专利名称：一种地黄茎叶提取物及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种地黄茎叶提取物；此外，本发明还涉及该地黄茎叶提取物的制备 方法和用途。
背景技术：
参科多年生草本植物，一般是新鲜或干燥块根入药。现代科学研究表明，地黄含有 环烯醚萜苷类、单萜及其苷类、低聚糖类、氨基酸类等多种化学成分。梓醇是地黄中含量最 高的环烯醚萜单糖苷，为地黄的主要活性成分之一，具有降血糖和保护脑神经作用。地黄茎 叶常规被认为是没有药用价值，有效成分含量微不可计，一般也不用作药材，而作废弃物处 理掉。为了节约利用药材资源，本专利申请发明人对地黄茎叶进行了深入地研究，发现地黄 茎叶的提取物可以作为原料，用于制备降血糖和保护脑神经的药物或保健品。经专利检索发现，涉及地黄茎叶提取物的专利有1篇，申请号为 CN200410062245. 3，专利名称地黄茎叶总苷提取物的提取工艺。该专利公开了地黄茎叶总 苷的制备方法，其制备方法的技术特征是通过活性炭分离柱，用低浓度的有机溶剂洗脱。据 该专利说明书声称，该制备方法得到环烯醚萜苷类成分50%以上，梓醇含量大于20%。梓醇等环萜类化合物的特点是结构近似，稳定性差，极性很大，易溶于高极性溶 剂。发明人经过系统的试验筛选发现，上述CN200410062245.3专利的制备工艺存在瑕疵， 主要表现在(1)采用活性炭做吸附剂不合适。活性炭是一种优良的吸附剂，它具有物理吸 附和化学吸附的双重特性，可以有选择的吸附气相、液相中的各种物质，以达到脱色精制、 消毒除臭和去污提纯等目的。活性炭具有像石墨晶粒却无规则地排列的微晶，活性炭是非 极性分子，易于吸附非极性或极性很低的吸附质。而地黄茎叶中的环烯醚萜苷类多为水溶 性强的极性成分，因此选择活性炭作为地黄茎叶总苷的分离填料是不合适的。( 吸附后洗 脱比较困难。公开专利采用水洗、低于10%的乙醇水溶液洗、高于10%以上的乙醇水溶液 洗等等。在工艺上比较冗长复杂，资源浪费多。( 洗脱液选用及用量不合理。公开专利提 供的技术方案中，其必要技术特征之一，即采用水常规洗去杂质至无色，或进一步采用低于 10%的乙醇、低于15%的甲醇或低于10%的丙酮溶液洗至洗脱液无色。对洗脱剂的用量不 做限定，会导致大量以梓醇为代表的环烯醚萜苷类成分从活性炭柱上流失，造成严重的浪 费，也最终导致了其成品中梓醇的含量较低。本专利申请的发明人经过大量的试验，确定了一种从地黄茎叶中制备地黄茎叶提 取物的方法，并按照该方法，制备得到了一种新的地黄茎叶提取物，该提取物中梓醇含量显 著高于公开专利制备得到的地黄茎叶总苷。本专利发明人同时还探索了提取物的制备方法 及医药上的应用。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种地黄茎叶提取物；本发明的另一 个目的是提供该地黄茎叶提取物的制备方法和用途。
本发明提供的一种地黄茎叶提取物是从地黄的地上部分即茎叶中提取的，其中含 有梓醇50%以上。本发明提供的地黄茎叶提取物，可与药用辅料结合，制成临床可接受的各种药物 制剂。本发明的地黄茎叶提取物是按以下方法制备得到的(1)将地黄茎叶粉碎后，用水加热回流提取，得提取液；(2)将提取液过滤，滤液浓缩，得浓缩液A ；(3)将浓缩液A加入乙醇，放置过夜，取滤液，得醇沉液B ；(4)将醇沉液B回收乙醇、浓缩，得浓缩液C ；(5)将浓缩液C上大孔吸附树脂，水洗脱，弃去洗脱液，以乙醇洗脱，收集洗脱液， 回收乙醇，减压浓缩，得浸膏D ；(6)将浸膏D干燥，即得。优选地，本发明的地黄茎叶提取物是按以下方法制备得到的(1)将地黄茎叶粉碎后，用水加热回流提取，得提取液；(2)将提取液过滤，滤液浓缩至相对密度1. 08-1. 15(50°C )，得浓缩液A ；(3)将浓缩液A加入95%乙醇至醇浓度60-80%，放置过夜，取滤液，得醇沉液B ；(4)将醇沉液B回收乙醇、浓缩至相对密度1. 05-1. 1 (50°C )，得浓缩液C ；(5)将浓缩液C上大孔吸附树脂，用1 5倍量水洗脱，弃去洗脱液，以柱体积1-5 倍量浓度为5-10%的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇、浓缩至相对密度1. 1-1. 3 (500C ), 得浸膏D ；(6)将浸膏D干燥，粉碎，即得。在上述步骤(5)中，所述大孔吸附树脂采用XAD-1600、XAD-16、PRP-2A，PRP-5A中 的一种。本发明提供的地黄茎叶提取物在制备脑缺血后神经功能改善药物或保健品中的 应用。本发明提供的地黄茎叶提取物在制备降血糖药物或保健品中的应用。本发明的优点本发明的一种地黄茎叶提取物所得到的最终产品中梓醇含量 50%以上，能够保证良好的降血糖和保护脑神经作用，比专利CN200410062245. 3以总环烯 醚萜苷类为主，梓醇仅占约20%要优良。本发明的制备方法中采用大孔吸附树脂柱具有比 活性炭吸附柱更好的效果，且工艺简单，未使用有毒溶剂，工业污染小，成本低。
图1.梓醇含量50%以上的鉴定2.梓醇标准品图药效学实验(一)1实验目的考察本发明地黄茎叶提取物在体内对大鼠脑缺血后神经功能改善的 药效作用。2实验材料2. 1受试药物地黄茎叶提取物(按照实施例4制备的本发明药物)，用生理盐水溶解(现用现配)。2. 2实验动物SD大鼠，雄性，体重270 300g，由中国人民解放军军事医学科学 院实验动物中心提供，许可证号SCXK (军)2007-0004。3实验方法取大鼠40只，设假手术组、模型组、地黄茎叶提取物60、20mg/kg组。造模后3天， 根据行为实验评分随机分组，每组10只，并开始给药。大鼠脑缺血模型方法大鼠用10%水合氯醛350mg/kg麻醉，背位固定，分离右侧 颈总动脉，剥离颈外动脉，颈内动脉；结扎颈总动脉、颈外动脉，动脉夹夹闭颈内动脉。于颈 总动脉插入鱼线(直径0. 25mm)，打开动脉夹，栓入鱼线(深至18mm)，固定鱼线。缝合伤口 回笼饲养。给药方法地黄茎叶提取物60mg/kg组将地黄茎叶提取物MOmg溶至細1灌胃给 药，给药容积为0. lml/100g体重，即60mg/kg ；地黄茎叶提取物20mg/kg组将地黄茎叶提 取物80mg溶至細1灌胃给药，给药容积为0. lml/100g体重，即20mg/kg ；假手术组、模型组 每日灌胃给予等量饮用水0. lml/100g体重。指标测定于给药后第3、6、9天分别进行行为评分、横木行走试验、测定大鼠的双 侧前肢抓力、健侧前肢感觉能力及测定大鼠的健侧后肢压痛痛阈值。行为评分(1)提鼠尾离开地面约一尺，观察前肢屈曲情况。如双前肢对称伸向地面，记为0 分；如手术对侧前肢出现肩屈曲、肘屈曲、肩内旋或既有腕肘的屈曲又有内旋者，记为1分。(2)将动物置于平滑地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等 且有力者记为0分；如向手术对侧推动时阻力下降者，记为1分。C3)将动物两前肢置一金属网上，观察两前肢的肌张力。双侧肌张力对等且有力者 为0分；手术对侧前肢肌张力下降记为1分。(4)提鼠尾离开地面约一尺，动物有不停地向手术对侧旋转者，记为1分；否则，记 为0分。根据以上标准评分，满分为4分，分数越高，动物的行为障碍越严重。横木行走实验横木行走实验评价运动的协调和整合缺损。横木宽2. 0cm,长 120cm,厚1cm，，距地面80cm水平悬空放置，横木一端连接一个暗盒(长25cm，宽22cm，高 18cm)，用噪音刺激大鼠通过横木走进暗盒。评分标准大鼠不能呆在横木上，0分；大鼠能 呆在横木上但不动，1分；大鼠试图通过，但从横木摔下，2分；大鼠走上横木，但损伤的后肢 滑落次数超过50%，3分；超过1次但不到50%，4分；仅滑落1次，5分；顺利通过，6分。缺 血前训练2天，让大鼠学会顺利走过横木。以缺血后3，6，9天为观察时间点分别进行检测。触觉刺激实验评价躯体感觉和精细运动执行功能。用相同面积(0. 7cm*0. 7cm) 的医用胶布贴在大鼠左前肢腕部腹侧面作为触觉刺激，记录大鼠揭除胶布的潜伏期。术前 训练2天，1次/天，使大鼠能够在20秒内完成揭除胶布的动作。以缺血后3，6，9天为观察 时间点分别进行检测。大鼠的双侧前肢抓力测试动物抓握力测试仪测试。大鼠的健侧后肢压痛痛阈值测试动物压痛测试仪测试。4实验结果对各种检测值进行组间比较，t检验。结果见表。
表1. 1本发明地黄茎叶提取物对脑缺血亚急性期大鼠神经症状评分的影响
权利要求
1.一种地黄茎叶提取物，其特征在于该地黄茎叶提取物是按以下方法制备得到的(1)将地黄茎叶粉碎后，用水加热回流提取，得提取液；(2)将提取液过滤，滤液浓缩，得浓缩液A；(3)将浓缩液A加入乙醇，放置过夜，取滤液，得醇沉液B；(4)将醇沉液B回收乙醇、浓缩，得浓缩液C；(5)将浓缩液C上大孔吸附树脂，水洗脱，弃去洗脱液，以乙醇洗脱，收集洗脱液，回收 乙醇、浓缩，得浸膏D ；(6)将浸膏D干燥，即得地黄茎叶提取物。
2.根据权利要求1所述的一种地黄茎叶提取物，其特征是按以下方法制备得到的(1)将地黄茎叶粉碎后，用水加热回流提取，得提取液；(2)将提取液过滤，滤液浓缩至50°C相对密度1.08-1. 15，得浓缩液A ；(3)将浓缩液A加入95%乙醇至醇浓度60-80 %，放置过夜，取滤液，得醇沉液B ；(4)将醇沉液B回收乙醇、浓缩至50°C相对密度1.05-1. 1，得浓缩液C ；(5)将浓缩液C上大孔吸附树脂，用1 5倍量水洗脱，弃去洗脱液，以柱体积1-5倍量 浓度为5-10%的乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇、浓缩至50°C相对密度1. 1-1. 3，得浸膏 D ；(6)将浸膏D干燥，粉碎，即得地黄茎叶提取物。
3.根据权利要求1或2所述的一种地黄茎叶提取物，其特征是梓醇含量在50%以上。
4.根据权利要求1或2所述的一种地黄茎叶提取物，其特征是所述制备方法第(5)步 大孔吸附树脂采用XAD-1600、XAD-16、PRP-2A、PRP-5A中的一种。
5.根据权利要求1或2所述的地黄茎叶提取物的应用，其特征在于与至少一种药学上 可接受的赋形物制备药物或药物组合物。
6.本发明提供的地黄茎叶提取物在制备脑缺血后神经功能改善的药物或保健品中的 应用。
7.本发明提供的地黄茎叶提取物在制备降血糖药物或保健品中的应用。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，具体地说，涉及一种地黄茎叶提取物。该地黄茎叶提取物，是按以下方法制备得到的(1)将地黄茎叶粉碎后，用水加热回流提取，得提取液；(2)将提取液过滤，滤液浓缩，得浓缩液A；(3)将浓缩液A加入乙醇，放置过夜，取滤液，得醇沉液B；(4)将醇沉液B回收乙醇、浓缩，得浓缩液C；(5)将浓缩液C上大孔吸附树脂，水洗脱，弃去洗脱液，以乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇、浓缩，得浸膏D；(6)将浸膏D干燥。该地黄茎叶提取物的特征是梓醇含量在50％以上。本发明还提供了该地黄茎叶提取物在制备脑缺血后神经功能改善、制备降血糖的药物或保健品中的应用。
文档编号A61P3/10GK102058712SQ200910201798
公开日2011年5月18日 申请日期2009年11月13日 优先权日2009年11月13日
发明者吴惠, 吴立怀, 玄振玉, 陆琪, 黄孝春 申请人:上海玉森新药开发有限公司