专利名称：一种中药组合物中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法
技术领域：
本发明涉及到一种中药组合物中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法，特别地，涉 及一种中药组合物中齐墩果酸和熊果酸含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定的 方法。
背景技术：
第ZL200410012347. 4号专利申请中公开了 一种中药组合物，该中药组合物由 如下重量份的原料药制成黄芪120-360、女贞子100-300、人参30-95、灵芝30-95、莪 术65-195、白术30-90、半枝莲65-195、绞股蓝120-360、茯苓30-95、鸡内金15-45、蛇莓 65-195、白英65-195、茵陈65-195、徐长卿65-195、土鳖虫10-30、白花蛇舌草65-195。具有 健脾益肾、化瘀解毒的功效，适用于不宜手术的脾肾两虚、瘀毒内阻型原发性肝癌的辅助治 疗。该中药组合物中含有女贞子，女贞子中含有齐墩果酸和熊果酸，为有效控制其质量，需 要建立该中药组合物中齐墩果酸和熊果酸含量的测定方法。齐墩果酸和熊果酸含量的测定往往采用高效液相色谱法，如相延英等的论文[相 延英，杨光.常用中药中齐墩果酸和熊果酸的含量测定.[J]中国医院药学杂志.2004， 24(5)316-318]中公开了一种枇杷叶中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法，该法色谱条件 为0DS C18色谱柱，甲醇-水-冰乙酸-三乙胺(90 10 0.03 0. 06)为流动相；检 测波长为210nm ；流速0. 6mL/min ；石敏娟等的论文[石敏娟，朱卫丰，刘耀明.苦丁茶中的 齐墩果酸和熊果酸的含量测定.[J]中医药学报.2007，35 (2) 45-46]中公开了苦丁茶中齐 墩果酸和熊果酸的含量测定方法，该法色谱条件为色谱柱为HypersilODS-2 C18(5um, 250mmX4. 6mm)色谱柱；柱温30°C;流动相甲醇_0. 磷酸水溶液(85 15)；检测波长 210nm ；流速0. 6ml/min。由于中药组合物成份复杂，因此，不同中药组合物难以采用相同 的方法测定，不同的中药组合物需要根据其组合物特点建立其特有的检测方法，且需要严 格的方法学研究，才可以用于控制该中药组合物的含量测定。
发明内容
本发明目的是提供一种中药组合物中齐墩果酸和熊果酸含量的测定方法。所述中药组合物是由如下重量份的原料药制成黄芪120-360 女贞子 100-300 人参 30-95莪术65-195 白术 30-90半枝莲 65-195茯等30-95 鸡内金 15-45 蛇莓 65-195茵陈65-195 徐长卿 65-195 土鳖虫 10-30本发明含量测定方法为高效液相色谱_蒸发光散射检测法，测定条件如下色谱条件和检测条件色谱柱为反相色谱柱，流动相由室温下60-80体积份的甲 醇、10-30体积份的乙腈和5-15体积份的0. 5%冰乙酸组成，流速为0. 15-1. OOml/min，蒸发 光散射检测器的漂移管温度为75-85°C ；
灵芝30-95 绞股蓝120-360 白英65-195 白花蛇舌草65-195 ；
供试品溶液的制备取所述中药组合物制剂或制剂内容物，研细，取0．5一0．7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇l0一50ml，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处理20分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸对照品和熊果酸对照品适量，加无水乙醇制成每lml约含齐墩果酸0．05一0．15mg和熊果酸0．03一0．09mg的溶液，即得。
优选地，本发明含量测定方法中色谱条件和检测条件为
色谱柱为规格为4．6mm×250mm1填料粒径为5 u m的C18柱，流动相由室温下70体积份的甲醇120体积份的乙腈和l0体积份的0．5％的冰乙酸混合而成，流速为0．35ml／min，理论塔板数按齐墩果酸峰计算不得低于10000；蒸发光散射检测器的漂移管温度为80℃。
优选地，本发明含量测定方法中供试品溶液的制备方法为
取所述中药组合物制剂或制剂内容物，研细，取0．6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处理20分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
优选地，本发明含量测定方法中对照品溶液的制备方法为
精密称取齐墩果酸对照品和熊果酸对照品适量，加无水乙醇制成每lml约含齐墩果酸0．10mg和熊果酸0．06mg的溶液，即得。
优选地，本发明含量测定方法中，所述中药组合物原料药的重量份比例为
黄芪120女贞子300人参30灵芝95莪术65白术90
半枝莲65绞股蓝360茯苓30鸡内金45蛇莓65
白英195茵陈65徐长卿195土鳖虫l0白花蛇舌草195
或者
黄芪360女贞子l00人参95灵芝30莪术195 白术30
半枝莲195 绞股蓝120茯苓95鸡内金15蛇莓195
白英65茵陈195徐长卿65土鳖虫30白花蛇舌草65
或者
黄芪250女贞子200人参65灵芝65莪术132 白术64
半枝莲128 绞股蓝256茯苓65鸡内金30蛇莓128
白英128茵陈128徐长卿128白花蛇舌草128土鳖虫20。
本发明含量测定方法中，所述中药组合物的活性成分是由以下步骤制成的
(1)1按照原料药重量比例称取中药材，淨选；
(2)1女贞子1人参加6一l0倍量50一90％乙醇提取卜3次，每次卜4小时，合并提取液，过滤，滤液回收乙醇至无醇味，药渣备用；
(3)1莪术1白术1徐长卿加4—8倍量水提取挥发油，收集挥发油，另器收集，残渣及水溶液备用；
(4)、土鳖虫、鸡内金、茯苓粉碎成细粉；(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(1)中所 得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(2)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣及水溶液 合并，加7-10倍量水，加热煎煮1-3次，每次1-3小时，合并煎煮液，加入步骤(1)中所得人 参、女贞子醇提液，浓缩成清膏，干燥，粉碎，备用；步骤⑷所得粉碎粉、步骤(3)所得挥发油与步骤(5)所得的干膏粉共同构成该 中药组合物的活性成分。本发明含量测定方法中，适用于所述中药组合物的任何口服或非口服的固体制 剂，所述中药组合物制剂剂型优选为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或丸剂。本发明中药组合物中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法，适用于使用任何方法制 备成的上述剂型固体制剂。优选为由如下方法制成的胶囊剂(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；(2)、人参、女贞子，加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小 时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，人参、女贞子残渣备用；(3)、莪术、白术、徐长卿，合并提取挥发油，提油时间不少于8小时，挥发油另器收 集，残渣及水溶液备用；(4)、土鳖虫、鸡内金两味动物药，水洗，60°C烘干，与茯苓合并，粉碎成100目粉， 灭菌后备用；(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(2)中所 得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(3)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣及水溶液 合并，加9倍量水，加热煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，加入步骤(2)中所得人参、女贞 子醇提液，浓缩成相对密度1. 20-1. 25的清膏，干燥，粉碎，备用；将步骤(5)所得干膏粉加入适当药学上可接受的辅料制粒；(6)、将步骤(3)中所得挥发油喷入步聚(4)中所得茯苓、土鳖虫、鸡内金的细粉 中，混勻，与步骤(5)中中所得的颗粒混勻，密闭半小时，装胶囊即得。本发明方法测定齐墩果酸和熊果酸的含量从线性关系，溶液稳定性，重现性试验， 回收试验和空白干扰方面评价该方法的可行性，评价方法如下1、仪器与试药高效液相色谱仪(Waters) ；Alltech-500型蒸发光散射检测器；齐墩果酸对照品 和熊果酸对照品(含量测定用，购自中国药品生物制品检定所)；本发明药物(石家庄以岭 药业股份有限公司提供)；甲醇、乙腈均为色谱纯，水为双蒸馏水，其它试剂均为分析纯。2、线性关系考察精密吸取齐墩果酸对照品溶液2、5、10、20iU，注入高效液相色谱仪中，进行测定。 以进样量的自然对数为横坐标，峰面积积分值的自然对数为纵坐标，绘制标准曲线，进行线 性回归，计算相关系数，相关系数应该大于0. 99。精密吸取熊果酸对照品溶液2、5、10、20iU，注入高效液相色谱仪中，进行测定。以 进样量的自然对数为横坐标，峰面积积分值的自然对数为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性 回归，计算相关系数，相关系数应该大于0. 99。
3、溶液稳定性试验精密吸取同一供试品溶液，每隔一定时间进样，测定峰面积，结果在测定的24小 时内，计算RSD值，齐墩果酸峰面积RSD值和熊果酸峰面积RSD值为均应小于5%。4、重复性试验取同一批样品，分别取高、中、低三个样品量，每个样品量3份，按供试品溶液的制 备方法，分别进行提取，制备，测定结果计算齐墩果酸的RSD和熊果酸的RSD均应小于3%。5、回收率试验采用加样回收实验，取同一批该中药组合物9份，分别加入低、中、高三个浓度的 齐墩果酸对照品和熊果酸对照品溶液，按供试品溶液的制备方法，进行提取，制备，测定，计 算回收率。计算齐墩果酸和熊果酸的平均回收率和RSD，RSD值应小于3%。6、空白试验按本发明中中药物组合物的制备方法制成不含女贞子的模拟制剂，按供试品溶液 的制备方法制成空白对照品溶液，按含量测定方法进行测定，结果表明其它组分对测定无 干扰。为更好的理解本发明中药组合物中齐墩果酸和熊果酸含量测定方法的技术方案， 下面通过以下实施例的实施，不对本发明方法构成任何限制。
具体实施例方式实施例1为了便于本发明方法的实施，将该中药组合物制备为胶囊剂处方黄芪120g 女贞子300g人参30g 灵芝95g 莪术65g 白术90g半枝莲65g 绞股蓝360g茯苓30g 鸡内金45g蛇莓65g白英195g 茵陈65g 徐长卿195g 土鳖虫10g 白花蛇舌草195g制备方法(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；(2)、人参、女贞子，加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小 时，合并提取液，回收乙醇至无醇味，人参、女贞子残渣备用；(3)、莪术、白术、徐长卿，合并提取挥发油，提油时间不少于8小时，挥发油另器收 集，残渣及水溶液备用；(4)、土鳖虫、鸡内金两味动物药，水洗，60°C烘干，与茯苓合并，粉碎成100目粉， 灭菌后备用；(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(2)中所 得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(3)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣及水溶液 合并，加9倍量水，加热煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，加入步骤(2)中所得人参、女贞 子醇提液，浓缩成相对密度1. 20-1. 25的清膏，干燥，粉碎，备用；将步骤(5)所得干膏粉加入适当药学上可接受的辅料制粒；(6)、将步骤(3)中所得挥发油喷入步聚(4)中所得茯苓、土鳖虫、鸡内金的细粉 中，混勻，与步骤(5)中中所得的颗粒混勻，密闭半小时，装胶囊即得。
色谱条件和检测条件色谱柱为规格为4. 6mmX250mm、填料粒径为5iim的C18 柱，流动相由室温下70体积份的甲醇、20体积份的乙腈和10体积份的0. 5%的冰乙酸混合 而成，流速为0. 35ml/min，理论板数按齐墩果酸峰计算不得低于10000 ；蒸发光散射检测器 的漂移管温度为80°C。供试品溶液的制备方法取所述中药组合物制剂或制剂内容物，研细，取0. 6g，精 密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处理20分 钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备方法精密称取齐墩果酸对照品和熊果酸对照品适量，加无水 乙醇制成每1ml约含齐墩果酸0. 10mg和熊果酸0. 06mg的溶液，即得。评价结果表1评价结果表 实施例2为了便于本发明方法的实施，将该中药组合物制备为片剂处方黄芪360g 女贞子100g人参95g 灵芝30g 莪术195g 白术30g半枝莲195g 绞股蓝120g茯苓95g 鸡内金15g蛇莓195g白英65g 茵陈195g 徐长卿65g 土鳖虫30g 白花蛇舌草65g制备方法(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；(2)、女贞子、人参加7倍量50%乙醇提取2次，每次2小时，合并提取液，过滤，滤
液回收乙醇至无醇味，药渣备用；(3)、莪术、白术、徐长卿加5倍量水提取挥发油，收集挥发油，另器收集，残渣及水 溶液备用；(4)、土鳖虫、鸡内金、茯苓粉碎成细粉；(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(1)中所 得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(2)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣及水溶液 合并，加7倍量水，加热煎煮2次，每次1小时，合并煎煮液，加入步骤(1)中所得人参、女贞 子醇提液，浓缩成清膏，干燥，粉碎，备用；(6)、按常规制剂方法制成片剂。色谱条件和检测条件色谱柱为规格为4. 6mmX250mm、填料粒径为5iim的C18 柱，流动相由室温下60体积份的甲醇、10体积份的乙腈和5体积份的0. 5%的冰乙酸混合 而成，流速为0. 15ml/min，理论板数按齐墩果酸峰计算不得低于10000 ；蒸发光散射检测器 的漂移管温度为75°C。供试品溶液的制备方法取所述中药组合物制剂或制剂内容物，研细，取0. 5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10ml，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处理20分 钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备方法精密称取齐墩果酸对照品和熊果酸对照品适量，加无水 乙醇制成每1ml约含齐墩果酸0. 05mg和熊果酸0. 03mg的溶液，即得。评价结果表1评价结果表 实施例3为了便于本发明方法的实施，将该中药组合物制备为丸剂处方黄芪250g 女贞子200g 人参65g 灵芝65g 64g半枝莲128g绞股蓝256g茯苓65g 鸡内金30g白英128g 茵陈128g 徐长卿128g白花蛇舌草128g制备方法(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；(2)、女贞子、人参加8倍量70%乙醇提取3次，每次3小时，合并提取液，过滤，滤 液回收乙醇至无醇味，药渣备用；(3)、莪术、白术、徐长卿加6倍量水提取挥发油，收集挥发油，另器收集，残渣及水 溶液备用；(4)、土鳖虫、鸡内金、茯苓粉碎成细粉；(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(1)中所 得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(2)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣及水溶液 合并，加8倍量水，加热煎煮2次，每次3小时，合并煎煮液，加入步骤(1)中所得人参、女贞 子醇提液，浓缩成清膏，干燥，粉碎，备用；(6)、按常规制剂方法制成丸剂。色谱条件和检测条件色谱柱为规格为4. 6mmX250mm、填料粒径为5iim的C18 柱，流动相由室温下80体积份的甲醇、10体积份的乙腈和15体积份的0. 5%的冰乙酸混合 而成，流速为0. 45ml/min，理论板数按齐墩果酸峰计算不得低于10000 ；蒸发光散射检测器 的漂移管温度为79°C。供试品溶液的制备方法取所述中药组合物制剂或制剂内容物，研细，取0.6g，精 密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇35ml，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处理20分 钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备方法精密称取齐墩果酸对照品和熊果酸对照品适量，加无水 乙醇制成每1ml约含齐墩果酸0. 10mg和熊果酸0. 05mg的溶液，即得。
9
莪术132g 白术
蛇莓128g 土鳖虫20g
评价结果表1评价结果表 实施例4为了便于本发明方法的实施，将该中药组合物制备为散剂处方黄芪250g 女贞子200g 人参65g 灵芝65g 64g半枝莲128g绞股蓝256g茯苓65g 鸡内金30g白英128g 茵陈128g 徐长卿128g白花蛇舌草128g制备方法(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；(2)、女贞子、人参加9倍量80%乙醇提取3次，每次4小时，合并提取液，过滤，滤 液回收乙醇至无醇味，药渣备用；(3)、莪术、白术、徐长卿加8倍量水提取挥发油，收集挥发油，另器收集，残渣及水 溶液备用；(4)、土鳖虫、鸡内金、茯苓粉碎成细粉；(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(1)中所 得人参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(2)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣及水溶液 合并，加9倍量水，加热煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，加入步骤(1)中所得人参、女贞 子醇提液，浓缩成清膏，干燥，粉碎，备用；(6)、按常规制剂方法制成散剂。色谱条件和检测条件色谱柱为规格为4. 6mmX250mm、填料粒径为5iim的C18 柱，流动相由室温下70体积份的甲醇、20体积份的乙腈和10体积份的0. 5%的冰乙酸混合 而成，流速为0. 75ml/min，理论板数按齐墩果酸峰计算不得低于10000 ；蒸发光散射检测器 的漂移管温度为85°C。供试品溶液的制备方法取所述中药组合物制剂或制剂内容物，研细，取0. 7g，精 密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处理20分 钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。对照品溶液的制备方法精密称取齐墩果酸对照品和熊果酸对照品适量，加无水 乙醇制成每1ml约含齐墩果酸0. 15mg和熊果酸0. 08mg的溶液，即得。评价结果表1评价结果表
莪术132g 白术
蛇莓128g 土鳖虫20g
权利要求
一种中药组合物中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法，该中药组合物由如下重量份的原料药制成黄芪120-360女贞子100-300 人参30-95 灵芝30-95莪术65-195 白术30-90 半枝莲65-195 绞股蓝120-360茯苓30-95 鸡内金15-45 蛇莓65-195白英65-195茵陈65-195 徐长卿65-195土鳖虫10-30 白花蛇舌草65-195；其特征在于该方法采用高效液相色谱-蒸发光散射检测外标法测定，测定条件如下色谱条件和检测条件色谱柱为反相色谱柱，流动相由室温下60-80体积份的甲醇、10-30体积份的乙腈和5-15体积份的0.5％冰乙酸组成，流速为0.15-1.00ml/min，蒸发光散射检测器的漂移管温度为75-85℃；供试品溶液的制备取所述中药组合物制剂或制剂内容物，研细，取0.5-0.7g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10-50ml，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处20分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液作为供试品溶液；对照品溶液的制备精密称取齐墩果酸对照品和熊果酸对照品适量，加无水乙醇制成每1ml约含齐墩果酸0.05-0.15mg和熊果酸0.03-0.09mg的溶液，即得。
2.如权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，色谱条件和检测条件为色谱柱为规格为4. 6mmX 250mm、填料粒径为5 y m的C18柱，流动相由室温下70体积份 的甲醇、20体积份的乙腈和10体积份的0. 5%的冰乙酸混合而成，流速为0. 35ml/min,理论 塔板数按齐墩果酸峰计算不得低于10000 ；蒸发光散射检测器的漂移管温度为80°C。
3.如权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于供试品溶液的制备方法为取所述 中药组合物制剂或制剂内容物，研细，取0. 6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25ml，密塞，称定重量，浸渍过夜，超声处理20分钟，放冷，称定重量，用甲醇补足减失的重 量，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
4.如权利要求1所述的马钱苷的含量测定方法，其特征在于对照品溶液的制备方法 为精密称取齐墩果酸对照品和熊果酸对照品适量，加无水乙醇制成每lml约含齐墩果酸 0. 10mg和熊果酸0. 06mg的溶液，即得。
5.如权利要求1-4任一项所述的含量测定方法，其特征在于所述中药组合物有如下重 量份的原料药制成黄芪120 女贞子300 人参30灵芝95莪术65 白术90半枝莲65 绞股蓝360 茯苓30鸡内金45蛇莓65白英195 茵陈65徐长卿195 土鳖虫10白花蛇舌草195。
6.如权利要求1-4任一项所述的含量测定方法，其特征在于所述中药组合物由如下重 量份的原料药制成黄芪360 女贞子100 人参95灵芝30莪术195 白术30半枝莲195绞股蓝120 茯苓95鸡内金15蛇莓195白英65 茵陈195 徐长卿65 土鳖虫30白花蛇舌草65。
7.如权利要求1-4任一项所述的含量测定方法，其特征在于所述中药组合物由如下重 量份的原料药制成黄芪250 女贞子200 人参65灵芝65莪术132 白术64半枝莲128绞股蓝256 茯苓65鸡内金30蛇莓128白英128 茵陈128 徐长卿128 白花蛇舌草128 土鳖虫20。
8.根据权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于所述中药组合物的活性成分由以 下步骤制成(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；(2)、女贞子、人参加6-10倍量50-90%乙醇提取1-3次，每次1-4小时，合并提取液，过 滤，滤液回收乙醇至无醇味，药渣备用；(3)、莪术、白术、徐长卿加4-8倍量水提取挥发油，收集挥发油，另器收集，残渣及水溶 液备用；(4)、土鳖虫、鸡内金、茯苓粉碎成细粉；(5)、黄苗、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤⑴中所得人 参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(2)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣及水溶液合并， 加7-10倍量水，加热煎煮1-3次，每次1-3小时，合并煎煮液，加入步骤(1)中所得人参、女 贞子醇提液，浓缩成清膏，干燥，粉碎，备用；步骤(4)所得粉碎粉、步骤(3)所得挥发油与步骤(5)所得的干膏粉共同构成该中药 组合物的活性成分。
9.如权利要求1-4任一项所述的含量测定方法，其特征在于所述中药组合物制剂剂型 为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂或丸剂。
10.如权利要求9所述的含量测定方法，其特征在于所述中药组合物胶囊剂由以下步 骤制成(1)、按照原料药重量比例称取中药材，净选；(2)、人参、女贞子，加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合 并提取液，回收乙醇至无醇味，人参、女贞子残渣备用；(3)、莪术、白术、徐长卿，合并提取挥发油，提油时间不少于8小时，挥发油另器收集， 残渣及水溶液备用；(4)、土鳖虫、鸡内金两味动物药，水洗，60°C烘干，与茯苓合并，粉碎成100目粉，灭菌 后备用；(5)、黄芪、灵芝、白花蛇舌草、半枝莲、绞股蓝、蛇莓、白英、茵陈，与步骤(2)中所得人 参、女贞子的醇提后残渣，及步骤(3)中所得莪术、白术、徐长卿提油后残渣及水溶液合并， 加9倍量水，加热煎煮2次，每次2小时，合并煎煮液，加入步骤(2)中所得人参、女贞子醇 提液，浓缩成相对密度1. 20-1. 25的清膏，干燥，粉碎，备用；将步骤(5)所得干膏粉加入适当药学上可接受的辅料制粒；(6)、将步骤(3)中所得挥发油喷入步聚(4)中所得茯苓、土鳖虫、鸡内金的细粉中，混 勻，与步骤(5)中中所得的颗粒混勻，密闭半小时，装胶囊即得。
全文摘要
本发明公开了一种中药组合物中齐墩果酸和熊果酸的含量测定方法。该中药组合物是由黄芪、女贞子等中药组合而成，具有益气养阴、健脾补肾、散结通络的功效。为有效控制其质量，本发明采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定了其中齐墩果酸和熊果酸的含量，该方法灵敏、高效、准确、稳定，可有效控制该中药组合物中齐墩果酸和熊果酸的含量。
文档编号A61K35/37GK101874886SQ200910074239
公开日2010年11月3日 申请日期2009年4月28日 优先权日2009年4月28日
发明者刘敏彦, 张运芳, 李向军, 王玉峰, 许红辉 申请人:河北以岭医药研究院有限公司