专利名称：碘化亚油酸去氧氟脲苷酯及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属药物合成技术领域，涉及一种抗肿瘤药物的合成及应用，具体涉及一种
碘化亚油酸去氧氟脲苷酯及其制备方法及其抑瘤用途。
背景技术：
已知5-氟尿嘧啶及去氧氟脲苷作为胸腺嘧啶合成酶等的抑制剂，属于抗代谢类 抗癌药物，可抑制肿瘤细胞DNA的生物合成，导致肿瘤细胞死亡。其抗瘤谱广，二十余年来， 一直是临床治疗常见肿瘤的首选药物之一。研究显示，碘油对恶性肿瘤组织亲和力高，具有 相对选择性，另外它在体内可长期粘附存在。临床有研究利用这些特点，将碘油与抗癌药震 荡混合制成乳化液，用于晚期肿瘤等疾病的介入治疗，有较好疗效，可延长病人的生存期。 亚油酸是唯一的一种自体无法合成的机体必需长链脂肪酸。但临床实践中发现，采用碘油 与抗肿瘤药震荡混合制成的乳化液在肿瘤组织中实际保留时间一般只有5-10天，远不能 达到肿瘤尤其是恶性肿瘤治疗的要求，寻求治疗效果好且药效能维持满足治疗需要的药物 一直是本领域研究人员的关注热点。
与本发明相关的现有技术有下述参考文献 l.Ken Iwai，Hiroshi Maeda， Toshimitsu Konno. Cancer Res. 1984， 44， 2115.
2. Chang Jin Yoon， Jin Wook Ch皿g， Jae Hy皿g Park, et al. Radiology. 2003， 229(1) :126-131 3. Min-shan Chen ， J i n_Q i ng Li，Ya-Qi Zhang，et al.World J Gastroenterol. 2002，8(1) :74-78。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种抗肿瘤药物，尤其是一种碘化 亚油酸去氧氟脲苷酯。 本发明的进一步目的是提供所述碘化亚油酸去氧氟脲苷酯物的制备方法。
本发明的进一步目的是提供所述碘化亚油酸去氧氟脲苷酯物的抑瘤用途。
本发明药物采用抗肿瘤药物作为弹头，碘化亚油酸作为载体，制成化学性共价结 合物作为对癌瘤有识别力的抗癌导弹，在体内酯酶的缓慢降解下，其抗癌药物可长期缓慢 (可达1-3个月)释放直接抑制癌瘤。同时该发明药物与现有药物碘油同属长链脂肪酸酯 类，具有相近的物理化学特性，可与其它抗癌药物制成乳化剂，同样可与抗癌药震荡混合制 成乳化液，用于肿瘤血管栓塞化疗(如肝癌)，并可作为良性，其他恶性肿瘤，巨大血管瘤等 疾病的局部治疗药物。 本发明的碘化亚油酸去氧氟脲苷酯，具有如下的结构式
4<formula>formula see original document page 5</formula>(A) 本发明以碘化亚油酸和去氧氟脲苷为反应原料，通过酯化反应获得目标产物碘化 亚油酸去氧氟脲苷酯(化合物A)。 通过下述合成步骤制备碘化亚油酸去氧氟脲苷酯 1、按式(I)制备碘化亚油酸
<formula>formula see original document page 5</formula>(I ) 烧瓶中加入溶剂氯仿、亚油酸(化合物B)、氯化碘乙酸溶液，在室温下磁力搅拌 5-20分钟，反应液经亚硫酸钠溶液洗涤至无色后，以乙酸乙酯萃取，有机层经饱和食盐水洗 涤、无水硫酸钠干燥后，减压蒸去溶剂得无色液体，即为碘化亚油酸(化合物C)。其中，氯仿 与亚油酸摩尔比为50-200 : l，氯化碘与亚油酸摩尔比为5-15 : l，乙酸与亚油酸摩尔比 为50-200 : 1。 2、按式(II)制备碘油氟脲苷酯
<formula>formula see original document page 5</formula>(II) 烧瓶中加入溶剂苯、碘化亚油酸(化合物C)、去氧氟脲苷(化合物D)、对-二甲氨 基吡啶(DMAP)，在室温下磁力搅拌5-20分钟，然后加入N， N' - 二环己基碳二亚胺(DCC)， 室温下反应15-24小时，减压蒸去溶剂苯，残留物以乙酸乙酯/石油醚为淋洗液进行柱层析 分离提纯，即得所需产品碘化亚油酸去氧氟脲苷酯(化合物A)。其中，苯与碘化亚油酸摩尔 比为50-200 : l，去氧氟脲苷与碘化亚油酸摩尔比为1-1.5 : l，对-二甲氨基吡啶(DMAP) 与碘化亚油酸摩尔比为0. 1-1. 5 : 1， N， N' -二环己基碳二亚胺(DCC)与碘化亚油酸摩尔 比为1-1. 2 : 1。
本发明中，所述亚硫酸钠溶液，其浓度为2% _18%。 本发明中，所述淋洗液中，乙酸乙酯与石油醚的体积比为1 : 1-1 : 20。 本发明中，所述加料顺序中，N， N' - 二环己基碳二亚胺(DCC)在磁力搅拌5_20分
钟后加入。 本发明进行了碘化亚油酸去氧氟脲苷酯物的抑瘤实验，体外实验结果显示，具有 杀伤癌细胞和良好的抑制肿瘤细胞生长的效果；体内瘤内注射对小鼠H22肝癌模型的抑瘤 初步抑瘤效果显示，能抑制肿瘤的生长。 本发明碘化亚油酸去氧氟脲苷酯可制备导向治疗肿瘤药物。 所述的导向治疗肿瘤药物其特征是以碘化长链脂肪酸或其酯作为结合肿瘤的导
向部分，可与其他抗癌药或含金属化合物或含砷化合物或激素或细胞因子或蛋白的毒性或
活性物质作为杀伤肿瘤的部分，以共价或配位键结合，实施肿瘤导向治疗。 表1是体外对SMMC-7721肝癌细胞株72小时细胞存活率(MTT法，六孔值的均数)。 表2是体外对QGY-7703肝癌细胞株72小时细胞存活率(MTT法，六孔值的均数). 表1化合物碘油氟五氟碘化超液化碘油注射液亚油酸终浓度脲苷酯尿嘧啶亚油酸(三孔值的均数) 0 uM100100100100100 2 uM56. 1862. 2797.,9595. 8496. 92 10 uM57. 3144. 0188.,1788. 92未测 50 uM18. 6436. 4689.,1783. 41未测 100 uM9. 5718. 5873.,5179. 8290. 11 200 uM9. 0713. 035.,134. 3795. 34估计>>400。于300uM，4Q0uM17. 557. 38134.,38139. 52 IC50uM时分别为91.74， 95.22。
表2化合物终浓度碘油氟脲苷酯五氟尿嘧啶碘化亚油酸 亚油酸
0 uM1001001001002 uM94. 6599. 57104.8875. 92 10 uM74. 6281. 4699. 2772. 7550 uM46. 3165. 8695. 9471. 20100 uM36. 1749. 3653. 8070. 52200 uM30. 2421. 7214. 008. 24估计IQ。uM44. 7998. 06109.55132.95 本发明通过酯化反应获得碘油氟脲苷酯。与现有抗癌药相比，本发明的碘化亚油 酸去氧氟脲苷酯能选择性粘附及沉积于癌组织内，在局部高浓度长期直接杀伤癌细胞，由 于该化合物与现有碘化油同属碘油酯类物质，同样也可与抗癌药震荡混合制成乳化液，用 于具有血管栓塞特性，通过血管介入，还适用于肝癌、直肠癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、乳腺癌 和肺癌及淋巴瘤，局部浸润性型白血病等的治疗，对无法手术切除的原发性肝癌疗效显著， 也可直接或与其他药物混合用于局部治疗。 本发明中，所述的局部治疗可以是直接注射，所述的其他药物包括无水酒精，乙 酸，盐酸，五氟尿嘧啶，氟尿嘧啶核苷，铂剂，阿霉素，丝裂霉素，或紫杉醇。
6
本发明中，可以碘化亚油酸或碘油氟脲苷酯直接，或与一定的媒溶剂如聚山梨醇， 或聚氧乙烯蓖麻油等或辅剂辅料混合溶解或乳化后，作为口服制剂，静脉治疗制剂，肌肉或 皮下或腔内(胸腔或腹腔)治疗制剂，或外用制剂，诊治腹腔转移癌，胸腔转移癌，肝癌，肺 癌，膀胱癌，胃癌，食道癌，黑色素瘤等各种癌症。 本发明中，还可以碘化亚油酸或碘油氟脲苷酯直接，或与一定的媒溶剂(如聚山 梨醇，或聚氧乙烯蓖麻油等)或分散剂，或辅料混合溶解或乳化后，作为吸入制剂，或腔道， 腔隙内局部使用制剂，诊治腹腔转移癌，胸腔转移癌，肺癌，膀胱癌，胃癌，食道癌，黑色素瘤 等多种癌症。 本发明中，还可以碘化亚油酸或碘油氟脲苷酯直接，或与一定的媒溶剂(如聚山 梨醇，或聚氧乙烯蓖麻油等)或分散剂，或辅料混合溶解或乳化后，与含恶性肿瘤组织的材 料(如白血病病人的血液或骨髓)混合化疗后，再回输体内进行肿瘤治疗。
具体实施例方式
下述通过实施例进一步说明本发明，但不能限制本发明的内容。 实施例1按下述反应式制备碘油氟脲苷酯 1、烧瓶中加入39. 80mL(500mmo1)氯仿，加入1. 26mL(5mmo1)亚油酸(化合物B)， 加入含2. 54mL(50mmo1)氯化碘及28. 62mL(500mmo1)乙酸的混合溶液，在室温下磁力搅拌 IO分钟。反应液经6%亚硫酸钠溶液洗涤至无色后，以乙酸乙酯萃取。有机层经饱和食盐 水洗涤、无水硫酸钠干燥后，减压蒸去溶剂氯仿得无色液体2. 85g，即为碘化亚油酸(化合 物C)，收率为94%。 ^ NMR(500MHz， CDCl3，8ppm) :4. 64(m， 1H) ， 4. 34—4. 31 (m， 1H) ，4. 12—4. 08 (m， 1H)， 3. 68-3. 65 (m， 1H) ， 2. 38—2. 35 (t， 2H) ， 2. 12—2. 05 (m， 2H) ， 2. 01—1. 85 (m， 4H) ， 1. 65—1. 58 (m， 4H) ， 1. 41-1. 26 (m， 12H) ， 0. 92-0. 90 (t， 3H) 2、烧瓶中加入17. 75mL(200mmo1)苯，加入1. 21g(2mmo1)碘化亚油酸(化合物C)， 加入O. 59g(2. 4mmo1)去氧氟脲苷(化合物D)、0. 24g(2. Ommol)对-二甲氨基吡啶(DMAP)， 在室温下磁力搅拌10分钟，然后加入0. 45g(2. 2mmol)N， N' - 二环己基碳二亚胺(DCC)，室 温下反应18小时，减压蒸去溶剂苯，残留物以乙酸乙酯石油醚=1 : 2为淋洗液进行柱 层析分离提纯，得白色固体1. 60g，即为碘油氟脲苷酯(化合物A)，收率为96% 。
CH3(CH2)4CHICHCICH2CHCICHI(CH2)7C02H +
'0 (CH2)7CHICHCICH2CHCICHI(CH2)4CH3
力匪R(500MHz， CDC13， S ppm) :7. 66 (d， 1H， J = 6. 5Hz) ， 6. 29 (3， 1H)， 5. 57-5. 52 (m， 1H) ， 5. 21 (d， 1H) ， 4. 64—4. 62 (m， 1H) ， 4. 44—4. 42 (m， 1H) ， 4. 33—4. 27 (m， 3H)， 4. 11-4. 05 (m， 2H) ， 2. 54—2. 51 (m， 2H) ， 2. 15—2. 05 (m， 4H) ， 1. 72—1. 54 (m， 6H) ， 1. 34—1. 09 (m， 14H)，0. 91(t，3H). 实施例2按下述反应式制备碘油氟脲苷酯
CH3(CH2)4CHICHCICH2CHCICH!(CH2)7C02H + 、上。 C '力
DCC扁AP, benzene, rt
人 0
N d人
0 \(CH2)7CHICHCICH2CHCICHI(CH2)4CH3
A 1、烧瓶中加入19. 90mL (250,1)氯仿，加入1.26mL(5翻l)亚油酸(化合物B)， 加入含1. 27mL(25mmo1)氯化碘及14. 31mL (250mmol)乙酸的混合溶液，在室温下磁力搅拌 10分钟。反应液经3%亚硫酸钠溶液洗涤至无色后，以乙酸乙酯萃取。有机层经饱和食盐 水洗涤、无水硫酸钠干燥后，减压蒸去溶剂氯仿得无色液体2. 78g，即为碘化亚油酸(化合 物C)，收率为92%。 2、烧瓶中加入14. 20mL(160mmo1)苯，加入1. 21g(2mmo1)碘化亚油酸(化合物C)， 加入O. 56g(2. 2,1)去氧氟脲苷(化合物D)、0. 12g(1.0,1)对-二甲氨基吡啶(DMAP)， 在室温下磁力搅拌12分钟，然后加入0. 42g(2. Ommol)N， N' - 二环己基碳二亚胺(DCC)，室 温下反应24小时，减压蒸去溶剂苯，残留物以乙酸乙酯石油醚=1 : 4为淋洗液进行柱 层析分离提纯，得白色固体1. 50g，即为碘油氟脲苷酯(化合物A)，收率为90% 。
实施例3按下述反应式制备碘油氟脲苷酯
CH3(CH2)4CHICHCICH2CHCICHI(CH2)7C02H C
o
NH
人 O
N 0、。a人
O (CH2)7CHICHCICH2CHCICHI(CH2)4CH3
A
DCC/DMAP
N q O benzene, rt
\八OH 1、烧瓶中加入59. 70mL(750mmo1)氯仿，加入1. 26mL(5翻l)亚油酸(化合物B)， 加入含3. 05mL(60mmo1)氯化碘及42. 93mL(750mmol)乙酸的混合溶液，在室温下磁力搅拌IO分钟。反应液经10%亚硫酸钠溶液洗涤至无色后，以乙酸乙酯萃取。有机层经饱和食盐 水洗涤、无水硫酸钠干燥后，减压蒸去溶剂氯仿得无色液体2. 75g，即为碘化亚油酸(化合 物0，收率为91%。 2、烧瓶中加入21. 30mL(240mmo1)苯，加入1. 21g(2mmo1)碘化亚油酸(化合物C)， 加入O. 72g(3. Ommol)去氧氟脲苷(化合物D)、0. 37g(3. Ommol)对-二甲氨基吡啶(DMAP)， 在室温下磁力搅拌10分钟，然后加入0. 50g(2. 4mmol)N， N' - 二环己基碳二亚胺(DCC)，室 温下反应20小时，减压蒸去溶剂苯，残留物以乙酸乙酯石油醚=1 : l为淋洗液进行柱 层析分离提纯，得白色固体1. 53g，即为碘油氟脲苷酯(化合物A)，收率为92% 。
实施例4细胞体外实验 按常规方法，采用碘油氟脲苷酯，五氟尿嘧啶，碘化亚油酸和亚油酸及超液化碘油 注射液进行体外SMMC-7721肝癌细胞株72小时细胞存活实验，结果显示，本发明碘油氟脲 苷酯具有杀伤癌细胞和良好的抑制肿瘤细胞生长的效果。 表1显示了体外对S匪C-7721肝癌细胞株72小时细胞存活率(MTT法，六孔值的
均数)。
表1化合物碘油氟五氟碘化超液化碘油注射液亚油酸终浓度脲苷酯尿嘧啶亚油酸(三孔值的均数) 0 uM100100100100100 2 uM56. 1862. 2797. 9595. 8496. 92 10 uM57. 3144. 0188. 1788. 92未测 50 uM18. 6436. 4689. 1783. 41未测 100 uM9. 5718. 58 73.51 79.8290. 11 200 uM9. 0713.03 5.134. 3795. 34估计>>400。于300uM， 400uM17. 557. 38134. 38 139. 52 IC5QuM 时分别为91.74， 95.22。 实施例5动物体内实验 按常规方法，体内瘤内注射对小鼠H22肝癌模型进行抑瘤实验，以碘化亚油酸或 碘油氟脲苷酯直接注射，或者将其与五氟尿嘧啶，氟尿嘧啶核苷，铂剂，丝裂霉素，阿霉素， 或紫杉醇，并不限于此，混合并乳化后实验动物体内瘤内注射，效果显示，能抑制肿瘤的生 长。表明本发明可作为肝癌肝动脉内介入性栓塞化疗药物，诊治肝癌等实质性癌症。
权利要求
碘化亚油酸去氧氟脲苷酯，其特征是具有如下的结构式F2008102053671C0000011.tif
2. —种制备权利要求1所述碘化亚油酸去氧氟脲苷酯的方法，其特征是以碘化亚油酸 和去氧氟脲苷为反应原料，通过酯化反应获得目标产物碘化亚油酸去氧氟脲苷酯，包括下述步骤1)按反应式I制备碘化亚油酸<formula>formula see original document page 2</formula>烧瓶中加入溶剂氯仿、亚油酸、氯化碘乙酸溶液，在室温下磁力搅拌5-20分钟，反应液 经亚硫酸钠溶液洗涤至无色后，以乙酸乙酯萃取，有机层经饱和食盐水洗涤、无水硫酸钠干 燥后，减压蒸去溶剂得无色液体；2)按反应式II制备碘油氟脲苷酯<formula>formula see original document page 2</formula> II烧瓶中加入溶剂苯、碘化亚油酸、去氧氟脲苷、对-二甲氨基吡啶，室温下磁力搅拌 5-20分钟，然后加入N， N'-二环己基碳二亚胺，室温下反应15-24小时，减压蒸去溶剂苯，残 留物以乙酸乙酯/石油醚为淋洗液进行柱层析分离提纯，得所碘化亚油酸去氧氟脲苷酯。
3. 按权利要求2所述的制备碘化亚油酸去氧氟脲苷酯的方法，其特征是所述步骤1) 中，氯仿与亚油酸摩尔比为50-200 : 1，氯化碘与亚油酸摩尔比为5-15 : l，乙酸与亚油酸 摩尔比为50-200 : 1。
4. 按权利要求2所述的制备碘化亚油酸去氧氟脲苷酯的方法，其特征是所述步骤1)中 所述亚硫酸钠溶液，其浓度为2% -18%。
5. 按权利要求2所述的制备碘化亚油酸去氧氟脲苷酯的方法，其特征是所述步骤 2)中所述的苯与碘化亚油酸摩尔比为50-200 : l，去氧氟脲苷与碘化亚油酸摩尔比为1-1.5 : i，对-二甲氨基吡啶与碘化亚油酸摩尔比为o. 1-1.5 : i， n， n'-二环己基碳二 亚胺与碘化亚油酸摩尔比为1-1.2 : i。
6. 按权利要求2所述的制备碘化亚油酸去氧氟脲苷酯的方法，其特征是所述步骤2)中所述的淋洗液中，乙酸乙酯与石油醚的体积比为i : i-i : 20。
7. 按权利要求2所述的制备碘化亚油酸去氧氟脲苷酯的方法，其特征是所述步骤2)中 所述的加料顺序中，n， n' - 二环己基碳二亚胺在磁力搅拌5-20分钟后加入。
8. 权利要求l的碘化亚油酸去氧氟脲苷酯在制备导向治疗肿瘤药物中的用途。
9. 按权利要求8的用途，其特征在于，所述的导向治疗肿瘤药物以碘化长链脂肪酸或 其酯作为结合肿瘤的导向部分，与其他抗癌药或含金属化合物或含砷化合物或激素或细胞 因子或蛋白的毒性或活性物质作为杀伤肿瘤的部分，以共价或配位键结合，实施肿瘤导向 治疗。
10. —种抗肿瘤药物，其特征在于含有权利要求1的碘化亚油酸去氧氟脲苷酯。
全文摘要
本发明属药物合成领域，涉及一种碘化亚油酸去氧氟脲苷酯及其制备方法和抑瘤用途。本发明采用抗肿瘤药物为弹头，碘化亚油酸为载体，制成化学性共价结合物作为对癌瘤有识别力的导向治疗肿瘤药物，实验显示，可选择性粘附及沉积于癌组织内，在局部高浓度长期直接杀伤癌细胞，在体内酯酶的缓慢降解下，可长达1-3个月释放直接抑制癌瘤。所述药物与现有药物碘油同属长链脂肪酸酯类，具有相近的物化特性，可与其它抗癌药物制成乳化剂，用于肿瘤血管栓塞化疗如肝癌，胰腺癌、直肠癌、食道癌、胃癌、乳腺癌和肺癌。并可作为良性，巨大血管瘤等疾病的局部治疗药物。
文档编号A61K31/7072GK101768195SQ20081020536
公开日2010年7月7日 申请日期2008年12月31日 优先权日2008年12月31日
发明者储艳秋, 匡春香, 戴兆云, 江玉波, 蒋公羽, 闵太善, 黄伟达 申请人:复旦大学附属华东医院