专利名称：：多利培南水合物结晶及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及多利培南水合物结晶及其制备方法，尤其涉及多利培南1.5水合物结晶及其制备方法。
背景技术：
：多利培南(doripenem)是一种P-甲基碳青霉烯(carbapenem)抗生素，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、厌氧菌具有广谱而平衡的强效抗菌活性。多利培南的其它名包括S-4661，多尼培南等。化学名为(4R，5S，6S)-3-[[(3S，5S)-5-[(氨磺酰胺基)甲基]吡咯烷-3-基]硫基]-4-甲基-6-[(111)-1-羟乙基]-7-氧代-1-氮杂二环[3.2.0廣-2-烯-2-羧酸，结构式如下COOH日本专利申请JP5294970公开了无定型多利培南，但这种无定型多利培南不稳定，在通常保存条件下易变色且纯度下降。为了克服无定型多利培南稳定性差的缺陷，中国ZL95193672.7公开了多利培南I型结晶和II型结晶;这两种多利培南结晶的制备方法之一是将多利培南的水溶液(用氢氧化钠、碳酸钠或碳酸氢钠调节pH为5.86.2，含有氯化钠和甘露糖醇)，冷却至一2(TC或一20。C以下，将所得冻结物升温到^—10°C，并在0一l(TC至少温度升降2次，再在一3"C或一1(TC下静置110小时，将所得结晶真空干燥。但这种制备方法复杂，反复升降温度，耗时耗力，不适合于工业化生产多利培南结晶，而且得到的结晶稳定性也很有限。为了解决上述问题，中国ZL01810309.X公开了多利培南III型结晶(多利培南的二水合物结晶)和IV型结晶(多利培南的一水合物结晶)。就保存稳定性而言，in型结晶和iv型结晶优于i型结晶和n型结晶，iv型结晶优于ni型结晶。但是IV型结晶的制备需要分步进行首先向多利培南的水溶液中加入ni型结晶后，使ni型结晶析出，经过干燥制备in型结晶，再将所得in型结晶进一步干燥才能得到iv型结晶。
发明内容本发明的目的是为了解决现有技术中多利培南结晶稳定性差，其制备方法复杂、耗时耗能等问题，提供新的具有优良的稳定性和溶解性能，并且适宜工业化制备的多利培南结晶，特别是新的多利培南水合物结晶。具体地，本发明提供的多利培南新晶型具有高度的稳定性，适宜作为药剂贮藏和使用；而且具有其他优良性质，例如溶解性能优良，便于制备溶液通过非肠道途径给药；制备方法简便，无需经过特别的中间晶型，适于工业规模的实施。本发明的目的是提供一种新的多利培南水合物，即多利培南的1.5水合物。其分子式为(:1511241^0682丄5&0，结构式如下式I所示。式I本发明的再一目的是提供一种上述多利培南的1.5水合物结晶，在本发明中将其称为多利培南V型结晶，该结晶的粉末X线衍射图中，在衍射角度20=6.45、13.05、14.99、15.31、15.89、16.64、17.50、18.07、19.67、20.65、21.07、22.17、23.44、23.90、24.49、26.08、27.57、28.22、29.00、31.69、34.97、38.08和39.87度处有主峰。多利培南V型结晶的含水量并不一定为恒量，而是取决于干燥条件、保存条件等因素，优选1.5水合物结晶。本发明的多利培南V型结晶中的有机溶剂残留量也并不一定为恒量，而是取决于结晶方法、干燥条件等因素。本发明的多利培南V型结晶，较佳地也可以以下述结构式所示的分子内盐的形式存在。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>本发明的另一目的是提供本发明的多利培南V型结晶的制备方法，该方法包括如下步骤在无接种或者接种多利培南晶种的条件下，从多利培南溶液中析出结晶，分离析出结晶，干燥至含水量为5.6%6.4%，优选5.8%6.2%，更优选6%左右。所述的多利培南溶液的溶剂是水与有机溶剂的混合液；优选在接种多利培南V型结晶的条件下，从所述的多利培南溶液中析出结晶。在上述多利培南溶液中，水与有机溶剂的体积比，较佳地为1:0.16，更佳地为1:0.153。为了获得多利培南V型结晶，优选将多利培南首先制备成水溶液，为了溶解多利培南，可以进行加热(例如，3060°C)，溶解之后加入有机溶剂，所得多利培南溶液的重量浓度优选为340%。所述的有机溶剂包括醇、丙酮、乙腈和/或四氢呋喃，所述的醇优选低级醇，所述的低级醇是指C卜4的低级醇，优选甲醇、乙醇、异丙醇、异丁醇等低级醇，更优选异丙醇。在本发明中，所述的析出多利培南结晶优选在020。C，更佳地在05'C并且搅拌的条件下进行，以加速结晶的生成。本发明的多利培南V型结晶的制备方法进一步包括在析出结晶之后，加入反溶剂和/或冷却的步骤，以便于析晶充分；所述的反溶剂包括醇、丙酮、乙腈和/或四氢呋喃等有机溶剂，所述的醇优选低级醇，该低级醇是指C卜4的低级醇，更优选甲醇、乙醇、异丙醇和/或异丁醇等低级醇，最优选异丙醇；所述的冷却较佳地冷却至一20(TC，更佳地冷却至一18一5°C，更佳地冷却至一15--10°C。本发明的多利培南V型结晶的制备方法进一步包括采用过滤、离心等适宜的方法将所得多利培南结晶从结晶液中分离出来，分离出来的多利培南结晶可通过干燥而获得多利培南V型结晶。干燥的方法可采用任何适宜的已知方法，优选减压(真空)干燥。具体的干燥条件是，例如，温度优选1090°C，3070。C较好，4060。C更好；压力优选0100mmHg，030mmHg较好，020mmHg更好，010mmHg最好；干燥时间优选115小时，2IO小时较好，26小时更好，所得结晶最优选在010mmHg下干燥24.5小时。无论采用何种干燥手段，都应该保证将所得样品含水量控制在5.6%6.4%,优选5.8%6.2%。水份的测定可以采用任何适宜方法，例如卡尔-费歇(KF)法。本发明的又一目的是提供另一种多利培南1.5水合物的结晶，在本发明中将其称为多利培南VI型结晶，该结晶的粉末X线衍射图中，在衍射角度26-12.91、14.87、15.75、16.52、20.52、20.97、22.05、23.31、23.79、24.37、25.98、27.43、28.12、28.85和34.08度处有主峰。多利培南VI型结晶的含水量并不一定为恒量，而是取决于干燥条件、保存条件等因素，优选1.5水合物结晶。本发明的多利培南VI型结晶中的有机溶剂残留量也并不一定为恒量，而是取决于结晶方法、干燥条件等因素。本发明的多利培南VI型结晶，也较佳地以下述结构式所示的分子内盐的形式存在。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>本发明的再一目的是提供本发明的多利培南VI型结晶的制备方法，该方法包括如下步骤在无接种或者接种多利培南晶种的条件下，从多利培南水溶液中析出结晶，分离出结晶，干燥至含水量为5.6%6.4%，优选5.8%6.2%，更优选6%左右。优选在接种多利培南VI型结晶的条件下，从多利培南水溶液中析出结晶。为了获得多利培南VI型结晶，优选将多利培南首先制备成溶液，所采用的溶剂是水；为了溶解多利培南，可以进行加热(例如，3060°C)，所得多利培南水溶液的重量浓度优选为340%。在本发明中，所述的析出多利培南结晶优选在02(TC，更佳地在05'C并且搅拌的条件下进行，以加速结晶的生成。本发明的多利培南VI型结晶的制备方法进一步包括在析出结晶之后，加入反溶剂和/或冷却的步骤，以便于析晶充分；所述的反溶剂包括醇、丙酮、乙腈和/或四氢呋喃等有机溶剂，所述的醇优选低级醇，该低级醇是指C卜4的低级醇，更优选甲醇、乙醇、异丙醇和/或异丁醇等低级醇，最优选异丙醇;所述的冷却较佳地冷却至一20(TC，更佳地冷却至一18一5°C，更佳地冷却至一15一10°C。本发明的多利培南VI型结晶的制备方法进一步包括采用过滤、离心等适宜的方法将所得多利培南结晶从结晶液中分离出来，分离出来的多利培南结晶可通过干燥而获得多利培南VI型结晶。干燥的方法可采用任何适宜7的已知方法，优选减压(真空)干燥。具体的干燥条件是，例如，温度优选1090°C，3070。C较好，4060。C更好；压力优选0100mmHg，030mmHg较好，020mmHg更好，010mmHg最好；干燥时间优选115小时，210小时较好，26小时更好，所得结晶最优选在010mmHg下干燥24.5小时。无论采用何种干燥手段，都应该保证将所得样品含水量控制在5.6%6.4%，优选5.8%6.2%。水份的测定可以采用任何适宜方法，例如卡尔.费歇(KF)法。本发明的多利培南V型结晶和VI型结晶可用于制备各种制剂供药用，特别是用作抗感染药物。本发明的制剂可以采用纯的多利培南结晶V型结晶和VI型结晶，也可以采用多利培南结晶V型结晶和VI型结晶的任意比例的混合物。将含有本发明多利培南结晶的组合物用作抗感染药物时，给药途径可以是肠道给药或非肠道给药；给药剂型可以是注射剂、局部给药制剂、外用剂、口服制剂等，优选注射剂，包括含有本发明多利培南结晶的粉针剂或冷冻干燥制剂。含有本发明多利培南结晶的组合物用作抗感染药物时，可用于治疗由对本品敏感的致病微生物引起的各种感染，例如败血症，感染性心内膜炎；深部皮肤感染症，淋巴管炎，淋巴节炎；外伤、烫伤及手术创伤等的二次感染、骨髄炎，关节炎；咽喉炎，扁桃体炎(含扁桃体周围炎，扁桃体周围脓疡)；肺炎，肺脓疡，脓胸，慢性呼吸器病変的二次感染；复杂性膀胱炎，肾盂肾炎，前列腺炎(急性、慢性)，副睾丸炎；腹膜炎，腹腔内脓疡；胆嚢炎，胆管炎，肝脓疡；子宫内感染，子宫附件炎，子宫旁结合组织炎；眼窝感染，角膜炎(含角膜溃疡)，眼内炎(含全眼球炎)；中耳炎；颚骨周边蜂窝组织炎，颚炎；等等。含有本发明多利培南结晶的组合物用作抗感染药物时，其用法用量根据患者的年龄和症状、感染的种类等因素来确定。如采用注射剂，通常，成人1日给药2至lj3次，1次0.20.3克，在3060min内静脉滴注。本发明的积极进步效果在于1)本发明的多利培南VI型结晶和多利培南V型结晶具有优良的稳定性。将本发明所制备的多利培南V型结晶和多利培南VI型结晶分别密封于玻璃管制注射剂瓶中，在4(TC和相对湿度75%的条件下放置6个月，被考察样品的有关物质和含量等均无明显变化。将本发明所制备的多利培南VI型结晶和多利培南V型结晶分别密封于玻璃管制注射剂瓶中，在25°(:和相对湿度60%的条件下放置12个月，被考察样品的有关物质和含量等均无明显变化。2)本发明的多利培南V型结晶和多利培南VI型结晶具有优良的溶解性能，便于通过非肠道途径给药。分别称取本发明所制备的多利培南V型结晶和多利培南VI型结晶0.27克，加入生理盐水100毫升，震摇后可迅速溶解。3)本发明的多利培南V型结晶和多利培南VI型结晶制备方法简便，无需经过中间晶型过渡，所采用的仪器、设备和操作均无特殊和苛刻的要求，适于工业规模的实施。图l为本发明的多利培南V型结晶的粉末X线衍射谱；图2为本发明的多利培南VI型结晶的粉末X线衍射谱。具体实施例方式下述实施例应被视为对本发明的进一步说明，而并非对本发明精神和范围的界定和局限。适于充当本发明原料的多利培南可以按照任何己知的方法合成。例如下述文献中所公开的多利培南的合成方法US5，317,016;Iso,Y;Irie，T，Nishino，Y，etal.ANovel1(3-mehylcarbapenemantibiotic,S-4661Synthesisandstructure-activityrelationshipsof2-(5-substitutedpyrrolidin-3-ylthio)-l(3-methylcarbapenems.JAntibiotics,1996,49(2):199-209;Iso,Y;Irie,T，IwakiT，etal.Synthesisandmodificationofanovel1p陽methylcarbapenemantibiotic,S-4661.JAntibiotics,1996,49(5):478-484;以及NishinoY，KobayashiM,ShinnoT，etal.Practicallarge-scalesynthesisofdoripenem:anovel1卩-methylcarbapenemantibiotic.OrgProcessResDev，2003,7(5):846-850。适于充当本发明原料的多利培南，可以存在于制备多利培南的操作所得到的多利培南溶液中，也可以包括各种固体形态，如已知的无定型、I型结晶、n型结晶、in型结晶和iv型结晶等；也可以是各种纯度，纯度可以在60%以上，在80%以上较好，在卯％以上更好，在95%以上最好。粉末X线衍射的测定条件铜靶，波长1.5406埃石墨晶体过滤器，管电压40KV，管电流40mA，衍射角度20的测定误差约为±0.2，即使使用非常精密的仪器，测定误差也可能达到土O.l。实施例1将多利培南粗品(10g)在5055"C溶于蒸馏水(200mL)中，加入活性炭(0.6g)脱色，抽滤。趁热向滤液中加入异丙醇(卯mL)，冷至1520"C搅拌1小时，再冷至05'C搅拌2小时。向所得悬浊液中滴加异丙醇(90mL)，然后05r搅拌2小时，最后冷至一l(TC搅拌过夜。滤集析出的结晶，用异丙醇:水(体积比4:1)洗涤滤饼。将所得滤饼于5(TC减压(010mmHg)干燥约4小时至含水量为6%左右，得多利培南V型结晶。所得结晶的粉末X衍射谱见图l，其中在衍射角度20=6.45、13.05、14.99、15.31、15.89、16.64、17.50、18.07、19.67、20.65、21,07、22.17、23.44、23.90、24.49、26.08、27.57、28.22、29.00、31.69、34,97、38.08和39.87处有主要峰。此外，在衍射角度26=10.91、25.37、36.49、37.20处有次要峰。元素分析C15H24N406S2.1.5H20元素分析实际值％理论值％C40.4840.26H6.036.08N12.4212.52S_14.2414.33卡尔-费歇(KF)法水份测定理论值(1.5水合物)6.04%测定值5.91%实施例2将多利培南粗品(10g)在6065。C溶于蒸馏水(100mL)中，加入活性炭(0.3g)脱色，抽滤。将滤液冷至室温，搅拌1小时，再冷至05"C搅拌3小时；向所得悬浊液中滴加异丙醇(100mL)，然后05"C搅拌2小时。最后，冷至一15"C搅拌过夜，滤集析出的结晶，用异丙醇:水(体积比4:1)洗涤滤饼。将所得滤饼于5(TC减压(1020mmHg)干燥约5.5小时至含水量为6%左右，得多利培南VI型结晶。所得结晶的粉末X衍射谱见图2，其中在衍射角度26=12.91、14.87、15.75、16.52、20.52、20.97、22.05、23.31、23.79、24.37、25.98、27.43、28.12、28.85和34.08处有主要峰。此外，在衍射角度26=10.78、17.93、35.48、37.13处有次要峰。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>卡尔.费歇(KF)法水份测定理论值(1.5水合物)6.04%测定值5.87%实施例3将多利培南粗品(10g)在5055T:溶于蒸馏水(200mL)中，加入活性炭(0.6g)脱色，抽滤。趁热向滤液中加入异丙醇(90mL)，向所得溶液中投入多利培南V型结晶的晶种，冷至152(TC搅拌1小时，再冷至05。C搅拌2小时。向所得悬浊液中滴加异丙醇(90mL)，然后05。C搅拌2小时，最后冷至一1(TC搅拌过夜。滤集析出的结晶，用异丙醇:水(体积比4:1)洗涤滤饼。将所得滤饼于5(TC减压(010mmHg)干燥约4小时至含水量约为6%，得多利培南V型结晶(8.4g，精制率84%)。实施例4将多利培南粗品(10g)在6065"C溶于蒸馏水(100mL)中，加入活性炭(0.3g)脱色，抽滤。将滤液冷至室温，投入多利培南VI型结晶的晶种，搅拌1小时，再冷至05"C搅拌3小时；向所得悬浊液中滴加异丙醇(100mL)，然后05t:搅拌2小时。最后，冷至一15。C搅拌过夜，滤集析出的结晶，用异丙醇:水(体积比4:1)洗涤滤饼。将所得滤饼于5(TC减压(1020mmHg)干燥约5.5小时至含水量约为6%，得多利培南VI型结晶(8.7g，精制率87%)。实施例5将多利培南(10g)在5055'C溶于蒸馏水(200mL)中，加入活性炭(0.3g)脱色，抽滤。趁热向滤液中加入丙酮(100mL)，向所得溶液中投入多利培南V型结晶的晶种，冷至152(TC搅拌1小时，再冷至05。C搅拌2小时。向所得悬浊液中滴加丙酮(90mL)，然后05"搅拌2小时，最后冷至一15'C搅拌过夜。滤集析出的结晶，用丙酮:水(5:1)洗涤滤饼。将所得滤饼于60。C减压(010mmHg)干燥约3小时至含水量约为6%,得多利培南V型结晶(8.1g，精制率81%)。实施例6将(4R，5S，6S)-3-[[(3S，5S)-l-(4-硝基苄氧羰基)-5-[(氨磺酰基胺基)甲基]吡咯垸-3-基]硫基]-4-甲基-6-[(lR)-l-羟乙基]-7-氧代-l-氮杂二环[3，2，0]庚-2-烯-2-羧酸(4-硝基苄基)酯(3(^)溶于四氢呋喃(20011)中，加入去离子水(2601111)和10%钯碳(19g)。将所得悬浊液在氢气(0.4MPa)下263(TC搅拌2h。滤除钯碳，减压蒸去四氢呋喃，用乙酸乙酯(3X300ml)洗涤所得水层。分取水层，得到多利培南粗品溶液，加入活性炭(0.5g)脱色，抽滤。向滤液中投入多利培南VI型结晶的晶种，搅拌1小时，再冷至05"C搅拌3小时;向所得浆液中滴加丙酮(300mL)，然后05"C搅拌2小时。最后，冷至一15'C搅拌过夜，滤集析出的结晶，用丙酮:水(5:1)洗涤滤饼。将所得滤饼于4(TC减压(010mmHg)干燥约6小时至含水量约为6%，得多利培南VI型结晶(10.9g，收率60%)。试验实施例1将多利培南II型结晶和本发明所制备的多利培南V型结晶和VI型结晶各0.27克分别密封于10毫升玻璃管制注射剂瓶中，在4(TC和相对湿度75%的条件下放置6个月，考察3种样品的有关物质和含量变化情况。有关物质和含量采用高效液相(HPLC)法测定。有关物质测定结果(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>含量测定结果(％)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>上述稳定性试验结果表明，多利培南V型结晶和VI型结晶在加速稳定性试验条件下考察6个月，有关物质和含量均无明显变化；而多利培南II型结晶在同样条件下，有关物质明显增加，含量显著下降。因此，多利培南V型结晶和VI型结晶比II型结晶稳定。权利要求1、一种多利培南1.5水合物，其分子式为C15H24N4O6S2·1.5H2O。2、一种如权利要求1所述的多利培南1.5水合物的结晶，该结晶的粉末X线衍射图中，在衍射角度26=6.45、13.05、14.99、15.31、15.89、16.64、17.50、18.07、19.67、20.65、21.07、22.17、23.44、23.90、24.49、26.08、27.57、28.22、29.00、31.69、34.97、38.08和39.87度处有主峰。3、一种如权利要求1所述的多利培南1.5水合物的结晶，该结晶的粉末X线衍射图中，在衍射角度29=12.91、14.87、15.75、16.52、20.52、20.97、22.05、23.31、23.79、24.37、25.98、27.43、28.12、28.85和34.08度处有主峰。4、一种如权利要求2所述的结晶的制备方法，该方法包括如下步骤从多利培南的水与有机溶剂的混合液中析出结晶，分离该析出结晶，干燥至含水量为5.6%6.4%，其中，所述的水与有机溶剂的体积比为1:0.153，该有机溶剂选自C卜4的低级醇、丙酮、乙腈和四氢呋喃。5、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，其是在权利要求2所述的结晶作为晶种的条件下进行结晶。6、如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述的将结晶干燥的步骤包括将结晶在406(TC、010mmHg下干燥24.5小时。7、一种如权利要求3所述的结晶的制备方法，该方法包括如下步骤从多利培南水溶液中析出结晶，并将析出的结晶干燥至含水量为5.6%6.4%。8、如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，其是在权利要求3所述的结晶作为晶种的条件下进行结晶。9、如权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述的将结晶干燥的步骤包括将结晶在4060°C、010mmHg下干燥24.5小时。全文摘要本发明公开了两种多利培南1.5水合物结晶，在粉末X线衍射图中，一种多利培南结晶在衍射角度2θ＝6.45、13.05、14.99、15.31、15.89、16.64、17.50、18.07、19.67、20.65、21.07、22.17、23.44、23.90、24.49、26.08、27.57、28.22、29.00、31.69、34.97、38.08和39.87度处有主峰；另一种多利培南结晶在衍射角度2θ＝12.91、14.87、15.75、16.52、20.52、20.97、22.05、23.31、23.79、24.37、25.98、27.43、28.12、28.85和34.08度处有主峰。本发明还公开了这两种结晶的制备方法。本发明的结晶稳定性高，溶解性能好；而且其制备方法简便可靠，适宜工业上实施。文档编号A61P31/00GK101100468SQ20061002874公开日2008年1月9日申请日期2006年7月7日优先权日2006年7月7日发明者唐志军,张庆文,时惠麟申请人:上海医药工业研究院