专利名称：N-乙酰神经氨酸类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及N-乙酰神经氨酸类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途。这些化合物可抑制病毒表面神经氨酸酶，因而可应用于相关疾病的治疗。
背景技术：
神经氨酸酶存在于许多流感病毒、副流感病毒、流行性腮腺炎病毒等病毒粒子的表面。
由于其能催化末端神经氨酸与相邻糖基间的α-酮苷键裂解，使受体破坏，病毒体得以游离，从而加重感染症状。因此，通过抑制神经氨酸酶的活性，能阻滞子代病毒脱离感染细胞的表面，从而防止继发性感染。所以，一般认为具有抑制神经氨酸酶活性的物质可用于治疗或预防流感。
大多数已知的神经氨酸酶抑制剂是神经氨酸的类似物，如2-脱氧-2，3-二脱氢-N-乙酰神经氨酸(DANA)和它的衍生物。国际专利申请WO91/16320中描述了一系列DANA的衍生物，它们在体内和体外都对神经氨酸酶具有一定的抑制活性。其它DANA衍生物公开于WO98/06712、WO97/06157、WO01/81331等国际专利中请中。扎那米韦就是第一个上市的神经氨酸酶抑制剂，然而，由于该化合物极性很大，其口服生物利用度很低(2-3％)，不能口服给药，需要制成喷雾剂，通过鼻腔吸入式给药，给患者用药带来极大不便，也增加了制剂的生产成本。另一方面，流感病毒对已上市药物例如扎那米韦、奥司它韦等易产生耐药性。
因此，寻找新的活性化合物进而开发出新的抗流感病毒药物已迫在眉睫。在寻找新的对流感病毒有抑制作用的活性化合物的过程中，本发明人发现了一类结构新颖的具有明显的抗流感病毒活性的N-乙酰神经氨酸类化合物。
发明内容
因此，本发明的主要目的是提供一类新型的抑制病毒、特别是抑制流感病毒的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物。
本发明的再一目的是提供该N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物的制备方法。
本发明的还一目的是提供一种有效抑制神经氨酸酶的抗病毒药物组合物。
本发明的又一目的是提供上述N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物和药物组合物的用途，所述N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物和其药物组合物能有效地抑制神经氨酸酶，因而是神经氨酸酶抑制剂，可应用于相关的病毒性疾病及其感染的治疗。
根据本发明的一个方面，本发明提供如下通式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物
其中 R1代表OR5、SR5、NR5R6、N(OR5)R6或N(NR5R6)R6； R2代表H、C1-20烷基、C1-5烷氧基取代的C1-5烷基、COR5或CONR5R6； R3代表N3、NR7R8、NHC(＝NR9)NR5R10、N＝PPh3或
R4代表COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6； R5代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、五氟苯基、芳基、CONR14R15、COOR14、COR14或被一个或多个如下基团取代的C1-10烷基NR14R15、NR14COR15、CO2R14、OR14、C3-8环烷基和芳基； R6代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、芳基、COR14或被一个或多个如下基团取代的C1-10烷基NR14R14、COR14、C3-8环烷基、CN、N3、OR14和芳基； 或者R5和R6与它们相连的氮原子共同构成环状结构，该环状结构可以是饱和或非饱和的，并可以含有一个或多个选自N、O和S中的杂原子，该环状结构还可以非必需地被卤素、C1-10烷基、C1-C10烷氧基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、CF3、CN或NO2取代； R7和R8各自独立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烃链，该烃链中非必需地含有一个NR11基团，该烃链非必需地被1～4个选自氧代基(羰基)和C1-6烷基的基团所取代，而该C1-6烷基非必需地被羟基或芳基取代； R9和R10各自独立地代表H、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、NR14R15、OR14、CN或NO2； R11和R12各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C1-10烷氧基、COOR5、CONR14R15或芳基；或者非必需地被羟基、氨基、胺基、COOR5或C1-6烷氧基取代的C1-10烷基； R14和R15各自独立地代表H、C1-6烷基、C3-8环烷基或芳基； 其中，所述芳基是指芳香族的碳环或杂环基团，且非必需地被取代。当所述芳基被取代时，合适的取代基包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基、氨基、C1-4烷基取代的氨基、苯基和苯甲基。合适的是，所述芳基被1～3个上述取代基取代。
本文中，烷基包括直链或支链的饱和的烃基。
本文中，烯基是指直链或支链的、含有一个或多个碳-碳双键的烃基。
本文中，炔基是指直链或支链的、含有一个或多个碳-碳三键的烃基。
在上述定义中，通式(I)的化合物可含有一个或多个手性中心，因此可存在立体异构体，即对映异构体或非对映异构体，或其混合物。本发明的化合物可以为通式(I)化合物的单个立体异构体或各立体异构体的混合物。可通过常规技术将非对映异构体分离，例如，将通式(I)化合物或其适宜的盐或其衍生物的非对映异构体混合物通过分步结晶或色谱(包括HPLC)进行分离。也可由相应的光学纯的中间体制备或通过拆分制备通式(I)的单一对映体，拆分时可用手性柱分离，或者通过与光学活性的酸或碱反应形成的非对映异构体盐分步结晶。
本发明通式(I)所示化合物的药学上可接受的盐是指，按照化学上常规成盐的方法，通式(I)所示化合物与合适的酸或碱形成的盐，例如合适的酸的例子包括氢氯酸、氢溴酸、硫酸、高氯酸、富马酸、马来酸、磷酸、乙醇酸、乳酸、水杨酸、琥珀酸、对甲苯磺酸、酒石酸、乙酸、三氟乙酸、柠檬酸、甲磺酸、甲酸、苯甲酸、丙二酸、萘-2-磺酸和苯磺酸，其它的酸如草酸，虽然本身不是药物上可接受的，但可用于制备作为中间体的盐，所述中间体用于制备本发明化合物及其药物上可接受的酸加成盐；与碱形成的盐，例如通式(I)所示化合物的碱金属(如钠)、碱土金属(如镁)、铵或NR4+(其中R为C1-4烷基)的盐。
优选地，式(I)化合物中 R1代表OR5、NR5R6或N(OR5)R6； R2代表H、COR5或CONR5R6； R3代表NR7R8、NHC(＝NR9)NR5R10或
其为α构型； R4代表COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6； R5和R6各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基或芳基；或者被OR14、C3-8环烷基或芳基取代的C1-10烷基； 或者R5和R6与它们相连的氮原子共同构成环状结构，该环状结构可以是饱和或非饱和的，并可以含有一个或多个选自N、O和S中的杂原子，该环状结构还可以非必需地被卤素、C1-10烷基、C1-C10烷氧基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代； R7和R8各自独立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烃链，该烃链中非必需地含有一个NR11基团，该烃链非必需地被1～4个选自氧代基(羰基)和C1-6烷基的基团所取代，而该C1-6烷基非必需地被羟基或芳基取代； R9和R10各自独立地代表H、C1-6烷基、NR14R15、OR14、CN或NO2； R11和R12各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、COOR5或芳基；或者非必需地被羟基、氨基、胺基、COOR5或C1-6烷氧基取代的C1-10烷基； R14和R15各自独立地代表H、C1-6烷基、C3-8环烷基或芳基； 其中，所述芳基的定义同上。
更优选地，式(I)化合物中 R1代表NR5R6或N(OR5)R6； R2代表H或COR5； R3为α构型； R3代表NR7R8或NHC(＝NR9)NR5R10； R4代表COOR5或CON(OR5)R6； R5和R6各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基；或者R5和R6与它们相连的氮原子共同构成环状结构，该环状结构可以是饱和或非饱和的，并可以含有一个或多个选自N、O和S中的杂原子，该环状结构还可以非必需地被C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代； R7和R8各自独立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烃链，该烃链中非必需地含有一个NR11基团，该烃链非必需地被1或2个选自氧代基(羰基)和C1-6烷基的基团所取代，而该C1-6烷基非必需地被羟基或芳基取代，所述芳基包括苯基、萘基、吡啶基、咪唑基和噻吩基，且非必需地被取代；当所述芳基被取代时，所述取代基包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、硝基、氨基、苯基和苯甲基；并且所述被取代的芳基带有1～3个上述取代基； R9和R10各自独立地代表H、C1-6烷基、NH2、OH、CN或NO2； R11和R12各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基或COOR5。
再进一步优选的化合物如下式(I)所示 R1代表NR5R6； R2代表H； R3代表NH2或NHC(＝NH)NH2，其为α构型； R4代表COOR5； R5和R6各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基；或者R5和R6与它们相连的氮原子共同构成环状结构，该环状结构可以是饱和或非饱和的，并可以含有一个或多个选自N、O和S中的杂原子，该环状结构还可以非必需地被C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代。
本发明特别优选的具体化合物包括 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例22化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例23化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例24化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例25化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯(实施例27化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例28化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例30化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例31化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯(实施例32化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯(实施例34化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例35化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例36化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例37化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例42化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-异丙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例43化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-羟胺基-2’-氧乙基}-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例44化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环己胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例45化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环己基胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例47化合物)、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例48化合物)、和 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-异丙胺胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(实施例49化合物)。
本发明进一步特别优选的具体化合物包括 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、 (2R，3R，4s)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、和 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸。
根据本发明的另一方面，本发明提供通式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物的制备方法，该方法包括下述方法的任何一种 (1)当通式(I)化合物中R1为OH，R2不为H，R3为N3，R4为COOR5，且R5不为H时，即通式(Ia)化合物，可以通过通式(II)化合物(Carbohydrate Research，2008，343，14，2459-2462.)氧化裂解来制备，如果需要，随后进行脱保护，通式(II)化合物的R2和R4取代基定义同通式(I)化合物
氧化裂解适当地通过两步完成。适当的是第一步采用高碘酸盐完成，如用高碘酸钠，适当地是在合适溶剂中完成，如含水有机溶剂，例如含水甲醇。用于氧化裂解第二步的合适试剂可以是亚氯酸盐，如亚氯酸钠，适当地是存在有缓冲剂，如碱金属或碱土金属磷酸盐，如磷酸二氢钾，并且在含水有机溶剂中，如醇和烃的含水混合物，例如叔丁醇和环己烯的含水混合物。
(2)当通式(I)化合物中R1为OR5或SR5时，即通式(Ic)化合物，可以通过相应的通式(Ib)化合物(通式(I)化合物中的R1代表OH)与被R5取代的含氧或含硫化合物通过缩合反应来制备
(3)当通式(I)化合物中R1为NR5R6、N(OR5)R6或N(NR5R6)R6时，即通式(Id)化合物，可以通过相应的通式(Ib)化合物(通式(I)化合物中的R1代表OH)与-R5R6、-(OR5)R6或-(NR5R6)R6取代的含氮化合物反应来制备。合适的是，羧基在与胺反应之前被活化。适当的活化方法对于本领域技术人员是清楚的，并包括例如转化成五氟苯氧基。胺化反应可以方便地在适当的有机溶剂中完成，如在醚中，例如在THF中。
(4)当通式(I)化合物中R3为
时，即通式(If)化合物，可以通过相应的通式(Ie)化合物(通式(I)化合物中的R3代表N3)与被R11和R12取代的炔类化合物反应来制备。合适的是，制备需要在催化剂催化下进行。适当的催化方法对于本领域的技术人员是清楚的，如亚铜离子催化。
(5)当通式(I)化合物中R3为NH2时，即通式(Ig)化合物，可以通过相应的通式(Ie)化合物(通式(I)化合物中的R3代表N3)通过叠氮基的还原反应来制备
可以采用任何已知的将叠氮化合物转变成胺的方法完成还原反应。适当的方法描述在以下实施例中，以及例如国际专利申请公开WO93/12105和WO95/00503中均有描述。合适的是，使用Lindlar催化剂催化，氢气或甲酸等可以提供活性氢的化合物还原完成反应。
(6)当通式(I)化合物中R3为NR7R8时，即通式(Ih)化合物，可以从通式(Ig)化合物(通式(I)化合物中的R3为NH2)通过与被R7和R8取代的化合物反应来制备，例如用含R7和R8取代基的卤化物、酸酐、酰卤衍生物等经常规的N官能团化反应来制备，但不限于此。适当的制备方法对于本领域的技术人员是清楚的。
(7)当通式(I)化合物中R3为NHC(＝NR14)NR15R16时，即通式(Ii)化合物，可以从通式(Ih)化合物(通式(I)化合物中的R3为NR7R8)通过胍基化反应来制备。适当的引入胍基及其衍生物的方法对于本领域的技术人员是清楚的。尤其是当通式(I)化合物中R3为NHC(＝NH)NH2时，即通式(Ik)化合物，例如通过通式(Ig)化合物(通式(I)化合物中的R3为NH2)与脒基吡唑或其盐或衍生物(优选脒基吡唑)反应或经过中间体式(Ij)化合物(通式(I)化合物中的R3为NHCN)来制备。
(8)当通式(I)化合物中R3代表N3，R4为CONR5R6时，即通式(Im)化合物，可以通过相应的通式(Il)化合物(通式(I)化合物中的R3代表N3，R4为COOR5，且R5不为H)与羟胺或其衍生物的碱式盐反应得到。适当的转化方法对于本领域技术人员是清楚的，并包括例如用NH2OH/KOH。
(9)通式(Ih)化合物(其中R3为NR7R8)或通式(Ii)化合物(其中R3为NHC(＝NR14)NR15R16)还可以从通式(Im)化合物(通式(I)化合物中的R3代表N3，R4为CONR5R6)通过与上述方法(5)类似的叠氮基还原方法还原，然后进一步反应来制备。适当的制备方法对于本领域的技术人员是清楚的。
(10)通过通式(I)的不同化合物之间的官能团相互转化可以制备通式(I)的其它化合物。例如，其中R2为H的化合物可以通过不为H的化合物来制备；R7和R8不为H的化合物可以通过相应的R7和/或R8为H的化合物来制备；R4为COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6的化合物可以与R4为COOH的化合物相互转化。
本领域技术人员可以理解，为了防止副反应，在上述方法的任何阶段可能需要保护分子中的一个或多个敏感基团；在反应序列的任一适当的后继阶段可以将保护性基团除去。
用于制备通式(I)化合物的保护性基团可以使用传统方法。例如参见“Greene’s protectivegroups in organic synthesis”，Peter G M.Wuts和Theodora W.Greene(A John Wiley & Sons，Inc.，2007)。
传统的氨基保护基团可以包括例如芳烷基，如苄基、二苯基甲基或三苯基甲基；和酰基，如N-苄氧基羰基或叔丁氧基羰基。
羟基可以被以下基团保护如芳烷基，如苄基、二苯基甲基或三苯基甲基；酰基，如乙酰基；硅保护性基团，如三甲基甲硅烷基，或者作为四氢呋喃衍生物。
羧酸基可以适当地保护成为甲酯或二苯基甲酯。
可用传统方法除去存在的任何保护性基团。
当需要以盐，例如酸加成盐的形式分离出本发明化合物时，这可以通过用适当的酸(优选使用等当量的酸)处理通式(I)的游离碱来完成。
根据本发明的又一方面，本发明的药物组合物含有治疗有效量的一种或多种上述通式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物，以及一种或多种可药用载体或稀释剂。
根据本发明的再一方面，通式(I)化合物可以作为前药形式应用，从而提高生物利用度或改善该类化合物的理化性质。例如通式(I)化合物中R4代表COOR5(R5不为H)的化合物也可以作为R4代表COOH的化合物的前药形式。化合物的极性降低，有利于患者口服给药。
本发明的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物和其药物组合物能有效地抑制神经氨酸酶，因而可应用于相关疾病的治疗。
具体实施例方式 下列实施例进一步解释了本发明的化合物及其中间体的合成，但并不限制本发明的范围。
1H NMR在Mercury-400核磁共振波谱仪(Varian公司)上完成，1H NMR的观测频率为300MHz或400MHz。常规缩写如下s，单峰；d，双峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰。质谱测定在MAT-95型质谱仪(Thermo Finnigan公司)上完成，电离方式EI 70V，源温200℃，LR分辨率1000。高分辨质谱由Finnigan MAT，Bruker Daltonics FTMS-7型仪器测定。
实施例1 (S)-[(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-4-叠氮基-6-(甲氧羰基-3，4-二氢吡喃-2’]-2-乙酰氧基乙酸
7-O-乙酰基-N-乙酰基-2，4-二脱氧-2，3-脱氢-4α-叠氮基-D-神经氨酸甲酯(1.6g，4.3mmol)(Carbohydrate Research，2008，343，12，2459-2462.)溶于CH3OH和H2O(48mL和16mL)的混合溶液中，加入NaIO4(1.84g，8.6mmol，2.0eq.)，室温搅拌30min后，过滤，减压浓缩得白色固体。将白色固体溶于t-BuOH(27mL)中，加入环己烯(2.7mL，)，然后再向体系中加入NaClO2(2.87g，)、KH2PO4(2.87g，)的水(18.5mL)溶液。溶液由无色变为明亮的橙黄色，室温搅拌2h后，停止反应。向反应溶液中加入乙酸乙酯(50mL)和H2O(100mL)，分液，弃去乙酸乙酯层，水层用6M HCl溶液调节pH＝1～2后，用乙酸乙酯提取(75mL×5)，合并有机相，无水MgSO4干燥后，过滤，减压浓缩得白色固体的标题化合物1.765g，产率100％。
1H NMR(300MHz，DMSO)δ8.19(1H，d，J＝9.3Hz，NH)，5.89(1H，d，J＝2.5Hz，3-H)，5.22(1H，d，J＝2.1Hz，7-H)，4.56(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝10.9Hz，6-H)，4.43(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝9.4Hz，4-H)，4.07(1H，d，J＝10.5Hz，5-H)，3.71(3H，s，CH3)，2.05(3H，s，OAc)，1.79(3H，s，NAc)；HRMS(ESI)m/z计算值C13H16N4O8[M+H]+357.1.测定值356.3。
实施例2 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-五氟苯氧基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例1 化合物(855mg，2.4mmol)溶于DMF(8mL)中，再加入吡啶(0.2mL，2.5mmol，1.1eq.)和CF3COOC6F5(1.11mL，0.63g/mL，2.5mmol，1.1eq.)，室温搅拌2h后，停止反应。向反应液中加入乙酸乙酯(32mL)，依次用1M HCl(30mL×3)、饱和NaHCO3(30mL×3)、饱和NaCl溶液(30mL×1)洗，无水MgSO4干燥后，过滤，减压浓缩至恰好有固体析出，滴加石油醚使结晶得标题化合物523mg，产率42％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.05(1H，d，J＝2.6Hz，3-H)，5.78(1H，d，J＝2.7Hz，7-H)，5.61(1H，d，J＝8.7Hz，NH)，4.99(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝10.4Hz，6-H)，4.47(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.2Hz，4-H)，4.09(1H，dd，J＝9.1Hz，J＝19.0Hz，5-H)，3.81(3H，s，CH3)，2.27(3H，s，OAc)，2.06(3H，s，NAc)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝544.9。
实施例3 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1，-乙酰氧基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例1 化合物(35mg，0.1mmol)和1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺(EDCI)(21mg，0.11mmol)溶解于THF(0.5mL)中，冰水冷却条件下加入1-羟基苯并三唑(HOBt)(15mg，0.11mmol)，室温搅拌10min后，加入甲胺的水溶液(12μL，0.11mmol)，2.5h后TLC显示反应完全，停止反应。减压浓缩至干，柱层析分离(CH2Cl2∶CH3OH＝60∶1(v/v))得白色固体的标题化合物27mg，产率75％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.26(1H，d，J＝8.9Hz，NHCO)，6.49(1H，d，J＝4.7Hz，NH)，5.91(1H，d，J＝2.2Hz，3-H)，5.40(1H，d，J＝1.7Hz，7-H)，4.49(1H，dd，J＝1.8Hz，J＝8.7Hz，6-H)，4.35(1H，dd，J＝9.4Hz，J＝9.8Hz，5-H)，4.26(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.7Hz，4-H)，3.77(3H，s，CH3)，2.87(1H，d，NHCH3)，2.22(3H，s，OAc)，1.97(3H，s，NAc)；13C NMR(400MHz，CDCl3)20.82(OCOCH3)，23.00(NHCOCH3)，26.26(NHCH3)，48.45(C-5)，52.53(OCH3)，58.80(C-4)，70.59(C-7)，77.32(C-6)，108.34(C-3)，144.70(C-2)，161.47(COO)，168.90(C＝O)，169.84(C＝O)，170.61(C＝O)。
实施例4 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
按照与实施例3相同的方法，采用乙胺代替甲胺来制备标题化合物；产率67％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.53(1H，d，J＝9.4Hz，NH)，6.32(1H，m，NH)，5.95(1H，d，J＝2.4Hz，3-H)，5.42(1H，d，J＝1.9Hz，7-H)，4.53(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝10.4Hz，6-H)，4.33(1H，dd，J＝9.4Hz，J＝19.1Hz，5-H)，4.25(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝8.9Hz，4-H)，3.78(3H，s，CH3)，3.49(1H，m，CH)，3.22(1H，m，CH)，2.24(3H，s，OAc)，1.98(3H，s，NAc)，1.20(3H，t，J＝7.1Hz，CH3)；HRMS(ESI)m/z计算值C15H22N5O7[M+H]+384.1519，测定值384.1535。
实施例5 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例2 化合物(369mg，0.73mmol)溶于THF(15mL)中，慢慢加入氨甲醇(0.2mL，0.87mmol，1.2eq.)，室温搅拌30min后，停止反应。减压浓缩后，柱层析分离(EtOAc∶石油醚＝1∶1(v/v))得标题化合物206mg，产率80％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.59(1H，s，NH)，6.49(1H，s，NH)，6.06(1H，d，J＝6.6Hz，NH)，5.96(1H，s，3-H)，5.44(1H，s，7-H)，4.56(1H，d，J＝5.1Hz，6-H)，4.28(1H，s，4-H and5-H)，3.79(3H，s，CH3)，2.23(3H，s，OAc)，1.98(3H，s，NAc)；LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝378.0。
实施例6 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
按照与实施例5相同的方法，采用二甲基胺代替氨甲醇来制备标题化合物；产率86％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.24(1H，d，J＝6.8Hz，NH)，6.05(1H，d，J＝3.6Hz，7-H)，5.87(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，4.74(1H，t，J＝6.5Hz，4-H)，4.58(1H，dd，J＝3.7Hz，J＝6.3Hz，6-H)，4.12(1H，dd，J＝7.1Hz，J＝14.4Hz，5-H)，3.81(3H，s，CH3)，3.13(3H，s，CH3)，2.99(3H，s，CH3)，2.15(3H，s，OAc)，1.99(3H，s，NAc)；HRMS(EI)m/z计算值C15H22N5O7[M+H]+384.1519；测定值384.1527。
实施例7 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
按照与实施例5相同的方法，采用二乙基胺代替氨甲醇来制备标题化合物；产率90％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.29(1H，d，J＝7.5Hz，NH)，6.05(1H，d，J＝3.6Hz，3-H)，5.87(1H，d，J＝6.3Hz，7-H)，4.75(1H，t，J＝6.3Hz，6-H)，4.56(1H，dd，J＝3.6Hz，J＝6.3Hz，4-H)，4.03(1H，dt，J＝6.9Hz，J＝13.8Hz，5-H)，3.80(3H，s，CH3)，3.37(4H，m，2CH2)，2.15(3H，s，OAc)，1.99(3H，s，NAc)，1.15(6H，m，2CH3)；LRMS(EI)m/z[M+H]+＝412.0。
实施例8 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-羟胺基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例2 化合物(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-五氟苯氧基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯(200mg，0.04mmol)溶于THF(5mL)中，加入盐酸羟胺(30mg，0.043mmol，1.1eq.)和二异丙基乙胺(DIPEA)(7.5μL，0.043mmol，1.1eq.)，室温搅拌30min后，停止反应。减压浓缩后，柱层析分离(EtOAc)得标题化合物131mg，产率92％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ6.20(1H，d，J＝2.8Hz，3-H)，5.57(1H，d，J＝2.2Hz，7-H)，4.66(1H，t，J＝2.1Hz，J＝10.5Hz，6-H)，4.51(1H，dd，J＝2.9Hz，J＝9.6Hz，4-H)，4.29(1H，t，J＝9.9Hz，5-H)，3.89(3H，s，CH3)，2.28(3H，s，OAc)，2.09(3H，s，NAc)；LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝478.1。
实施例9 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
按照与实施例5相同的方法，采用环戊胺代替氨甲醇来制备标题化合物；产率98％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.78(1H，d，J＝8.3Hz，NH)，5.99(1H，d，J＝3.0Hz，3-H)，5.56(1H，d，J＝4.4Hz，7-H)，4.66(1H，dd，J＝4.8Hz，J＝9.1Hz，6-H)，4.56(1H，dd，J＝2.8Hz，J＝7.8Hz，4-H)，4.11(1H，dt，J＝8.5Hz，J＝16.5Hz，5-H)，3.69(4H，m，2CH2)，3.79(3H，s，CH3)，2.16(3H，s，OAc)，1.99(3H，s，NAc)，1.92(4H，m，2CH2)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝410.0。
实施例10 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-叠氮基-N-羟基-3，4-二氢吡喃-6-甲酰胺
将实施例6 化合物(100mg，0.26mmol)溶解于CH3OH(5mL)中，加入NH2OH/KOH/CH3OH溶液(1.0mL，0.72mmol)，室温搅拌10min后，TLC显示反应完全，加入冰醋酸调节体系pH＝6.5。得标题化合物反应液，可不经处理，直接用于下步反应。
HRMS(ESI)m/z计算值C12H18N6O6Na[M+Na]+365.1186，测定值365.1181。
实施例11 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-N-羟基-3，4-二氢吡喃-6-甲酰胺
向实施例10的反应溶液中加入Lindlar(10mg)催化剂，室温常压氢化反应48h后，TLC显示反应完全，停止反应，向反应体系加入冰醋酸调节体系pH＝6.5。用硅藻土过滤后，反相硅胶柱层析分离得标题化合物16mg，产率20％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.76(1H，d，J＝2.3Hz，3-H)，4.56(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝9.8Hz，6-H)，4.37(1H，t，J＝9.5Hz，5-H)，4.31(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝9.6Hz，4-H)，3.14(3H，s，CH3)，3.05(3H，s，CH3)，2.15(3H，s，NAc)；HRMS(ESI)m/z计算值C12H20N4O6Na[M+Na]+339.1281，测定值339.1266。
实施例12 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-羟甲基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例3 化合物(60mg，0.16mmol)溶于乙醇水溶液(0.5mL)，加入丙炔醇(11μL，0.16mmol)，再加入新配制的抗坏血酸钠盐(0.38mL，30％mmol，25mg/mL)、五水硫酸铜水溶液(0.21mL，5％mmol，0.4mg/mL)，避光条件下，室温搅拌18h，减压蒸除溶剂。以乙酸乙酯甲醇＝25∶1(v/v)为洗脱剂，柱层析分离得标题化合物(48mg，70％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.72(1H，s，CH)，7.44(1H，d，J＝9.2Hz，NH)，6.42(1H，d，J＝4.1Hz，NH)，6.03(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，5.71(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝10.6Hz，4-H)，5.61(1H，s，7-H)，4.85(1H，d，J＝1.3Hz，J＝10.7Hz，6-H)，4.77(2H，s，CH2)，4.56(1H，dt，J＝10.5Hz，J＝20.1Hz，5-H)，3.79(3H，s，CH3)，2.91(3H，d，J＝4.8Hz，CH3)，2.18(3H，s，OAc)，1.80(3H，s，NHAc)；HRMS(EI)m/z计算值C17H23N5O8[M]+425.1547，测定值425.1512。
实施例13 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-羟甲基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
将实施例12 化合物(20mg，0.04mmol)溶于甲醇(0.4mL)中，然后加入NaOH的甲醇溶液(0.17mL，0.16mmol，24mg/mL)。室温搅拌2h后，TLC显示反应完全，然后加入Dowex50W×8(H+)，调节体系pH为7。过滤后，减压浓缩得标题化合物(16mg，92％)。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.27(1H，d，J＝8.8Hz，NH)，7.90(1H，s，CH)，7.79(1H，d，J＝4.8Hz，NH)，5.81(1H，d，J＝2.3Hz，3-H)，5.57(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝9.7Hz，4-H)，4.51(2H，m，6-H and 7-H)，4.47(2H，s，CH2)，4.29(1H，dt，J＝10.2Hz，J＝18.1Hz，5-H)，2.62(2H，d，J＝3.7Hz，CH3)，1.75(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)[M+H]+＝369.9；HRMS(EI)m/z计算值C14H21N5O7Na[M+Na]+392.1182，测定值392.1170。
实施例14 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-甲氧羰基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
按照与实施例12相同的方法，采用丙炔酸甲酯代替丙炔醇来制备标题化合物；产率72％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.26(1H，s，CH)，7.30(1H，t，J＝9.6Hz，NH)，6.43(1H，d，J＝4.9Hz，NH)，6.04(1H，d，J＝2.2Hz，3-H)，5.80(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝10.0Hz，4-H)，5.57(1H，d，J＝1.6Hz，7-H)，4.90(1H，dd，J＝1.7Hz，J＝10.8Hz，6-H)，4.57(1H，dt，J＝9.7Hz，J＝19.8Hz，5-H)，3.93(3H，s，CH3)，3.80(3H，s，CH3)，2.92(3H，d，J＝4.8Hz，CH3)，2.19(3H，s，OAc)，1.83(3H，s，NHAc)；HRMS(EI)m/z计算值C18H24N5O9[M+H]+454.0574，测定值454.1603。
实施例15 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-羧基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例13相同的方法，以实施例14化合物为原料来制备标题化合物；产率92％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.63(1H，s，CH)，7.82(1H，m，NH)，5.91(1H，d，J＝2.3Hz，3-H)，5.60(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝9.8Hz，4-H)，4.58(1H，d，J＝11.3Hz，6-H)，4.33(1H，m，5-H)，4.09(1H，s，7-H)，2.64(5H，d，J＝3.6Hz，CH3)，1.74(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)m/z计算值C14H17N5O8Na[M+Na]+406.0975，测定值406.0991。
实施例16 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-(3”-氨基苯基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
按照与实施例12相同的方法，采用苯乙炔代替丙炔醇来制备标题化合物；产率61％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.92(1H，s，CH)，7.82(2H，d，J＝7.3Hz，PhH)，7.43(2H，t，J＝7.3Hz，PhH)，7.34(1H，t，J＝7.3Hz，PhH)，6.98(1H，d，J＝9.7Hz，NH)，6.37(1H，d，J＝5.5Hz，NH)，6.09(1H，d，J＝2.4Hz，3-H)，5.79(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝10.1Hz，4-H)，5.61(1H，d，J＝1.5Hz，7-H)，4.88(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝10.6Hz，6-H)，4.66(1H，dt，J＝9.9Hz，J＝20.0Hz，5-H)，3.81(3H，s，CH3)，2.93(3H，d，J＝5.1Hz，CH3)，2.22(3H，s，OAc)，1.82(3H，s，NHAc)；HRMS(EI)m/z计算值C22H26N5O7[M+H]+472.1832，测定值472.1809。
实施例17 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-(3”-氨基苯基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例13相同的方法，以实施例16化合物为原料来制备标题化合物；产率90％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.59(1H，s，CH)，8.25(1H，d，J＝8.7Hz，NH)，7.85(2H，d，J＝7.8Hz，PhH)，7.80(1H，d，J＝4.8Hz，NH)，7.42(2H，t，J＝7.5Hz，PhH)，7.31(1H，t，J＝7.5Hz，PhH)，5.90(1H，d，J＝2.0Hz，3-H)，5.61(1H，d，J＝10.0Hz，4-H)，4.59(1H，d，J＝11.1Hz，6-H)，4.31(1H，dt，J＝10.0Hz，J＝20.5Hz，5-H)，4.08(1H，s，7-H)，2.64(3H，d，J＝3.7Hz，CH3)，1.74(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)[M+H]+＝415.9；HRMS(EI)m/z计算值C19H21N5O6Na[M+Na]+438.1390，测定值438.1367。
实施例18 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-甲氧羰基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
按照与实施例12相同的方法，以实施例9化合物为原料，采用丙炔酸甲酯代替丙炔醇来制备标题化合物；产率55％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.86(1H，s，CH)，6.08(1H，d，J＝2.7Hz，3-H)，5.61(1H，dd，J＝2.3Hz，J＝9.6Hz，6-H)，5.31(1H，d，J＝2.4Hz，7-H)，4.74(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝10.3Hz，4-H)，4.39(1H，t，J＝10.0Hz，5-H)，3.87(1H，m，CH)，3.83(3H，m，CH3)，3.74(3H，m，CH3)，3.31(3H，m，CH2+CH)，2.04(3H，s，OAc)，1.87(4H，m，2CH2)，1.66(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)[M]+＝494.0，516.1；HRMS(ESI)m/z计算值C21H27N5O9Na[M-H]+516.1706，测定值516.1714。
实施例19 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-羧基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例13相同的方法，以实施例18化合物为原料来制备标题化合物；产率76％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.62(1H，s，CH)，5.87(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，5.60(1H，d，J＝2.2Hz，J＝9.5Hz，6-H)，4.56(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝10.3Hz，4-H)，4.33(1H，d，J＝2.1Hz，7-H)，4.24(1H，t，J＝9.8Hz，5-H)，3.74(1H，m，CH)，3.30(3H，m，CH2+CH)，1.80(4H，m，2CH2)，1.71(3H，s，NHAc)；HRMS(ESI)[M+H]+＝424.0，445.9；HRMS(ESI)m/z计算值C17H21N5O8Na[M+Na]+446.1288，测定值446.1266。
实施例20 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-(3”-氨基苯基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
按照与实施例12相同的方法，以实施例9化合物为原料，采用环丙基乙炔代替丙炔醇来制备标题化合物；产率38％。
1H NMR(400MHz，DMSO)δ7.83(1H，s，CH)，5.97(1H，d，J＝2.4Hz，3-H)，5.47(1H，dd，J＝2.6Hz，J＝9.5Hz，6-H)，5.25(1H，d，J＝2.8Hz，7-H)，4.68(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝9.9Hz，4-H)，4.27(1H，t，J＝10.0Hz，5-H)，3.82(1H，m，CH)，3.71(3H，m，CH3)，3.27(3H，m，CH2+CH)，2.03(3H，s，OAc)，1.85(4H，m，2CH2)，1.68(3H，s，NHAc)，0.86(2H，m，CH2)，0.67(2H，m，CH2)；HRMS(ESI)[M]+＝498.2，510.1。
实施例21 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-[4’-(3”-氨基苯基-1，2，3-三氮唑-1]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例13相同的方法，以实施例20化合物为原料来制备标题化合物；产率90％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.79(1H，s，CH)，5.83(1H，d，J＝2.5Hz，3-H)，5.51(1H，d，J＝2.3Hz，J＝9.3Hz，6-H)，4.55(1H，dd，J＝2.5Hz，J＝10.2Hz，4-H)，4.29(1H，d，J＝2.5Hz，7-H)，4.13(1H，t，J＝9.9Hz，5-H)，3.75(1H，m，CH)，3.25(3H，m，CH2+CH)，1.83(4H，m，2CH2)，1.73(3H，s，NHAc)，0.86(2H，m，CH2)，0.67(2H，m，CH2)；HRMS(ESI)[M+H]+＝420.0，442.1；HRMS(ESI)m/z计算值C19H25N5O6Na[M]+ 442.1703，测定值442.1705。
实施例22 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
将实施例3 化合物(78mg，0.21mmol)溶于0.3mL H2O中，加入1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7(DBU)(0.22mL，1.47mmol，7.0eq.)，室温搅拌2h后，TLC显示反应完全。向反应体系加入Lindlar催化剂(8mg)后，通入H2反应24h后，TLC显示反应完全，停止反应。过滤除去不溶物，用离子交换树脂分离得标题化合物42mg，产率70％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.71(1H，d，J＝2.6Hz，3-H)，4.53(1H，d，J＝10.9Hz，6-H)，4.42(1H，s，7-H)，4.34(1H，t，J＝9.9Hz，5-H)，4.15(1H，dd，J＝1.4Hz，J＝9.2Hz，4-H)，2.87(3H，s，CH3)，2.12(3H，s，NAc)；MS(ESI)m/z(％)＝287.1(100)[M+H+].LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝288.0。
实施例23 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
将实施例22 化合物(10mg，0.035mmol)溶于0.3mL H2O中，加入脒基吡唑单盐酸盐(7.6mg，0.042mmol，1.5eq)和咪唑(11.8mg，0.17mmol，5.0eq.)，搅拌24h后，加入4滴Et3N，继续搅拌12h后，TLC显示反应完全。将反应液用离子交换树脂分离除去部分原料，再用反相硅胶柱层析分离(洗脱剂水)得标题化合物8.4mg，产率74％。
1H NMR(400MHz，D2O)δ5.64(1H，d，J＝2.5Hz，3-H)，4.54(1H，dd，J＝1.9Hz，J＝10.4Hz，6-H)，4.46(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝6.8Hz，4-H)，4.39(1H，dd，J＝2.0Hz，J＝4.5Hz，7-H)，4.26(1H，t，J＝10.1Hz，5-H)，2.84(3H，s，CH3)，2.04(3H，s，NAc)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝330.1。
实施例24 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例22相同的方法，以实施例6化合物为原料来制备标题化合物；产率70％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.74(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，4.90(1H，d，J＝2.1Hz，7-H)，4.54(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝9.6Hz，6-H)，4.35(1H，t，J＝9.6Hz，5-H)，4.28(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝9.3Hz，4-H)，3.12(3H，s，CH3)，3.03(3H，s，CH3)，2.13(3H，s，NAc)；HRMS(EI)m/z计算值C12H19N3O6Na[M+Na]+324.1172，测定值324.1163。
实施例25 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例23相同的方法，以实施例24化合物为原料来制备标题化合物；产率74％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.72(1H，d，J＝3.2Hz，3-H)，4.55(1H，dd，J＝4.2Hz，J＝8.2Hz，6-H)，4.42(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝7.8Hz，4-H)，4.21(1H，t，J＝7.9Hz，5-H)，3.13(3H，s，CH3)，3.00(3H，s，CH3)，2.06(3H，s，NAc)；13C NMR(400MHz，D2O)δ19.03，33.14，45.23，46.40，63.49，73.83，100.57，146.05，154.19，165.96，168.50，171.87；HRMS(ESI)m/z计算值C13H21N5O6[M+H]+344.1570，测定值344.1577。
实施例26 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-三苯基膦亚胺基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例4 化合物(30mg，0.07mmol)溶于THF(2.0mL)中，加入PPh3(20mg，0.07mmol，1.05eq.)，室温搅拌18h后，减压浓缩得油状物。制备板(CH2Cl2∶CH3OH＝30∶1(v/v))分离得标题化合物15mg，产率30％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.20(1H，d，J＝7.8Hz，NH)，7.73(18H，m，18PhH)，6.56(1H，m，NH)，5.45(1H，d，J＝1.5Hz，7-H)，5.40(1H，d，J＝2.1Hz，3-H)，4.98(1H，dd，J＝1.5Hz，J＝10.2Hz，6-H)，4.82(1H，m，4-H)，4.14(1H，dt，J＝10.5Hz，J＝17.7Hz，5-H)，3.67(3H，s，CH3)，3.39(1H，m，CH)，3.18(1H，m，CH)，2.23(3H，s，OAc)，1.76(3H，s，NAc)，1.12(3H，t，J＝7.2Hz，CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝618.3。
实施例27 (2R，3R，S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例4 化合物(30mg，0.07mmol)溶于THF(2.0mL)中，加入PPh3(20mg，0.07mmol，1.05eq.)，室温搅拌18h后，减压浓缩得油状物。制备板(CH2Cl2∶CH3OH＝10∶1(v/v))分离得标题化合物24mg，产率50％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ5.87(1H，d，J＝2.5Hz，3-H)，5.08(1H，d，J＝1.8Hz，7-H)，4.30(1H，dd，J＝1.6Hz，J＝10.4Hz，6-H)，3.76(1H，t，J＝9.9Hz，5-H)，3.68(3H，s，CH3)，3.40(1H，m，4-H)，3.24(1H，m，CH)，2.99(1H，m，CH)，2.11(3H，s，OAc)，1.79(3H，s，NAc)，1.03(3H，t，J＝7.1Hz，CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝380.1。
实施例28 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
将实施例26 化合物(15mg，0.024mmol)溶于甲醇(0.75mL)和水(0.75mL)的混合溶液中，加入KOH(0.3mL)，室温搅拌16h后，用2mol/L的盐酸调节溶液pH＝6-7，减压浓缩后得浅黄色固体的标题化合物。可不经纯化，直接用于下步反应。
LRMS(ESI)m/z[M-H]+＝300.1。
实施例29 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-[2’，3’-二叔丁氧羰基胍基]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
将实施例28 化合物溶于甲醇(0.2mL)和THF(0.2mL)的混合溶液中，然后加入N，N’-二叔丁氧羰基脒基吡唑(10.4mg，0.04mmol)，室温搅拌24h后，减压浓缩，制备板(CH2Cl2∶CH3OH＝6∶1(v/v))分离得标题化合物10mg，产率76％。
LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝566.1。
实施例30 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
将实施例29 化合物(10mg，0.02mmol)溶解于CH2Cl2(0.2mL)中，然后加入CF3COOH(0.1mL)，室温搅拌2h后，减压浓缩至干，离子交换树脂分离得白色固体的标题化合物6mg，产率96％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.65(1H，d，J＝2.4Hz，3-H)，4.55(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝10.5Hz，6-H)，4.48(1H，dd，J＝2.4Hz，J＝12.0Hz，4-H)，4.39(1H，d，J＝2.1Hz，7-H)，4.28(1H，dt，J＝7.8Hz，J＝17.7Hz，5-H)，3.33(4H，dt，J＝7.2Hz，J＝14.4Hz，CH2)，2.07(3H，s，NAc)，1.17(6H，t，J＝7.2Hz，CH3)。
实施例31 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例22相同的方法，以实施例7的化合物为原料来制备目标化合物；产率93％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.73(1H，d，J＝1.8Hz，3-H)，4.74(1H，d，J＝3.0Hz，7-H)，4.47(1H，dd，J＝2.7Hz，J＝9.0Hz，6-H)，4.23(1H，dt，J＝9.6Hz，J＝18.6Hz，5-H)，4.20(1H，dd，J＝2.1Hz，J＝10.5Hz，4-H)，3.43(4H，m，2CH2)，2.10(3H，s，NAc)，1.23(3H，t，J＝7.2Hz，CH3)，1.15(3H，t，J＝7.2Hz，CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝330.0。
实施例32 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例7 化合物(10mg，0.02mmol)溶于THF(0.5mL)和H2O(4.4μL，0.2mmol，10eq.)中，加入PPh3(7mg，0.02mmol)，室温搅拌48h后，停止反应。减压浓缩后，制备板(CH2Cl2CH3OH＝6/1(v/v))分得标题化合物4mg，产率43％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ6.94(1H，d，J＝8.7Hz，NH)，6.05(1H，d，J＝3.0Hz，3-H)，5.80(1H，d，J＝4.5Hz，7-H)，4.57(1H，dd，J＝4.8Hz，J＝8.4Hz，6-H)，3.97(1H，dt，J＝8.4Hz，J＝16.5Hz，5-H)，3.78(3H，s，CH3)，3.73(2H，m，CH and 4-H)，3.35(3H，m，CH and CH2)，2.19(3H，s，OAc)，1.99(3H，s，NAc)，1.13(6H，t，J＝6.9Hz，2CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+Na]+＝408.3。
实施例33 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-[2’，3’-二叔丁氧羰基胍基]-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
将实施例32 化合物(60mg，0.16mmol)溶于无水甲醇(2mL)中，N2保护下，滴加N，N’-二叔丁氧羰基脒基吡唑(60mg，0.19mmol)的THF(2mL)溶液。室温搅拌48h后，旋尽溶剂，直接制备板(CH2Cl2∶CH3OH＝10∶1(v/v))分离，得白色固体的标题化合物78mg，产率80％。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ11.40(1H，s，NH)，8.52(1H，d，J＝8.3Hz，NH)，6.66(1H，d，J＝8.5Hz，NH)，5.92(1H，d，J＝2.3Hz，3-H)，5.65(1H，d，J＝4.2Hz，7-H)，5.21(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝10.3Hz，4-H)，4.55(1H，dd，J＝4.3Hz，J＝10.7Hz，6-H)，4.25(1H，dt，J＝9.9Hz，J＝18.8Hz，5-H)，3.84(3H，s，CH3)，3.36(4H，m，2CH2)，2.23(3H，s，OAc)，1.91(3H，s，NAc)，1.52(9H，s，3CH3)，1.51(9H，s，3CH3)，1.16(3H，t，J＝6.9Hz，CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝628.1。
实施例34 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯
将实施例33 化合物(4mg，0.03mmol)溶于无水CH2Cl2(0.5mL)中，N2保护下，加入CF3COOH(0.2mL)溶液。室温搅拌5h后，旋尽溶剂，得标题化合物3mg，可直接用于下步反应。
LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝372.2。
实施例35 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
将实施例34 化合物(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯(3mg，0.01mmol)溶于H2O(0.2mL)和1M NaOH的水溶液(2μL)中，室温搅拌15h后，停止反应。阳离子交换树脂分离得标题化合物2mg，产率73％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.79(1H，d，J＝3.3Hz，3-H)，4.80(1H，d，J＝5.7Hz，7-H)，4.61(1H，t，J＝6.0Hz，6-H)，4.43(1H，dd，J＝3.3Hz，J＝6.6Hz，4-H)，4.23(1H，dt，J＝9.0Hz，J＝15.9Hz，5-H)，3.49(4H，m，CH2)，2.11(3H，s，NAc)，1.29(6H，t，J＝7.2Hz，2CH3)；LRMS(ESI)m/z[M+H]+＝372.2。
实施例36 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例22相同的方法，以实施例9化合物为原料来制备标题化合物；产率90％。
1H NMR(400MHz，D2O)δ5.74(1H，d，J＝3.0Hz，3-H)，4.70(1H，d，J＝2.5Hz，7-H)，4.52(1H，t，J＝2.7Hz，J＝10.2Hz，6-H)，4.34(1H，t，J＝9.4Hz，5-H)，4.27(1H，dd，J＝2.2Hz，J＝9.4Hz，4-H)，3.58(4H，m，2CH2)，2.12(3H，s，NAc)，1.97(4H，m，2CH2)；LR-ESI-MS[M+Na]+＝350.1。
实施例37 (2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸
按照与实施例23相同的方法，以实施例36化合物为原料来制备标题化合物；产率80％。
1H NMR(300MHz，D2O)δ5.73(1H，d，J＝3.0Hz，3-H)，4.67(1H，d，J＝4.5Hz，7-H)，4.55(1H，dd，J＝4.5Hz，J＝8.4Hz，6-H)，4.43(1H，dd，J＝3.0Hz，J＝7.5Hz，5-H)，4.237(1H，t，J＝8.1Hz，5-H)，3.69(1H，m，CH)，3.51(3H，m，CH+CH2)，2.06(3H，s，NAc)，1.95(4H，m，2CH2)；HRMS(ESI)[M+H]+＝370.2。
实施例38～41 按照与实施例5相同的方法，将实施例2化合物与不同的胺反应，分别制备实施例38～41化合物。
实施例42～47 按照与实施例31相同的方法，分别由实施例5、38、8、39～41相应地制备实施例42～47化合物。
实施例48～52 按照与实施例23相同的方法，分别由实施例42～46相应地制备实施例48～52化合物。
实施例53～87 按照与实施例12相同的制备方法，相应地制备实施例53～87化合物。
实施例88～111 按照与实施例13相同的方法，相应地制备实施例88～111化合物。
本发明化合物的神经氨酸酶抑制活性测定 参照文献(Bioorg. & Med Chem.Lett 2007，17，1655-1658)方法，测定了本发明的通式(I)化合物对流感病毒H3N2的抑制活性。测定结果如下表
由上表可见，本发明所述的化合物具有对流感病毒的抑制活性，而此类化合物的结构与扎那米韦不同，可用于对扎那米韦耐药的流感病毒的治疗，且化合物极性降低，有利于口服给药。由此，本发明提供了一类高活性的N-乙酰神经氨酸类化合物，该类化合物及其药物组合物可用于抗流感病毒，特别的，可用于对扎那米韦、奥司它韦等其他抗流感药物耐药的流感病毒感染的治疗。
权利要求
1.如下通式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物
其中
R1代表OR5、SR5、NR5R6、N(OR5)R6或N(NR5R6)R6；
R2代表H、C1-20烷基、C1-5烷氧基取代的C1-5烷基、COR5或CONR5R6；
R3代表N3、NR7R8、NHC(＝NR9)NR5R10、N＝PPh3或
R4代表COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6；
R5代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、五氟苯基、芳基、CONR14R15、COOR14、COR14或被一个或多个如下基团取代的C1-10烷基NR14R15、NR14COR15、CO2R14、OR14、C3-8环烷基和芳基；
R6代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、芳基、COR14或被一个或多个如下基团取代的C1-10烷基NR14R14、COR14、C3-8环烷基、CN、N3、OR14和芳基；
或者R5和R6与它们相连的氮原子共同构成环状结构，该环状结构是饱和或非饱和的，并含有一个或多个选自N、O和S中的杂原子，该环状结构非必需地被卤素、C1-10烷基、C1-C10烷氧基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、CF3、CN或NO2取代；
R7和R8各自独立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烃链，该烃链中非必需地含有一个NR11基团，该烃链非必需地被1～4个选自氧代基和C1-6烷基的基团所取代，而该C1-6烷基非必需地被羟基或芳基取代；
R9和R10各自独立地代表H、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、NR14R15、OR14、CN或NO2；
R11和R12各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C1-10烷氧基、COOR5、CONR14R15或芳基；或者非必需地被羟基、氨基、胺基、COOR5或C1-6烷氧基取代的C1-10烷基；
R14和R15各自独立地代表H、C1-6烷基、C3-8环烷基或芳基；
其中，所述芳基是指芳香族的碳环或杂环基团，且非必需地被取代；当所述芳基被取代时，取代基包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、硝基、三氟甲基、氨基、C1-4烷基取代的氨基、苯基和苯甲基；所述芳基被1～3个上述取代基取代。
2.根据权利要求1所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物，其特征在于，其中，
R1代表OR5、NR5R6或N(OR5)R6；
R2代表H、COR5或CONR5R6；
R3代表NR7R8、NHC(＝NR9)NR5R10或
其为α构型；
R4代表COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6；
R5和R6各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基、C2-10炔基或芳基；或者被OR14、C3-8环烷基或芳基取代的C1-10烷基；
或者R5和R6与它们相连的氮原子共同构成环状结构，该环状结构是饱和或非饱和的，并含有一个或多个选自N、O和S中的杂原子，该环状结构非必需地被卤素、C1-10烷基、C1-C10烷氧基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代；
R7和R8各自独立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烃链，该烃链中非必需地含有一个NR11基团，该烃链非必需地被1～4个选自氧代基和C1-6烷基的基团所取代，而该C1-6烷基非必需地被羟基或芳基取代；
R9和R10各自独立地代表H、C1-6烷基、NR14R15、OR14、CN或NO2；
R11和R12各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、COOR5或芳基；或者非必需地被羟基、氨基、胺基、COOR5或C1-6烷氧基取代的C1-10烷基；
R14和R15各自独立地代表H、C1-6烷基、C3-8环烷基或芳基；
所述芳基的定义与权利要求1相同。
3.根据权利要求2所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物，其特征在于，其中，
R1代表NR5R6或N(OR5)R6；
R2代表H或COR5；
R3为α构型；
R3代表NR7R8或NHC(＝NR9)NR5R10；
R4代表COOR5或CON(OR5)R6；
R5和R6各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基；或者R5和R6与它们相连的氮原子共同构成环状结构，该环状结构是饱和或非饱和的，并含有一个或多个选自N、O和S中的杂原子，该环状结构非必需地被C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代；
R7和R8各自独立地代表H、CN、C1-6烷基、C3-8环烷基、C2-6烯基、C2-6炔基或C2-6的烃链，该烃链中非必需地含有一个NR11基团，该烃链非必需地被1或2个选自氧代基和C1-6烷基的基团所取代，而该C1-6烷基非必需地被羟基或芳基取代；所述芳基包括苯基、萘基、吡啶基、咪唑基和噻吩基，且非必需地被取代；当所述芳基被取代时，所述取代基包括C1-4烷基、C1-4烷氧基、硝基、氨基、苯基和苯甲基；并且所述被取代的芳基带有1～3个上述取代基；
R9和R10各自独立地代表H、C1-6烷基、NH2、OH、CN或NO2；
R11和R12各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基或COOR5。
4.根据权利要求3所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物，其特征在于，其中，
R1代表NR5R6；
R2代表H；
R3代表NH2或NHC(＝NH)NH2，其为α构型；
R4代表COOR5；
R5和R6各自独立地代表H、C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基；或者R5和R6与它们相连的氮原子共同构成环状结构，该环状结构是饱和或非饱和的，并含有一个或多个选自N、O和S中的杂原子，该环状结构非必需地被C1-10烷基、C3-8环烷基、C2-10烯基或C2-10炔基取代。
5.根据权利要求1所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物，其特征在于，其选自
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯、
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯、
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-乙酰氧基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸甲酯、
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-异丙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-羟胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环己胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环己基胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-氨基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、和(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-异丙胺胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸。
6.根据权利要求5所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物，其特征在于，其选自
(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二甲胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-氨基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-二乙胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸、和(2R，3R，4S)-3-乙酰胺基-2-[(S)-1’-羟基-2’-环戊胺基-2’-氧乙基]-4-胍基-3，4-二氢吡喃-6-甲酸。
7.权利要求1所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物的制备方法，其特征在于，采用下述方法中的任意一种
(1)当通式(I)化合物中R1为OH，R2不为H，R3为N3，R4为COOR5，且R5不为H时，即通式(Ia)化合物，通过通式(II)化合物氧化裂解来制备；如果需要，随后进行脱保护；通式(II)化合物的R2和R4取代基定义同通式(I)化合物
氧化裂解通过两步完成第一步与高碘酸盐反应；第二步的试剂是亚氯酸盐；
(2)当通式(I)化合物中R1为OR5或SR5时，即通式(Ic)化合物，通过相应的通式(I)化合物中的R1代表OH的通式(Ib)化合物与被R5取代的含氧或含硫化合物通过缩合反应来制备；
(3)当通式(I)化合物中R1为NR5R6、N(OR5)R6或N(NR5R6)R6时，即通式(Id)化合物，通过相应的通式(I)化合物中的R1代表OH的通式(Ib)化合物与-R5R6、-(OR5)R6或-(NR5R6)R6取代的含氮化合物反应来制备；羧基在与胺反应之前被活化；胺化反应在有机溶剂中完成；
(4)当通式(I)化合物中R3为
时，即通式(If)化合物，通过相应的通式(I)化合物中的R3代表N3的通式(Ie)化合物与被R11和R12取代的炔类化合物反应来制备；制备在催化剂催化下进行，催化方法包括亚铜离子催化；
(5)当通式(I)化合物中R3为NH2时，即通式(Ig)化合物，通过相应的通式(I)化合物中的R3代表N3的通式(Ie)化合物通过叠氮基的还原反应来制备；
(6)当通式(I)化合物中R3为NR7R8时，即通式(Ih)化合物，从通式(I)化合物中的R3为NH2的通式(Ig)化合物通过与被R7和R8取代的化合物反应来制备；
(7)当通式(I)化合物中R3为NHC(＝NR14)NR15R16时，即通式(Ii)化合物，从通式(I)化合物中的R3为NR7R8的通式(Ih)化合物通过胍基化反应来制备；当通式(I)化合物中R3为NHC(＝NH)NH2时，即通式(Ik)化合物，通过通式(I)化合物中的R3为NH2的通式(Ig)化合物与脒基吡唑或其盐或衍生物反应或经过通式(I)化合物中的R3为NHCN的中间体式(Ij)化合物来制备；
(8)当通式(I)化合物中R3代表N3，R4为CONR5R6时，即通式(Im)化合物，通过相应的通式(I)化合物中的R3代表N3，R4为COOR5，且R5不为H的通式(Il)化合物与羟胺或其衍生物的碱式盐反应得到；
(9)通式(I)化合物中R3为NR7R8的通式(Ih)化合物或通式(I)化合物中R3为NHC(＝NR14)NR15R16的通式(Ii)化合物从通式(I)化合物中的R3代表N3，R4为CONR5R6的通式(Im)化合物通过与上述方法(5)类似的叠氮基还原方法还原，然后进一步反应来制备；或
(10)通过通式(I)的不同化合物之间的官能团相互转化可以制备通式(I)的其它化合物；其中R2为H的化合物通过不为H的化合物来制备；R7和R8不为H的化合物通过相应的R7和/或R8为H的化合物来制备；R4为COOR5、CONR5R6或CON(OR5)R6的化合物与R4为COOH的化合物相互转化。
8.根据权利要求7所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物的制备方法，其特征在于，在制备通式(Ia)化合物时，氧化裂解的第一步是采用高碘酸盐，在含水有机溶剂中完成；第二步是采用亚氯酸盐，存在有包括碱金属或碱土金属磷酸盐的缓冲剂，在含水有机溶剂中完成。
9.根据权利要求7所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物的制备方法，其特征在于，在制备通式(Id)化合物时，羧基在与胺反应之前进行活化的方法包括转化成五氟苯氧基；胺化反应在醚中完成。
10.根据权利要求7所述的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物的制备方法，其特征在于，在制备通式(Ig)化合物时，所述还原条件为Lindlar催化剂催化，氢气或甲酸提供活性氢。
11.权利要求1～6中的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物在制备神经氨酸酶抑制剂的药物中的用途。
12.权利要求1～6中的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物在制备抑制病毒的药物中的用途。
13.根据权利要求12所述的用途，其特征在于，所述病毒包括流感病毒。
14.权利要求1～6中的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物在制备预防和治疗病毒性疾病及其感染的药物中的用途。
15.一种用于抑制神经氨酸酶的药物组合物，该组合物包含治疗有效量的一种或多种权利要求1～6中的式(I)所示的N-乙酰神经氨酸类化合物或它们的任何前药形式、它们的可药用盐或可药用溶剂化物和一种或多种可药用载体或稀释剂。
全文摘要
本发明公开了如下通式所示的N-乙酰神经氨酸类化合物、其药物组合物及其制备方法和用途。这些化合物可抑制流感病毒表面神经氨酸酶，因而可用于抗流感病毒，特别的，可用于对扎那米韦、奥司它韦等其他抗流感药物耐药的流感病毒感染的治疗。
文档编号A61P31/12GK101787008SQ200910045818
公开日2010年7月28日 申请日期2009年1月23日 优先权日2009年1月23日
发明者赵庆杰, 李剑峰, 沈敬山, 朱维良, 蒋华良, 沈竞康, 卢敬泰, 金汉祚, 南基烨, 成百麟, 申宇镇 申请人:中国科学院上海药物研究所, 韩国分子设计研究所