专利名称：：用于溶酶体贮积症的脑室内酶输注系统的制作方法
技术领域：
：本发明涉及溶酶体贮积症领域。特别地，涉及这些疾病的通过酶补偿疗法的治疗和/或预防。
发明内容称为溶酶体贮积症(LSDs)的一组代谢性疾病包括超过四十种遗传病，其中很多涉及各种溶酶体水解酶的遗传缺陷。在表l中列举了典型的溶酶体贮积症和相关缺陷酶。表1溶酶体贮积症天冬氨酰葡糖胺尿症法布里病婴儿期巴藤病MCNL1)典型婴儿后期巴藤病*(CNL2)少年巴藤病^CNL3)巴藤病，其他形式*(CNL4-CNL8)胱氨酸贮积症Faber氏症岩藻糖苷贮积症Galactosidosialidosis综合症缺陷酶天冬氨酰氨基葡糖苷酶a.-半乳糖苷酶A软脂酰蛋白硫酯酶三肽基肽酶溶酶体跨膜蛋白多种基因产物半胱氨酸运载蛋白酸性神经酰胺酶酸性.a.-L-岩藻糖苷酶保护性蛋白/组织蛋白酶A1、2*、3*型戈谢病G.sub.Ml神经节苷脂沉积症*亨特综合症*胡-射二氏综合征*球形细胞型白质营养不良*a.-甘露糖苷贮积症*P.-甘露糖苷贮积症*Maroteai)x-Lamy综合症异染性脑白质营养不良*酸性.卩.-葡萄糖苷酶，或者酸性.(3.-半乳糖苷酶艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶a.-L-艾杜糖苷酶半乳糖脑苷脂酶酸性.a,甘露糖苷酶酸性.卩，甘露糖苷酶芳基硫酸酯酶B芳基硫酸酯酶A溶酶体贮积症MorquioA综合症MorquioB综合症粘多糖症n/in*神经鞘磷脂沉积病A型*,B型神经鞘磷脂沉积病c型*蓬佩病*山德霍夫病*乙酰氨基葡糖苷酶缺乏综合征A*乙酰氨基葡糖苷酶缺乏综合征B*乙酰氨基葡糖苷酶缺乏综合征C*乙酰氨基葡糖苷酶缺乏综合征D*Schindler病*Schindler-Kanzaki病涎酸贮积症Sly病承Tay-Sachs病*.沃耳曼氏综合征**影响中枢神经系统溶酶体贮积症的标志性特征为溶酶体中代谢产物异常积累，其导致核周体中大量膨胀的溶酶体出现。治疗溶酶体贮积症(和治疗器官特异的酶病如肝脏特异酶病不同)的主要挑战在于需要在多种不同组织中逆转溶酶体贮积的病状。一些溶酶体贮积症能够通过静脉输注缺失的酶(酶补偿疗法，ERT)进行有效地治疗。比如，戈谢病一型患者仅有内脏疾病，对使用重组葡萄糖脑苷脂酶(Cerezyme,GenzymeCorp.)进行补偿疗法反应良好。但是，患有影响中枢神经系统的代谢疾病(如戈谢病二型或三型)的患者对这种采用静脉输注重组酶的补偿疗法只有部分有反应，因为补偿用酶无法通过血脑屏障(BBB)进入脑部。此外，通过直接注射向脑部输注补偿用酶的试图部分被限制，原因为脑中局部高浓度酶的细胞毒性和有限的实质扩散速率(Partridge,PeptideDrugDeliverytotheBrain,RavenPress,1991)。A型神经鞘磷脂沉积病(NPA)是一种典型的溶酶体贮积症。根据UniProtKB/Swiss-Prot进入号P17405,A型神经鞘磷脂沉积病(NPA)由11号染色体(Ilpl5.4-pl5.1)上SMPD1基因缺陷引起，也称为这种疾病的早期的典型症9缺陷酶N-乙酰半乳糖胺-6-硫酸盐酸性.(i-半乳糖苷酶N-乙酰氨基葡萄糖-l-酸性鞘磷脂酶NPC-1.CL-葡萄糖苷酶.卩.-己糖胺酶B乙酰肝素N-硫酸酯酶.(X.-N-乙酰氨基葡糖苷酶乙酰辅酶A:a.-氨基葡萄糖苷N-乙酰氨基葡萄糖-6-硫酸盐.a.-N-乙酰基半乳糖苷酶a,N-乙酰基半乳糖苷酶.a,神经醇胺酶.p.-葡糖醛酸糖苷酶.P.-己糖胺酶A酸性脂肪状。神经鞘磷脂沉积病是临床和遗传不同的隐性遗传病。由溶酶体内鞘磷脂和其他代谢相关的类脂异常积累所引起，从而导致从早年开始的神经退行性病变。患者可能出现黄瘤、色素沉积、肝脾肥大、淋巴结病和智力低下。相比于普通人群，神经鞘磷脂沉积病在北欧犹太人家系出现的频率更高。NPA的特点表现为婴儿期非常早地发病，病程进展很快，导致患者三年内死亡。NPA患者缺乏酸性鞘磷脂酶(ASM)，该酶能够将鞘磷脂转化成神经酰胺。ASM对1,2-二酰基甘油磷酸胆碱(1,2-diacylglycerolphosphocholine)和1,2-二酰基甘油磷酸甘油(1，2-diacylglycerolphosphoglycerol)还具有磷脂酶C活性。该酶能够将鞘磷脂和水转化成为N-酰基神经鞘氨醇和磷酸胆碱。依照本发明，如上述表1中鉴定的任何疾病的溶酶体C积症如A型或B型祌经鞘磷脂沉积病，可以采用脑室内输注此种疾病中缺乏的酶进行治疗和/或预防。慢速输注可以达到最高的效应。在血脑屏障两侧都看到了效应，这使脑室内输注成为影响大脑和/或脏器的溶酶体贮积症的有用的输注方法。因此，在第一个方面，本发明提供了治疗或预防患者中因酶缺陷引起的溶酶体贮积症的方法，该方法包含通过脑室内输注将酶给予到患者的脑部。在相关的方面，本发明提供酶在制备用于治疗或预防患者中由患者中酶缺陷引起的溶酶体贮积症的药物中的用途，其中治疗或预防包含酶脑室内输注到脑。引起酶缺陷的原因例如酶表达缺乏、造成的活性水平下降(如酶失活)的酶突变或者体内酶清除/分解速率升高。酶缺陷引起酶底物累积，酶的输注可以减少脑中酶底物水平。溶酶体忙积症可能是上述表1中鉴定的任意一种，酶可能是一种溶酶体水解酶。根据本发明的一个实施方案，治疗了A型或B型神经鞘磷脂沉积病患者。经由脑室内输注将足以降低所述脑中鞘磷脂水平的酸性鞘磷脂酶输注到患者脑中。本发明的另一个方面是用于治疗或预防患者中因酶缺陷引起的溶酶体贮积症的试剂盒。试剂盒包括存在缺陷的酶以及用于将酶输注到脑中一个或多个脑室的导管和/或泵。这些导管或泵经过特殊设计和/或改造，适用于脑室内输注。根据一个实施方案，本发明提供用于治疗A型或B型祌经鞘磷脂沉积病患者的试剂盒。试剂盒包含酸性鞘磷脂酶和将所述酸性鞘磷脂酶输注入患者脑室的导管。仍是本发明的另一个方面是用于治疗A型或B型神经鞘磷脂沉积病患者的试剂盒。试剂盒包含酸性鞘磷脂酶和将所述酸性鞘磷脂酶输注入患者脑室的泵。根据本发明，因酶缺陷造成酶底物累积从而引起溶酶体贮积症的患者可以被进行治疗。这样的疾病包括戈谢病、I型和II型MPS病、蓬佩病、巴藤病(CLN2)，等。在特定疾病中缺乏的酶被通过脑室内输注输入患者的脑部。输注部位可以是侧脑室和/或第四脑室。依照本发明，酶输注速率可以是单次剂量快速推注，或者输注持续大约1-5分钟、大约5-10分钟、大约10-30分钟、大约30-60分钟、大约1-4小时，或者消耗超过4、5、6、7或8小时。借此所述患者脑脑酶底物水平降低。单剂量输注可能持续超过1分钟、2分钟、5分钟、IO分钟、20分钟、30分钟、1小时、2小时或者3小时。在阅读本说明书后对本领域技术人员是显而易见的这些和其它实施方案为该领域提供了治疗和/或预防溶酶体贮积症，特别是那些既涉及中枢神经系统又涉及其他脏器的的溶酶体贮积症的方法和试剂盒。图l:显示被分析鞘磷脂的脑部分的简图。Sl在脑前端，S5在脑后端。图2:显示脑室内输注rhASM降低了ASMKO小鼠脑中的SPM水平。图3:显示脑室内输注rhASM降低了ASMKO小鼠肝脏、脾脏和肺脏中的SPM水平。图4:显示脑室内输注后脑中的hASM染色。图5:显示脑室内输注rhASM六小时后ASMKO小鼠脑中SPM水平降低。图6:显示脑室内输注rhASM六小时后，ASMKO小鼠肝脏、血清和肺脏中SPM水平降低。图7:显示已记录的hASM变体及它们与疾病或酶活性的关系。图8:显示包含标明的脑室的脑横切面图。图9A和9B:分别显示脑室的侧视图和上面观。图10:显示到侧脑室中的输注。具体实施例方式本发明的实施将使用，除非另作说明，本领域技术中的免疫学、分子生物学、微生物学、细胞生物学和DNA重组的传统技术。参见例如，Sambrook，FritschandManiatis,MOLECULARCLONING:ALABORATORYMANUAL,2ndedition(1989);CURRENTPROTOCOLSINMOLECULARBIOLOGY(F.M.Ausubel,Wa/,eds.,(1987》；METHODSINENZYMOLOGY(AcademicPress,Inc.):PCR2:APRACTICALAPPROACH(M丄MacPherson,B.D.HamesandG.R.Tayloreds.(1995)),HarlowandLane,eds.(1988)ANTIBODIES,ALABORATORYMANUAL,andANIMALCELLCULTURE(R丄Freshney,ed.(1987))系列.如说明书和权利要求中所用，如果上下文没有明确指明，单数形式"a""an"和"the"都包含复数范围。举例说明，术语"acell"包括多个细胞，包括其混合物。如本文所用，术语"包含"指组合物和方法包括所述成分，但是并不排除其他成分。当用于定义组合物和方法时，术语"基本由……组成"指排除药物对组合具有任何基本重要性的其他组分。因此，如本文所定义的，基本由组分组成的组合物将不排除来源于分离和纯化方法和药学上可接受的载体如磷酸盐缓冲盐水、防腐剂等的微量污染物。术语"由……组成"指排除超出其他成分的微量组分并排除用于给予依照本发明的组合物或药物的基本方法歩骤。使用这些过渡术语定义的实施方案也在本发明的范围之内。所有的数字指标，例如pH值、温度、时间、浓度和分子量，包括范围，都是以0.1增量(+)或(-)变动的近似值。尽管不总是明确地表明所有的数字指标前都会加上"大约"这个术语，但这是应该知道的。尽管不总是明确地表明本文公开的试剂仅是示例性的以及也使用本领域公知的这些试剂的等同物，但这也是应该知道的。术语"治疗的""治疗有效量"及其同源词指物质如酶或者蛋白质的产生阻止或延缓发病、或者减轻患者一种或多种疾病症状或达到目标生物学效应如神经病理纠正的量。术语"治疗纠正"指产生阻止或延缓发病或者减轻患者一种或多种疾病症状的纠正程度。有效量可以通过公知实验方法确定。"组合物""药物"指包括活性剂的组合，例如酶和载体或其他物质，如化合物或组合物，其是无活性的(如可检测试剂或标记)或者有活性的，例如佐剂、稀释剂、粘合剂、稳定剂、缓冲液、盐、亲脂溶剂、防腐剂、佐剂，等，或两种或者更多种这些物质的混合物。载体优选药学上可接受的。它们包括药用辅料、添加剂、蛋白质、肽、氨基酸、脂质和碳水化合物(例如，糖，包括单糖、二糖、三糖、四糖和低聚糖；衍生糖如糖醇、糖醛酸、酯化糖等；多糖或糖多聚体)，其可以单独存在也可以组合存在，按重量或者按体积可以单独或组合包含1-99.99%。示例性的蛋白辅料包括血清白蛋白如人血清白蛋白(HSA)、重组人白蛋白(rHA)、明胶、酪蛋白等。代表性的氨基酸/抗体组分，其在缓冲能力中也起作用，包括丙氨酸、甘氨酸、精氨酸、甜菜碱、组氨酸、谷氨酸、天门冬氨酸、半胱氨酸、赖氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、阿斯帕坦，等。碳水化合物辅料也包括在本发明的范围内，其例子包括但不限于单糖如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖、山梨糖等；二糖如乳糖、庶糖、海藻糖、纤维二糖等；多糖如棉籽糖、松三糖、麦芽糊精、右旋糖苷类、淀粉，等；糖醇如甘露醇、木糖醇、麦芽糖醇、拉客替醇、木糖醇山梨醇(葡糖醇)和肌醇。术语载体也包括缓冲液或pH调节试剂或者包含相同物质的组合物。典型地，缓冲液为从有机酸或者碱制备的盐。代表性的缓冲液包括有机酸盐如拧檬酸、抗坏血酸、葡糖酸、碳酸、酒石酸、琥珀酸、醋酸或邻苯二甲酸的盐，Tris，盐酸氨丁三醇或者磷酸盐缓冲液。另外的载体包括多聚体辅料/添加剂，如聚乙烯吡咯酮、蔗聚糖(多聚蔗糖)、葡聚糖结合剂(如，环糊精，如2-羟丙基-.quadrature.-环糊精)、聚乙烯乙二醇、调味剂、抗微生物剂、甜味剂、抗氧化剂、抗静电剂、表面活性齐1J(如，聚山梨酯如"吐温20"和"吐温80")、脂质(如磷脂类、脂肪酸)、类固醇(如胆固醇)和螯合剂(如EDTA)。如本文所用，术语"药学上可接受的载体"包括任何标准的药物载体，例如磷酸盐缓冲盐水、水和乳剂，如油/水或水/油乳剂，以及各种类型的湿润剂。依照本发明生产和/或使用的且其包括特定的其缺陷是要被纠正的酶的组合物和药物能包括稳定剂和防腐剂和任何上面提及的具有可体内使用的额外条件的载体。载体、稳定剂和佐剂的例子可参见MartinREMINGTON'SPHARM.SCI,15thEd.(MackPubl.Co"Eastern(1975)和Williams&Williams,(1995),以及"PHYSICIAN'SDESKREFERENCE",52nded.,MedicalEconomics,Montvale,N丄(1998)。"受试者"、"个体"或者"患者"在本文可交换使用，其指脊椎动物，优选哺乳动物，更优选人。哺乳动物包括但不限于小鼠、大鼠、猴、人、农场动物、竞技用动物和宠物。如本文所用，术语"调节"指改变效应或产出的量或者强度，例如，加强、扩大、减少或降低。如本文使用，术语"改善"和"减轻"同义，指降低或减轻。例如，通过使它们更耐受，可以改善疾病或障碍的症状。对于人脑结构的鉴定，参见例如，TheHumanBrain:Surface,Three-DimensionalSectionalAnatomyWithMRI,andBloodSupply,2nded.,eds.Deuteronetal.,SpringerVela,1999;AtlasoftheHumanBrain,eds.Maietal.,AcademicPress;1997禾口Co-PlanarStereotaxicAtlasoftheHumanBrain:3-DimensionalProportionalSystem:AnApproachtoCerebralImaging,eds.Tamaracketal.,ThymeMedicalPub.1988。对于小鼠脑结构的鉴定，参见例如，TheMouseBraininStereotaxicCoordinates,2nded.,AcademicPress,2000。发明人发现，对存在溶酶体水解酶缺陷的患者脑室内输注该酶到脑导致改善的大脑和受到影响的脏器(非中枢神经系统)的代谢情况。相比于快速推注，慢速输注时其尤其真实。因此，由特定酶缺陷引起的溶酶体贮积症，如上述表1中鉴定的那些疾病，可以通过脑室内输注各自的酶进行治疗或预防。一种用于治疗A型或B型神经鞘磷脂沉积病的特别有用的酶为酸性鞘磷脂酶(ASM)，如显示在SEQIDNO:l1。一种用于治疗戈谢病的特别有用的酶为葡萄糖脑苷脂酶。一种用于治疗MPSI病的特别有用的酶为a-L-艾杜糖苷酸酶。一种用于治疗MPSII病的特别有用的酶为艾杜糖酸酯-2-硫酸酯酶。一种用于治疗蓬佩病或也称为酸性麦芽糖酶缺乏症(AMD)的II型糖原贮积病(GSDII)的特别有用的酶为ot-葡萄糖苷酶。一种用于治疗典型婴儿期巴藤病(CLN2)的特别有用的酶为三肽基肽酶。根据本发明使用和/或输注的酶可以是采用本领域公知的方法生产的酶的重组形式。在一个实施方案中，酶是重组人酶。可将溶酶体酶类，更特定地溶酶体水解酶输注到存在所述酶的缺陷的患者的一个或多个充满脑脊液(CSF)的脑室。脑脊液为充满脑室的清亮液体，存在于蛛网膜下空隙，并围绕脑和脊髓。脑脊液由脉络丛产生，通过脑部组织液的渗出或传送进入脑室。脉络丛是顺侧脑室底部到第三和第四脑室顶部排列的结构。某些研究表明，这些结构能够每天产生400-600ccs的液体，相当于一天内充盈中枢神经系统空隙四次的量。在成人中，这种液体的体积被计算为从125至U50ml(4-5残基1-46组成了分泌时切割掉的信号序列盎司)不等。脑脊液不断的形成、循环、吸收。某些研究表明，每天大约产生430到450ml(近似两杯)的脑脊液。某些计算估计，成人中脑脊液的产生速度约为每分钟0.35ml，婴儿中约为每分钟0.15ml。脑脊液主要由侧脑室的脉络丛产生。脑脊液从脑室间孔进入第三脑室，其中它通过从第三脑室生产被加入，并继续下行从脑水导管进入第四脑室。第四脑室汇入更多的脑脊液；随后脑脊液从马让迪孔和卢施卡孔流入蛛网膜下间隙。然后循环流动遍及脑基底层，下行环绕脊髓，上行覆盖大脑半球。脑脊液通过蛛网膜绒毛和颅内血管窦排空进入血液，借此传递注入脑室的酶不仅进入脑还进入已知的受溶酶体贮积症影响的脏器。尽管SEQIDNO:1中显示了特定的氨基酸序列，保持有活性的此序列的突变体，例如人群中的正常突变体，同样可以使用。典型地，这些正常突变体和SEQIDNO:1中所示的序列仅有一到两个残基差异。根据本发明使用的SEQIDNO:1的突变体，不管是否为自然发生，与SEQIDNO:1至少95%、96%、97%、98%或99%相同。根据本发明，也可以使用其他酶的突变体。然而，与使用的酶无关，不应该使用与疾病或者降低的活性相关的突变体。典型地，将酶的成熟形式进行输注。在SEQIDNO:1的情况下，酶的成熟形式开始于如SEQIDNO:1中所示的第47个残基。与疾病相关的突变体显示在图7中。以相似的方式，人群中这样的溶酶体贮积症的酶如葡萄糖脑苷脂酶、cx-L-艾杜糖苷酸酶、艾杜糖酸酯-2-硫酸酯酶、酸性(x-葡萄糖苷酶和三肽基肽酶的保持酶活性的正常突变体同样可以使用。根据本发明的试剂盒由各个分开的部分组成。虽然它们可以包装在单个储存盒中，它们也可以单独分装。甚至单个储存盒也可以分成间隔。典型地，试剂盒中提供一套说明书并提供脑室内输注酶例如溶酶体水解酶的说明。说明书可能是打印格式、电子格式、在光盘、软盘、具有包装中提供的因特网地址上的说明书视频或者DVD，或这些方式的组合。除去酶、一个或更多个插管或导管和/或泵以外，还提供其它组分，如稀释剂、缓冲液、溶剂、条带、螺丝钉和维护工具。通过本发明的方法治疗的人群包括但不限于患有神经代谢疾病如溶酶体贮积症，如表1中列举的疾病，特别是假如这样的疾病影响中枢神经系统和脏器的患者，或者存在患病可能的高危人群。在示例性的实施方案中，疾病是A型神经鞘磷脂沉积病。ASM或者其他溶酶体水解酶能够整合入药物组合物，有助于治疗如抑制、减弱、防止或改善特征为溶酶体水解酶活性水平不充分的状况。这种药物组合物将被输注到溶酶体水解酶存在缺陷的巳发患者和可能出现所述缺陷的高危人群。组合物应该在药学上可接受的载体中包含治疗用量或预防用量的ASM或者其他溶酶体水解酶。药学上可接受的载体可以是任何可配伍的、没有毒性的、适合将多肽载入患者体内的物质。无菌水、醇、脂肪和蜡质都可以用来作为载体。药学上可接受的佐剂、缓冲剂、分散剂等也可以掺入药物组合物中。载体可与ASM或者其他溶酶体水解酶结合成任何适合于脑室内注射或输注或其它的形式(这种形式可能也适合于静脉注射或者鞘内注射)。合适的载体包括，例如，生理盐水、抑菌水、Crem叩horEL.TM.(BASF,Parsippany,N丄)、磷酸盐缓冲盐水(PBS)、其它盐溶液、葡萄糖溶液、甘油溶液、水和例如用石油、动物油、植物油或者合成来源的油(花生油、大豆油、矿物油或者芝麻油)制成的油乳剂。人造脑脊液也可以作为载体。载体优选无菌和无致热原。药物组合物中ASM或者其他溶酶体水解酶浓度变化很广，即从按重量至少占总组合物的大约0.01%、0.1%、1%至多达20%或更多。对于ASM或者其他溶酶体水解酶的脑室内输注，组合物必须无菌并且为液体。组合物在生产和储存条件下必须稳定，并能抵御微生物如细菌和真菌的污染行为。避免微生物污染行为可以使用不同的抗细菌和抗真菌剂，例如对羟苯甲酸酯、氯丁醇、石炭酸、硫汞柳酸钠等获得。在许多情况下，在组合物中优选包括等渗物质如糖、多元醇如甘露醇、山梨醇等、氯化钠。ASM或者其他溶酶体水解酶的剂量因个体不同有些变化，这取决于特定的酶及其体内活性的特异性、给药途径、医疗条件，患者的年龄、体重或性别、患者对ASM、其他溶酶体水解酶或者载体成分的敏感性以及其他主治医师能很容易考虑到的因素。虽然药物剂量由于患者和疾病的原因可能变化，通常输注给患者的酶用量约为从每月每50公斤患者体重O.lmg到大约1000mg。在一个实施方案中，输注给患者的酶用量约为每月每50公斤患者体重lmg到500mg。在另一个实施方案中，输注给患者的酶用量约为每月每50公斤患者体重5mg到300mg，或者约为每月每50公斤患者体重10mg到200mg。输注速率可以是单次剂量输注以快速推注输注。单剂量也可输注持续大约1-5分钟、5-10分钟、10-30分钟、30-60分钟、1-4小时或者持续超过4、5、6、7或8小时。它可能花费超过l分钟、2分钟、5分钟、IO分钟、20分钟、30分钟、1小时、2小时或者3小时。申请人观察到，虽然脑室内快速推注是有效的，但是慢速输注非常有效。虽然申请人不希望被任何特定操作所束缚，据认为，由于脑脊液的代谢回转，慢速输注更加有效。虽然文献中估计的和计算的不同，据认为人类脑脊液代谢回转的时间大约在4、5、6、7或8小时。在一个实施方案中，本发明的慢速输注时间需要测定，以便输注时间与脑脊液代谢回转的时间相等或者更长。代谢回转时间取决于物种、大小及年龄，但可通过使用本领域公知方法进行测定。输注可能持续一天或者更多天的周期。患者可能每月接受一次、两次、三次或者更多次的治疗，例如每周一次或者每两周一次。如被患者脑部和其他脏器中疾病底物重新累积所指明地，患者可能在其生命期内需要重复输注。可采用本领域公知的任何鉴定和定量相关底物的技术，该技术可能在取自脑部和/或一个或多个脏器的一份或多份样品上进行，对重新累积进行测定。这样的技术包括酶实验和/或免疫学实验，例如放射免疫测定法或酶联免疫测定法。脑脊液通过蛛网膜绒毛和颅内血管窦排空进入血液，借此传递输注的酶进入已知受溶酶体贮积症影响的脏器。通常受神经鞘磷脂沉积病影响的脏器包括肺脏、胰脏、肾脏和肝脏。脑室内慢速输注至少在脑和潜在地在脏器中提供了针对输注的酶的降低的底物含量。在脑部、肺脏、胰脏、肾脏和/或肝脏中累积的底物的减少可以很明显。减少能够超过10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%。不同患者或者同一患者的不同脏器中的减小可不必相同。减少可以通过任何的本领域公知技术进行测定，例如通过酶实验和/或免疫学实验技术，如本文其它地方所讨论的。假如需要，能将人类大脑结构和其他哺乳动物的大脑的相似结构联系起来。例如，大多数哺乳动物，包括人类和啮齿类，显示了相似的内嗅区-海马体投射的组织结构(topographicalorganization),具有投射至海马体背侧或者中隔的内嗅皮层外侧和内侧中的神经元，而至海马体腹侧的投射神经元主要从内嗅皮层内侧部中的神经元起源(PrinciplesofNeuralScience,4thed.,edsKandeletal.McGraw-Hill,1991;TheRatNervousSystem,2nded.,ed.Paxinos，AcademicPress,1995)。此夕卜，内嗅皮层中的第二层细胞投射至齿状回，终止于齿状回分子层外三分之二处。来源于第三层细胞的轴突两侧投射至海马体的CA1和CA3海马角区域，终止于多孔层(stratumlacunose)分子层。在示例性实施方案中，LSD酶被输注进入受治者或患者一个或两个侧脑室。通过输注进入侧脑室，酶能到达脑部产生最大量脑脊液的部位。酶也可以被输注进入一个以上的脑室。治疗可以由每个耙位单次输注组成，也可以重复进行。可以使用多个靶位进行输注/注射。例如，酶被输注进入的脑室可以包括侧脑室和第四脑室。在一些实施方案中，除了第一个输注靶位之外，含有LSD酶的组合物可被输注到第一个耙位对侧或者同侧的另一个靶位。注射/输注可以是单次或者多次，单侧或者双侧。为了特异性地输注含酶溶液或组合物到中枢神经系统的特定位置，例如到特定脑室，比如到侧脑室或者第四脑室，可以采用脑功能区定位的显微注射方法。举例来说，手术当天，患者脑部具有固定在位的立体定位架(拧紧固定于头盖骨)。使用高分辨率的核磁共振对带有立体定位架(MRI相匹配的可信标记)的脑部进行成像。核磁共振图像传送到运行立体定位的电脑。使用一系列冠状、矢状和轴向图像确定载体注射的靶位和轨迹。这个软件能直接将轨迹转换成与立体定位架相匹配的三维形式。在头颅进入部位上方钻孔，立体定位仪用植入在设定深度的针定位。在药学上可接受的载体中的酶溶液被注射。也可能使用额外的给药途径，例如可直接目视下的皮质表层给药方式，或其他非脑功能区定位应用。慢速输注的一种方法是使用泵。这样的泵都可通过购买获得，例如购自Alzet(Cupertino,CA)或者Medtronic(Minneapolis,MN)。这种泵可以为可植入式的。输注酶的另外一种便利的方法是使用插管或者导管。插管或者导管可用于不同时间的多次输注。可通过脑功能定位植入插管和导管。仔细考'虑的是，使用多次输注治疗典型的溶酶体贮积症患者。导管和泵可以单独使用也可以联合使用。溶酶体贮积症(LSD)包括超过四十种遗传病，其中很多涉及各种溶酶体水解酶的遗传缺陷。在表l中列举了典型的溶酶体贮积症和相关的存在缺陷的酶。戈谢病是由溶酶体水解酶葡萄糖脑苷脂酶(GC)存在遗传缺陷所引起，导致其底物葡萄糖苷(脂)酰鞘氨醇(GL-1)在组织细胞溶酶体中累积。在各种组织中出现组织巨噬细胞(戈谢细胞)中的GL-1的进行性累积。这种累积的范围部分依赖于基因型。临床上己经鉴定了三种不同的戈谢病表型，非神经性1型，其最常见，发病时间从幼童时期到成年；神经性2型和3型，分别在婴儿期和幼童时期呈现。任何这些表型都可以依照本发明进行治疗。所有类型戈谢病共同的主要临床表现为肝脾肥大、血细胞减少、病理性骨折，并且，偶尔地，肺衰竭。戈谢病的详细论述可以参照OnlineMetabolic&MolecularBasesofInheritedDiseases,Part16,Chapter146and146.1(2007)。在明显涉及中枢神经系统的2型和3型戈谢病患者中，通过脑室内输注缺陷的LSD酶可以改善脑部和潜在受影响脏器(非中枢神经系统)的代谢状况。在患有1型戈谢病的患者中的脑室内输注存在缺陷的LSD酶可以改善受影响脏器(非中枢神经系统)的代谢情况。从通过靶向断裂相关的小鼠基因制造的小鼠模型制备了戈谢病的动物疾病模型。例如，存在在小鼠GC基因座包含D409V突变的戈谢疾病小鼠(Xu,Y-Hetal.(2003).Am.J.Pathol.163:2093-2101)。杂合小鼠g6"D409V/null显示了在内脏组织中正常小鼠GC活性的约5%，并在四月龄时在肝脏、脾脏、肺脏和骨髓中发展了充盈脂质的巨噬细胞(戈谢细胞)。这个动物模型可作为评价戈谢病患者脑室内输注存在缺陷的LSD酶的益处、测定输注条件的合适系统。尼曼-匹克病(NPD)是溶酶体贮积症，为遗传性的神经代谢异常，特征是遗传性的酸性鞘磷脂酶缺陷(ASM;鞘磷脂胆碱磷酸水解酶，EC3丄3.12)。功能性ASM蛋白的缺少导致整个脑内的神经元和神经胶质的溶酶体内鞘磷脂底物的累积。这导致核周体内大量膨胀的溶酶体形成，其是A型NPD的标志性特征和主要的细胞表型。膨胀溶酶体的存在与正常细胞功能的丢失和进行性的祌经变性过程相关，其导致受影响个体在幼童时期死亡(TheMetabolicandMolecularBasesofInheritedDiseases,eds.Scriver"a/"McGraw-Hill,NewYork,2001,pp.3589-3610)。-次级细胞表型(例如其他代谢异常)也与此疾病相关，特别是溶酶体间隔中胆固醇的高水平累积。鞘磷脂对胆固醇有很强的亲和性，其导致ASMKO小鼠和患者的溶酶体中大量的胆固醇的分离(Leventhale/a/.(2001)J.Biol.Chem.，276:44976-44983;Slotte(1997)Subcell.Biochem.,28:277-293;和Viana"(19卯)J.Med.Genet"27:499-504.)。NPD病详细的论述可能于OnlineMetabolic&MolecularBasesofInheritedDiseases,Part16，Chapter144(2007)找到。存在NPD的动物模型。例如，ASMKO小鼠是认可的A和B型尼曼-匹克病模型(Horinouchietal.(1995)Nat.Genetics,10:288-293;Jinetal.(2002)J.Clin.Invest"109:1183-1191;和Otterbach(1995)Cell,81:1053-1061)。脑室内输注缺陷的LSD酶导致脑和受影响的脏器(非CNS)的代谢状态改善。粘多糖贮积病(MPS)是一组溶酶体贮积异常，其由催化葡萄糖胺聚糖(粘多糖)变性的酶缺陷引起。存在ll种已知酶缺陷，其产生7种不同的MPS，包括MPSI(胡氏，射氏和胡-射二氏综合症)和MPSII(亨特综合症)。依照本发明任何MPS均可被治疗。MPS详细的论述可能于OnlineMetabolic&MolecularBasesofInheritedDiseases,Part16，Chapter136(2007)中找到。存在多种MPS动物模型，其可来源于狗、猫、大鼠、小鼠和山羊中自然发生的突变，也可以是通过耙向破坏相关小鼠基因而创建的小鼠模型。这些动物模型的生物化学和代谢特征一般与发现于人类的特征极为相似；但是，临床症状可能较轻。例如，MPSI认可的模型包括鼠模型[Clark，LAetal.,Hum.Mol.Genet.(1997),6:503]和犬模型[Menon,KPetal.,Gewwz/c^(1992),14:763]。例如，MPSII认可的模型包括小鼠模型[Muenzer,丄etal.,(2002),ActaPaediatr.Suppl.;91(439):98-9]。在涉及中枢神经系统的MPS中，如同在MPSI和MPSII患者中发现的那样，脑室内输注缺陷的LSD酶导致脑和潜在受影响的脏器(非CNS)代谢状态改善。蓬佩病，或II型糖原贮积病(GSDII)，也称为酸性麦芽糖酶缺乏症(AMD),是遗传性的糖原代谢异常，由受影响个体的所有组织中溶酶体水解酶酸性cc-糖苷酶活性缺陷引起。酶的缺乏导致许多组织中正常结构的溶酶体内糖原的累积。这种累积最显著的特征是心肌、骨骼肌和婴儿的肝脏组织的广泛异常。在迟发型GSDII中，溶酶体内糖原的累积事实上仅限于骨骼肌，且程度较轻。提示诊断的肌电图异常包括假性肌强直性放电和兴奋性增强，但在青少年和成年发病的患者中，这种异常可在不同的肌肉组织中不同。CAT扫描可以显示受影响的肌肉的位置。大多数患者血浆中肌酸激酶(CK)升高，肝的酶升高，尤其见于成年发病的患者。存在几种自然发生的婴儿期发病和迟发型动物模型。存在基因敲除小鼠模型[BijvoetAGetal.,Hum.Mol.Genet.(1998);7:53-62.]。酶治疗的改善作用被描述于基因敲除小鼠模型[Raben,Netal.,Mol.Genet.Metab.(2003);80:159-69]和鹌鹑模型中。脑室内输注缺陷的LSD酶导致脑和潜在受影响的器官(非-CNS)代谢状态改善。神经元蜡样褐脂质沉积症(NCL)是一组神经变性疾病，通过在脑和其他组织有自发荧光物质("老化色素")的沉积区别于其他神经变性疾病。主要临床特征包括癫痫发作、精神运动退化、失明和早年死亡。NCL的不同亚型已经被识别，其在症状出现的年龄和电子显微镜显示储存物质的出现上不同。三种主要类型-婴儿型(INCL)、典型的婴儿晚期(LINCL)和青少年型(JNCL，也称为巴藤病)分别由CLN1、CLN2和CLN3基因的常染色体隐性突变引起。CLNl(软脂酰蛋白硫酯酶)禾口CLN2(三肽基肽酶或肽酶(pepinase))基因的蛋白产物为可溶性的溶酶体酶，然而CLN3蛋白(巴藤素(battenin))为溶酶体膜蛋白，CLN5蛋白亦同(暂时的)。在几种形式的NCL中鉴定编码溶酶体蛋白基因突变可以识别褐脂质沉积症是真性溶酶体贮积病。根据本发明，NCL的任何一个亚型均可治疗。关于NCL疾病详细的论述可能于OnlineMetabolic&MolecularBasesofInheritedDiseases,Part16，Chapter154(2007)中找到。自然发生的NCL疾病被描述于绵羊、狗和靶向破坏某相关小鼠基因而衍生的小鼠模型[参见例如Katz,MLetal.,J.Ne画ci.Res.(1999);57:551-6;Cho,SKetal.,Glycobiology(2005);15:637-48.]。脑室内输注缺陷的LSD酶可使脑和可能受影响的的脏器(非CNS)的代谢状态改善。公开在表l中的其他溶酶体贮积症的详细论述见，其中脑室内输注缺陷的LSD酶，可能在OnlineMetabolic&MolecularBasesofInheritedDiseases,Part16，(2007)中找到。上述内容大致公开了本发明。本文列出的所有参考文献均通过引用整合。更全面的了解可参照以下特定实施例获得，实施例仅供说明之用，并不意味着限定发明的范围。实施例1动物模型ASMKO小鼠是被认可的A和B型尼曼-匹克病动物模型(Horinouchietal.(1995)Nat.Genetics,10:288-293;Jinetal.(2002)J.Clin.Invest.,109:1183-1191;和Otterbach(1995)Cell,81:1053-1061)。尼曼-匹克病(NPD)被归类于溶酶体贮积症，为遗传性的神经代谢异常，特征是遗传性的酸性鞘磷脂酶缺陷(ASM;鞘磷脂胆碱磷酸水解酶，EC3丄3.12)。功能性ASM蛋白的缺乏导致整个脑部神经元和祌经胶质溶酶体内鞘磷脂底物的累积。这导致核周体内大量膨胀溶酶体的形成，是A型NPD的标志性特征和主要的细胞表型。膨胀溶酶体的存在与正常的细胞功能的丢失和进行性的神经变性过程相关，导致幼童时期受影响的个体死亡(TheMetabolicandMolecularBasesofInheritedDiseases,eds.Scriver"a/.，McGraw-Hill,NewYork,2001,pp.3589-3610)。次级细胞表型(例如其他代谢异常)也与此疾病相关，特别是溶酶体分隔中胆固醇的高水平累积。鞘磷脂对胆固醇有很强的亲和性，其导致ASMKO小鼠和患者溶酶体中大量的胆固醇的分离(LeventhalWd(2001)J.Biol.Chem.,276:44976-44983;Slotte(1997)Subcell.Biochem.，28:277-293;和VianaWa/.(1990)J.Med.Genet"27:499-504.)。实施例2"ASMKO小鼠中rhASM的连续性脑室内输注"目的测定脑室内输注重组人ASM(rhASM)对ASMKO小鼠脑中的贮积病理(即鞘磷脂和胆固醇贮积)有何种影响。方法通过脑功能定位向12到13周龄间的的ASMKO小鼠移植留置导管。14周龄时通过使用与泵连接的输注探针(安装在导管内)每隔24h向小鼠输注.250mghASM(n=5)(.01mg/h)，连续4天(共给药lmg)。输注前将冻干的hASM用人造脑脊液(aCSF)溶解。输注结束3天后处死小鼠。在处死时，小鼠被注射过量的戊巴比妥(>150mg/kg)后灌注PBS或413/。多聚甲醛。取下脑、肝、肺和脾进行鞘磷脂(SPM)水平分析。在进行SPM分析前将脑组织分成5部分(S^前脑，85=后脑；见图.l)表2.<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>结果总结连续4天以.250mg/24h脑室内输注hASM(共lmg)导致整个ASMKO脑内hASM染色和菲里平(即胆固醇r:存)清除。生物化学分析显示脑室内输注hASM也会导致整个脑内的SPM水平的总体减少。SPM水平降低至野生型(WT)水平。SPM的显著降低也见于肝脏和脾脏(肺脏中也见下降趋势)。实施例3"ASMKO小鼠中hASM的脑室内输注II"目的测定在6h输注时间的最低有效剂量。方法通过脑功能定位向12到13周龄间的ASMKO小鼠移植留置导管。14周龄时在6小时周期按以下剂量之一向小鼠输注hASM:10mg/kg(.250mg;n=12)、3mg/kg(.075mg;n=7)、1mg/kg(.025mg;n=7)、.3mg/kg(.0075mg;11=7)或aCSF(人造脑脊液；n=7)。6h输注后立即从每个剂量水平组取两只小鼠用4%多聚甲醛灌注以获得脑内酶的分布情况(也从这些鼠收集血液来确定血清hASM的水平)。每组剩余的小鼠于输注后1周处死。来源于这些小鼠的脑、肝和肺组织用于分析SPM水平，同研究(study)05-0208。表3.<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>结果总结无论何种剂量，在6h期间内向脑室内输注hASM导致整个脑内SPM水平显著降低。用剂量>.025mg处理的小鼠脑SPM水平降低至野生型水平。脏器SPM水平呈剂量依赖性的显著降低(但是未至野生型水平)。为支持此发现，也检测了输注了hASM蛋白的ASMKO小鼠血清中的hASM蛋白水平。组织学分析显示脑室内给予hASM后hASM蛋白在整个脑广泛分布(从Sl到S5)。实施例4"ASMKO小鼠中rhASM的脑室内输注III"目的测定(1)6h输注hASM后(剂量二.025mg)SPM在脑内(和脊髓)重新累积所需的时间；(2)hASM脑室内给药效果是否存在性别差异(先前的试验显示在肝脏底物的积累存在性别差异，这种现象在脑内是否存在还不清楚)。方法通过脑功能定位向12到13周龄间的ASMKO小鼠移植留置导管。14周龄时在6h期间内向小鼠输注.025mghASM。小鼠脑室内输注hASM后，小鼠在输注后1周(n=7雄性，7雌性)或2周(n=7雄性，7雌性)或3周(n=7雄性，7雌性)处死。在处死时，取其脑、脊髓、肝脏和肺用于SPM分析。表4.<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>为用于SPM分析，组织标本被准备。实施例5"脑室内输注rhASM对ASMKO小鼠认知能力的影响"目的测定脑室内注射rhASM是否减轻ASMKO小鼠疾病导致的认知缺陷。方法通过脑功能定位向9到10周龄间的ASMKO小鼠移植留置导管。13周龄时在6小时期间内向小鼠输注.025mghASM。在14和16周龄时，用Barnes迷宫对小鼠进行认知能力测验。实施例6"脑室内输注后hASM蛋白在ASMKO小鼠中枢神经系统的分布"目的测定脑室内输注hASM后ASMKO小鼠脑和脊髓内hASM蛋白(作为时间功能)的分布。方法通过脑功能定位向12到13周龄间的ASMKO小鼠移植留置导管。14周龄时在6h期间内向小鼠输注.025mghASM。输注程序后立刻处死小鼠或于1周、2周或3周后处死。表5.显示了可与用于治疗如表1中所示的酶在其中缺陷的疾病的特定酶使用的输注时间。输注时间<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>参考文献所引用的每个参考文献均清楚的整合与此。1)BelichenkoPV，DicksonPI，PassageM,JunglesS,MobleyWC,KakkisED.Penetration,diffusion,anduptakeofrecombinanthumanalpha-1-iduronidaseafterintraventricularinjectionintotheratbrain.MolGenetMetab.2005;86(1-2》141-9.2)KakkisE,McEnteeM,VoglerC，LeS,LevyB,BelichenkoP，MobleyW，DicksonP,HansonS,PassageM.IntrathecalenzymereplacementtherapyreduceslysosomalstorageinthebrainandmeningesofthecaninemodelofMPSI.MolGenetMetab.2004;83(1-2):163-74.3)BembiB,CianaG,ZanattaM,etal.Cerebrospinal-fluidinfusionofalgluceraseinthetreatmentforacuteneuronopathicGaucher'sdisease.PediatrRes1995;38:A425.4)LonserRR,WalbridgeS，MurrayGJ,AizenbergMR，VortmeyerAO,AertsJM，BradyRO,OldfieldEH.ConvectionperfusionofglucocerebrosidaseforneuronopathicGaucher'sdisease.AnnNeurol.2005Apr;57(4):542-8.权利要求1、治疗A或B型尼曼-匹克病患者的方法，包括下述步骤经由脑室内输注向患者脑内给予足以降低所述脑内鞘磷脂水平的酸性鞘磷脂酶。2、根据权利要求1所述的方法，其中给予的量足以降低患者肝脏中的鞘磷脂水平。3、根据权利要求1所述的方法，其中给予的量足以降低患者肺脏中的鞘磷脂水平。4、根据权利要求1所述的方法，其中给予的量足以降低患者脾脏中的鞘磷脂水平。5、根据权利要求1所述的方法，其中给予的量足以降低患者肾脏中的鞘磷脂水平。6、根据权利要求1-5任一项所述的方法，其中给予的量足以将患者脑内的鞘磷脂水平降低至少10%。7、根据权利要求6所述的方法，其中给予的量足以将患者脑内的鞘磷脂水平降低至少20%。8、根据权利要求7所述的方法，其中给予的量足以将患者脑内的鞘磷脂水平降低至少30%。9、根据权利要求8所述的方法，其中给予的量足以将患者脑内的鞘磷脂水平降低至少40%。10、根据权利要求9所述的方法，其中给予的量足以将患者脑内的鞘磷脂水平降低至少50%。11、根据权利要求10所述的方法，其中给予的量足以将患者脑内的鞘磷脂水平降低至少60%。12、根据权利要求l-ll任一项所述的方法，其中给药步骤使用泵。13、根据权利要求1-12任一项所述的方法，其中酸性鞘磷脂酶通过留置导管给药。14、根据权利要求1-13任一项所述的方法，其中对患者体内的鞘磷脂水平进行监测，并根据测定的鞘磷脂水平给予额外的酸性鞘磷脂酶。15、根据权利要求l-14任一项所述的方法，其中酸性鞘磷脂酶是人酸性鞘磷脂酶。16、根据权利要求l-14任一项所述的方法，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少95%的氨基酸序列同一性。17、根据权利要求16所述的方法，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少96%的氨基酸序列同一性。18、根据权利要求17所述的方法，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少97%的氨基酸序列同一性。19、根据权利要求18所述的方法，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少98%的氨基酸序列同一性。20、根据权利要求19所述的方法，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少99%的氨基酸序列同一性。21、根据权利要求20所述的方法，其中酸性鞘磷脂酶的序列是如SEQIDNO:1所示的序列。22、根据权利要求1-21任一项所述的方法，其中给药步骤包括多次输注。23、根据权利要求1-21任何一项所述的方法，其中给予单次剂量的步骤以使单次剂量给药耗时多于4小时的速率进行。24、根据权利要求23所述的方法，其中给予单次剂量的步骤以使单次剂量给药耗时多于5小时的速率进行。25、根据权利要求24所述的方法，其中给予单次剂量的步骤以使单次剂量给药耗时多于6小时的速率进行。26、根据权利要求25所述的方法，其中给予单次剂量的步骤以使单次剂量给药耗时多于7小时的速率进行。27、根据权利要求26所述的方法，其中给予单次剂量的步骤以使单次剂量给药耗时多于8小时的速率进行。28、用于治疗A或B型尼曼-匹克病患者的试剂盒，其包括酸性鞘磷脂酶；和向患者脑室输注所述酸性鞘磷脂酶的导管。29、用于治疗A或B型尼曼-匹克病患者的试剂盒，其包括酸性鞘磷脂酶；和向患者脑室输注所述酸性鞘磷脂酶的泵。30、根据权利要求28所述的试剂盒，进一歩包括向患者脑室输注所述酸性鞘磷脂酶的泵。31、根据权利要求28或29所述的试剂盒，其中酸性鞘磷脂酶是人酸性鞘磷脂酶。32、根据权利要求28或29所述的试剂盒，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少95%的氨基酸序列同一性。33、根据权利要求28或29所述的试剂盒，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少96%的氨基酸序列同一性。34、根据权利要求28或29所述的试剂盒，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少97%的氨基酸序列同一性。35、根据权利要求28或29所述的试剂盒，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少98%的氨基酸序列同一性。36、根据权利要求28或29所述的试剂盒，其中酸性鞘磷脂酶与SEQIDNO:1所示的酸性鞘磷脂酶分享至少99%的氨基酸序列同一性。37、根据权利要求28或29所述的试剂盒，其中酸性鞘磷脂酶序列是如SEQIDNO:l所示的序列。38、治疗患有由于酶缺陷引起的溶酶体贮积症的患者的方法，该方法包括通过脑室内输注向患者脑部给予酶。39、根据权利要求38所述的方法，其中酶缺陷导致酶底物的累积且给药后所述脑中的底物水平降低。40、根据权利要求38-40任一项所述的方法，其中溶酶体贮积症为A型尼曼-匹克病，酶为鞘磷脂酶。41、根据权利要求38-40任一项所述的方法，其中溶酶体贮积症为B型尼曼-匹克病，酶为鞘磷脂酶。42、根据权利要求38-40任一项所述的方法，其中溶酶体C积症是I型粘多糖IC积症综合症，酶是cx-L-艾杜糖醛酸酶。43、根据权利要求38-40任一项所述的方法，其中溶酶体ie积症是II型粘多糖IC积症综合症，酶是艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶。44、根据权利要求38-40任一项所述的方法，其中溶酶体贮积症为戈谢病，酶为葡糖脑苷脂酶。45、根据权利要求38-40任一项所述的方法，其中溶酶体贮积症为蓬佩病，酶为a-葡糖苷酶。46、根据权利要求38-40任一项所述的方法，其中溶酶体贮积症为典型婴儿后期巴藤病(CLN2)，酶为三肽基肽酶。47、根据权利要求38-46任一项所述的方法，其中以使单次剂量给药耗时多于4小时的速率给予酶。48、根据权利要求47所述的方法，其中速率为使单次剂量给药耗时多于5小时。49、根据权利要求48所述的方法，其中速率为使单次剂量给药耗时多于6小时。50、根据权利要求49所述的方法，其中速率为使单次剂量给药耗时多于7小时。51、根据权利要求50所述的方法，其中速率为使单次剂量给药耗时多于8小时。52、酶在制备预防或治疗患者中溶酶体贮积症的药物中的用途，该疾病由患者体内酶的缺陷引起，其中所述的治疗或预防包括脑室内给予酶。53、根据权利要求52所述的用途，其中缺陷导致酶底物的累积且给予该酶导致脑内底物水平降低。54、根据权利要求52或53所述的用途，其中缺陷导致酶底物的累积且给予该酶导致脑和一个或多个脏器内底物水平降低。55、根据权利要求52-54任一项所述的用途，其中酶是溶酶体水解酶。56、根据权利要求52-55任一项所述的用途，其中溶酶体贮积症是一种在表1中鉴定的疾病。57、根据权利要求56所述的用途，其中疾病选自A型尼曼-匹克病、B型尼曼-匹克病、I型粘多糖贮积病综合症、II型粘多糖贮积病综合症、戈谢病、蓬佩病或典型婴儿晚期巴藤病(CLN2)。58、根据权利要求52-57任一项所述的用途，其中以给药耗时多于4小时、优选多于5小时、更优选多于6小时、更优选多于7小时、最优选多于8小时的速率给予单次剂量的酶。59、根据权利要求52-58任一项所述的用途，其中所述的治疗或预防包括向脑的侧脑室和/或第四脑室给予该酶。60、用于治疗或预防由溶酶体酶缺陷引起的溶酶体贮积症的试剂盒，所述试剂盒包括酶和特别适应脑室内给予酶的导管和/或泵。61、根据权利要求5所述的试剂盒，其中酶是溶酶体水解酶。全文摘要采用脑室内输注疾病病因上所缺陷的酶能够成功地治疗溶酶体贮积症。慢速输注可以达到最大的效应。令人惊讶的是，血脑屏障两侧都能观察到效应，这使它成为影响大脑和脏器的溶酶体贮积症的理想的输注方法。文档编号A61F2/00GK101431960SQ200780006925公开日2009年5月13日申请日期2007年1月22日优先权日2006年1月20日发明者J·道奇,L·谢哈布丁,M·帕西尼,S·郑申请人:建新公司