专利名称：提取富集山绿茶总黄酮的方法
技术领域：
本发明涉及一种山绿茶总黄酮的提取方法、特别是用大孔树脂提取富集山绿茶总黄酮的 方法。
背景技术：
山绿茶为冬青科植物海南冬青(//ex/w/"a"e/w&Merr.)的干燥叶。为广西壮族民间中草 药，具有清热解毒、消炎消肿、通经活血的功效。用于防治高血压症、降血脂、降胆固醇、 口腔炎、疖肿、慢性喉炎、妇科附件炎等症，使用历史较悠久，已收载于《广西中药材标准》 (1990年版)。药理实验表明，山绿茶确实具有明显、持久而平稳的降压作用，且对动物心血管、脑血 管、毛细血管具有明显扩张作用，并未见明显毒副作用。临床观察表明，山绿茶对高血压患 者的有效率高，而且对降低血脂也有满意的效果。黄酮类成分具有多项心血管方面活性，而 文献报道山绿茶中含有较多的芦丁等黄酮类成分。植物化学成分研究表明，山绿茶的主要化学成分为黄酮类、三萜皂苷类成分。现已分离 得到的主要有芦丁，槲皮素，山柰酚，槲皮素-3-0-A-D-葡萄糖苷，槲皮素-7-0-刀-D-葡萄 糖苷，山柰酚-7-0-芸香糖苷等。同时，黄酮也是山绿茶生理活性的主要成分，其中的卢丁 是山绿茶中具有明确药理活性的成分之一，具有降低血管脆性及异常通透性、并具有明显的 扩冠作用。除此之外，山绿茶中还含有冬青素A，冬青皂苷A^海南冬青苷，熊果酸，绿 原酸等成分。目前尚没有多少对山绿茶中总黄酮研究的报道，更没有关于山绿茶中总黄酮的提取方法 的报道。发明内容本发明要解决的技术问题是提供一种从山绿茶中提取山绿茶总黄酮的方法。本发明以如下技术方案解决上述技术问题 提取总黄酮的方法有以下步骤原料山绿茶用重量浓度(以下同)为40-95%的乙醇回流提取；提取液浓縮后上HPD-400 大孔树脂柱，用含水乙醇梯度洗脱，收集浓度为20-50%乙醇洗脱的部分；回收溶剂后，干 燥，得总黄酮。本发明的最优化技术方案为 a.取山绿茶饮片，加重量为山绿茶饮片12.5倍、浓度为70%的乙醇回流提取2次，每 次lh;b合并提取液，浓縮至无醇味，静置，取上清液；c上清液过HPD-400型大孔树脂柱，大孔树脂先用柱体积的4倍量10%的乙醇洗脱，弃 去；再用柱体积的3倍量的30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓縮至无醇味，喷雾干燥，得总 黄酮。本发明提取富集山绿茶总黄酮的方法，在提取过程中有选择性的富集活性成分，去除大 量杂质，得到的产品采用UV法测定的总黄酮含量大于50%,同时，本方法的重复性、稳 定性好，从而保证了疗效的稳定；原料有效成分转移率高，成本低，操作简便，适用于工业 化生产。
具体实施方式
实施例1a. 取山绿茶饮片10kg，加100kg70X乙醇回流提取2次，每次lh;b. 合并提取液，浓缩至无醇味，静置，取上清液；c. 上清液过HPD-400型大孔树脂柱，先用4倍量10%乙醇洗脱，弃去；再用3倍量的 30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓縮至无醇味，喷雾干燥，得总黄酮414g，含量为53.5%。 实施例2a. 取山绿茶饮片10kg,加100kg 60%乙醇回流提取3次，每次L5h;b. 合并提取液，浓縮至无醇味，静置，取上清液；c. 上清液过HPD-400型大孔树脂柱，先用5倍量10%乙醇洗脱，弃去；再用2.5倍量 的30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，喷雾干燥，得总黄酮343g，含量为53.3%。 实施例3a. 取山绿茶饮片10kg，力口100kg 80%乙醇回流提取3次，每次1.5h;b. 合并提取液，浓缩至无醇味，静置，取上清液；c. 上清液过HPD-400型大孔树脂柱，先用4倍量10%乙醇洗脱，弃去；再用3倍量的 30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，喷雾干燥，得总黄酮365g，含量为52.7%。实施例4a. 取山绿茶饮片10kg，力fU2.5kg 90%乙醇回流提取2次，每次2h;b. 合并提取液，浓縮至无醇味，静置，取上清液；c. 上清液过HPD-400型大孔树脂柱，先用3.5倍量10%乙醇洗脱，弃去；再用4倍量的 50%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓縮至无醇味，喷雾干燥，得总黄酮281g,含量为57.5%。 实施例5a. 取山绿茶饮片10kg，力tU2.5kg 70%乙醇回流提取3次，每次0.5h;b. 合并提取液，浓缩至无醇味，静置，取上清液；c. 上清液过HPD-400型大孔树脂柱，先用4倍量10%乙醇洗脱，弃去；再用3倍量的 30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓縮至无醇味，喷雾干燥，得总黄酮408g，含量为56.2%。 实施例6a. 取山绿茶饮片10kg，加12.5 kg 80%乙醇回流提取1次，每次lh;b. 合并提取液，浓縮至无醇味，静置，取上清液；c. 上清液过HPD-400型大孔树脂柱，先用3倍量10%乙醇洗脱，弃去；再用4倍量的 20%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓縮至无醇味，喷雾干燥，得总黄酮302g，含量为57.1%。 实施例7a. 取山绿茶饮片10kg，加15kg 50%乙醇回流提取3次，每次lh;b. 合并提取液，浓縮至无醇味，静置，取上清液；c. 上清液过HPD-400型大孔树脂柱，先用4.5倍量10%乙醇洗脱，弃去；再用3倍量 的30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓縮至无醇味，喷雾干燥，得总黄酮270g，含量为56.3%。 实施例8a. 取山绿茶饮片10kg,加15kg 70%乙醇回流提取1次，每次l,5h;b. 合并提取液，浓缩至无醇味，静置，取上清液；c. 上清液过HPD-400型大孔树脂柱，先用3.5倍量10%乙醇洗脱，弃去；再用4倍量的 40%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓縮至无醇味，喷雾干燥，得总黄酮260g，含量为53.9%。
权利要求
1.一种提取富集山绿茶总黄酮的方法，其特征是提取的步骤为原料山绿茶用重量浓度为40-95％的乙醇回流提取；提取液浓缩后上HPD-400大孔树脂柱，用含水乙醇梯度洗脱，收集浓度为20-50％7醇洗脱的部分；回收溶剂后，干燥，得总黄酮。
2. 如权利要求1所述的提取富集山绿茶总黄酮的方法，其特征是优化的提取工艺是a.取山绿茶饮片，加重量为山绿茶饮片12.5倍、浓度为70%的乙醇回流提取2次，每次lh;b合并提取液，浓縮至无醇味，静置，取上清液；c上清液过HPD-400型大孔树脂柱，大孔树脂先用柱体积的4倍量10%的乙醇洗脱， 弃去；再用柱体积的3倍量的30%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至无醇味，喷雾干燥，得 总黄酮。
全文摘要
一种提取富集山绿茶总黄酮的方法，其特征是提取的步骤为原料山绿茶用重量浓度为40-95％的乙醇回流提取；提取液浓缩后上HPD-400大孔树脂柱，用含水乙醇梯度洗脱，收集浓度为20-50％乙醇洗脱的部分；回收溶剂后，干燥，得总黄酮。本发明提取富集山绿茶总黄酮的方法，在提取过程中有选择性的富集活性成分，去除大量杂质，得到的产品总黄酮的含量超过50％，同时，本方法的重复性，稳定性好，从而保证了疗效的稳定；原料有效成分转移率高，成本低，操作简便，适用于工业化生产。
文档编号A61K36/185GK101214269SQ200710303509
公开日2008年7月9日 申请日期2007年12月26日 优先权日2007年12月26日
发明者强 王, 赖茂祥, 虹 陈, 陈小刚, 陈筱清 申请人:广西壮族自治区中医药研究院;中国药科大学