专利名称：：一种高抗氧化性长链脂肪乳注射液及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及药剂学领域，尤其涉及一种高抗氧化性的脂肪乳注射液及其制备方法。
背景技术：
：长链脂肪乳注射液(C14C24)是一种临床应用非常广泛的提供能量和必需脂肪酸的营养补充剂，以注射用油(大豆油)为油相、辅以磷脂为乳化剂、甘油为等渗调节剂，经适当的乳化技术制备而得。由于植物或动物来源的油通常含有多种非甘油酯杂质，使用含杂质的油制备成脂肪乳注射液在临床应用时可产生发热等不良反应，因此油必须经过精制除去杂质后才可用于制备静注脂肪乳，但随着精制程度的提高，油中所含的天然抗氧化剂的含量则会极大的减少，导致油的抗氧化能力降低。在脂肪乳制备过程中，由于受到氧、光、温度和金属离子等因素的影响，容易发生氧化变质。注射用油氧化的最初产物是过氧化物，其数量以过氧化值表示。过氧化物受热很不稳定，可分解为小分子的复杂化合物如醛、酮、酸等，能够破坏人体细胞膜的正常生理功能，促使疾病的发生和发展，故分解产物的多少，也是衡量注射用油质量的重要指标，它以测定注射用油的甲氧基苯胺值表示。在本领域的常规应用中，例如按照现行的中/长链脂肪乳注射液国家药品标准(如WS1-(X-153)-2004Z)，一般只对注射用油氧化生成的初级产物，即过氧化物进行控制，采用的技术手段是测定过氧化值。专利(CN1376460A)揭示了一种含30%大豆油的脂肪乳注射液，其组方为纯化大豆油270-330克/升，精制卵磷脂11-13克/升，无水甘油15-18克/升，氢氧化钠适量，其余为注射用水。该专利并未涉及本发明的研究和应用范围。Anne-MetteHaahr等(Eur.J.LipidSci.Technol.2008,110(10):940_961)考察了食品10%鱼油乳剂中依地酸二钠(EDTA-Na2，用量为0.019%，不在本专利的保护范围之内)降低乳剂中的脂质氧化的效果，但并未揭示了EDTA-Na2对乳粒稳定性的影响，当EDTA-Na2用量过大，会破坏乳粒表面的双电层，导致乳粒变大，最终分层。此外，对于静注脂肪乳来说，其用量也明显不符合SFDA的安全性要求。
发明内容基于
背景技术：
中所介绍的注射用油质量控制情况，本发明对此进行了深入研究，并从中发现在现有技术采用的注射用油检测方式下，经常出现样品的过氧化值均为零，而甲氧基苯胺值却有较大差异的情况。因此，注射用油的质量不能得到保证。实际上甲氧基苯胺值是衡量注射用油氧化更灵敏的指标。此外，发明人意外地发现，通过在处方中加入一定量的金属离子螯合剂可以极大地降低脂肪乳注射液的氧化，这不光反映在对过氧化值的控制上，由于金属离子螯合剂的加入，注射液的甲氧苯胺值也可以被显著降低。本发明因此相应提出一种注射用油的制剂处方，该处方通过加入适量的金属离子螯合剂以降低脂肪乳的氧化。本发明第一方面的目的在于提供一种具有强抗氧化能力的长链脂肪乳注射液，该脂肪乳注射液的甲氧基苯胺值明显低于国内市售产品。所得到的脂肪乳注射液稳定性良好，易于制备，有利于工业化生产。在本发明中，以甲氧基苯胺值为指标，对长链脂肪乳注射液中过氧化物的产生和降解的机理进行了详细的研究，发明人发现通过加入适当的金属离子螯合剂，可以极大地降低长链脂肪乳注射液的氧化。本发明提供的高抗氧化性长链脂肪乳注射液含下列成分注射用大豆油，乳化剂，和等渗调节剂，以及0.00050.OlgWt%的金属离子螯合剂。其中金属离子螯合剂用于降低长链脂肪乳注射液的氧化。所述乳化剂选自大豆磷脂或蛋黄卵磷脂等中的一种或其以任何比例混合的混合物。同样地，上述列举仅仅用于举例而非用于限制，只要选择的乳化剂符合生物相容性，可以在人体被新陈代谢即可，这对本领域技术人员来说是比较容易做到的。所述等渗调节剂选自甘油、果糖、木糖醇、山梨醇或葡萄糖等中的一种或其以任何比例混合的混合物，优选甘油。上述列举仅仅用于举例而非用于限制，只要选择的等渗调节剂符合临床用药的要求，且具有生物相容性，可以在人体被新陈代谢即可，这对本领域技术人员来说是比较容易做到的。所述金属离子螯合剂选自依地酸、依地酸二钠、依地酸钙钠等依地酸盐类中的一种或其以任何比例混合的混合物，优选依地酸钙钠、依地酸二钠。上述列举仅仅用于举例而非用于限制，只要选择的金属粒子螯合剂符合临床用药的要求，且具有生物相容性，可以在人体被新陈代谢即可，这个对本领域技术人员来说是比较容易做到的。除此之外，本发明中，如有必要还可添加适量的其它稳定剂，这个对本领域技术人员来说是比较容易做到的，主要包括油酸、油酸钠及其它油酸盐等中的一种或其以任何比例混合的混合物，优选油酸或油酸钠，用量为0.0010.03%。除此之外，本发明中，如果有必要还可添加适量的维生素E或其衍生物作为抗氧齐U，这个对本领域技术人员来说是比较容易做到的，用量为0.010.05wt%。一般地，作为示范性的例子而不是作为限制，本发明所述高抗氧化性长链脂肪乳注射液的成分为注射用大豆油1030wt%乳化剂0.53wt%等渗调节剂15wt%金属离子螯合剂0.00050.Olgwt%视需要添加适量稳定剂和抗氧剂；余量为注射用水。本发明的另一方面目的在于提供一种制备长链脂肪乳注射液的方法，该方法能明显改善制备过程中脂肪乳的氧化，并形成稳定的乳粒，平均粒径0.10.5μm。本发明长链脂肪乳注射液的制备方法是1、用以下方法制备油相在惰性气体环境下，称取注射用大豆油，加热至5070°C，在转速不低于1500转/分钟高速搅拌下，将乳化剂加入注射用大豆油中，搅拌均勻作为油相；2、用以下方法制备水相在惰性气体环境下，将等渗调节剂和金属离子螯合剂加入适量的注射用水中混勻后过滤成水相；3、用以下方法制备注射剂在惰性气体环境下，在不低于1500转/分钟的高速搅拌下，将油相和水相混合并继续搅拌成初乳，调节初乳pH至9.010.0，加注射用水至1000ml，混勻后经高压勻质机勻化至乳粒合格，过滤后，灌封、通氮、熔封，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得。在本发明的制备方法中，搅拌的时间根据需要进行控制，搅拌的速度在不低于1500转/分钟下进行选择，这种选择可根据需要而进行，经高压勻质机勻化时，勻化条件和时间是本领域技术人员所熟知的，只要勻化后的乳粒不得有大于5um的粒子，1um以上的粒子不多于3%。在本发明的制备方法中，惰性气体的选择一般为氮气。在本发明的制备方法中，加热的温度也是本领域技术人员熟知的，一般为5070°C，优选60°C。鉴于临床上脂肪乳注射液主要用于为患者提供必需脂肪酸(必需脂肪酸是指人体本身不能合成，必须从外界摄取的脂肪酸)和能量。在本发明的技术方案中优先选取注射用大豆油为长链脂肪乳注射液油相，因为大豆油可为人体提供必需脂肪酸亚油酸(《_6脂肪酸)和a-亚麻酸(《_3脂肪酸)，长链(注射用大豆油)脂肪乳注射液在1961年作为第一个营养型脂肪乳在欧洲上市，至今已有40多年临床应用历史，被证明是非常有效和安全的营养补充剂。20世纪80年代，长链(注射用大豆油)脂肪乳注射液进入国内市场，是目前国内应用最广泛的营养型脂肪乳注射液。本发明的优点在于，由于所制备的长链脂肪乳注射液加入了合适的金属离子螯合剂，可极大的降低长链脂肪乳注射液在制备和灭菌中氧化程度，减少了对人体的潜在危害。同时，由于金属离子用量合适，既减少了长链脂肪乳注射液的氧化，又保证了乳粒的稳定性，其安全性均符合相关的SFDA的规定，有利于产品的进一步开发。具体实施例方式下面结合实施例对本发明作进一步阐述，但这些实施例不对本发明构成任何限制。实施例1在氮气保护下，称取注射用大豆油100g，加热至60°C，在高速搅拌下，加入蛋黄卵磷脂12g，搅拌均勻作为油相，将依地酸钙钠0.05g、注射用甘油25g加入600ml注射用水中，混勻后用0.45ym的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，用NaOH调节pH值为9.010.0，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1Pm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。实施例2在氮气保护下，称取注射用大豆油200g、油酸0.2g，加热至60°C，在高速搅拌下，加入蛋黄卵磷脂12g，搅拌均勻作为油相，将依地酸钙钠0.05g、注射用甘油25g加入600ml注射用水中，混勻后用0.45μm的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，用NaOH调节pH值为9.010.0，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1μm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。实施例3在氮气保护下，称取注射用大豆油300g、油酸0.2g加热至60°C，在高速搅拌下，力口入蛋黄卵磷脂12g，搅拌均勻作为油相，将依地酸钙钠0.lg、注射用甘油25g加入600ml注射用水中，混勻后用0.45μm的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，用NaOH调节pH值为9.010.0，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1μm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。实施例4在氮气保护下，称取注射用大豆油100g、油酸0.2g，加热至60°C，在高速搅拌下，加入蛋黄卵磷脂18g，搅拌均勻作为油相，将依地酸二钠0.05g、注射用甘油22.5g加入600ml注射用水中，混勻后用0.45μm的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，用NaOH调节pH值为9.010.0，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1μm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。实施例5在氮气保护下，称取注射用大豆油200g、维生素E0.2g，加热至60°C，在高速搅拌下，加入蛋黄卵磷脂30g，搅拌均勻作为油相，将依地酸0.05g、油酸钠0.3g、注射用甘油22.5g加入600ml注射用水中，用NaOH调节pH值为9.010.0，溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1μm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。实施例6在氮气保护下，称取注射用大豆油200g，加热至60°C，在高速搅拌下，加入蛋黄卵磷脂30g，搅拌均勻作为油相，将依地酸0.05g、油酸钠0.3g、注射用甘油25g加入600ml注射用水中，用NaOH调节pH值为9.010.0，溶解后用0.45μm的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1μm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。比较例7在氮气保护下，称取注射用大豆油200g，加热至60°C，在高速搅拌下，加入蛋黄卵磷脂12g，搅拌均勻作为油相，将依地酸钙钠0.002g、注射用甘油25g加入600ml注射用水中，混勻后用0.45μm的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，用NaOH调节pH值为9.010.0，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1μm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。比较例8在氮气保护下，称取注射用大豆油200g，加热至60°C，在高速搅拌下，加入蛋黄卵磷脂12g，搅拌均勻作为油相，将依地酸钙钠0.5g、注射用甘油25g加入600ml注射用水中，混勻后用0.45ym的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，用NaOH调节pH值为9.010.0，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1Pm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。比较例9在氮气保护下，称取注射用大豆油100g、油酸0.2g，加热至60°C，在高速搅拌下，加入蛋黄卵磷脂12g，搅拌均勻作为油相，将依地酸二钠0.5g、注射用甘油25g加入600ml注射用水中，混勻后用0.45ym的滤膜过滤作为水相。在高速搅拌下将油相加入水相中制成初乳，用NaOH调节pH值为9.010.0，加注射用水至1000ml，经高压勻质机反复勻质，检查乳粒大小，所有粒子的粒径均小于1Pm。乳液过滤后通氮灌装、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得该大豆油的高抗氧化性脂肪乳注射液。实验例10脂肪乳注射液中甲氧基苯胺值的测定方法如下甲氧基苯胺值精密量取本品10ml，置250ml圆底烧瓶中，加入无水乙醇20ml，于60°C水浴真空旋转蒸发除去水份。自“加入无水乙醇20ml”起，依法重复操作三次除尽水分。残渣加20%异丙醇的异辛烷溶液溶解并移至25ml量瓶中，加上述溶液稀释至刻度，摇勻，滤过，取续滤液作为供试品溶液。取供试品溶液，照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版二部附录IVA)，在350nm的波长处，以20%异丙醇的异辛烷溶液作空白，测得的吸光度为Ao。精密量取供试品溶液5ml至具塞试管中，再精密加入0.25%4-甲氧基苯胺的冰醋酸溶液(临用新配)1ml，加塞，振摇，避光放置1030分钟(不超过30分钟)；另精密量取20%异丙醇的异辛烷溶液5ml代替供试品溶液，同法操作，制成试剂空白溶液。以试剂空白溶液作空白，在350nm波长处测得的吸光度为A。按下式计算。VxB式中V为供试品的取样量，ml；B为供试品中油的标示量，g/ml；1.2为加入4-甲氧基苯胺的冰醋酸溶液后的溶液稀释因子。表1脂肪乳注射液稳定性试验-加速试验(40°C士2°C放置)结果样品_时间(月)pH值平均粒径(nm)曱氧苯胺值实施例107.81249.51.0517.64254.61.088<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>从表1中加速试验(中国药典2005年版二部附录XIXC)结果可以看出，通过加入本发明要求范围的金属离子螯合剂后，在40°C加速6个月内，甲氧基苯胺值均低于2.2的限度；而加入的金属离子螯合剂用量不在本发明所要求的范围内，当低于此范围时(比较例7)，金属离子螯合剂不足够产生抗氧化的效果；而高于此范围时(比较例8、9)，乳粒在加速条件下不能达到足够的稳定性。权利要求一种高抗氧化性长链脂肪乳注射液，所述注射液包含下列成分注射用大豆油10～30wt％乳化剂0.5～3wt％等渗调节剂1～5wt％金属离子螯合剂0.0005～0.01wt％。2.根据权利要求1所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液，其特征在于，其包含下列成注射用大豆油1030wt%乳化剂0.53wt%等渗调节剂1~5wt%金属离子螯合剂0.00050.01wt%稳定剂0.0010.03wt%。3.根据权利要求1所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液，其特征在于，其包含下列成注射用大豆油1030wt%乳化剂0.53wt%等渗调节剂1~5wt%金属离子螯合剂0.00050.01wt%稳定剂0.0010.03wt%抗氧剂0.010.05wt%。4.根据权利要求1至3中任意一项所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液，其特征在于，所说的乳化剂选自大豆磷脂或蛋黄卵磷脂中的一种或一种以上的混合物。5.根据权利要求1至3中任意一项所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液，其特征在于，所说的等渗调节剂选自一种或一种以上下列物质甘油、果糖、木糖醇、山梨醇或葡萄糖。6.根据权利要求1至3中任意一项所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液，其特征在于，所说的金属离子螯合剂选自依地酸、依地酸二钠、依地酸钙钠中的一种或一种以上以任何比例混合的混合物。7.根据权利要求6所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液，其特征在于，所述金属离子螯合剂选自依地酸二钠和/或依地酸钙钠。8.根据权利要求1至3中任意一项所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液，其特征在于，所述稳定剂选自油酸和/或油酸钠。9.根据权利要求1至3中任意一项所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液，其特征在于，所述抗氧剂选自维生素E或其衍生物。10.一种制备权利要求1至9任一项所述的高抗氧化性长链脂肪乳注射液的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤1)用以下方法制备油相在惰性气体环境下，称取注射用大豆油，加热至5070°C，在转速不低于1500转/分钟高速搅拌下，将乳化剂加入注射用大豆油中，搅拌均勻作为油相；2)用以下方法制备水相在惰性气体环境下，将等渗调节剂和金属离子螯合剂加入适量的注射用水中混勻后过滤成水相；3)用以下方法制备注射剂在惰性气体环境下，在不低于1500转/分钟的高速搅拌下，将油相和水相混合并继续搅拌成初乳，调节初乳pH至9.010.0，加注射用水至1000ml，混勻后经高压勻质机勻化至乳粒合格，过滤后，灌封、通氮、加塞、轧盖，置旋转式蒸汽灭菌器中灭菌，冷却后即得所述注射液。11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，勻化后的大多数乳粒的粒径为0.10.5μm，大于1μm的乳粒不超过3%，并不得检出大于5μm的乳粒。全文摘要一种高抗氧化性长链脂肪乳注射液(C14～C24)及其制备方法。其脂肪乳注射液由活性成份注射用大豆油、乳化剂、等渗调节剂、金属离子螯合剂及注射用水所组成。制备方法是在惰性气体环境下，向加热的注射用大豆油中加入乳化剂、辅助乳化剂，高速搅拌均匀作为油相；将等渗调节剂、金属离子螯合剂加入适量的注射用水中混匀后过滤成水相；在高速搅拌下，将油相和水相混合并继续高速搅拌成初乳，并调节初乳的pH至9.0～10.0，加注射用水至1000ml，混匀后经高压均质机匀化至乳粒合格，过滤后，灌装、通氮、加塞、轧盖、灭菌、冷却后即得长链脂肪乳注射液。文档编号A61P3/02GK101797227SQ20091004606公开日2010年8月11日申请日期2009年2月10日优先权日2009年2月10日发明者何军,孙润梅,张兵,谢保源,陈允发,陈辰申请人:上海医药工业研究院