专利名称：：一种含嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物及其应用，该组合物可作为食品或药物或保健品，适于长期食用，主要用于调节肠道菌群和增强免疫力。
背景技术：
：正常人的肠道菌群极其复杂，随着宿主年龄的变化，其菌群的数量及种类也发生相应的改变。膳食环境的改变、应激、损伤、抗生素的使用等均可导致肠道菌群紊乱，而引发多种疾病，如肝硬化、胆结石、动脉硬化、冠心病、心肌梗塞、脑动脉硬化、脑中风等。人体免疫是人体对外界的病原微生物等的防御机能，或者说是防御系统，在正常情况下，它能够保证人体不受外界病原微生物的侵害。免疫功能低下分为原发性和继发性两类，原发性是先天发育不全所致，大多数与遗传有关，多发生于儿童；继发性则由病毒、细菌、真菌等感染或药物、肿瘤、疲劳、失眠、营养不良等原因引起，可见于各种年龄的人群。免疫功能低下易导致细菌、病毒、真菌感染，如上呼吸道感染、尿路感染、败血症、脑膜炎、水痘、麻疹、肺结核等。乳酸菌作为人体有益菌，在食品和医药上的应用非常广泛，通过补充肠道益生菌，恢复和保持微生态平衡，起到调节宿主肠道菌群作用。另外，乳酸菌定植于人体肠道，相当于自然免疫，能激活机体吞噬活性，作为免疫原诱发特异性和非特异性免疫反应，产生特异性抗体和致敏淋巴细胞，调节机体免疫应答，增强机体免疫力，提高抗感染的能力。低聚糖(01igosaccharide)或称寡糖，低聚糖是一种高效双歧因子，也是一种膳食纤维，是由2-10个单糖通过糖苷键连接形成直链或支链的低聚糖。低聚糖不能被人体直接吸收利用，因此可直接到达肠道，被肠道内双歧扦菌优先利用，增殖双歧杆菌，抑制肠内腐败菌生长，调节肠道菌群平衡，增强机体免疫力。因此，针对上述肠道菌群紊乱和免疫力低下所带来的危害，开发以乳酸菌和低聚糖为主要原料复配开发出的具调节肠道菌群和增强免疫力功能的组合物具有十分重要的经济效益和社会效益。
发明内容本发明目的是提供一种含嗜酸乳杆菌LAll-Onlly和长双歧杆菌BL88-Onlly的组合物及其应用，用于调节人体肠道菌群和增强免疫力。该组合物不含任何人工合成色素、激素、甜味素、鲜味素和防腐剂，不含任何违禁药物，安全无毒。实现上述发明目的的解决方案是一种嗜酸乳杆菌LAH-Onlly，该菌抹于2007年7月13号在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址中国北京市海淀区中关村一条13号，中国科学院微生物研究所)保藏，保藏登记号CGMCCNO.2106。一种长双歧杆菌BL88-Onlly,该菌抹于2007年7月13号在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址中国北京市海淀区中关村一条13号，中国科学院微生物研究所)保藏，保藏登记号CGMCCNO.2107。一种含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物，其特征在于采用嗜酸乳杆菌、长双歧杆菌、低聚糖、维生素、辅料组成复合配'方。所述的含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物，其特征在于按照重量百分比计，该组合物中嗜酸乳杆菌LAll-Onlly用量范围为1~10%,长双歧杆菌BL88-Onlly用量范围为110%，'低聚糖用量范围为10~30%,维生素用量范围为1~10%,其余为食品辅料。所述的含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物，其特征在于，该组合物中嗜酸乳杆菌为LAll-OnllyCGMCCNO.2106,长双歧杆菌为BL88-OnllyCGMCCNO.2107。所述的含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物，其特征在于该组合物中低聚糖包括低聚果糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖和低聚半乳糖中的一种或多种。所述的含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物，其特征在于该组合物中维生素包括维生素C钠、维生素维生素B,、B2、B6中的一种或多种。所述的含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物，其特征在于该组合物中食品辅料包括麦芽糊精、山梨醇、乳糖、果粉中的一种或多种。所述的含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物在调节肠道菌群和增强免疫力功能食品或药物或保健品方面的应用。具体实施例方式下面结合实施例进一步说明本发明实施例1:嗜酸乳杆菌LAll-Onlly生理生化特征本发明的嗜酸乳杆菌LAll-Onlly直接自健康婴儿粪便中分离获得，其形态为杆状，革兰氏染色阳性，不形成芽孢，产生乳酸，兼性厌氣。它能利用半乳糖、葡萄糖、果糖、甘露糖、甘露醇、纤维二糖、麦芽糖、乳糖、蜜二糖、蔗糖、海藻糖、棉子糖、龙胆二糖，不能利用山梨糖、鼠李糖、D-塔格糖、a-曱基-D-葡萄糖甙、淀粉、山梨醇、木糖、阿拉伯糖、赤癣醇。实施例2:嗜酸乳杆菌LAll-Onlly耐酸性能评价将嗜酸乳杆菌LAll-Onlly发酵液以生理盐水洗涤两次，重悬于pH3和pH4的MRS液体培养基中，37。C下分别处理lh、2h，测细胞残存率，对菌林耐酸性能进行评价。(表l)从表l中可见，嗜酸乳杆菌LAll-Onlly耐酸性能较好，pH4、37。C下处理2h，细胞残存率大于95%;pH3、37。C下处理2h,细胞残存率大于50%。表1嗜酸乳杆菌LAll-Onlly耐酸性能评价<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>实施例3:嗜酸乳杆苗LAll-Onlly耐胆汁盐性能将嗜酸乳杆菌LAll-Onlly发酵液以生理盐水洗涂两次，重悬于含0.5%和1.0%脱氧胆酸钠浓度的MRS液体培养基中，37。C下分别处理12h、24h，测细胞残存率，对菌林耐胆汁盐性能进行评价。(表2)从表2中可见，嗜酸乳杆菌LAll-Onlly耐胆汁盐性能较好，0.5%胆汁盐浓度、37。C下处理24h，细胞残存率大于95%;1.0%胆汁盐浓度、37'C下处理24h,细胞残存率大于50%。表2嗜酸乳杆菌LAll-0nlly耐胆汁盐性能评价<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>实施例4:含嗜酸乳杆菌LAll-Onlly和长M杆苗BL88-Onlly的组合物调节场道菌群和改善皮肤水分功能实验按配方(重量比)嗜酸乳杆菌LAll-Onlly2%、长双歧杆菌BL88-Onlly2%、低聚木糖20%、维生素C钠5%、麦芽糊精28%、山梨醇20%、乳糖17%、果粉6%复配成组合物。上述组合物经上海市预防医学研究院实验结果表明具有调节肠道菌群和增强免疫力功能，以下为实验结果1.调节肠遣菌群功能动物实验该组合物人体推荐量为每日2g/60kg。本次实验40只正常小鼠，分成四组，设立低、中、高三个剂量组，分别为0.17、0.33、lg/kg，分别相当于人体推荐量的5、10、30倍，另设蒸馏水对照组。检测喂养前后小鼠肠道微生物变化情况，应用统计软件SPSS10.0进行t检验及相关分析(表3~7)。从表3~7可见，该组合物能明显增加小鼠肠道内双歧杆菌和乳杆菌的数量，对肠杆菌、肠球菌和产气荚膜梭菌无明显影响。这表明该组合物具有调节肠道菌群功能。表3样品对动物肠杆菌的影响(logCFU/gx士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>表4样品对动物肠球菌的影响(logCFU/gx士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表5样品对动物双歧杆菌的影响(logCFU/gx士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表6样品对动物乳杆菌的影响(logCFU/gx±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>表7样品对动物产气荚膜梭菌的影响(logCFU/gx±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>2.调节麻遣菌群功JJIA群实狳本次试验采用双盲对照法，共选100例受试者，随机分为试食组和对照组(各50例)，分别食用该组合物和安慰剂每日1次，每次l条，2克/条。试验期间不改变原来的饮食习惯，正常饮食。14天后结果表明，试食组双歧杆菌和乳杆菌明显增加，与试食前有显著差异(p<0.05)，产气荚膜梭菌、拟杆菌、肠杆菌.肠球菌无明显变化。这说明该组合物具有调节肠道菌群功能(表8)。表8人体肠道菌群检测结果(logCFU/gx士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>*:p<0.05与对照组相比#:p<0.05与给样前3.增强免疫力功能动物实验该组合物人体推荐量为每日2g/60kg。本次实验40只正常小鼠，分成四组，设立低、中、高三个剂量组，分别为0.17、0.33、lg/kg，分别相当于人体推荐量的5、10、30倍，另设蒸馏水对照组。检测喂养前后小鼠抗体积数、溶血空斑数、胸腺指数、脾指数、ConA值、DTH、NK细胞活性、吞噬％和吞噬指数、变化情况，应用统计软件SPSS10.0进行t检验及相关分析(表915)。表9~15结果经统计学分析可知，样品0.33g/kg和lg/kg剂量组的小鼠抗体积数、ConA值、NK细胞活性、吞噬％和吞噬指数与对照组相比，均有显著性差异；样品lg/kg剂量组的小鼠溶血空斑数和DTH与对照组相比，均有显著性差异；而样品各剂量组的小鼠胸腺指数、脾指数与对照组相比，均无显著性差异。这说明该组合物具有增强免疫力功能。表9血清溶血素试验<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表10抗体生成检测试验<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表ll胸腺指数、脾指数<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表12ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>*:p<O.05与对照组相比表13DTH测定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*:p<0.05与对照组相比表14NK细胞活性测定<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*:p<0.05与对照组相比表15巨噬细胞吞噬试验<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*:pO.05与对照组相比4.结论上述实验结果表明，该组合物具有调节肠道菌群和增强免疫力功能。另外，根据相同实验表明，当该组合物中嗜酸乳杆菌LA1l-Onlly用量范围为1~10%，长双歧杆菌BL88-Onlly用量范围为110%,低聚糖(包括低聚果糖、低聚木糖、低聚异麦芽糖和低聚半乳糖中的一种或多种)用量范围为10~30%,维生素(包括维生素C钠、维生素B,、B2、B6中的一种或多种)用量范围为1~10%，其余为食品辅料(包括麦芽糊精、山梨醇、乳糖、果粉中的一种或多种)的情况下，也都具有调节肠道菌群和增强免疫力功能，并可用于制作相应的食品或药物或保健品。权利要求1、一种含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物，其特征在于采用嗜酸乳杆菌、长双歧杆菌、低聚糖、维生素、辅料组成复合配方。全文摘要本发明涉及一种含有嗜酸乳杆菌和长双歧杆菌的组合物及其应用，使用的嗜酸乳杆菌LA-OnllyCGMCCNO.2106，长双歧杆菌BL88-OnllyCGMCCNO.2107。该组合物中含有嗜酸乳杆菌LA-Onlly、长双歧杆菌BL88-Onlly，还含有低聚糖和维生素等。该组合物可作为食品、药物或保健品，适于长期食用，主要用于调节肠道菌群和增强免疫力。文档编号A61K31/51GK101099749SQ20071004417公开日2008年1月9日申请日期2007年7月25日优先权日2007年7月25日发明者旻张,张和春,国杨,杭晓敏,潘玉辉,范小兵申请人:上海交大昂立股份有限公司