病理状况下的结締組织重塑；(3)例如iNOS的胞内酶表达，iNOS调节氧化作用；(4)诱导粘附蛋白如VCAM-1和许多其它炎症相关分子。除此之外，p38途径可在免疫系统细胞的增殖和分化中起调节作用。p38可以参与GM-CSF、CSF、EPO和CD40诱导的细胞增殖和/或分化。在若干动物模型中研究了p38途径在炎症相关疾病中的作用。SB203580对p38的抑制降低了内毒素诱导性休克的鼠模型的死亡率，并抑制小鼠胶原诱导性关节炎和大鼠佐剂性关节炎的发展。最新研究显示，一种更有效的p38抑制剂SB220025使肉芽肿的血管密度产生显著的剂量依赖性下降。这些结果表明，p38或者p38途径的组分可为炎症疾病的治疗靶才示。p38与纤維化不受控制的和/或异常的胞外基质蛋白沉积导致纤维症，是包括特发性肺纤维症(IPF)、结节病、慢性阻塞性肺病(COPD)和硬化症在内的疾病的发病基础。p38通过其在TGF-p受体信号转导中的作用牵涉几个促纤维化途径事件(Kaminska等，ActaBiochimicaPolonica52(2):329-37)。TGF-|3是纤维化的基础，涉及若干事件，包括诱导胶原沉积、合成促纤维化细胞因子、成纤维细胞增殖、成肌纤维细胞分和上皮-间充质寿争才奐(Kaminska等，ActaBiochimicaPolonica52(2):329曙37;Border和Noble1994NEJM331:1286-92)(R.Newton和N.S.Holden，DrugDiscoveryToday:DiseaseMechanisms,第3巻,第1期，2006年春季号，第53-61页)。p38被可能与纤维症相关的其它细胞因子和生长因子活化，这些因子包括白介素-l(3(IL-ip)、白介素-17(IL-17)、表皮生长因子(EGF)和血d、板衍生生长因子(PDGF)。纤维化，例如在肝脏中的纤维化，是由于胞外基质组分(尤其是胶原)的过量沉积而发生，过量沉积起因于肝脏中产生的和降解的基质大分子之间的量不平衡(NIH指引PA-99-110，酒精滥用和酒精中毒国立研究所)。从历史上看，肝脏纤维化一直被认为是涉及富含胶原的ECM渐进取代肝实质的不可逆过程(Muddu等，IntJBiochemCellBiol.2006年10月7日)。在急性和慢性形式的肺纤维化患者中均已证实了人体内胶原沉积增加的生物化学证据(Laurent，CibaFoundSymp.1985114:222-33)。在特发性肺纤维化中，存在过度的胞外基质分子产生，所述分子包括胶原、腱生蛋白(tenascin)和蛋白聚糖(Noble等，ClinChestMed200425:749-758)。控制由纤维发生(潜在可逆的反应)至纤维化(不可逆的)的步骤的机制可能与胶原突变、钙化或交联蛋白质的形成有关联(ToxicolPathol.1991;19(4Pt1):526-39)。如本文所述和实施例所示，业已通过RNA抑制试验发现，抑制p38,包括但不限于p38y异构体(isoform)，可影响包括成纤维细胞在内的靶细胞中的胶原产生水平。RNA干扰(RNAi)是其中称为短干扰RNA或siRNA的双链短RNA指导互补RNA靶降解的细胞机制。该过程可导致RNA靶水平显著降低。Elbashir和同事(2001Nature411:494-8)确定了典型siRNA的结构特征，为19个碱基对的双链体，在两个末端各具有两个核苷酸突出端。研究人员随后使用该形式设计了合成siRNA，其中两个RNA寡核苷酸之一与目标基因互补。将这些合成的siRNA导入哺乳动物细胞中可促进互补mRNA降解以及对应蛋白产物的相应减少。RNAi技术的应用使得可以进行这样的功能性研究其中特定基因表达的减少允许以试验研究该基因在细胞途径或病症中的作用。短发夹RNA(或shRNA)是相关的研究工具，其中由Elbashir和同事描述的21个核苷酸的双链体而转变为发夹形式。发夹设计允许将表达盒导入由适宜的转录启动子指导shRNA表达的细胞中。shRNA的应用消除了用合成siRNA有效转染细胞的需求(该需求对某些细胞类型会有难度)，因此扩展了可成功用于RNAi型试验的细35胞类型数。shRNA的应用还允许延长地/稳定地敲减(knockdown)mRNA靶，以及分离已用shRNA表达盒转导的细胞群。稳定导入shRNA表达盒的一种形式是减毒慢病毒。Moffat和同事已描述了减毒慢病毒颗粒的文库，这些减毒慢病毒颗粒设计用于将U6启动子驱动的shRNA表达盒稳定掺入感染细胞的基因组中(Moffat等，2006Cell124:1283-98)。工程病毒的转移区段还编码噪呤霉素抗性标记，该标记可用于选择具有稳定整合的shRNA表达盒的细胞。如在实施例10中所述，制备8个含有编码区(SEQIDNO:l-8)的慢病毒颗粒并导入细胞中，所述编码区编码靶向p38ot或p38y的不同shRNA，按照实施例11分离并定量mRNA，并按照实施例12测定胶原水平，此时的结果表明，降低p38YmRNA水平的序列与所产生的胶原累积下降有关。参见实施例12中的表1。因此，抑制例如p38y可导致胶原表达水平下降，并因此可抑制纤维化。p38与凋亡看起来p38和凋亡的伴随激活由多种物质诱导，例如NGF戒断和Fas结合。半胱氨酸蛋白酶(半胱天冬酶)是凋亡途径的关键，作为失活酶原被表达。然后半胱天冬酶抑制剂可以通过Fas交联阻断p38活化。但是，显性活化的MKK6b的过表达也可能诱导半胱天冬酶活性和细胞死亡。p38在凋亡中的作用是细月包类型和刺激依赖性的。尽管已经表明p38信号转导促进某些细胞系中的细胞死亡，但是已表明p38在不同细胞系中增强存活、细胞生长和分化。细胞周期中的p38p38a在酵母中的过表达导致增殖显著减慢，说明p38a参与细胞生长。当用p38a/p抑制剂SB203580处理细胞时观察到培养的哺乳动物细胞的增殖减慢。p38与心肌细胞肥大已研究了p38在心肌细胞肥大中的活化和功能。在肥大发展过程中，p38a和p38(3的水平都提高，而且肌原节组织和升高的房性利尿因子表达增强了激发组成型活性的MKK3和MKK6的肥大响应。此外，在心脏内减弱的p38信号转导经由涉及钾调神经磷酸酶-NFAT信号转导的机制促进肌细胞分化。D38与发育尽管p38敲除小鼠无存活力，但是存在关于p38在发育中的差异性作用的证据。p38已在几个研究中被与胎盘血管生成相关联，但是未与心脏血管发育关联。此外，还将p38与促红细胞生成素表达相联系，提示其在促红细胞生成中的作用。PRAK最近已牵涉入鼠移植物中的细胞发育。发现PRAKmRNA以及p38异构体在整个胚泡发育过程中表达。p38与细胞分化已发现p38a和/或p38p在几种不同细胞类型的细胞分化中起重要作用。3T3-L1细胞分化为脂肪细胞以及PC12细胞分化为神经元都需要p38a和/或P。已发现p38途径对于SKT6分化为血红蛋白化细胞以及C2C112分化为肌管是必需的且足够的。在衰老和肿瘤抑制中的p38p38在肿瘤生成和衰老中有作用。业已报道，MKK6和MKK3的活化产生取决于p38MAPK活性的衰老表型。此外，已表明p38MAPK活性是造成响应于端粒缩短、&02暴露和慢性RAS癌基因信号转导的衰老的原因。肿瘤细胞的共同特征是衰老丧失，在某些细胞中p38与肺瘤发生相关。业已报道，肿瘤中的p38活化减弱，失去p38途径的组分如MKK3和MKK6导致增殖和致瘤转变的可能性增加，而与在这些研究中使用的细胞系或肿瘤诱导物无关。p38MAP激酶抑制剂"p38MAPK抑制剂"为抑制p38活性的化合物。可以通过技术人员众所周知的各种方法检测化合物对p38活性的抑制作用。例如，可以通过测量抑制脂多糖(LPS)刺激的细胞因子产生的水平来测量抑制作用(Lee等，1988J/附mw"op/wrwaco/10:835-843;Lee等，1993爿朋AO^cat/5W696:149-170;Lee等，19947Vamre372:739-746;Lee等，1999尸/zormaco/7T^r82:389-397)。开发p38MAPK抑制剂的努力一般集中于增加效力。已发现SB203580是有效的p38激酶抑制剂，其ICso值在纳摩尔浓度(nM)范围内。例如，发现SB203580的ICso为48nM。以下显示的吡咬基咪唑SKF86002(Pl)和SB203582(P2)也是p38激酶抑制剂。最近的出版物(Lee等，2000/mmwwo//zarmaco/og);47:185-201)已公开了下文所示的p38抑制剂(P3-P6)。在这些抑制剂中值得注意的是针对化合物P4描述的相对高效力和选择性(p38IC5o=0.19nM)，以及SB220025(P6)对由炎症驱动的血管生成的抑制。这些化合物一般被认为在p38a多肽的ATP口袋(pocket)中结合，是辅因子ATP的竟争性抑制剂。还发现某些嘧啶。米唑也是有效的p38激酶抑制剂，其IC50值为亚纳摩尔浓度(Liverton等，1999/MW.C/zem.42:2180-2190)。一般认为这些化合物在p38a多肽的ATP口袋中结合，并为必需的辅因子ATP的竟争性抑制剂。某些二芳基脲，例如BIRB796,也是p38MAPK的有效抑制剂(Pargellis等，7Wm^e5Vrw"wra/所o/ogy9:268-272)。BIRB796针对TNFot的IC5o为18nM。二芳基脲在结构上与p38的吡咬基咪唑和嘧啶基咪唑抑制剂截然不同。某些二芳基脲被认为是p38a的变构抑制剂。一般认为，在空间上移出ATP结合口袋的位点结合p38a时，变构抑制剂诱导多肽的ATP结合口袋的构象变化，该构象变化产生与38有效的ATP结合不相适的ATP结合口袋，由此解释了所观察到的该化合物作为p38ot抑制剂的效力。临床研发中报道的两种p38抑制剂为HEP689(P7)和VX-745(P8)。据报道VX-745在II期临床试验中用于类风湿性关节炎。已经公开了HRP689的有效的局部抗炎活性，据报道HRP689已进入临床研发阶段，以研究其作为局部用药用于治疗银屑病和其它皮肤病的潜力。P6X=H，Y=CH;HEP689(SB235699)P8VX-745P7X-HN2，Y=N;SB220025对各种p38抑制剂的进一步i仑述可参见Boehm等，2000五;c/O;/"77zer尸af10:25-37;和Salituro等，1999CwrMedCAem6:807-823和Fitzgerald等，2003A^w"Sfrw"Mra/B/o/ogy10:764-769。业已发现，p38的y异构体与ot异构体具有显著的结构相似性。然而，尽管在异构体之间重要的残基是保守的，但观察到结构变异，包括蛋白的ATP结合口袋周围区域中的变异。上述p38抑制剂的建模表明，在p38ot抑制剂与p38Y异构体相互作用时，观察到在能量上不利的相互作用。建才莫还揭示，在p38oc抑制剂与p38Y异构体相互作用时，其它在能量上有利的相互作用得以保留。业已发现，式II化合物中的某些没有空间上不利的相互作用，例如，在p38y的Met109和Fitzgerald等，2003iVaft^eSfrwcmra/说o/ogv10:764-769描述的化合物1的三氟曱基苯基部分之间的空间上不利的相互作用，此外，式II化合物中的某些具有与p38y相互作用并赋予正结合能的取代基。已经发现，仅去除三氟曱基苯基部分可失去具有与蛋白相互作用的取代基的化合物的有利结合能。因此，在某些实施方案中，Fitzgerald等，2003A^wreS^w"wra/B/o/o^10:764-769的化合物1中的三氟甲基苯基取代基被较小分子体积较小的取代基置换，或者被分子体积较小、且与由p38Y残基Leu89、Leu58、Leul07和Leul08限定的疏水口袋产生范德华相互作用的取代基置换，或者被分子体积较小、且与p38y的Metl09产生氢键:4建合相互作用或静电相互作用的取代基置换，或者被分子体积较小、且与由p38丫残基Leu89、Leu58、Leul07和Leul08限定的疏水口袋产生范德华相互作用、且还与p38y的Metl09产生氢键键合相互作用或静电相互作用的取代基置换。业已发现，式IV化合物中的某些没有空间上不利的相互作用，例如，在p38y的Metl09和p2的氟苯基部分之间的空间上不利的相互作用，此外，式IV化合物中的某些具有与p38y相互作用并赋予正结合能的取代基。因此，在某些实施方案中，p2的氟苯基取代基被分子体积较小的取代基置换，或者被分子体积较小、且与由p38y残基Leu89、Leu58、Leul07和Leul08限定的疏水口袋产生范德华相互作用的取代基置换，或者被分子体积较小、且与p38y的Metl09产生氢键键合相互作用或静电相互作用的取代基置换，或者被分子体积较小、且与由p38y残基Leu89、Leu58、Leul07和Leul08限定的疏水口袋产生范德华相互作用、且还与p38y的Metl09产生氢键键合相互作用或静电相互作用的取代基置换。业已发现，式IIH匕合物中的某些没有空间上不利的相互作用，例如，在p38y的Metl09和BIRB796的取代的亚萘基部分之间的空间上不利的相互作用，此外，式III化合物中的某些具有与p38y相互作用并赋予正结合能的取代基。因此，在某些实施方案中，BIRB796的取代的亚萘基被分子体积较小的取代基置换，或者被分子体积较小、且与由p38y残基Leu89、Leu58、Leul07和Leul08限定的疏水口袋产生范德华相互作用的取代基置换，或者被分子体积较小、且与p38y的Metl09产生氢键键合相互作用或静电相互作用的取代基置换，或者被分子体积4交小、且与p38y的Phelll产生兀-堆积或兀-阳离子相互作用的取代基置换，或者被分子体积较小、且与由p38y残基Leu89、Leu58、Leul07和Leul08限定的疏水口袋产生范德华相互作用、且还与p38y的Metl09产生氢键键合相互作用或静电相互作用的取代基置换，或者被分子体积4^小、且与由p38y残基Leu89、Leu58、Leul07和Leul08限定的疏水口袋产生范德华相互作用、且还与p38y的Phelll产生兀-堆积或兀-阳离子相互作用的取代基置换，或者被分子体积较小、且与由p38y残基Leu89、Leu58、Leul07和Leul08限定的疏水口袋产生范德华相互作用、且与p38y的Metl09产生氬4走4建合相互作用或静电相互作用、且还与p38y的Phelll产生兀-堆积或兀-阳离子相互作用的取代基置换。本文描述的优选p38抑制剂为表现出相对较高的p38y抑制效力并具有由此抑制产生的相对较高疗效(例如用于调节SAPK系41统)的双环氧代吡咬衍生物和类似物。优选地，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约500的范围内，优选在约10pM至约5pM或约100nM至约500(iM的范围内，优选在约50pM至约1的范围内，更优选在约50pM至约200nM的范围内。优选地，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38a的IC50值是抑制p38yMAPK的ICso值的至少约2倍。更优选地，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38a的ICso值是抑制p38yMAPK的IC50值的至少约5倍。甚至更优选;也，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38a的IC5o值是抑制p3~MAPK的ICso值的至少约10倍。本文描述的优选p38抑制剂为表现出相对较高的p38Y抑制效力并具有由此抑制产生的相对较高疗效(例如用于调节SAPK系统)的嗜咬基咪唑衍生物和类似物。优选地，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约500的范围内，优选在约10pM至约5nM或约100nM至约500|iM的范围内，优选在约50pM至约1^iM的范围内，更优选在约50pM至约200nM的范围内。优选地，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38a的IC50值是抑制p38yMAPK的ICso值的至少约2倍。更优选地，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38a的ICso值是抑制p38yMAPK的IC50值的至少约5倍。甚至更优选;也，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38a的IC5o值是抑制p38YMAPK的ICso值的至少约10倍。本文描述的优选p38抑制剂为表现出相对较高的p38y抑制效力并具有由此抑制产生的相对较高疗效(例如用于调节SAPK系统)的二芳基脲衍生物和类似物。优选地，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约10pM至约500^iM的范围内，优选在约10pM至约5pM或约100nM至约500|xM的范围内，优选在约50pM至约1|aM的范围内，更优选在约50pM至约200nM的范围内。优选地，该实施方案的p38抑制剂表现出的抑制p38a的IC50值是抑制p38yMAPK的ICs。值的至少约2倍。"硝基烷基"是指烷基上连接有一个或"硫代烷基"是指烷基上连接有一个或"羟基烷基"是指烷基上连接有一个或本文使用的术语"烷基"是指1-10个碳原子的单价直链或支链基团，包括但不限于曱基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、正己基等。本文使用的术语"烯基"是指含有碳双键的2-10个碳原子的单价直链或支链基团，包括但不限于l-丙烯基、2-丙烯基、2-曱基-l-丙烯基、l-丁烯基、2-丁烯基等。本文使用的术语"卤素"是指氟、氯、渙或碘。本文使用的术语"卣代烷基"是指烷基上连接有一个或多个卣素基团。本文^f吏用的术i吾多个硝基。本文使用的术语多个硫基。本文使用的术语多个羟基。本文使用的术语"烷氧基"是指通过-O-连接而共价键合在母体分子上的直链或支链烷基。烷氧基的例子包括但不限于曱氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。本文使用的术语"烷氧基烷基"是指烷基上连接有一个或多个烷氧基。本文中使用的术语"羧基"是指-COOH。术语"烷氧基羰基"是指-(CO)-O-烷基。烷氧基羰基的例子包括但不限于曱氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基等。本文所用的基团是指具有单个、未配对的电子的物质，使得含有该基团的物质可以与另一物质共价键合。因此，在本文中，基团不一定是自由基。相反，基团是指较大分子的特定部分。术语"基团"可以与术语"基"互换4吏用。本文所用的取代基衍生自未取代的母体结构，在该母体结构中，一个或多个氢原子已经交换为另一个原子或基团。当被取代时，取代基为一个或多个单独或独立地选自以下的基团烷基、环烷基、芳基、稠合芳基、杂环基、杂芳基、羟基、烷氧基、芳氧基、巯基、烷硫基、芳硫基、氰基、卣素、羰基、硫代羰基、烷氧基羰基、硝基、曱硅烷基、三卣代甲磺酰基、三氟曱基和氨基，包括单取代氨基和二取代氨基，及其被保护的衍生物。可以形成上述取代基的保护性衍生物的保护基是本领域技术人员已知的，而且可参见参考文献，例如Greene和Wuts，/V她c/zVeGraw/wz,wOga"/c<^"//2&5^;JohnWileyandSons:NewYork,1999。无i仑何种情况，只要取代基被描述为"任选取代的"，则该取代基可以被上述取代基取代。术语"纯化的"是指已经从其它化合物中分离出来的化合物，使得其在测定时包括至少95%的被测物质。本文中描述的化合物中可以存在不对称碳原子。所有这些异构体，包括非对映异构体和对映异构体及其混合物，都包括在所提及化合物的范围内。在某些情况下，化合物可以以互变异构形式存在。所有的互变异构形式都包括在所提及化合物的范围内。同样，当化合物含有烯基或亚烯基时，化合物可能存在顺式异构形式和反式异异构体的混合物。因此，除非上下文中明确地另外指出，否则本文中所指的化合物包括所有前述异构形式。各种形式都包括在实施方案中，包括多晶型物、溶剂化物、水合物、构象异构体、盐和前体药物衍生物。多晶型物是化学式相同但结构不同的结合物。溶剂化物是通过溶剂化作用而形成的结合物(溶剂分子与溶质分子或离子的结合)。水合物为通过结合水而形成的化合物。构象子是一种为构象异构体的结构。构象异构性是结构式相同但围绕旋转键的原子构象不同(构象异构体)的分子现象。化合物的盐可以通过本领域技术人员已知的方法制备。例如，可以使适当的碱或酸与等化学计量的化合物反应而制备化合物的盐。前体药物是在进行生物转化(化学转化)之后显示出其药理学作用的化合物。因此，举例来说，可以将前体药物视为含有特化保护基的药物，所述特化保护基被以短暂方式使用，以改变或消除母体分子中的不希望有的特性。因此，除非上下文中另外明确指出，否则本文中所提及的化合物包括所有前述形式。下述化合物可用于本文描述的方法。在一个实施方案中，下迷化合物表现出的抑制p38y的ICso在约10pM至约5的范围内，优选在约100nM至约500liM的范围内。—个实施方案提供由下列结构式(式I)表示的一类化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>式I其中R选自H、卤素、氰基、硝基、羟基、任选取代的d—6烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的CMO烷基环烷基、任选取代的(32.6烯基、任选取代的C"6烷氧基、任选取代的Q或w芳基、任选取代的吡咬基、任选取代的嘧咬基、任选取代的噻吩基、任选取代的p夫喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的嗯唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的M磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的>5危脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基曱酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧45基、任选取代的羰基、任选取^的螺环环烷基、任选取代的吡溱基、任选取代的P达溱基、任选取代的吡咯基、任选取代的P塞吩基、任选取代的P塞喳基、任选取代的噁唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异嗨唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异P羞唑基、任选取代的萘基、任选取代的会啉基、任选取代的异唾啉基、任选取代的会喔啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取^的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的P引咮基和任选取代的苯并咪唑基。另一个实施方案提供由下列结构式(式II)表示的一类化合物其中W选自H、卣素、氰基、硝基、羟基、任选取代的Cw烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的(:4_1()烷基环烷基、任选取代的C2-6烯基、任选取代的Q-6烷氧基、任选取代的Q幻()芳基、任选取代的吡咬基、任选取代的嘧咬基、任选取代的噻吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的笨氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基曱酰基、任选取代的疏醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡嗪基、任选取代的哒嗓基、任选取代的吡咯基、任选取代的噻吩基、任选取代的p塞唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异嗯唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异P塞唑基、任选取代的萘基、任选取代的会啉基、任选取代的异全啉基、任选取代的全吸啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取4戈的苯并P塞吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的吲哚基和任选取代的苯并咪唑基。再一个实施方案^是供由下列结构式(式m)表示的一类化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>其中112和113各自独立地选自H、卣素、fj^、硝基、羟基、任选取代的C"6烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的CMO烷基环烷基、任选取代的C2，6烯基、任选取代的Q，6烷氧基、任选取代的C6或H)芳基、任选取代的吡啶基、任选取代的嘧啶基、任选取代的噻吩基、任选取代的吹喃基、任选取代的P塞唑基、任选取代的嚼唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的石危脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基曱酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的石风、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡溱基、任选取代的哒。秦基、任选取代的吡咯基、任选取代的噻吩基、任选取代的瘗唑基、任选取代的嚼唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异噁唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异P塞唑基、任选取代的萘基、任选取代的喹啉基、4壬选取代的异喹啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的吲哚基和任选取代的苯并咪唑基。式in<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>在一个实施方案中，式III化合物不是l-(5-叔丁基-2-对曱苯基JH-吡唑-:3-基)-:3-W-P-吗啉4-基-乙氧基)萘-l-基]脲(BIRB796)。另一个实施方案4是供由下列结构式(式IV)表示的一类化合物其中R5和R6各自独立地选自H、卤素、、硝基、羟基、任选取代的C,-6烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的C^烷基环烷基、任选取代的C2—6烯基、任选取代的C,-6烷氧基、任选取代的Q或K)芳基、任选取代的吡咬基、任选取代的嘧咬基、任选取代的噻喻基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的嗨唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的石克脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基甲酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的^风、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡溱基、任选取代的哒溱基、任选取代的吡咯基、任选取代的噻吩基、任选取代的P塞唑基、任选取代的嗨唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异噁唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的喹啉基、任选取代的异喹啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的式IV48苯并呋喃基、任选取代的P引哚基和任选取代的苯并咪唑基。在一个实施方案中，式IV化合物不是其中X为N。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage49</formula>要理解的是，本文描述的具体化合物可为上述各类化合物中的一类以上的成员。本文描述的化合物可用于调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统。另一个实施方案涉及纯化的由式I-IV表示的化合物。纯度可以用如上所述的百分率表示。在一个优选实施方案中，以纯化化合物占组合物总重量计，纯化的由式I-IV表示的化合物的纯度约为96%以上，更优选其纯度约为98%以上(重量比)。式I-IV化合物可通过使用本领域已知的各种常规反应进行合成。合成的实例包括在实施例6、7、8和9中提供的合成流程。还可以通过本领域已知的、基于用于双环氧代吡啶的已知合成方案的任何常规反应，例如在实施例6中给出的反应，合成为双环氧代吡咬书f生物的式I化合物。还可以通过本领域已知的任何常规反应，包括那些基于用于嘧啶基咪唑的已知合成方案的反应，例如在实施例7和9中阐述的反应，合成为嘧咬基咪唑衍生物的式II和式IV化合物。还可以通过本领i或已知的任何常规反应，包括那些基于用于二芳基脲的已知合成方案的反应，例如在实施例8中阐述的反应，合成为二芳基脲衍生物的式III化合物。本文描述的原料可以商购获得、为已知材料或者可以通过本领域已知的方法制备。此外，本文未描述的原料也可以商购获得、为已知材料或者可以通过本领:减已知的方法制备。原料可以具有适当的取代基，以最终得到具有相应取代基的目标产物。或者，取代基可以在合成的任意时刻加入，以最终得到具有相应取代基的目标产物。示于实施例6的合成方案显示了可用于制备式I化合物的方法。示于实施例7和9的合成方案显示了可用于制备式II和式IV化合物的方法。示于实施例8的合成方案显示了可用于制备式m化合物的方法。本领域技术人员应该理解，可以使用许多不同的合成反应方案来合成式I-IV化合物。ot匕外，本领域技术人员会理解，在合成反应中可以使用许多不同的溶剂、偶联剂和反应条件，以得到相当的结果。本领域技术人员由所示的或已知的类似反应会意识到顺序的变化，还会认识到适宜反应条件的变化，这些变化可适用于上述方法，以制备式I-IV化合物。在本文描述用于制备式I-IV化合物的方法中，保护基的使用通常是有机化学领域技术人员公知的，因此，在某些情况下，本文的流程方法可能暗指使用适宜的保护基，尽管这些基团可能未被明确地表述。这些适宜保护基的引入和除去是有机化学领域众所周知的；参见例如T.W.Greene,"ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis,,,Wiley(NewYork),1999。本文描述的反应产物可以通过常规手段分离，例如萃取、蒸馏、色谱等。可以通过使适当的;威或酸与等化学计量的化合物反应制备式I-IV化合物的盐，例如药学上可接受的盐。类似地，可通过本领域技术人员公知的方法制备式I-IV化合物的药学上可接受的衍生物(例如酯)、代谢物、水合物、溶剂化物和前体药物。因此，另一个实施方案提供为活性化合物的前体药物的化合物。通常，前体药物是在体内代谢(例如通过代谢转化，例如脱氨基、脱烷基、脱酯等)而提供活性化合物的化合物。"药学上可接受的前体药物"是指在合理的医疗判断范围内适于在患者中药用的化合物，没有过度不当的毒性、刺激、变态反应等，并有效实现预期用途，如果可能的话，包括实施方案化合物的药学上可接受的酯以及两性离子形式。药学上可接受的前体药物类型的例子描述于T.Higuchi和V.Stella,Pro-drugsasNovelDeliverySystems,A.C.S.专题系列的第14巻，以及EdwardB.Roche编辑，BioreversibleCarriersinDrugDesign,AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress,1987，该两篇文献都通过引用结合到本文中。本文描述的化合物和结合物还可以包括代谢物。本文所用的术语"代谢物"是指实施方案的化合物或其药学可接受的盐、类似物或衍生物的代谢产物，其在体外或体内表现出与实施方案化合物类似的活性。本文描述的化合物和结合物还可以包括水合物和溶剂化物。本文所用的术语"溶剂化物"是指由溶质(此处为式I-IV化合物)与溶剂形成的络合物。用于实施方案的这些溶剂优选不应妨碍溶质的生物活性。例如，溶剂可为水、乙醇或乙酸。由前述内容来看，本文中所指的具体化合物或一类化合物应理解为包括上述的各种形式，包括其药学可接受的盐、酯、前体药物、代谢物和溶剂化物。筛选化合物文库中的p38y优先抑制剂另一方面，提供用于鉴定药物活性化合物的方法，例如用于确定化合物是否可潜在地用作治疗剂，例如用于预防或治疗纤维化疾病(例如与p38或细胞因子相关的疾病)。该方法包括测定多个化合物对p38Y的抑制，选择表现出相对较高的p38y抑制效力的化合物，并进一步测试选定化合物对p38a的抑制，选择还表现出相对较高的p38a抑制效力的化合物。该方法还包括测定多个化合物对p38y的抑制，选择表现出相对较高的p38"中制效力并还表现出相对较高的p38a抑制效力的化合物。该方法还包括测定多个化合物对p38a的抑制，选择表现出相对较高的p38a抑制效力并还表现出相对较高的p38y抑制效力的化合物。优选地，此高效力p38y和p38a抑制剂化合物抑制p38y的IQo在约10pM至约500|liM的范围内，优选在约10pM至约5jiM或约100nM至约500一的范围内，更优选在约500pM至约1|jM的范围内，甚至更优选在约500pM至约1iiiM的范围内。优选地，此高效力p38y和p38a抑制剂化合物针对p38a的IQo值是针对p38y的ICso值的2倍。更优选地，此高效力p38y和p38a抑制剂化合物针对p38a的IQo值是针对p38y的ICso值的5倍。甚至更优选地，此高效力p38y和p38a抑制剂化合物4十对p38a的ICso值是针对p38y的IC5o值的10倍。；降测定的多个化合物优选选自潜在化合物文库。可以以各种方式对选自该文库的多个4匕合物进行测定。例如，在某些实施方案中，该方法还包括使p38MAPK与多个化合物接触，并确定该化合物是否抑制细胞因子活性。p38MAPK优选选自p38a和p38Y。在优选实施方案中，接触步骤在体外进行；在某些优选实施方案中，接触步骤包括使含有p38MAPK的细月包与该化合物接触。在又一个实施方案中，提供用于在体外或在体内抑制细胞中的p38MAPK活性的方法。通常，这些方法包括在使细胞中的p38活性受到抑制的条件下，使含有p38MAPK的细胞与有效抑制p38的量的化合物(例如式I-IV化合物)接触。这些方法的实例在下面的实施例部分提供。优选地，所述化合物表现出的抑制p38y的ICso在约10pM至约500的范围内，优选在约10pM至约5或约100nM至约500的范围内，更优选在约500pM至约1pM的范围内，甚至更优选在约500pM至约1pM的范围内。优选地，所述化合物针对p38a的ICso值是针对p38y的ICso值的2倍。体内方法包括例如将不同浓度的目标化合物(例如式I-IV化合物)经口服或注射给予一组动物。给予该化合物之后，静脉内给予脂多糖。测量血清TNFa水平并与对照动物的该水平对比。优选的化合物抑制TNFa释放，因此降低试验动物血样中的TNFa水平。优选地，该化合物表现出的抑制TNFa释放的EQo在约10pM至约5jiM的范围内，更优选在约500pM至约1pM的范围内，甚至更优选在约500pM至约1(aM的范围内。鉴定药物活性化合物的方法还可以包括确定所选化合物的哺乳动物毒性。这些方法通常是本领域技术人员已知的。鉴定药物活性化合物的方法还可以包括一寻所选化合物给予受试者，同时确定哺乳动物活性或者用于其它目的。在一个实施方案中，受试者患有炎性疾病或处于炎性疾病的风险当中。优选地，受试者为哺乳动物，并可以是人。抑制p38MAP激酶的方法在一个实施方案中，提供在体外或体内调节SAPK系统的方法。这些方法包括使SAPK调节浓度的化合物与p38MAPK接触(例如通过^f吏该化合物与含有p38MAPK的细胞或组织4妄触)，其中，该化合物具有相对较高的p38y抑制效力，对应于该化合物抑制p38MAPK的相对较高的抑制浓度。抑制浓度(IC)为在剂量-反应曲线上使p38MAPK活性降低特定百分率(例如50%、40%、30%、20%、10%)的浓度。例如，依据剂量-反应曲线上导致p38MAPK活性分别降低50。/。、40%、30%、20%和10%的浓度确定1(:50、IC40、IC30、IC2o和ICm。调节SAPK系统的化合物抑制p38y的IC5o优选在约10pM至约500jiM的范围内，优选在约10pM至约5或约100nM至约500拜的范围内，更优选在约500pM至约1iaM的范围内，甚至更优选在约500pM至约1^M的范围内。"与细胞接触"是指一种状态，在该状态下，化合物或其它物质组合物与细胞或组织直接接触，或者紧密得足以在细胞或组织中诱导期望的生物学作用。例如，可以以允许p38MAPK与化合物相互作用的任意方式使含有p38MAPK的细胞或组织与化合物接触，从而在细胞中产生期望的生物学作用。可以例如通过混合或给予化合物(例如式I-IV化合物；和/或其盐、酯、前体药物和/或中间体，和/或包含一种或多种前述物质的药物组合物)实现接触细胞或組织。或者，可以通过使化合物直接或间接靶向含有p38MAPK的细胞或组织的方式引入化合物，实现与细胞或组织的接触。可以在^f吏化合物与p38MAPK结合的条件下实现与细胞或組织的接触。这样的条件可包括化合物和含有p38的细胞或组织的接近度、pH、温度或可以影响化合物与p38MAPK结合的任何条件。在某些实施方案中，使细胞与化合物在体外接触；在其它实施方案中，使细胞与化合物在体内接触。当在体内接触细胞时，有效浓度(EC)为依据对依赖于p38MAPK活性降低的特定生理反应的检测，使p38MAPK活性降低特定百分率(例如50%、40%、30%、20%、10%)的浓度。这种生理反应可以为例如血液或其他体液中的TNFoc浓度降低。例如，EC5()、EC40、EC3o、EC2。和EC,。被确定为依椐TNFa浓度降低的检测导致p38MAPK活性在剂量-反应曲线上分别降低50%、40%、30%、20%和10%的浓度。调节SAPK系统的化合物抑制p38y的EC5o优选在约10pM至约500^M的范围内，优选在约10pM至约5^M或约100nM至约500(iM的范围内，更优选在约500pM至约1的范围内，甚至更优选在约500pM至约1的范围内。在某些实施方案中，提供的化合物为连同药学上可接受的载体一起的药物组合物的形式。治疗和/或预防方法另一个实施方案4是供治疗或预防疾病如纤维化疾病的方法。该方法包括鉴别有纤维^化疾病风险或已患有纤维化疾病的受试者，并将治疗或预防纤维化疾病有效量的化合物给予受试者。在优选的实施方案中，所述化合物表现出的抑制p38y的ICso在约10pM至约500)aM的范围内，优选在约10pM至约5iaM或约100nM至约500pM的范围内，更优选在约500pM至约1iaM的范围内，甚至更优选在约500pM至约lpM的范围内。在优选的实施方案中，所述化合物针对p38a的ICso值是针对p38<y的ICso值的2倍。在优选实施方案中，有效量产生的血液或血清或另一种体液的浓度等于或小于该化合物抑制P38y的ICs。、或ICh)、或IC30、或IC2。、或IC1()，此外，有效量产生的血液或血清或另一种体液的浓度等于或小于该化合物抑制p38a的IC5Q、或ICto、或IQ(()、或IC2Q、或IC1Q。在优选的实施方案中，所述化合物表现出的抑制TNFa分泌的EQo在约10pM至约5pM的范围内，更优选在约500pM至约1pM的范围内，甚至更优选在约500pM至约1pM的范围内。在其它优选实施方案中，有效量产生的血液或血清或另一种体液的浓度等于或小于该化合物在体液中抑制LPS刺激性TNFa释放的EC50、或EC40、或EC30、或EC20、或EC10。该有效量优选为在受试者中引起不希望的副作用的量的约70%以下，更优选约50%以下，所述副作用例如但不限于嗜睡、胃肠不适和光壽丈性皮渗。用于治疗或预防的化合物优选为式I-IV化合物。用于鉴别有纤维化疾病风险或已患有纤维化疾病的受试者的方法是本领域技术人员已知的。可通过本文所述方法治疗或预防的纤维化疾病的实例包括与p38有关的疾病，例如与细胞因子活性改变有关的疾病、与SAPK系统调节有关的疾病、与自身免疫性疾病和纤维化病症有关的疾病。细胞因子(一种或多种细胞因子)优选选自但不限于IL-ip、IL-6、IL-8和TNFa。在一个实施方案中，用于治疗或预防炎性疾病的化合物为抑制SAPK信号转导途径中的激酶的化合物。优选化合物的实例包括式I-IV化合物。术语"与p38有关的病症"是指其中无论直接还是间接涉及p38MAP激酶信号转导途径的疾病或其它有害状况。与p38有关的病症的例子包括由持续、延长、增强或升高的p38活性水平产生的IL-ip、TNFa、IL-6或IL-8失调或过表达所引起的病症。这些病症包括但不限于炎性疾病、自身免疫性疾病、纤维化疾病、破坏性骨病、增生性疾病、感染性疾病、神经退行性疾病、变态反应、中风性再灌注局部缺血、心脏病发作、血管生成疾病、器官缺氧、血管增生、心脏肥大、凝血酶诱导的血小板聚集以及与前列腺素或环加氧酶途径有关的病症，例如涉及前列腺素内过氧化物合酶的病症。与p38有关的病症可以包括任何与p38异构体有关或由其介导的病症。"纤维化病症"、"纤维增殖性疾病"、"纤维化疾病"、"纤维增殖性疾病"、"纤维〗匕障碍"和"纤维增殖性障碍"均可互换使用，是指以成纤维细胞的增殖或活性失调和/或胶原组织的病理或过度聚集为特征的病症、疾病或障碍。通常，任何这种疾病、障碍或病症都能够通过给予本文所述^b合物来治疗。纤维化疾病包括但不限于肺纤维化，包括特发性肺纤维化(IPF)和由已知病因引起的肺纤维化、肝纤维化和肾纤维化。其它示例性纤维化病症包括肌肉骨骼纤维化、心脏纤维化、手术后的粘连、硬皮病、青光眼和皮肤损伤，例如术语"调节SAPK系统，，是指无论在体外还是体内例如通过抑制p38活性来提高或降4氐应激活化蛋白激酶系统活性。在某些实施方案中，当与未处理的对照细胞的p38活性相比，细胞中的p38活性被抑制约50%、约40°/。、约30%、约20%或约10%时，SAPK系统受到调节。本文所用的与细月包因子活性改变有关的病症是指与非疾病状态相比其中的细胞因子活性被改变的病症，包括但不限于由导致持续、延长、增强或升高的细月包因子活性水平的IL-lp、TNFa、IL-6或IL-8过量产生或失调引起的病症，这可能与p38活性有关。这样的病症包括但不限于炎性疾病、自身免疫性疾病、纤维化疾病、破坏性骨疾病、增殖性疾病、感染性疾病、神经退行性疾病、变态反应、中风性再灌注/局部缺血、心脏病发作、血管生成疾病、器官缺氧、血管增生、心脏肥大、凝血酶诱导的血小板聚集以及与环加氧酶和脂加氧酶信号转导途径有关的病症，例如与前列腺素内过氧化合酶有关的病症。与细胞因子有关的病症可以包括与IL-1(尤其是IL-ip)、TNFa、IL-6或IL-8或能够被p38调节的任何其它细胞因子有关或由其介导的任何病症。在优选的实施方案中，与细胞因子有关的病症为与TNFot有关的病症。本文描述的方法还可以用于治疗自身免疫疾病以及与急性和慢性炎症有关的疾病。这些疾病包括但不限于慢性阻塞性肺病(COPD)、炎症性肺纤维化(IPF)、类风湿性关节炎；类风湿性脊推炎；骨关节炎；痛风、其它关节炎性疾病；脓毒症；脓毒性休克；内毒素性休克；革兰氏阴性脓毒症；中毒性休克综合征；肌筋膜疼痛综合征(MPS);志贺氏菌病；哞喘；成人呼吸窘迫综合征；炎性肠病；克罗恩病(Crohn，sdisease);银屑病；湿渗；溃疡性结肠炎；肾小球肾炎；硬皮病；慢性曱状腺炎；格雷夫斯病(Grave，sdisease);奥蒙德病(Ormond，sdisease);自身免疫性胃炎；重症肌无力；自身免疫性溶血性贫血；自身免疫性嗜中性白细胞减少症；血小板减少症；胰腺纤维化；慢性活动性肝炎，包括肝纤维化；急性和慢性肾病；肾纤维化；过敏性肠综合征；热病(pyresis);再狭窄；脑型症；中风和局部缺血性损伤；神经损伤；阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease);亨廷顿病(Huntington'sdisease);帕金森病(Parkinson'sdisease);急、'1"生和'J"曼')"生疼痛；变态反应，包括变应性鼻炎和变应性结膜炎；心脏肥大；慢性心力衰竭；急性冠状动脉综合征；恶病质；痴疾；麻风病；利什曼病；莱姆病(Lymedisease);赖特综合征(Reiter，ssyndrome);急性滑膜炎；肌肉变性；粘液嚢炎；腱炎；腱鞘炎；病性、破裂性或脱垂性推间盘综合征；骨石更化症；血栓形成；硅沉着病；肺肉瘤病；骨吸收疾病，例如骨质疏松症或与多发性骨髓瘤相关的骨病；癌症，包括但不限于转移性乳腺癌、结肠直肠癌、恶性黑素瘤、胃癌和非小细胞肺癌；移植物抗宿主反应；和自身免疫疾病，例如多发性硬化症、《良裔和纤维肌痛；AIDS和其它病毒性疾病，例如带状疱療、单纯疱渗I或II、流感病毒、严重急性呼吸系统综合征(SARS)和巨细胞病毒感染；以及糖尿病。此外，实施方案的方法还可以用于治疗增殖性疾病(包括良性和恶性增生)，包括急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、卡波西肉瘤(Kaposi'ssarcoma)、多发性骨髓瘤、乳癌，包括转移性乳癌；结肠直肠癌；骨转移癌等；疼痛疾病，包括神经肌肉疼痛、头痛、癌症性疼痛、牙疼、和关节炎性疼痛；血管生成疾病，包括实体肿瘤血管生成、眼的新血管化和婴儿血管瘤；与环加氧酶和脂加氧酶信号转导途径有关的病症，包括与前列腺素内过氧化物合酶2有关的病症(包括水肿、发热、痛觉缺失和疼痛)；器官缺氧；凝血酶诱导的血小板聚集。此外，本文所述方法还可以用于治疗动物(包括哺乳动物)中的原虫病。受试者可以包括一种或多种细胞或组织，或有机体。优选的受试者为哺乳动物。哺乳动物可以包括任何哺乳动物。作为非限制性实例，优选的哺乳动物包;^舌牛、猪、绵羊、山羊、马、駱驼、水牛、猫、狗、大鼠、小鼠和人。高度优选的哺乳动物受试者为人。可以通过本领域已知的任何递药途径将化合物给予受试者。具体的示例性给药途径包括口服、眼用、直肠、经口腔、局部、经鼻、眼科、皮下、肌内、静脉内(推注和滴注)、脑内、透皮和经肺部。如在本文使用的"治疗有效量，，和"预防有效量"范围内使用的术语"有效量"是指足以治疗、緩解或预防所述疾病或病症的化合物量，或者足以表现出可检测的治疗、预防或抑制效果的化合物量。可以例如通过以下实施例中公开的测定检测该效果。用于受试者的精确有效量取决于受试者体重、大小和健康状况；病症性质和程度；以及选定用于给药的治疗剂或治疗剂组合。可以通过在临床医生的技能和判断范围内的常规试验来确定针对给定病况的治疗和预防有效量。优选地，实施方案化合物的有效量产生的血液或血清或另一种体液浓度小于抑制p38MAP激酶的ICso、IC4Q、IC3()、1(:2()或1(:10。优选地，实施方案化合物的有效量产生的血液或血清或另一种体液浓度有效改变全血的TNFa分泌达10%、15%、20%、30°/。、40%或50%。对于任何化合物而言，最初都可以在例如肿瘤细胞的细胞培养测定或在动物模型(通常为大鼠、小鼠、兔子、狗或猪)中估计治疗或预防有效量。动物模型还可以用于确定适当的浓度范围和给药途径。然后可以使用此信息确定人用的给药剂量和途径。可以通过在细胞培养物或试-睑动物中的标准药学方法来确定治疗/预防效力和毒性，例如ED5Q(对50%群体治疗有效的剂量)和LD5()(使50%群体致死的剂量)。治疗效果和毒性作用之间的剂量比为治疗指数，可以用ED5o/LD5()的比率表示。优选具有大治疗指数的药物组合物。但是，具有窄治疗指数的药物组合物也包括在实施方案的范围内。从细胞培养测定和动物研究获得的数据可用于制定人用剂量范围。这些组合物中含有的剂量优选在包括ED5()且毒性很小或无毒的循环浓度范围内。剂量可随所用剂型、患者^t感性和给药途径在该范围内变化。执业医生根据与需要治疗的患者有关的因素确定准确的剂量。对剂量和给药进行调整，以提供足够的活性药物水平或保持希望的效果。可考虑的因素包括病情严重性、受试者的身体健康情况、年龄、体重和受试者性别、饮食、给药时间和频率、药物组合、反应敏感性和对治疗的耐受/响应。长效药物組合物可以每3-4天1次、每周1次或每2周1次用药，这取决于具体制剂的半衰期和清除速率。应该理解，本文所述治疗包括预防疾病、緩解症状、减緩疾病发展、逆转损害或治愈疾病。—方面，对纤维4b病症的治疗导致受治疗的受试者群体与未治疗的受试者群体相比平均存活时间延长。优选地，平均存活时间延长约30天以上；更优选约60天以上；更优选约90天以上；甚至更优选约120天以上。可以釆用任何可重复的方式测量群体存活时间的延长。在一个优选方面，可以例如在用活性化合物开始治疗之后计算群体的平均存活长度来测量群体平均存活时间的延长。在另一个优选方面，还可以例如通过在完成活性化合物的第一轮治疗之后计算群体的平均存活长度测量群体平均存活时间的延长。另一方面，对纤维化病症的治疗导致受治疗的受试者群体与仅接受载体的受试者群体相比死亡率降低。另一方面，对纤维化病症的治疗导致受治疗的受试者群体与未治疗的受试者群体相比死亡率降低。又一方面，对纤维^化病症的治疗导致受治疗的受试者群体与接受非本实施方案的化合物或其药学可接受的盐、代谢物、类似物或衍生物的药物的单一治疗的群体相比死亡率降低。优选地，死亡率降低约2%以上；更优选约5%以上；更优选约10%以上；最优选约25%以上。在一个优选方面，可以通过任何可重复的方式测量受治疗的受试者群体的死亡率降低。在另一个优选方面，可以例如在用活性化合物开始治疗之后计算群体中每单位时间内与疾病有关的死亡平均数，从而测量群体死亡率的降低。在另一个优选方面，还可以例如在完成活性化合物的第一轮治疗之后计算群体中每单位时间内与疾病有关的死亡平均数，从而测量群体死亡率的降低。另一方面，对纤维化病症的治疗导致肿瘤生长速率降低。优选地，相对于治疗前，治疗后的肿瘤生长速率降低至少约5%;更优选地，肺瘤生长速率降低至少约10%;更优选降低至少约20%;更优选降低至少约30%;更优选降低至少约40%;更优选降〗氐至少约50%;甚至更优选降低至少约60%;最优选降低至少约75%。可以通过任何可重复的测量方式测量肿瘤生长速率。在一个优选方面，根据每单位时间的肺瘤直径变化测量肿瘤生长速率。另一方面，对纤维化病症的治疗导致细胞增殖速率降低。优选地，治疗后的细胞增殖速率降低至少约5%;更优选至少约10%;更优选至少约20%;更优选至少约30%;更优选至少约40%;更优选至少约50%;甚至更优选至少约60%;最优选至少约75%。可以通过任何可重复的测量方式测量细月包增殖速率。在一个优选方面，例如通过测量每单位时间内组织样品中的分裂细胞数量而测量细胞增殖速率。另一方面，对纤维化病症的治疗导致增殖细胞比例降低。优选地，治疗后的增殖细胞比例降低至少约5%;更优选至少约10%;更优选至少约20%;更优选至少约30%;更优选至少约40%;更优选至少约50%;甚至更优选至少约60%;最优选至少约75%。可以通过任何可重复的测量方式测量增殖细胞比例。在一个优选方面，例如通过确定组织样品中分裂细胞数只寸未分裂细胞数来测量增殖细胞比例。在另一个优选方面，增殖细胞比例等于有丝分裂指数。另一方面，对纤维化病症的治疗导致细胞增殖范围或区域的尺寸减小。优选地，相对于治疗前的细胞增殖范围或区域的尺寸，治疗后的其尺寸减小至少约5%;更优选减小至少约10%;更优选减小至少约20%;更优选减小至少约30%;更优选减小至少约40%;更优选减小至少约50%;甚至更优选减小至少约60%;最优选减小至少约75%。可以通过任何可重复的测量方式测量细胞增殖范围或区域的尺寸。在一个优选方面，细胞增殖范围或区域的尺寸可以以细胞增殖范围或区域的直径或宽度测定。本文描述的方法可以包括鉴定需要治疗的受试者。在一个优选实施方案中，所述方法包括鉴定需要治疗的哺乳动物。在一个高度优选的实施方案中，所述方法包括鉴定需要治疗的人。可以通过任何指示可由治疗获益的受试者的方法实现对需要治疗的受试者的鉴定。例如，可以通过临床诊断、实验室检验或本领域技术人员已知的任何其它方法，包括鉴定方法的任何组合，来鉴定需要治疗的受试者。如本文其它地方所述，本文所述化合物可以制成药物组合物，如有需要，可以通过允许治疗疾病或病症的任何途径给药。优选的给药途径为口服给药。可以采取单剂给药形式给药，或者可以在一段时间内以分剂量或连续释放的制剂或给药方法(例如泵)来给予实施方案的化合物。但是，将实施方案的化合物给予受试者时，应对化合物的给药量和所选的给药途径进行选择，使得可以有效治疗疾病。实施方案的方法还包括本文描述的一种或多种化合物连同一种或多种其它治疗剂用于治疗疾病的用途。因此，举例来说，活性成分的组合可以为(l)共同配制和在組合制剂中同时给药或递送；(2)作为单独的制剂交替或平行递送；或(3)本领域已知的任何其它联合治疗方案。当以交替疗法递送时，本文描述的方法可以包括例如以单独的溶液剂、乳剂、混悬剂、片剂、丸剂或胶嚢剂或者通过以单独注射器中的不同注射剂顺序给予或递送活性成分。通常，在交替治疗的过程中，依次(即连续)给予有效剂量的各活性成分，而在同时治疗中，一起给予有效剂量的两种或多种活性成分。还可以使用各种顺序的间歇组合疗法。^t断试駘4皮;現为本文所述方法的一部分。例如，可以从患有纤维化病症(例如与p38或细胞因子有关的病症)的受试者中取得组织活检样品。可以检验活检样品，以确定样品中存在的p38活性水平(或细胞因子水平)；然后可以使样品与选定的实施方案化合物接触，并测量p38活性(或细胞因子水平)，以确定化合物是否具有期望的作用(例如，抑制p38或细胞因子活性，其抑制p38y的IC5o在约10pM至约500pM的范围内，优选在约10pM至约5pM或约100nM至约500pM的范围内，更优选在约50pM至约1(iM的范围内，甚至更优选在约50pM至约1的范围内，其抑制p38ot的ICso值是抑制p38y的ICso值至少2倍)。此检验可用于确定用此化合物治疗是否有可能对该受试者有效。或者，可以使样品与标记化合物(例如荧光标记的化合物或放射性标记的化合物)接触，然后检查样品并检测荧光或放射性信号，以确定p38在组织样品中的分布。在治疗过程中重复取得的活检样品也可以用于研究疗效。根据本说明书的教导，对本领域普通技术人员来说，使用本文所述化合物的其它诊断试验是显而易见的。因此，举例来说，一个实施方案提供确定p38蛋白在细胞或组织样品中的存在、位置和/或数量的方法。该方法包括a)在使实施方案的化合物可与p38MAPK结合的条件下使细胞或组织样品与该化合物接触；和b)确定该化合物在细胞或组织样品中的存在、位置和/或数量，从而确定p38MAPK在细胞或组织样品中的存在、位置和/或数量。可以通过揭示该化合物在细胞或组织中的存在、位置和/或数量的任何方法来确定该化合物在细胞或组织样品中的存在、位置和/或数量。例如，如前所述，可以使用放射性或荧光标记法。确定化合物的存在、位置和/或数量的其它方法对于技术人员是显而易见的。另一个实施方案提供的方法用于确定(l)化合物是否是对治疗患有炎性疾病的受试者有用的治疗剂，或(2)疾病的严重性，或(3)在用疾病緩解药物治疗的过程中的病程。该方法包括a)在用本文所述化合物或另一种疾病緩解药物治疗之前、过程中和之后由受试者获得细胞或组织样品；b)使该样品与该化合物接触；和c)确定与样品结合的化合物的量，其中化合物与p38MAPK的结合与样品中的p38MAPK的量相关。用本文所述化合物和方法治疗的疾病的具体实例COPD慢性阻塞性肺病(COPD)的特征在于肺内的慢性炎症过程，包括(l)在呼吸道和实质中的炎性细胞(嗜中性白细胞、巨噬细胞和SD8+T细胞)数量增加，(2)炎性细胞因子和趋化因子表达增加，和(3)蛋白酶(弹性蛋白酶、组织蛋白酶和基质金属蛋白酶MMP)数量增加。一般认为许多潜在的呼吸道炎症介质的产生和作用都依赖于应激诱导的MAPK或p38激酶级:f关。若干报道都支持pfp38激酶活化与肺部多血症事件的关联肺部微血管内皮细胞上LPS-和TNFa-诱导的细胞间粘着分子l表达、MMP9活化、缺氧诱导的对肺动脉细胞的刺激、在支气管上皮细胞中高渗透压诱导的IL-8表达以及增强的嗜酸性并立细力包移4于和存活。Trifilieff等人(2005/尸/wm2ac0/144:1002-10)报道，一种组合的腺苷受体拮抗剂、p38MAPK和磷酸二酯酶4型抑制剂CGH2466对例如译喘和COPD的疾病显示出有效的体外和体内抗炎活'l"生。Underwood等(2000v4淤/尸/ywo/Ce〃Afo/尸A;w'o/279:L895-L902)表明，有效的选择性p38MAPK抑制剂SB239063减少促炎细胞因子(包括IL-ip、TNF-a、IL-6和IL-8，它们已因其调节成纤维细胞增殖和基质产生的能力而与呼吸道纤维化相关联)的产生；导致肺内嗜中性白细胞的移行和活化减少。较早前，已发现同样的化合物能够改变与博来霉素诱导的慢性纤维化有关的反应。该抑制活性对p38的a和p异构体是选择性的。本文所述化合物和方法可用于治疗COPD。肺纤维化肺纤维化也称作特发性肺纤维化(IPF)、间质弥漫性肺纤维化、炎症性肺纤维化或纤维性肺泡炎，是以由肺泡炎引起的肺泡间纤维化组织异常形成为特征的炎性肺病和一组异质性疾病，包括炎性细胞浸润入肺泡隔膜中和产生纤维化。IPF的作用是慢性的、渐进的且通常是致命的。已在患有肺纤维化的患者肺内证实了p38MAPK活化。许多关于肺纤维化的研究已指出，一些细胞因子在肺内的持续和增大的表达与炎性细胞的募集和肺组织结构重塑之后的胞外基质组分累积有关。具体地说，已证实促炎细胞因子如TNFa和白介素IL-ip在肺炎和肺纤维化的形成中起主要作用。此外，促纤维化细胞因子如TGF卩和CTGF在肺纤维化的发病中也起至关重要的作用。Matsuoka抑制剂FR-167653改善博来霉素诱导的鼠的肺纤维化。而且，J^现一种具有组合的抗炎、抗氧化和抗纤维化作用的化合物吡非尼酮(5-曱基-l-苯基-2-(lH)-吡啶S同)在肺纤维化的实验模型以及临床研究中有效(Raghu等，1999爿m/i^w>O"O^eMW159:1061-1069;Nagai等，2002/"&r"MW41:1118-1123;Gahl等，2002Mo/GWzefMeto676:234-242;Azuma等，2002爿m/^甲>CWfC廳MW165:A729)。本文所述化合物和方法可用于治疗肺纤维化，例如IPF。肾纤维化无论初始损害的性质如何，肾纤维化都被视为肾病发展至终末期肾衰竭的共同最终途4圣。Stambe等(2004>/A^/ra/15:370-379)在肾纤维化大鼠模型中测试了Scios公司(SanFrancisco,CA)研发的活性(磷酸化)形式p38的抑制剂NPC31169，并报道了通过间隙体积、胶原IV沉积和结締組织生长mRNA水平评价的肾纤维化显著降低。本文所述化合物和方法可以用于治疗肾纤维化。平滑肌瘤子宫平滑肌瘤或纤维瘤是女性最常见的骨盆肿瘤，并且没有已知的长期有效的可用药物疗法。平滑肌瘤的特征在于增加的细胞增殖和組织纤维化。在培养的子宫肌层和平滑肌瘤平滑肌细胞中测试了吡非尼酮对细胞增殖和胶原表达的作用，发现其为子宫肌层和平滑肌瘤细胞增殖的有效抑制剂(Lee等，1998/C""五"^c77'rto/Meto683:219-223)。本文所述化合物和方法可用于治疗平滑肌瘤。心内膜心肌纤维化心内膜心肌纤维化(EMF)是一种以限制型心肌病发展为特征的疾病。EMF有时被视为包括吕弗勒(L6ffler)心内膜炎(非热带嗜酸性粒细胞性心内膜心肌纤维化或室壁纤维增生性心内膜炎伴嗜酸粒细胞增多)的单一病程谱的组成部分。在EMF中，潜在病程导致心脏内膜表面的不规则纤维化，使顺应性下降，并且最终更普遍地累及心肌内膜表面的限制性生理。心内膜纤维化主要累及右和左心室的流入道，并可以累及房室瓣，导致三尖瓣和二尖瓣回流。已表明MAPK活化有助于EMF中的心律失常性心房结构重构。本文所述化合物和方法可以用于治疗和/或预防心内膜心肌纤维化。其它炎性疾病已经将许多自身免疫性疾病和与慢性炎症有关的疾病以及急性反应与p38MAP激酶的活化和炎性细胞因子的过表达或失调联系起来。这些疾病包括但不限于类风湿性关节炎、类风湿性脊推炎；骨关节炎；痛风，其它关节炎性疾病；脓毒症；脓毒性休克；内毒素休克；革兰氏阴性脓毒症；中毒性休克综合征；哞喘；成人呼吸窘迫综合征；慢性阻塞性肺病；慢性肺炎；炎性肠病；克罗恩病；银屑病；湿渗；溃疡性结肠炎；胰腺纤维化；肝纤维化；急性和慢性肾病；过敏性肠综合征；热病(pyresis);再狭窄；脑型痴；中风和局部缺血性损害；神经损伤；阿尔茨海默病；亨廷顿病；帕金森病；急性和慢性疼痛；变应性鼻炎；变应性结膜炎；慢性心力衰竭；急性冠状动脉综合征；恶病质；疾疾；麻风病；利什曼病；莱姆病；赖特综合征；急性滑膜炎；肌肉变性；粘液嚢炎；腱炎；腱鞘炎；疝性、破裂性或脱垂性推间盘综合征；骨硬化症；血栓形成；癌症；再狭窄；硅沉着病；肺肉瘤病；骨吸收疾病，例如骨质疏+>症；移植物抗宿主反应；和自身免疫性疾病，例如多发性硬化、狼疮和纤维肌痛；AIDS和其它病毒性疾病，例如带状疱渗、单纯疱渗I或II、流感病毒和巨细胞病毒感染；以及糖尿病。许多研究已经表明，通过遗传或化学方法降低p38MAP激酶、其上游激活物或其下游效应子的活性使炎症反应减弱，并预防或最小化组织损伤(参见例如English等，20027>e"<is/72armaco/23:40-45;和Dong等，2002^朋izAev/附mw"o/20:55-72)。因此，还抑制过量或失调的细胞因子产生并且可抑制一种以上的促炎细胞因子的p38活性抑制剂可以用作抗炎剂和治疗剂。此外，与p38MAP激酶相关性炎症反应有关的大量疾病表明，还需要治疗这些病症的有效方法。心血管疾病。炎症和白细胞激活/浸润在包括动脉硬化症和心力衰竭的心血管疾病的发作和发展中起主要作用。急性p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径抑制减少心肌局部缺血/再灌注损伤中的组织损伤和白细胞累积。本文所述化合物和方法可以用于治疗心血管疾病。多发性硬化。中枢神经系统内的炎症发生在诸如多发性硬化的疾病中，并且导致轴突才几能障碍和破坏。体外和体内观察都已表明，一氧化氮(NO)在介导炎性轴突病变中起重要作用。p38MAP激酶经NO暴露而被激活，已表明抑制p38信号转导产生神经元和轴突存活作用。OCM和IGF-1降低经NO暴露后的皮质神经元中的p38活化，并改善暴露于NO后的培养物中的轴突存活力，这种存活力是依赖于促分裂原活化蛋白激酶^包外信号相关激酶信号转导的过程。本文所述化合物和方法可以用于治疗多发性硬化。原发性移植物无功能。非特异性炎症与原发性移植物无功能(PNF)有关。炎性胰岛损伤至少部分由促炎细胞因子介导，所述促炎细胞因子例如由定居胰岛的巨噬细胞产生的白介素-ip(IL-ip)和肺瘤坏死因子a(TNFot)。已知p38途径参与单核细胞-巨噬细胞谱系细胞中的细胞因子产生。p38化学抑制剂SB203580对p38途径的抑制遏制了与脂多糖(LPS)和/或炎性细胞因子接触的人胰岛中的IL-1(3和TNFa产生。尽管IL-ip主要由定居巨噬细胞产生，但是发现胰管细胞和胰岛血管内皮细胞是分离的人胰岛内的另一种IL-1(3细胞源。SB203580还在经治疗的胰岛中抑制诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环加氧酶-2(COX-2)的表达。此外，在移植前1小时用SB203580处理的人胰岛显示出显著改善的移植物机能。本文所述化合物和方法可以用于改善临床胰岛移植中的移植物存活急性肾损伤。顺铂是一种重要的化疗药，但是会引起肾损伤。这种急性肾损伤部分由肿瘤坏死因子a(TNFa)介导。顺铂激活p38MAPK并诱发癌细胞凋亡。p38MAPK活化导致缺血性损伤和巨噬细胞中的TNFa产生增加。在体外，顺铂在近端小管细胞中引起p38MAPK的剂量依赖性活化。抑制p38MAPK活化导致对TNFa产生的抑制。在体内，用单剂顺铂治疗的小鼠出现严重的肾机能障碍，其伴随有肾脏p38MAPK活性提高和浸润白细胞增加。但是，与用顺铂+载体治疗的动物相比，用p38MAPK抑制剂SKF86002连同顺铂一起治疗的动物显示出较小的肾机能障碍、不太严重的组织损伤和较少的白细胞。本文所述化合物和方法可以用于预防急性肾损伤。牙周炎。促炎介质緩激肽(BK)在体外刺激白介素-8(IL-8)在人齿龈成纤维细胞中的产生，并在包括牙周炎在内的各种炎性疾病的发病机理中起重要作用。特定p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)抑制剂SB203580减少由BK和IL-ip组合刺激的IL-8产生以及IL-1(3刺激的IL-8产生。本文所述4匕合物和方法可以用于治疗或预防牙周炎。在某些实施方案中，任一种上述用途的p38抑制剂都不选自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage69</formula>药物组合物尽管有可能将本文所述化合物单独给药，但是优选可将本文所述化合物制成药物组合物。因此，在又一方面，提供可用于本发明方法的药物组合物。更具体地说，本文所述药物组合物尤其可用于治疗或预防炎性疾病，例如与p38活性或细胞因子活性或其任意组合相关的病症。药物组合物为可在体外或体内或经这两种方式给予受试者以治疗或緩解病症的任何组合物。在一个优选实施方案中，药物组合物可以体内给药。受试者可以包括一种或多种细胞或组织，或有才几体。优选的受试者为哺乳动物。哺乳动物包括任何哺乳动物，作为非限定性实例，例如为牛、猪、绵羊、山羊、马、骆驼、水牛、猫、狗、大鼠、小鼠和人。高度优选的哺乳动物受试者为人。在一个实施方案中，药物组合物可用药学上可接受的赋形剂配制，所述赋形剂例如为载体、溶剂、稳定剂、辅剂、稀释剂等，取决于具体的给药方式和剂型。通常应配制药物组合物以获得生理相适的pH，并根据制剂和给药途径，可在约pH3至约pH11的范围内，优选在约pH3至约pH7的范围内。在替代实施方案中，优选将pH调节至约pH5.0至约pH8的范围内。更具体地说，药物组合物可以包括治疗或预防有效量的至少一种本文所述化合物，连同一种或多种药学上可接受的赋形剂。任选地，药物组合物可以包括本文所述化合物的组合，或者可以包括可用于治疗或预防细菌感染的第二种活性成分(例如抗细菌剂或抗纟鼓生物剂)。例如用于胃肠外或口服给药的制剂最通常为固体、液体溶液剂、乳剂或混悬剂，而用于肺部给药的吸入制剂通常为液体或粉末，且通常优选粉末制剂。还可以将优选的药物组合物配制成在给药前用生理相容的溶剂重配的冻干固体。还可以将替代的药物组合物制成糖浆剂、霜剂、膏剂、片剂等。术语"药学上可接受的赋形剂"是指用于给予诸如本文所述化合物的药剂的赋形剂。该术语是指可以给药且没有过度不当毒性的任何药用赋形剂。药学可接受的赋形剂部分由要给予的具体组合物以及用于给予该组合物的具体方法决定。因此，存在各种各样适宜的药物組合物剂型(参见例》口Remington'sPharmaceuticalSciences)。适宜的赋形剂可以为载体分子，包括大的、緩慢代谢的大分子，例如蛋白质、多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、聚氨基酸、氨基酸共聚物和失活病毒粒子。其它示例性的赋形剂包括抗氧化剂，例如抗坏血酸；螯合剂，例如EDTA;碳水化合物，例如糊精、羟基烷基纤维素、羟基烷基曱基纤维素、石更脂酸；液体，例如油、水、盐水、甘油和乙醇；湿润剂或乳化剂；pH緩沖物质；等等。脂质体也包括在药学上可接受的赋形剂的定义内。可以将本文所述的药物组合物制成适于预期给药方法的任何形式。当计划口服使用时，可以制备例如片剂、软锭剂、糖锭剂、水性或油性混悬剂、非水性溶液剂、可分散的粉剂或颗粒剂(包括微粉化的颗粒或纳米颗粒)、乳剂、硬或软胶嚢剂、糖浆剂或酏剂。可以根据本领域已知的用于制备药物组合物的任何方法制备计划口服使用的组合物，这类组合物可以含有一种或多种包括甜味剂、调，朱剂、着色剂和防腐剂的物质，以便提供适口的制剂。特别适合与片剂一起使用的药学上可接受的赋形剂包括例如惰性稀释剂，例如纤维素、碳酸钓或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；崩解剂，例如交联聚维酮、玉米淀粉或海藻酸；结合剂，例如聚维酮、淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石粉。片剂可以为未包衣的，或者可以用已知技术(包括匸徵嚢化)包衣，以延迟其在胃肠道内的崩解和吸收，从而在一段时间内提供持续作用。例如，可以单独或与石蜡一起4吏用延时物质，例如甘油单硬脂酸酯或甘油二硬脂酸酯。还可以将口服使用的制剂作为硬明胶胶嚢提供，其中活性成分与惰性固体稀释剂(例如纤维素、乳糖、磷酸钩或高岭土)混合，或者制成软明月交胶嚢剂，其中活性成分与非水性或者油性介质(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇、花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。在另一个实施方案中，可以将药物组合物配制成混悬剂，其包含实施方案的化合物，该化合物与至少一种适于制备混悬剂的药学上可接受的赋形剂混合。在又一个实施方案中，可以将药物组合物配制成适于通过加入适宜的赋形剂而制备混悬剂的可分敉粉末和颗粒。适合连同混悬剂使用的赋形剂包括悬浮剂，例如羧曱基纤维素钠、曱基纤维素、羟丙基曱基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、西黄蓍胶、阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂，例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、环氧烷与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂肪醇的缩合产物(例如十七碳乙烯氧基十六醇)、环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯)；以及增稠剂，例如卡波姆、蜂蜡、硬石蜡或十六烷醇。混悬剂还可以含有一种或多种防腐剂，例如乙酸、对羟基苯曱酸曱酯和/或对羟基苯甲酸正丙酯；一种或多种着色剂；一种或多种调味剂；以及一种或多种甜味剂，例如蔗糖或糖精。药物组合物还可以为水包油的乳剂形式。油相可以为档、物油，例如橄榄油或花生油，^矿物油，例如液体石蜡，或这些的混合物。适当的乳化剂包括天然树胶，例如阿拉伯树胶和西黄蓍胶；天然磷脂，例如大豆卯磷脂、衍生自脂肪酸的酯或偏酯；己糖醇酐，例如失水山梨醇单油酸酯；以及这些偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如聚氧乙烯失水山梨醇单油酸酯。乳剂还可以含有甜味剂和调味剂。糖浆和酏剂可以与甜味剂如甘油、山梨糖醇或蔗糖一起配制。这样的制剂还可以含有緩和剂、防腐剂、调味剂或着色剂。此外，药物组合物可以为无菌注射制剂形式，例如无菌可注射水性乳剂或油性混悬剂。可以根据已知技术，使用那些适当的分散剂或湿润剂和上面提及的悬浮剂配制该乳剂或混悬剂。无菌注射制剂还可以为在无毒的、胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液剂或混悬剂，例如在1，2-丙二醇中的溶液。还可以将无菌注射制剂制成冻干粉末。在可以使用的可接受的载体和溶剂中有水、林格氏溶液和等渗的氯化钠溶液。此外，还可以将无菌的不挥发油用作溶剂或悬浮介质。为此，可以使用任何温和的不挥发油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸，例如油酸，同样可以用在注射剂中。为了获得药物组合物的稳定的水溶性剂型，可以将本文所述化合物的药学上可接受的盐溶解在有机酸或无机酸的水溶液中，例如0,3M琥珀酸溶液，或者更优选柠檬酸溶液。如果不能获得可溶的盐形式，则可以将化合物溶解在适当的共溶剂或共溶剂组合中。适当的共溶剂的实例包括乙醇、丙二醇、聚乙二醇300、聚山梨醇酯80、甘油等，其浓度为总体积的约0-60%。在一个实施方案中，将活性化合物溶解在DMSO中并用水稀释。药物组合物还可以为活性成分的盐形式在适宜水性溶媒(例如水或等渗盐水或葡萄糖溶液)中的溶液形式。还提出了已通过取代或加成化学或生化部分而被改变的化合物，所述化学或生化部分例如通过酯化、糖基化、PEG^f匕等使化合物更适于递送(例如提高溶解性、生物活性、适口性、降低副反应等)。在一个优选实施方案中，可以将本文所述化合物配制成适用于低溶解性化合物的液体型制剂用于口服给药。液体型制剂通常可以增强这些化合物的口服生物利用度。因此，优选的药物组合物包含治疗或预防有效量的本文所述化合物，连同至少一种药学上可接受的赋形剂(选自中链脂肪酸或其丙二醇酯，例如食用脂肪酸如辛酸和癸酸脂肪酸的丙二醇酯)和药学上可接受的表面活性剂(例如聚氧乙烯(40)氢化蓖麻油)。在替代的优选实施方案中，可以加入环糊精作为水溶性增强剂。优选的环糊精包括a-、(3-和Y-环糊精的羟丙基、羟乙基、葡糖基、麦芽糖基和麦芽三糖基杉于生物。特别优选的环糊精溶解性增强剂为羟丙基-o-环糊精(BPBC)，其可以加入到任何上述组合物中，以进一步改善实施方案化合物的水溶性特征。在一个实施方案中，组合物包括约0.1%至约20%的羟丙基-0-环糊精，更优选约1%至约15%的羟丙基_0_环糊精，甚至更优选约2.5%至约10°/。的羟丙基-0-环糊精。所用的溶解性增强剂的量取决于组合物中的实施方案化合物的量。药物组合物含有的活性成分总量足以实现预期疗效。更具体地说，在某些实施方案中，药物组合物含有治疗有效量(例如，SAPK调节化合物的量有效预防或治疗炎性疾病或病症的症状，其中该化合物表现出的抑制p38MAPK的ICso在约100至约1000一的范围内，优选在约200^M至约800^的范围内)。可以与载体物质组合而生产单位剂型的化合物的总量随治疗的宿主和具体给药方式而变。优选地，配制组合物，从而将剂量介于0.01-100mg/kg体重/日之间的SAPK调节化合物给予接受该组合物的患者。实施例1依据化合物在体外通过p38MAP激酶抑制ATF2磷酸化的能力进行筛选。在该体外测定中化合物抑制ATF2磷酸化的能力与p38MAP激酶的抑制作用和体内TNFa表勤目关，并因此成为潜在体内治疗活性的指示剂(Raingeaud,J,等，1995/5/。/.C72em.270:7420-7426;Brinkman，M.N.等，1999/所o/.C7^m.274:30882-30886;和Fuchs，S,Y.等，/扁.C7z亂275:12560-12564，2000)。所有激酶和底物ATF2都得自Upstate(Charlottesville,VA)。p38MAP激酶是具有氨基末端GST融合的重组人全长蛋白，其在大肠杆菌中表达并将其纯化。ATF2是含有在大肠杆菌内表达的人ATF2的氨基酸19-96的GST融合蛋白。将所有蛋白分成等份试样并贮存于-8(TC。使用含有25mMHEPESpH7.5、10mMMgCl2、2mMDTT、20mM|3-甘油磷酸酯、0.1mMNa3V04、40ATP和1.25jiMATF2以及6ngp38a蛋白、12ngp38(3蛋白、1.5ngp38y或0.4ngJNK2a2的测定緩冲液进行p38MAP激酶测定。将化合物连续稀释在DMSO中，并使用2|iL不同浓度的试验化合物。溶媒对照仅仅接受DMSO。将试-睑化合物与20|il酶于激酶緩沖液(25mMHEPESpH7.5、10mMMgCl2、2mMDTT、20mMP-甘油磷酸酯和0.1mMNa3V04)中的溶液于室温预温育15分钟。通过在激酶緩冲液中加入30^底物溶液获得40ATP和1.25]LiMATF2的终浓度，从而引发反应。将反应物于37。C温育30分钟，并通过加入18pi200mM的EDTA终止反应。使用ELISA法测量ATF2对Thr69的磷酸化作用。用50pi激酶反应物于37°C包被高结合的96孔板达1小时。用200pi洗涤緩冲液(25mMTrisHClpH8.3、192mM甘氨酸、0.1%SDS和0.05%吐温(Tween)-20)洗涤包被板三次。然后用SuperBlock的TBS溶液(Pierce,37535)洗涤板三次。封闭之后，将板与50nl兔抗磷酸ATF2抗体(CellSignaling,9221L,l:500)于37。C温育30分钟。用洗涤緩冲液洗涤板三次，之后与50pl缀合HRP的山羊抗兔抗体(CellSignaling,7074,l:500)于37。C温育30分钟。然后用洗涤緩冲液洗涤板三次，之后于室温与50piUltraTMB-ELISA(Pierce,34028)温育8分钟。最后，加入50(il磷酸(lM)终止反应，并用SpectmMax250读板仪于450nm读取板吸光度。在该体外测定中4匕合物抑制ATF2的磷酸化。优选化合物表现出的ICso值小于约100(xM,优选小于约1|iM。实施例2才艮据化合物在体外抑制TNFot由脂多糖(LPS)刺激的THP-1细胞释放的能力进行筛选。在该体外测定中化合物抑制TNFa释^L的能力与对p38活性和TNFa的抑制相关，并因此成为潜在体内治疗活性的指示剂(LeeJ.C.等，1993j朋.7V.7:5t/.696:149-170;和1994A^mre372:739-746)。将得自ATCC的THP-1细胞(TIB202)于37°C、5%C02下维持在含有4.5g/L葡萄糖并补加10%胎牛血清、1%青霉素/链霉素和50,P-巯基乙醇的RPMI1640培养基(MediaTech，Herndon,VA)中。开始时，将试验化合物溶解在含有1%DMSO(体积/体积)的RPMI培养基中。然后，将化合物连续稀释在RPMI培养基中，用于所有后续稀释度。在无菌条件下进行测定。收集培养密度为6-8xl05个细胞/ml的THP-1细胞，并以1(^个细胞/ml重悬浮在RPMI培养基中。将100的重悬浮细胞加至每个孔中，每个孔装有100|il试验化合物。以二倍终浓度制备试验化合物。最终的DMSO浓度不大于0.5%(体积/体积)。在用脂多糖(LPS)(SigmaL-2880,4mg/ml的PBS母液)进行刺激之前，细胞与化合物在37。C、5%(302下预温育60分钟。每个孔中分别用于TNFoc和IL-1(3释放的最终LPS浓度分别为10pg/ml或30^ig/ml。未刺激的对照细胞悬浮液仅接受PBS溶媒。针对TNFa和IL-ip释放，细胞混合物分别培养18或48小时。取150iil上清液并转移至新的板中，贮存于-20。C，直至进一步分析。使用ELISA试剂盒测量TNFa和IL-l(3水平。发光装置用作读板器。用非线性回归进行分析，得到剂量-反应曲线。ICso计算值为使TNFa或IL-lj3水平降低50%的试验化合物浓度。在该体外测定中，化合物抑制TNFa或IL-1|3或TNFa和IL-ip这二者的释放。优选化合物针对TNFa和/或IL-ip显示出的IC50值小于100(iM,优选小于约1^M。实施例3根据化合物在体外抑制TNFoc从脂多糖(LPS)刺激的原代人外周血单核细胞(PBMC)释放的能力进行筛选。在该体外测定中，化合物抑制TNFa释放的能力与p38活性抑制相关，并因此成为潜在的体内治疗活性的指示剂(2002OsteoaW/znY^&CaWz7age10:961-967;以及Laufer,S.A.和Wagner,G.K.2002ZMW.CTzem.45:2733-2740)。通过经3-8名个体供血者的合并血清的Ficoll-HyPaque密度梯度进行的差速离心，分离出人外周血单核细胞(PBMC)。分离的PBMC含有约10%的CD-14阳性单核细胞、90%的淋巴细胞和<1%的粒细胞和血小板。在存在和不存在连续稀释的试验化合物的情况下，以一式两份在无血清的GIBCOTMRPMI培养基(Invitrogen，Carlsbad,CA)中于37。C在聚苯乙烯板上培养并用脂多糖(LPS;50ng/ml;Sigma,St.Louis,MO)刺激PBMC(1(^个/ml)达24小时。使用商购试剂盒(MDSPanlabs#309700)通过ELISA测定细胞上清液中的TNFa水平。在该测定中，优选的化合物抑制TNFa释放的IQ。值小于约100|aM,优选小于约1nM。实施例4根据化合物在体内动物模型中抑制TNFa释放的能力进行筛选(参见例如GriswoldD.E.等，1993i>wwC7/".T^y.19:243-248;Badger，A.M.等，1996/尸/zawmco/.TT^r.279:1453-1461;Dong,C.等，2002^朋m.iev./奶mw"o/.20:55-72(和其中引用的参考文献)；Ono，K.和Han，J.2000Ce〃w/w<SVg"a〃/"g12:1-13(和其中引用的参考文献)；和Griffiths,J.B.等，1999Cwr.//2ewmato/1:139-148)。虽然不希望受任何具体理论的束缚，但是一般认为该模型对TNFoc的抑制源于化合物对p38MAP激酶的抑制。将雄性Sprague-Dawley大鼠(0.2-0.35kg)随机分成6组或更多组，并通过静脉内滴注或推注给药，或者在所有情况下将试验化合物以适宜的制剂口服给药。滴注或推注结束后30分钟以及口服给药后1-2小时，IV给予脂多糖大肠杆菌/0127:B8(0.8mg/kg)。用LPS处理后1.5小时收集血样。使用Biosource的ELISA试剂盒(KRC3011C)测定血清的TNFa水平，并与溶4某处理对照的该水平相比较。优选的化合物在该体内测定中抑制TNFa释放。优选化合物显示出的EDso值小于500mg/kg，优选小于400mg/kg，优选小于200mg/kg,优选小于100mg/kg,更优选小于50mg/kg，更优选小于40mg/kg，更优选小于30mg/kg，更优选小于20mg/kg，更优选小于10mg/kg。测定化合物抑制p38的ICso的方法包括本领域已知的允许定量^r测上述p38MAPK的^f壬一种下游底物的任何方法。因此，这些方法另外包括但不限于检测受p38单独调节或由基因阵列调节的基因表达。实施例5激酶测定在"P个ATP存在下，通过ATF-2的磷酸化确定P38的激酶异构体P38y和P38a的活性。在存在或不存在抑制剂的情况下确定32P对ATF-2的掺入情况。在该生物化学测定中测试本文所述化合物对P38y和P38a激酶活性的抑制。将化合物溶解在水或DMSO中，并使用适于稀释和作为溶媒对照的溶剂以0-10mM的不同浓度测试。得到作为活化和纯化的重组蛋白的酶P38y和P38a(Upstate，Charlottesville,VA)。在最终反应中使用24.8nM的活化酶。在于下列緩冲液(lMHEPESpH7.4、500mMDTT、1%TritonX-100和10mg/mlBSA)中进行反应之前先稀释酶。反应在制备成2倍原液(1MHEPESpH7.4、500mMDTT和1%TritonX-100)的以下溶液中进行，反应中存在6.25一ATP的非》文射性ATP(CellSignaling,Beverly,MA)。为了确定ATF-2的磷酸化作用，将7.5kiM浓度的32P-，ATP3000Ci/mmol加入到每个反应中。使用3|iMATF-2(CellSignaling,Beverly,MA)作为激酶底物。作为组合酶反应的第一步，将活化激酶和抑制剂或适当的溶媒对照加入到反应緩冲液中，并在室温下温育30分钟。加入ATF-2和ATP混合物引发激酶反应。每个反应的终体积为20nl，并在室温下进行30分钟。在30分钟温育之后，加入80|ilLaemmlie緩沖液。随后在还原条件下用SDS-Page(BioRad，Hercules,CA)分离20%的反应物。在电泳后，将凝胶于室温对3￥-增感屏过夜曝光，并使用磷光计StormSystem(AmershamBiosciences,Piscataway,NJ)分析。在背景校正之后定量所获得的信号，使用未抑制的激酶活性和溶媒对照作为0%抑制计算为抑制百分率。在存在不同抑制剂浓度的情况下，使用Kaleidagraph(SynergySoftware,Reading,PA)对激酶活性作图，以确定每种化合物的EQo，并测试P38激酶。TNFa诱导的抑制在ATCC推荐的常规组织培养条件下培养THP-1(ATCC，Rockville，MD)。在试验前18小时，将细胞以500,000个细胞/孔的密度铺板在96孔形式的含1%血清和0.25ml培养体积的常规培养基中。将化合物加入每个孔中(一式三份)，每个测定中都包括适宜的溶剂对照。每个测定包括1nM/ml的p38抑制剂SB203850(Upstate,Waltham,MA)作为阳性对照。为诱导TNPa表达，在加入化合物后30分钟将1昭/mlLPS加至每个孔。在组织培养条件下温育4小时后，通过离心(IO分钟，1000rpm,Beckman台式离心机)沉淀细胞，并收集一部分无细胞上清液，以10倍稀释度用于在TNFa特异性ELISA中定量(R&DSystems,Minneapolis,MN)。冲艮据制造商提供的指引进行TNFaELISA。检测TNFa(pg/ml),并将其作为对溶剂对照中的TNFa表达标准化的分数活性作图。在基于细胞的测定中测试的化合物毒性79将由于破碎的细胞膜产生的LDH释放用作细胞毒性的测量。使用市售诊断试剂盒(RocheDiagnostics,目录号1644793)由其酶活性检测LDH。为了与先前试验中诱导的TNFoc表it^目一致，使用THP-1细胞确定细胞毒性。如之前对TNFa诱导抑制测试的描述，在处于1%血清和常规组织培养条件下以96孔形式培养细胞。加入不同浓度的化合物，一式三份。各测定使用适宜的溶剂对照。加入化合物后在常规组织培养条件下培养细胞18小时。在此培养阶段后，将Triton-X-100(2%体积/体积)力。入至未处理细胞启动阳性对照，并再温育10分钟，以完全裂解细胞。随后通过离心沉淀细胞，并取出一部分上清液，按照制造商的说明分析LDH酶活性。数据通常表示为％细胞毒性，归一化至Triton-X-lOO裂解细胞为100%细胞毒性。实施例6式(l)化合物如正上方所示流程合成。R-取代的3-酰基吡啶(化合物2)得自商业来源或经已知方法制备，其与巯基乙酸乙酯阴离子反应，形成噻吩并[2,3-b]吡梵衍生物(化合物3)。化合物3被氧化为N-氧化物(化合物4),其在用乙酸酐处理继之以随后水解时转变为吡啶酉同(化合物5)。在乙酸铜存在下，使用已知方法，例如流程1的方法，使用4-氯苯基硼酸对化合物5进行N-芳基化。化合物1为式I化合物的实例。式I化合物的其它实例可以按类似方式合成。实施例71.U3A式(9)化合物如正上方所示流程合成。用二异丙基氨基锂使2-曱硫基-4-甲基嘧啶去质子化，接着用适宜的N,O-二曱基羟酰胺(化合物l)处理，得到相应的酮(化合物2)。后者通过与亚硝酸钠的乙酸溶液反应而转变为oc-肟酮(化合物3)。化合物3与N-苄氧羰基(Cbz)-保护的哌啶-4-甲醛缩合，得到N-羟基咪唑(化合物4)，其通过在常用条件下还原以形成咪唑中间体(化合物5)并后接甲基化而转变为N-甲基-咪唑(化合物6)。在氧化以形成砜(化合物7)后，曱磺酰基被胺取代，得到氨基嘧咬衍生物(化合物8)。最后在标准条件如HBr的乙酸溶液中脱去哌啶氮的保护基，得到目标取代的咪唑(化合物9)。化合物9为式II化合物的实例。式II化合物的其它实例可以按类似方式合成。实施例8式(4)化合物按照已知方法(参见J.Org.Chem.,62,17,5908-5919)如正上方所示流程合成。频哪酮阴离子与草酸乙酯反应，得到5,5-二曱基-2，4-二氧代己酸的乙酸乙酯(化合物1)。化合物1与适宜取代的肼反应得到吡唑(化合物2)，其通过常用方法而转变为目标化合物4。化合物4是式III化合物的实例。式III化合物的其它实例可以按类似方式合成。实施例9式(4)化合物如正上方所示流程合成。通过用乙醇/氨处理4-曱硫基曱基苯曱酸乙酯制备的苯曱脒(化合物l)与oc-氯酮(化合物2)反应，得到咪唑(化合物3)。在标准条件(例如所示的过硫酸钾)下氧化中间体3后获得目标化合物4。化合物4为式IV化合物的实例。式IV化合物的其它实例可以按类似方式合成。实施例10将靶向p38a或p38y的短发夹RNA(shRNA)导入培养细胞中。MISSIONTRCshRNA慢病毒颗粒得自SigmaAldrich(StLouis，MO)。这些自失活复制缺陷型病毒颗粒设计用于由U6启动子表达shRNA,并允许噪呤霉素选4斧感染细胞。用于该研究的shRNA设计用于靶向人p38y(含有SEQIDNo:l-4的编码区的慢病毒颗粒)、人P38a(含有SEQIDNo:5-8的编码区的慢病毒颗粒)。第一个对照慢病毒颗粒编码的shRNA携带至少5个针对所有已知人和小鼠基因的错配，且不耙向任何已知的人或小鼠基因。第二个对照慢病毒颗粒不表达shRNA。设计用于表达绿色荧光蛋白(GFP)的第三个对照慢病毒颗粒用于优化感染条件。HFL1细胞(ATCC,Rockville，MD)于37。C和5%C02下保持于补加L-谷氨酸盐、10%胎牛血清、碳酸氢钠(1.5g/L)和青霉素/链霉素的F12K培养基(MediaTech,Hemdon，VA)中。细胞在感染前1天被铺板在24孔板中，在感染时约2/3汇合。为进行感染，弃去原培养基，更换为含有0-12jig/mL海美溴铵(SigmaAldrich,St,Louis，MO)的新鲜培养基，然后以感染复数(MOI)为l-5加入慢病毒颗粒。24小时后，弃去感染培养基，更换为新鲜培养基。对于所有感染后步骤，细胞根据需要进行传代，以将原液保持在5和完全汇合之间。在感染后的1-3天之间，将细胞置于0.25-1吗/mL终浓度的嘌呤霉素选择之下，所述终浓度基于未感染细胞的嘌呤霉素敏感性确定。选择保持5-10天，选择过程通过观察用设计用于表达GFP的慢病毒转染的细胞以及未感染细胞的存活力丧失来评^f介。HFL1细胞被〗艮感染(无病毒)，或用设计用于赋予嘌呤霉素抗性并表达以下之一的慢病毒感染靶向人p38a的shRNA(SEQIDNO:5-8)、耙向人p38y的shRNA(SEQIDNO:l-4)、不靶向已知人或小鼠基因的shRNA、无表达(对照病毒)或绿色荧光蛋白。NIH3T3细月包(ATCCRockville，MD)保持在补加L-谷氨酸盐、10%胎牛血清、碳酸氢钠(1.5g/L)和青霉素/链霉素的DMEM培养基(MediaTech，Herndon，VA)中。感染细月包，并进行如上所述的噪呤霉素选择。NIH3T3细胞被假感染(无病毒)，或用设计用于赋予嘌呤霉素抗性并表达以下之一的慢病毒感染靶向小鼠p38a的shRNA(SEQIDNO:5-8)、靶向小鼠p38y的shRNA(SEQIDNO:l-4)、不輩巴向已知人或小鼠基因的shRNA、无表达(对照病毒)或绿色荧光蛋白。实施例11分离mRNA并使用定量PCR测定mRNA水平。使用RNaqueous96RNA分离试剂盒(Ambion，Austin,TX)，按照生产商的说明书，由约15,000~150,000个细胞获得RNA。使用TaqMan⑧逆转录试剂(AppliedBiosystems，Branchburg,NJ)和随才几六聚体引物，按照生产商的说明书，将RNA转变为cDNA。按照生产商的说明书，使用以上获得的cDNA、市售探针引物组(TaqMan⑧基因表达阵列，AppliedBiosystems)和TaqManUniversalPCRMasterMix(AppliedBiosystems,Branchburg，NJ)，在AppliedBiosystems7900HT序列检测系统(AppliedBiosystems，Branchburg,NJ)上进4亍定量PCR反应，一式三份。使用设计用于扩增人甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH;内源对照)、人p38ot和人p38Y的探针/引物组，对HFL1细胞操作3块板。使用设计用于扩增小鼠甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH;内源对照)、小鼠p38a和小鼠p38y的探针/引物組，对N1H3T3细胞操作3块板。数据使用△△Ct法分析，其中输入RNA的水平使用甘油醛-3-磷酸脱氢酶作为内源对照标准化。循环阈值(Ct)得自扩增图的几何相。基因表达的相对水平运用下列公式求出AACt=(平均值Ct*析*GAPDH-平均值Ct对照GAPDH)-(平均值Ct分析*p38—平均值ct对怖M8)其中84平均值Ct分躲GAPDH为采用GAPDH探针引物组的分析物(慢病毒处理的)细胞系的平均a值平均值Ct对照GAPDH为采用GAPDH探针引物組的对照细胞(未处理的)的平均Ct值平均值Ct分析物p38为采用p38(a或力探针引物组的分析物(慢病毒处理的)细胞系的平均Ct值平均值Ct对照浅为采用p38探针引物组的对照细胞(未处理的)的平均Ct值数据报告为在使用GAPDH内源对照校正输入RNA水平时慢病毒处理的细胞相比于未处理细胞的相对p38mRNA水平。对选定shRNA构建体观测到的p38mRNA水平在下面实施例12表1中提供。实施例12胶原水平的测定。正常HFL1细胞或用慢病毒感染并用嘌呤霉素选择的细胞于37。C和5%C02下在补加L-谷氨酸盐、10%月台牛血清、碳酸氢钠(1.5g/L)和青霉素/链霉素的F12K培养基(MediaTech,Hemdon,VA)中生长。对于胶原测定，将细胞以约6xl05个细胞/孔的密度铺板在6孔板中的2mL/孔饥饿培养基(补加L-谷氨酸盐、0.1%胎牛血清、碳酸氢钠(1.5g/L)和青霉素/链霉素的F12K培养基)中。16_20小时后，弃去原培养基，更换为补加20|ig/mL抗坏血酸(EMScience,Gibbstown,NJ)和10|iML-脯氨酸(Calbiochem，LJolla,CA)的新鲜饥饿培养基。在更换该培养基后1小时，用5ng/mL(10ng/孔)转化生长因子-(31(TGF-卩；Chemicon/Millipore，Billerica，MA或SigmaAldrich,St.Louis,MO)处理细胞。在加入TGF-(3后40-48小时去除细胞培养基，并将细胞在250|xL补力口1.25%TritonX-100(Fisher,FairLawn,NJ)和全蛋白酶抑制剂混合物(Roche,Mannheim,Germany)的磷酸緩冲盐水(PBS)中进行裂解。使用细胞刮器或移液管尖M上刮出细胞，裂解物于-20'C冷藏。按类似方式处理用慢病毒感染并用噪呤霉素选择的NIH3T3细胞和NIH3T3细胞，只是F12K培养基被DMEM(Mediatech，Herndon，VA)替代。DMEM培养基补加如同以上F12K—样的其它组分。收获的细胞解冻成;水。将200pL样品与等体积的0.5M乙酸在1.7mL《敖离心管中混匀。胶原浓度使用Sircol可溶性胶原测定(BiocolorLtd，Newtonabbey，NorthernIreland)4吏用改变的生产商方案确定。简而言之，加入1mlSircol染料试剂，振摇样品30-60分钟(时间长度对试验中的所有样品都是不变的)。然后用台式离心机以约10,000xg离心样品30分钟。使用移液管尖从沉淀中去除未结合的染料，小心操作以避免扰动沉淀。再离心样品4分钟，用移液管小心地由沉淀中去除残余的未结合染料。然后加入200nL生产商的碱性试剂，振摇样品，直至沉淀溶解。标准曲线通过在上述方案中使用已知量的胶原标准品(BiocolorLtd,Newtonabbey,NorthernIreland)建立。将100^iL标准品或样品加入至透明的96孔板，使用[xQuant分光光度计(Bio-Tek，Winooski,VT)测定540nm的样品吸光度。由以下表1以及图1和2可见，p38a或p38y表达降低导致胶原水平降低，而p38a和p38y水平增加导致胶原水平增加。因此，这些数据证实，抑制例如p38Y可导致胶原水平降低，并因此降低了纤维化。<table>tableseeoriginaldocumentpage87</column></row><table>实施例13评价了几种化合物对p38ot和p38yMAPK异构体的抑制。使用在WO2006/122154的实施例5中描述的测定确定1(:5()值，该专利通过引用全文结合到本文中。结果见表2。表2.选定化合物的p38抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage88</column></row><table>1连接至2-吡啶酮氮上的芳基为N-甲基吡啶输部分2溴芳基与2-吡啶酮环的5位和6位稠合。NC(未计算的)是指超出定量上限的值，由于太大以致不能可靠地确定尽管为了清楚和理解目的对本发明作了详细描述，但是本领域技术人员应该理解，在不偏离本发明真实范围的情况下，可以对本发明的形式和细节实施各种变化。上面提到的所有附图、表格、附录、专利、专利申请和出版物全都通过引用结合到本文中。权利要求1.一种下式的化合物其中R选自H、卤素、氰基、硝基、羟基、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C3-7环烷基、任选取代的C4-10烷基环烷基、任选取代的C2-6烯基、任选取代的C1-6烷氧基、任选取代的C6或10芳基、任选取代的吡啶基、任选取代的嘧啶基、任选取代的噻吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基甲酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡嗪基、任选取代的哒嗪基、任选取代的吡咯基、任选取代的噻吩基、任选取代的噻唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异噁唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的喹啉基、任选取代的异喹啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的吲哚基和任选取代的苯并咪唑基。2.—种下式的化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage3</formula>其中114选自H、卣素、氰基、硝基、羟基、任选取代的C^烷基、任选取代的C3-7环烷基、任选取代的C4-1D烷基环烷基、任选取代的Cw烯基、任选取代的Q-6烷氧基、任选取代的Ce或K)芳基、任选取代的吡咬基、任选取代的嘧p定基、任选取代的噻吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的p塞唑基、任选取代的嚼唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的tt磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基曱酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡嗪基、任选取代的哒溱基、任选取代的吡咯基、任选取代的噻吩基、任选取代的噻唑基、任选取代的嗨唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异噁唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异p塞唑基、任选取代的萘基、任选取代的会啉基、任选取代的异喹啉基、任选取代的唾喔啉基、任选取代的苯并p塞唑基、任选取代的苯并p塞吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的吲哚基和任选取代的苯并咪唑基。3.—种下式的化合物其中R"和RS各自独立地选自H、卣素、^、硝基、羟基、任选取代的C"烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的CMo烷基环烷基、任选取代的Cw烯基、任选取代的Cw烷氧基、任选取代的C6或10芳基、任选取代的吡啶基、任选取代的嘧p定基、任选取代的噻吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的噻唑基、任选取代的嚼唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基曱酰基、任选取代的疏醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡溱基、任选取代的哒嗪基、任选取代的吡咯基、任选取代的噻吩基、任选取代的p塞唑基、任选取代的嗯唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异噁唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的喹啉基、4壬选取代的异喹啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并噻唑基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的吲哚基和任选取代的苯并咪唑基；其中所述化合物不是1-(5-叔丁基-2-对甲苯基-2H-吡唑-3-基)-3-[4-(2-吗啉-4-基-乙氧基)萘-l-基]脲(BIRB796)。4.一种下式的化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>其中115和116各自独立地逸自H、卤素、氰基、硝基、羟基、任选取代的d-6烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的C4.1Q烷基环烷基、任选取代的C2—6烯基、任选取代的Cw烷氧基、任选取代的C6或10芳基、任选取代的吡咬基、任选取代的嘧-定基、任选取代的噻p分基、任选取代的呋喃基、任选取代的p羞唑基、任选取代的嚼唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代笨氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取^的氨基曱酰基、任选取代的硫醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取代的羰基、^壬选取代的螺环环烷基、任选取代的吡"秦基、任选取代的哒唤基、任选取代的吡咯基、任选取代的噻吩基、任选取代的噻唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异嗨唑基、任选取代的吡哇基、任选取代的异噻唑基、任选取代的萘基、任选取代的喹啉基、4壬选取代的异喹啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并p塞唑基、任选取代的苯并遙吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的吲哚基和任选取代的苯并咪唑基；其中所述化合物不是<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>，其中X为N。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage6</formula>其中，在所述化合物结合p38y时，114为距离p38yMetl09巯基部分不少于5A且不超过25A定位的基团。5.6.权利要求5的化合物，其中W选自H、卤素、氰基、硝基、羟基、任选取代的C,-6烷基、任选取代的Cw环烷基、任选取代的C"。烷基环烷基、任选取代的C2，6烯基、任选取代的Cp6烷氧基、任选取代的Q或K)芳基、任选取代的吡。定基、任选取代的嘧。定基、任选取代的p塞吩基、任选取代的呋喃基、任选取代的p塞唑基、任选取代的嗨唑基、任选取代的苯氧基、任选取代的硫代苯氧基、任选取代的氨基磺酰基、任选取代的脲基、任选取代的硫脲基、任选取代的酰胺基、任选取代的酮基、任选取代的羧基、任选取代的氨基曱酰基、任选取代的疏醚、任选取代的亚砜、任选取代的砜、任选取代的氨基、任选取代的烷氧基氨基、任选取代的烷氧基杂环基、任选取代的烷基氨基、任选取代的烷基羧基、任选取4戈的羰基、任选取代的螺环环烷基、任选取代的吡。秦基、任选取代的p达，秦基、任选取代的吡咯基、任选取代的p塞吩基、任选取代的噻唑基、任选取代的噁唑基、任选取代的咪唑基、任选取代的异嗯唑基、任选取代的吡唑基、任选取代的异瘗唑基、任选取代的萘基、任选取代的喹啉基、任选取代的异会啉基、任选取代的喹喔啉基、任选取代的苯并p塞喳基、任选取代的苯并噻吩基、任选取代的苯并呋喃基、任选取代的巧l咮基和任选取代的苯并咪唑基。7.—种治疗或预防个体的炎性疾病或纤维化疾病的方法，所述方法包括给予所述个体有效量的权利要求1的化合物。8.—种治疗或预防个体的炎性疾病或纤维化疾病的方法，所述方法包括给予所述个体有效量的权利要求2的化合物。9.一种治疗或预防个体的炎性疾病或纤维化疾病的方法，所述方法包括给予所述个体有效量的权利要求3的化合物。10.—种治疗或预防个体的炎性疾病或纤维化疾病的方法，所述方法包括给予所述个体有效量的权利要求4的化合物。11.一种治疗或预防个体的炎性疾病或纤维化疾病的方法，所述方法包括给予所述个体有效量的权利要求5的化合物。12.—种治疗或预防个体的炎性疾病或纤维化疾病的方法，所述方法包括给予所述个体有效量的权利要求6的化合物。13.权利要求7-12中任一项的方法，其中所述炎性疾病或纤维化疾病选自纤维化、特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺病、炎症性肺纤维化、类风湿性关节炎；类风湿性脊推炎；骨关节炎；痛风；脓毒症；脓毒性休克；内毒素休克；革兰氏阴性脓毒症；中毒性休克综合征；肌筋膜疼痛综合征(MPS);志贺氏菌病；哮喘；成人呼吸窘迫综合征；炎性肠病；克罗恩病；牛皮癬；湿疹；溃疡性结肠炎；肾小球肾炎；硬皮病；慢性曱状腺炎；格雷夫斯病；奥蒙德病；自身免疫性胃炎；重症肌无力；自身免疫性溶血性贫血；自身免疫性嗜中性白细胞减少症；血小板减少症；胰腺纤维化；慢性活动性肝炎；肝纤维化；肾病；肾纤维化、过敏性肠综合征；热病；再狭窄；脑型疟；中风和局部缺血性损伤；神经损伤；阿尔茨海默病；亨廷顿病；帕金森病；急性和慢性疼痛；变态反应；心脏肥大、慢性心力衰竭；急性冠状动脉综合征；恶病质；痴疾；麻风病；利什曼病；莱姆病；赖特综合征；急性滑膜炎；肌肉变性；粘液嚢炎；腱炎；腱鞘炎；疝性、破裂性或脱垂性推间盘综合征；骨硬化症；血栓形成；硅沉着病；肺肉瘤病；骨吸收疾病；癌症；多发性硬化、狼疮；纤维肌痛；AIDS;带状疱疹病毒感染、单纯疱渗病毒感染；流感病毒感染；严重急性呼吸道综合征(SARS);巨细月包病毒感染；和糖尿病。14.一种调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的方法，所述方法包括使化合物与p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)接触，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约10pM至约500pM的范围内；和其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的IC50值是抑制p38yMAPK的ICso值的至少2倍。15.权利要求14的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约10pM至约5的范围内。16.权利要求14的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38YMAPK的IC5o值在约100nM至约500的范围内。17.—种调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的方法，所述方法包括使化合物与p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)接触，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC5o值在约10pM至约500pM的范围内；和其中所述化合物表现出的4卬制p38aMAPK的ICso值是抑制p38YMAPK的ICso值的至少5倍。18.权利要求17的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约10pM至约5nM的范围内。19.权利要求17的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约100nM至约500|iM的范围内。20.—种调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的方法，所述方法包括使化合物与p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)接触，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约10pM至约500)iM的范围内；和其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso值是抑制p38yMAPK的IC5o值的至少10倍。21.权利要求20的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38YMAPK的ICso值在约10pM至约5pM的范围内。22.权利要求20的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约100nM至约500(_iM的范围内。23.—种调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的方法，所迷方法包括使化合物与p38促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)接触，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约10pM至约500pM的范围内；和其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的1(350值在约10pM至约1500pM的范围内。24.权利要求23的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约10pM至约5(aM的范围内；和其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso值在约10pM至约5^M的范围内。25.权利要求23的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38YMAPK的IC5o值在约100nM至约500jxM的范围内；和其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso值在约100nM至约1500(iM的范围内。26.权利要求14-25中任一项的方法，其中所述接触于调节SAPK的浓度进行，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso值在约50pM至约1拜的范围内。27.权利要求14-25中任一项的方法，其中所述接触于调节SAPK的浓度进行，其中所述化合物表现出的抑制p38YMAPK的ICso值在约50pM至约200nM的范围内。28.权利要求14-27中任一项的方法，所述方法还包括将所述化合物给予受试者。29.—种治疗或预防受试者的疾病状态的方法，所述方法包括纤维化疾病的受试者；和将化合物以治疗或预防炎性疾病或纤维化疾病的有效量给予受试者；其中所述化合物表现出的4卬制p38yMAPK的ICso在约10pM至约500一的范围内；和其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso是抑制p38yMAPK的IC5。的至少2倍。30.权利要求29的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约5pM的范围内。31.权利要求29的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约100nM至约500|iM的范围内。32.—种治疗或预防受试者的疾病状态的方法，所述方法包括纤维化疾病的受试者；和将化合物以治疗或预防炎性疾病或纤维化疾病的有效量给予受试者；其中所述化合物表现出的抑制p38YMAPK的ICso在约10pM至约500pM的范围内；和其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的IQo是抑制p38yMAPK的IQo的至少5倍。33.权利要求32的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约5(xM的范围内。34.权利要求32的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约100nM至约500的范围内。35.—种治疗或预防受试者的疾病状态的方法，所述方法包括鉴别处于炎性疾病或纤维化疾病的风险之中或患有炎性疾病或纤维化疾病的受试者；和将化合物以治疗或预防炎性疾病或纤维化疾病的有效量给予受试者；其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约10pM至约500ixM的范围内；和其中所述化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICmj是抑制p38yMAPK的IC5G的至少10倍。36.权利要求35的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约5pM的范围内。37.权利要求35的方法，其中所述化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约100nM至约500pM的范围内。38.权利要求29-37中任一项的方法，其中所给予的化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约50pM至约1pM的范围内。39.权利要求29-37中任一项的方法，其中所给予的化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约50pM至约200nM的范围内。40.—种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38aMAPK的抑制；和测定该文库中的多个化合物对p38yMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的1(:50在约10pM至约500的范围内；其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的IC50是抑制p38yMAPK的IC5。的至少10倍。41.权利要求40的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约10pM至约5(iM的范围内。42.权利要求40的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC5o在约100nM至约500fxM的范围内。43.—种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38otMAPK的抑制；和测定该文库中的多个化合物对p38yMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所迷至少一个化合物表现出的抑制p38^yMAPK的ICso在约10pM至约500|iM的范围内；其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso是抑制p38yMAPK的IC5o的至少5倍。44.权利要求43的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约5pM的范围内。45.权利要求43的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约100nM至约500拜的范围内。46.—种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38aMAPK的抑制；和测定该文库中的多个化合物对p38yMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约500的范围内；其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的1(:50是抑制p38丫MAPK的ICso的至少2倍。47.权利要求46的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约5的范围内。48.权利要求46的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约100nM至约500jiM的范围内。49.一种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38yMAPK的抑制；和AU亥多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC5o在约10pM至约500,的范围内；其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的105()是抑制p38yMAPK的IC5。的至少10倍。50.权利要求49的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约10pM至约5mM的范围内。51.权利要求49的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IQo在约100nM至约500jliM的范围内。52.—种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合净为对p38yMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约500的范围内；其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的IC50是抑制p38yMAPK的IC5Q的至少5倍。53.权利要求52的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约10pM至约5拜的范围内。54.权利要求52的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38"yMAPK的ICso在约100nM至约500的范围内。55.—种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38YMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC5o在约10pM至约500pM的范围内；其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的IC5o是抑制p38yMAPK的IC5()的至少2倍。56.权利要求55的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约5|iM的范围内。57.权利要求55的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约100nM至约500pM的范围内。58.—种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38aMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38ocMAPK的ICso在约10pM至约1500的范围内；和其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38ocMAPK的IC50是抑制p38yMAPK的IC5。的至少10倍。59.权利要求58的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约10pM至约5|xM的范围内。60.权利要求58的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38丫MAPK的ICso在约100nM至约1500pM的范围内。61.—种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38ocMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso在约10pM至约1500的范围内；和其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的1(35()是抑制p38yMAPK的IC5Q的至少5倍。62.权利要求61的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约10pM至约5[iM的范围内。63.权利要求61的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约100nM至约1500,的范围内。64.—种鉴定药物活性化合物的方法，所述方法包括提供化合物文库；测定该文库中的多个化合物对p38ocMAPK的抑制；和从该多个化合物中选出至少一个化合物，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38ccMAPK的IC5o在约10pM至约1500的范围内；和其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38aMAPK的ICso是抑制p3外MAPK的IC5q的至少2倍。65.权利要求64的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约10pM至约5pM的范围内。66.权利要求64的方法，其中所述至少一个化合物表现出的抑制p38yMAPK的ICso在约100nM至约1500)iM的范围内。67.权利要求40-66中任一项的方法，其中所述接触于调节SAPK的浓度进行，其中所述接触化合物表现出的抑制p38yMAPK的IC50在约50pM至约1jiM的范围内。68.权利要求40-66中任一项的方法，其中所述接触于调节SAPK的浓度进行，其中所述接触化合物表现出的抑制p38"yMAPK的IC50在约50pM至约200nM的范围内。69.权利要求40-68中任一项的方法，所述方法还包括测定选定化合物的哺乳动物毒性。70.权利要求40-69中任一项的方法，所述方法还包括给予受试者选定的化合物。71.权利要求70的方法，其中所述受试者患有炎性疾病或纤维化疾病或处于炎性疾病或纤维化疾病风险之中。72.权利要求14-71中任一项的方法，其中所述化合物不选自<formula>formulaseeoriginaldocumentpage16</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage17</formula><formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>，和吡非尼酮。73.—种药物组合物，所述药物组合物含有a)权利要求1或权利要求2或权利要求3或权利要求4或权利要求5或权利要求6的化合物；和b)药学上可接受的载体。74.—种治疗或预防本文所述的疾病或病症的方法，所述方法包括给予个体有效量的权利要求1-6中任一项的化合物。全文摘要现已发现，通过使用针对p38α也具有抑制活性的有效p38γ激酶抑制剂化合物，可以对治疗与激酶p38活性增强有关的各种疾病实现高疗效。此外，业已发现，通过修饰p38α抑制剂，使得该修饰产生针对p38γ的抑制活性。可实现降低效酶p38γ和激酶p38α这二者的活性，同时不将激酶p38α的活性减低至这样的程度在给予患有与激酶p38活性增强有关的疾病的受试者时观察到不希望有的副作用。描述了具有针对p38γ和p38α活性的化合物。公开了使用所述化合物和组合物以及活性化合物调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的方法，其中所述活性化合物表现出对p38γ和p38αMAPK的抑制。还公开了抑制p38γ和p38αMAPK并可以调节应激活化蛋白激酶(SAPK)系统的化合物的鉴定方法。文档编号A61P29/00GK101360750SQ200680051489公开日2009年2月4日申请日期2006年11月22日优先权日2005年11月23日发明者K·科森,S·D·塞维尔特,V·谢列布里亚内申请人:英特芒尼公司