专利名称：一种阿德福韦酯无水结晶物的制备方法、所得的阿德福韦酯无水结晶物及其应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及核苷类药物领域，具体地说涉及阿德福韦酯无水结晶 物的制备方法、所得的产品及其应用。
背景技术：
阿德福韦酯，其化学名称为9-{[2-[[双(特戊酰氧基)甲氧基]
磷酰基]甲氧基]乙基}腺嘌呤，是一种新型的HBV DNA聚合酶抑制剂， 阿德福韦酯能有效地抑制HBV DNA的复制，使HBV DNA滴度迅速降低。 在出现拉米夫定抗药性的患者中，阿德福韦酯同样能够继续有效地抑 制变异株。其对人和动物的反转录病毒感染(如HIV、 SIV、 FIV等)、 各种肝炎病毒感染(如HBV、 HCV等)和DNA病毒感染(如疱疹病毒、， HSV1、 HSV2等)显示出较好的抗病毒活性。
目前公开的几种阿德福韦酯结晶物，生产成本高，结晶物纯度较 低，这样的结晶物应用于制备治疗抗乙型肝炎病毒药物中，抗病毒活 性性能不高。中国专利CN101054393公开了一种阿德福韦酯无水结 晶物，其特征在于XRD:使用Cu-Ka辐射，以度2 9表示的X射 线粉末衍射光谱在约3.2、 6.5、 8.6、 15.7、 19.6、 21.6有特征吸 收峰；DSC: DSC吸热转变在约80°C;红外吸收光谱KBr压片，在 约3287cm1、 3175cnf1、 1753cm—\ 1254cnf1、 1147 cm—1、 1025cm_1、 970cm—1 有特征吸收峰。但该发明公开的阿德福韦酯无水结晶物的制备方法结 晶收率及结晶纯度一般。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种生产成本低、结晶收率高， 结晶物纯度高的阿德福韦酯无水结晶物制备方法；本发明要解决的另 一技术问题是提供一种区别于现有技术的阿德福韦酯无水结晶物及 该阿德福韦酯无水结晶物的应用。
本发明所采用的技术方案是 一种阿德福韦酯无水结晶物的制备方法，步骤为A、将阿德福韦酯粗品用95%乙醇溶解；B、在结晶釜 中加入醚，搅拌降温至2 5°C，将步骤A所得的阿德福韦酯溶解液滴 加进结晶釜中，搅拌结晶；C、将步骤C的结晶物过滤，收集结晶物 湿品，再烘干处理，所述的醚是异丙醚、正丁醚、仲丁醚中的一种或 者几种混合物。
进一步上述阿德福韦酯无水结晶物的制备方法中，所述步骤A 中，加热阿德福韦酯粗品溶解液至40士1(TC时，阿德福韦酯粗品完 全溶解，再降温至10士2'C以后，装入恒压漏斗，该恒压漏斗是本领 域技术人员常用的恒压漏斗。所述步骤B中，阿德福韦酯粗品结晶后， 低温保温20 50分钟，步骤C中所述的烘干处理是在减压烘箱中减 压烘干处理，温度升高至30 5(TC、真空为-0. 05 -0. lmpa。所述 的95%乙醇重量是阿德福韦酯粗品重量的1. 2 2. 5倍。所述醚的重 量是阿德福韦酯粗品重量的3. 5 150倍。
上述阿德福韦酯无水结晶物的制备方法简单，易操作，所得结晶 收率高达96%以上，结晶物纯度达到99.5%以上。
本发明还提供了一种阿德福韦酯无水结晶物及其用于制备治疗 抗乙型肝炎病毒药物的应用。所述晶型使用Cu-Ka辐射，以29角度 和晶面距离d值表示的X射线粉末衍射光谱在3. 18 (27. 76)、 6. 46 (13. 67)、 8. 12(10. 88)、 13. 56(6. 52)、 15. 28(5. 64)、 18. 32(4. 84)、 19.40 (4.57)、 20. 12 (4.41)有特征峰。所述阿德福韦酯晶型的DSC 吸热转变温度在8rC。所述阿德福韦酯晶型的红外吸收光谱KBr压 片，在3361cm匿1、 3287 cm層1、 3155 cm匿1、 3122 cm—'、 2976 cm—\ 1756 cm—1、 1260 cnf1、 1139 cm習1、 1029 cnf1、 970 cnf'有特征峰。这种结晶 物的活性好，它应用于制备治疗抗乙型肝炎病毒药物的应用中时，显 示很好的抗病毒活性。
图1为本发明的阿德福韦酯无水结晶的X射线粉末衍射光谱图。
图2为本发明的阿德福韦酯无水结晶的红外吸收光谱图。
图3为本发明的阿德福韦酯无水结晶的DSC图。
具体实施例方式
本发明的主旨是通过改变阿德福韦酯无水结晶物的制备方法，由
此提高阿德福韦酯无水结晶物的结晶收率和纯度。下面结合实施例对 本发明的内容作进一步详述，实施例中所提及的内容并非对本发明的 限定，制备过程中各个原材料的选择可因地制宜而对结果并无实质性 影响。
首先，简述本发明方法的基本方案。 一种阿德福韦酯无水结晶物
的制备方法，步骤为A、将阿德福韦酯粗品用95%乙醇溶解；B、在 结晶釜中加入醚，搅拌降温至2 5°C，将步骤A所得的阿德福韦酯溶 解液滴加进结晶釜中，搅拌结晶；C、将步骤C的结晶物过滤，收集 结晶物湿品，再烘干处理。所述步骤A中，加热阿德福韦酯粗品溶解 液至40壬1(TC时，阿德福韦酯粗品完全溶解，再降温至10±2°C以后，. 装入恒压漏斗。所述步骤B中，结晶后，低温保温20 50分钟。步 骤C中所述的烘干处理是在减压烘箱中减压烘干处理，温度升高至 30 50°C、真空为-0.05 -0. l卿a。所述的烘干处理是在40 50°C 温度下减压烘干。所述的醚是异丙醚、正丁醚、仲丁醚中的一种或者 几种混合物。所述的溶解阿德福韦酯粗品时所用的95%乙醇与阿德福 韦酯粗品的重量比为1:1.2 2.5。所述醚与阿德福韦酯粗品重量比 为1: 3. 5 150倍。
实施例l
将100g阿德福韦酯粗品溶解于200ml样95%乙醇，加热至40°C 溶解，再降温至10°C，装入恒压漏斗中。在5000ml三口瓶中加入 3000ml异丙醚，搅拌降温至2。C，然后将阿德福韦酯溶液滴加到异丙 醚中。然后在2'C保温搅拌25分钟，过滤，滤饼用异丙醚洗涤，50 "C减压烘干，得96. 5g阿德福韦酯无水结晶。采用HPLC测定含量 99. 8%，其X射线粉末衍射光谱图见附图1，红外吸收光谱图见附图2， DSC图见附图3。
实施例2
将100g阿德福韦酯粗品溶解于200ml95y。乙醇，加热至45。C溶解， 再降温至12°C，装入恒压漏斗中。在5000ml三口瓶中加入3000ml 正丁醚，搅拌降温至3"C，然后将阿德福韦酯溶液滴加到正丁醚中。 然后在3-C保温搅拌30分钟，过滤，滤饼用正丁醚洗涤，45'C减压 烘干，得98g阿德福韦酯无水结晶。采用HPLC测定含量99. 6%，其X
射线粉末衍射光谱图见附图1，红外吸收光谱图见附图2， DSC图见 附图3。
实施例3
将100g阿德福韦酯粗品溶解于200ml95呢乙醇，加热至5(TC溶解， 再降温至11°C，装入恒压漏斗中。在5000ml三口瓶中加入3000ml 仲丁醚，搅拌降温至4'C，然后将阿德福韦酯溶液滴加到仲丁醚中。 然后在2'C保温搅拌0.5hr，过滤，滤饼用仲丁醚洗涤，5(TC减压烘 干，得98.3g阿德福韦酯无水结晶。采用HPLC测定含量99. 8%，其X 射线粉末衍射光谱图见附图1，红外吸收光谱图见附图2， DSC图见 附图3。
实施例4
将100g阿德福韦酯粗品溶解于200ml95。/。乙醇，加热至5(TC溶解， 再降温至irC，装入恒压漏斗中。在5000ml三口瓶中加入3000ml 仲丁醚与正丁醚，搅拌降温至4'C，然后将阿德福韦酯溶液滴加到仲 丁醚中。然后在2t:保温搅拌0.5hr，过滤，滤饼用仲丁醚洗涤，50 t:减压烘干，得98. 3g阿德福韦酯无水结晶。采用HPLC测定含量 99. 8%,其X射线粉末衍射光谱图见附图1,红外吸收光谱图见附图2， DSC图见附图3。
实施例5
将100g阿德福韦酯粗品溶解于200ml95呢乙醇，加热至45"C溶解， 再降温至12°C，装入恒压漏斗中。在5000ml三口瓶中加入3000ml 正丁醚、仲丁醚与正丁醚的混合物，搅拌降温至3"C，然后将阿德福 韦酯溶液滴加到正丁醚中。然后在3'C保温搅拌30分钟，过滤，滤 饼用正丁醚洗涤，45'C减压烘干，得98g阿德福韦酯无水结晶。采用 HPLC测定含量99.69&，其X射线粉末衍射光谱图见附图1，红外吸收 光谱图见附图2， DSC图见附图3。
以下结合实例对阿德福韦酯无水结晶物应用于制备治疗抗乙型 肝炎病毒药物的应用中时，抗病毒活性的试验，。
实施例6
将上述阿德福韦酯无水结晶物加上本领域常用的载体与调配方 法，制成片剂，每片含本发明的阿德福韦酯无水结晶10mg。
成分
阿德福韦酯无水结晶 微晶纤维素
羧甲基淀粉钠 应只是镁
10mg片剂用量
10mg
55mg
45mg
3mg
2mg
溶出度实验
采用中国药典2000版二部规定的方法，并采用500ml水作为溶 出介质，浆法75rpm，对实施例6的制剂进行体外溶出度实验，45分 钟的平均溶出度为99. 68%
采用实施例6相同的方法，对Gilead Sciences公司的H印sera 片剂进行体外溶出度实验，45分钟的平均溶出度为93. 3%
用上述阿德福韦酯10mg片剂治疗拉米夫定耐药的慢性乙型肝炎 患者12周，血清HBV DNA水平较用药前下降(3. 01 ±1.81) loglO 拷贝/ml，而继续服用拉米夫定12的受试者血清HBV DNA水平较前仅 下降(0.78±1.63) loglO拷贝/ml，两组差异具有极显著的统计学 意义；服用上述阿德福韦酯12周血清HBV DNA水平下降》21og10拷 贝/ml的受试者比例为61.79%，而服用拉米夫定12的受试者血清 HBV DNA水平较下降》21oglO拷贝/ml的受试者比例仅为17.74%, 两组差异具有极显著的统计学意义。
用上述阿德福韦酯治疗12周，血清ALT均值下降(35. 94±73. 74) U/L，而继续服用拉米夫定12的受试者血清ALT水平反而增加(2. 75 ±108.46) U/L，两组相比有统计学差异(P=0.008)， 115例受试者 接受48周阿德福韦酯治疗血清ALT均值下降(51.30±78.07) U/L， 血清HBV DM水平下降均值为(4. 763.01±2.45) 1ogl0拷贝/ml。
对比例
实施例7
实施例8
权利要求
1、一种阿德福韦酯无水结晶物的制备方法，步骤为A、将阿德福韦酯粗品用95％乙醇溶解；B、在结晶釜中加入醚，搅拌降温至2～5℃，将步骤A所得的阿德福韦酯溶解液滴加进结晶釜中，搅拌至结晶；C、将步骤B的结晶物过滤，收集结晶物湿品，再烘干处理；所述的醚是异丙醚、正丁醚、仲丁醚中的一种或者几种混合物。
2、 根据权利要求1所述的阿德福韦酯无水结晶物的制备方法，其特 征在于:所述的步骤A中，加热阿德福韦酯粗品溶解液至40士10'C时，阿 德福韦酯粗品完全溶解，再降温至10士2"C。
3、 根据权利要求2所述的阿德福韦酯无水结晶物的制备方法，其特 征在于:所述的步骤B中，阿德福韦酯无水结晶物结晶后，低温保温20 50分钟。
4、 根据权利要求3所述的阿德福韦酯无水结晶物的制备方法，其特 征在于:所述的步骤C中，烘干处理是在减压烘箱中减压烘干处理，温度 升高至30 50°C、真空为-O. 05 -0. lmpa。
5、 根据权利要求4所述的阿德福韦酯无水结晶物的制备方法，其特 征在于:溶解阿德福韦酯粗品时所用的95%乙醇与阿德福韦酯粗品的重量 比为1:1. 2 2. 5。
6、 根据权利要求5所述的阿德福韦酯无水结晶物的制备方法，其特 征在于所述醚与阿德福韦酯粗品重量比为1: 3.5 150倍。
7、 一种根据权利要求1 6中任一项所述制备方法所得的阿德福韦酯 无水结晶物，其特征在于所述晶型使用Cu-Ka辐射，以29角度和晶面 距离d值表示的X射线粉末衍射光谱在3. 18 (27.76) 、 6.46 (13.67)、 8.12 (10.88) 、 13.56 (6.52) 、 15.28 (5.64) 、 18.32 (4.84) 、 19,40(4.57) 、 20.12 (4.41)有特征峰。
8、 根据权利要求7所述的阿德福韦酯无水结晶物，其特征在于所 述阿德福韦酯晶型的DSC吸热转变温度在81°C 。
9、 根据权利要求8所述的阿德福韦酯无水结晶物，其特征在于所 述阿德福韦酯晶型的红外吸收光谱KBr压片，在3361cm—'、 3287 cm—\ 3155 cm1、 3122 cm—1、 2976 cm1、 1756 cnf1、 1260 cm—'、 1139 cnf1、 1029cm—1 970 cm—1有特征峰。
10、 一种根据权利要求7 9中任一项所述的阿德福韦酯无水结晶物 用于制备治疗抗乙型肝炎病毒药物的应用。
全文摘要
一种阿德福韦酯无水结晶物的制备方法、所得的阿德福韦酯无水结晶物及其应用，步骤为A.将阿德福韦酯粗品用95％乙醇溶解；B.在结晶釜中加入醚，搅拌降温至2～5℃，将步骤A中所得的阿德福韦酯溶解液滴加进结晶釜中，搅拌至结晶；将结晶物过滤，收集结晶物湿品，再烘干处理，所述的醚是异丙醚、正丁醚、仲丁醚中的一种或者几种混合物。所得结晶收率达到96％以上，结晶物纯度达到99.5％以上。阿德福韦酯无水结晶物用于制备治疗抗乙型肝炎病毒药物的应用，产品活性好。
文档编号A61K31/675GK101343290SQ200810028388
公开日2009年1月14日 申请日期2008年5月24日 优先权日2008年5月24日
发明者崔锦栋, 瞿东方, 立 鲁, 龚美义 申请人:广东肇庆星湖生物科技股份有限公司