专利名称：：一种具有抗癌作用的药用植物紫雪花的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种具有抗癌作用的药用植物紫雪花，该植物可用于制备抗癌药物。技术背景癌症是人类的大敌，抗癌是保证人类健康和长寿永恒的主题。随着世界人口的加速老龄化，癌症的病人越来越多，已经影响到人类的生话质量，抗癌药物的研究也经历近百年的历史，现有的抗癌药物也有许多种类，有些药物已经取得很好的疗效，但，许多癌症还没有得到特效药的治疗，癌症还没有攻克。紫雪花为蓝雪科蓝雪属植物(PlumbagindicaL.)，广泛分布于亚热带地区，在我国福建，广东、广西、海南、云南等地区均有栽培或逸生。化学成分主要为白花丹素(Plumbagin)，6-羟基白花丹素(6-hydroxyplumbgin)、谷甾醇(Sitosterol)和菜油甾醇(Stigmastrol)。紫雪花具有散瘀消肿、祛风杀虫等作用，民间主要用于治疗风湿骨痛，痈疮肿毒、跌打扭伤、牛皮癣。本项目研究者研究发现一种药用植物紫雪花具有抗癌作用，可以研究开发成一种新的抗癌药
发明内容蓝雪科蓝雪属植物(PlumbagindicaL.)紫雪花，是一种具有抗癌作用药用植物，该植物可以通过传统的水提或醇提等生产工艺，制备成丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂和任何一种临床可接受的抗癌药物制剂，供临床用于预防可治疗某些肿瘤，也可以按现代工艺提取有效成分或有效部位群，制备成丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂和任何一种临床可接受的抗癌药物制剂，供临床用于预防可治疗某些肿瘤。具体实施例方式实施例一1.材料与方法l.l药品与仪器紫雪花干全草，由廉江种植场提供，经本院植物鉴定学博士苟占平副教授鉴定。5-FU注射液，由上海旭东海普药业有限公司生产(批号；060706)。氯化钠注射液，由石家庄四药有限公司生产(批号060605402)。洁净工作台，由北京市半导体设备厂生产。FA2104S电子天平，由上海精科天平厂生产。1.2动物与移殖性肿瘤昆明种小鼠，由广东医学院实验动物中心提供，清洁级，体重18-22g雌雄各半。S180瘤株，由中山医科大学实验动物中心提供，本课题组常规传代培养。1.3方法'1.3.1紫雪花提取制备紫雪花全草(干品)，500g,切碎，加水浸过液面约10cm、提取三次，每次煮沸一小时，过滤、合并三次滤液，浓縮成含生药135%的溶液，实验时用蒸馏水稀释后灌胃给药。1.3.2肿瘤细胞悬浮液的制备与接种[23]在无菌条件下抽取接种第七天生长良好的Sw,肿瘤腹水用台盼兰染色计数，采用肿瘤细胞数〉95%的移殖液，并用无菌生理盐水稀释成lxl(f个/ml浓度的肿瘤细胞悬浮液，然后无菌接种(0.2ml/只)于小鼠右腋下，接种后随机分成生理盐水组、5-FU组(25mg/kg)、紫雪花水提液高剂量组(27g/kg)、紫雪花水提液中剂量组"3.5g/kg)、紫雪花低剂量组(6.8g/kg)、紫雪花水提液+5-FU组(13.5g/kg+25mg/kg)共6组，每组小鼠分别按0.2ml/10g体重灌胃给药，连续给药lld，12d处死，称体重，解剖取肉瘤、肝脏、脾脏和胸腺，用FA2104S电子天平称重，计算每组平均瘤重和肿瘤生长抑制率及计算肝脏、脾脏和胸腺指数[4.5].1.4统计学处理实验结果用7土s表示，计量资料用t检验进行组间比较。2结果2.1紫雪花水提液和紫雪花水提液与5-FU合用对小鼠Sw。实体瘤的抑瘤作用紫雪花水提液高、中、低剂量组和紫雪花水提液与5-FU合用对小鼠S咖实体瘤的抑瘤作用见表l。紫雪花水提液中剂量(13.5g/kg)和紫雪花水提液与5-FU合用(13.5g/kg、25rag/kg)均对S180实体瘤小鼠有显著的抑瘤作用(抑瘤率分别为40.01%,P〈0.05和50.5%，P<0.01)，紫雪花水提液高剂量(27g/kg)和紫雪花水提液低剂量抑瘤作用不显著。但都有一定的抑制肿瘤细胞生长的作用。揭示超过一定剂量的紫雪花水提液反而使得对小鼠S,s。肿瘤细胞生长的抑制能力降低，提示紫雪花水提液抑制小鼠Sm,肿瘤细胞的最佳剂量是中剂量。表l紫雪花水提液和紫雪花水提液与5-TU合用对Sw。实体瘤小鼠的抑瘤作用(x±s)￥1S^"~体重/g一瘤重/g抑瘤率/%_(g/kg)(只)给药前lld生理盐水组1018.5±1.2328.8±2.635—FU组0.0251018.9±1.5925.2±3.29紫雪花(高)组27.01018.8±1.5127.2±2.58紫雪花(中)组13.51018.8±1.2325.9±3.41紫雪花(低)组6.81018.8±1.8826.9±2.66紫雪花+5—FU组13.5+0.0251018.7±1.2425.3±2.97注与生理盐水比较**:P<0.01;*:P<0.05。2.2紫雪花水提液、紫雪花和5-FU合用对S,8。实体瘤小鼠免疫器官的影响紫雪花水提液高、中、低剂量、紫雪花和5-FU合用对S,8。实体瘤小鼠免疫器官的影响见表2，结果表明5-FU(25mg/kg)单用对S180实体瘤小鼠有明显的胸腺抑制作用(与对照组比较P<0.01)，而紫雪花水提液高、中、低剂量及紫雪花与5-FU合用，对小鼠胸腺抑制无显著性差异，紫雪花水提液中、低剂量与5-FU比较P<0.01，紫雪花水提液高剂量和紫雪花与5-FU合用分别与5-FU比较均P<0.05，提示紫雪花水提液和紫雪花与5-FU合用有明显胸腺保护作用，紫雪花水提液各剂量组均可降低肝脏和脾脏的重量，对脾脏尤其明显，P<0.01。40.77±0.290.34±0.13林56.00.60±0.2422.40.46±0.27*40.00.57±0.2226.50.38±0.15**50.5表2紫雪花水提液、紫雪花与5-FU合用对Sw,实体瘤小鼠免疫器官的影响±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>注与生理盐水比较:P〈0.01;与5-FU比较**:P〈0.01;*:P〈0.05。3讨论3.1紫雪花水提液的抑瘤作用及对免疫器官的影响从实验结果表l可见，灌胃给药紫雪花水提液高剂量组(27g/Kg)，中剂量组(13.5g/Kg)，低剂量组(6.8g/kg),三组紫雪花水提液均对小鼠移殖性肿瘤S则有不同程度的抑制肿瘤生长作用，其中以紫雪花中剂量组抑制肿瘤生长较为明显,抑瘤率分别为40.01%,与生理盐水比较p<0.05。紫雪花水提液与阳性药物5-Fu比较，抑瘤率不如5-Fu0.025g/Kg组。紫雪花水提液高剂量组和低剂量组抑瘤率分别为22.4%，26.5%，但高剂量组抑瘤率反而降低,提示高剂量组可能使用剂量过大,产生毒性，造成小鼠抑制肿瘤生长能力下降的原因。而紫雪花水提液高、中、低剂量二种剂量对小鼠胸腺抑制无显著性差异，紫雪花水提液中、低剂量与5-FU比较P<0.01，紫雪花水提液高剂量与5-FU比较均P<0.05，提示紫雪花水提液有明显胸腺保护作用，紫雪花水提液各剂量组均可降低肝脏和脾脏的重量，对脾脏尤其明显，P<0.01。3.1紫雪花水提液与5-Fu合用的抑瘤作用及对免疫器官的影响5-Fu(0.025g/Kg)单独应用时有显著的抑瘤作用，抑瘤作用达到56.0%。灌胃给药紫雪花水提液(13.5g/Kg)与5-Fu(0.025g/Kg)合用时，对小鼠移殖性肿瘤S]80也有明显的抑制肿瘤生长作用，抑瘤率达到50.5%，与生理盐水比较p<0.01。对免疫器官的影响研究可见，紫雪花水提液对小鼠胸腺有明显的保护作用，紫雪花水提液与5-FU合用后，明显的优点是小鼠胸腺重量没有明显降低，提示紫雪花水提液与5-FU合用有明显胸腺保护作用。结论紫雪花水提液(6.8g/kg，13.5g/Kg，27g/Kg)三种剂量均对小鼠移殖性肿瘤S180有抑瘤作用。紫雪花水提液在发挥抑瘤作用的同时，可降低肝脏和脾脏的重量，但对胸腺有明显的保护作用。紫雪花水提液与5-Fu(0.025g/Kg)合用时，对小鼠移殖性肿瘤S180有抑瘤作用'同时'具有明显的对抗5-Fu抑制胸腺的作用。参考文献(1)南京中医药大学编著中药大辞典下(M〕第二版上海科学技术出版社20063300(2)徐叔云卞如濂陈修主编药理实验方法学(M〕第三版人民卫生出版200211758(3)陈方，吴铁，傅玉萍，等，人参茎叶皂甙对5氟尿嘧啶抗肿瘤的增强作用，中国临床药理学与治疗学，2002;7(4):299—301〔4〕戴滨，崔燎，吴铁，等，半边旗有效成分5F注射液体内外抗肿瘤药理作用研究，中国药理学报，2003;19(5):508-511(5)戴滨，崔燎，吴铁，等，半边旗提取物对H印A荷瘤小鼠的抑瘤作用及对免疫功能的影响，陕西中医，2006:27(3):370-373(6)戴滨，吴铁，崔燎，等，半边旗提取物5F注射液对淋巴肉瘤荷瘤小鼠的抑制作用及急性毒性研究,中医药学报，2006;34(3):5-7(7)张晓平，蒲小平，瞿所迪，等，抗瘤延生散抗S180肿瘤作用的初步研究，中国中药杂志'2002，27(11):852-85权利要求1、一种具有抗癌作用的药用植物紫雪花在制备抗癌药物制剂中的应用。2、如权利要求1所述的一种具有抗癌作用的药用植物紫雪花可按传统的生产工艺制备成丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂和任何一种临床可接受的抗癌药物制剂，供临床用于预防可治疗肿瘤。3、如权利要求1所述的一种具有抗癌作用的药用植物紫雪花可按现代工艺提取有效成分或有效部位群，制备成丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂和任何一种临床可接受的抗癌药物制剂，供临床用于预防可治疗肿瘤。全文摘要本发明公开了蓝雪科蓝雪属植物(PlumbagindicaL.)紫雪花是一种具有抗癌作用药用植物，该植物可以通过传统的水提或醇提等生产工艺，制备成丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂和任何一种临床可接受的抗癌药物制剂，供临床用于预防可治疗某些肿瘤，也可以按现代工艺提取有效成分或有效部位群，制备成丸剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、注射剂和任何一种临床可接受的抗癌药物制剂，供临床用于预防可治疗某些肿瘤。文档编号A61P35/00GK101112406SQ20071014141公开日2008年1月30日申请日期2007年8月17日优先权日2007年8月17日发明者铁吴,吴明寿,燎崔,张丽媛,陈志东申请人:广东医学院