专利名称：：葛根素的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及医药领域，具体为葛根素(Puerarin)在制药方面的应用，尤其是在制备a-葡萄糖苷酶抑制剂、a-淀粉酶抑制剂和制备治疗糖尿病药物方面的应用。
背景技术：
：葛根是治疗糖尿病中药复方经常出现的中药。葛根素(Puerarin)是中药葛根中主要有效成分，其结构如式(I)所示，药理作用广泛，目前明确的疗效有抗心肌缺血，抗氧化，抗骨质疏松，减轻酒精对肝脏的损伤，脑缺氧保护，抗心律失常，降血压，扩张冠状动脉，抗缺血_再灌注损伤，保护血管，保肝等。式(1)此外葛根素还能提高急性衰老大鼠的血清S0D、GSD-Px活性，降低MDA以及脑组织中LDF水平，具抗衰老作用；对尿酸转运因子URAT1有抑制作用，可治疗痛风。葛根素性质稳定，安全性好，来源易得，因此开发葛根素新的医药用途具有重要意义。
发明内容本发明的目的在于将葛根素应用于制备a-葡萄糖苷酶抑制剂。本发明另一个目的在于将葛根素应用于制备a-淀粉酶抑制剂。本发明还将葛根素应用于制备治疗糖尿病的药物。经过体外试验证实，中药材葛根的提取物葛根素对于a-葡萄糖苷酶和a-淀粉酶有抑制作用。以阿卡波糖为对照，葛根素对上述酶的抑制效果是阿卡波糖的13倍，具有良好的作用。降低餐后血糖是预防糖尿病、减少并发症和降低死亡率的重要措施，控制的方法是限制多糖在消化道内的分解和吸收，为此要降低a-葡萄糖苷酶和a-淀粉酶的活性，阻滞双糖水解成单糖，延缓糖的吸收，使血糖平稳。目前葡萄糖苷酶抑制剂被推荐为降低餐后血糖的一线药物。将葛根素应用于制备治疗糖尿病的药物，可单独使用或与其他成分的药物组合。所述的药物还包括药学上可接受的载体，剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊、软胶囊、滴丸、口服液、注射剂等。所述的药物中，葛根素的含量为5%100%。经体外实验证明葛根素对α-葡萄糖苷酶和α_淀粉酶活性有很强的抑制作用，为开发成降低餐后血糖，防治糖尿病及其并发症提供科学依据。而且葛根素性质稳定，安全性好；在植物中含量高，提取工艺简单，来源易得，既经济又安全，极具推广应用价值。具体实施例方式试剂阿卡波糖对照品购自上海史瑞可生物有限公司；葛根素对照品购自中国药品生物制品检定所；葛根素样品参照文献(杨云，冯卫生主编.中药化学成分提取分离手册，中国中医药出版社，1998，333)方法提取制备所得。α-葡萄糖苷酶(a-Glucosidase，TypeIFromBakersYeast)、α-淀粉酶(a-Amylase,TypeVI-B=FromPorcinepancreas，PPA)、4_硝基苯酚-α-D-口比喃葡萄糖苷(4-Nitropheny-α-D-glucopyranoside,PNPG)禾口淀粉天青(StarchAzure:PotatostarchcovalentlylinkedwithRemazolBriliantBlueR)均购自Sigma；其余试剂均为分析纯。仪器HWS26型电热恒温水浴锅，PHS-25酸度计，AnkeTGL-16C离心机，上海申生科技产；上海棱光S54PC紫外可见分光光度计。实施例1参照文献(中药材，2005，28(1)38)方法，以4_硝基苯酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物；反应体系为2mL0.Imol·厂1的磷酸盐缓冲液(pH6.8)中加入待测样品100μ1(DMS0溶解，剂量见表1)，还原谷胱甘肽50μ1(lmg·mL—1)，α-葡萄糖苷酶100μ1(0.57U·mΓ1)，摇勻后37°C温浴10分钟；然后加入37°C温浴好的底物PNPG0.2ml(20mmol37°C水浴反应15min后，加入0.Imol.L-1Na2CO3溶液IOmL终止反应，混勻后在波长400nm处测定吸光度。阳性对照物为阿卡波糖。结果如表1所示。α-葡萄糖苷酶抑制剂活性计算公式如下A空白-(A样品背景)α-葡萄糖苷酶活性抑制率(％)=--------------------------χ100A空白式中，Afie不加样品反应后的吸收值A样品加入样品反应后的吸收值A背景只加样品的吸收值实施例2参照文献(Biosci.Biotechnol.Biochem.2000,64(5)1041)方法，反应体系为淀粉天青5mg用0.5mL的0.05mol·I^pH6.9Tris-HCl缓冲液(含CaCl2O.Olmol·L—1)配制成悬液，于90-95°C水浴加热5min，再于37°C水浴置5min后，加0.5mL待测样品葛根素溶液(用DMSO溶解，剂量见表1)，加0.25mL的PPA(α-淀粉酶)溶液(2.3U·mL-1)，混勻后于37°C水浴反应lOmin，加入1.25mL50%冰醋酸终止反应，混勻，4°C条件下6000r/min离心5min，取上清液于595nm处测定吸光度。阳性对照物为阿卡波糖。结果见表1。α-淀粉酶抑制剂活性计算公式如下α-淀粉酶活性抑制率<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>式中，Ac+:100%酶活性的吸收值(仅溶剂中加酶)Ac_酶活性的吸收值(仅溶剂未加酶)As待测样品的吸收值(待测样品加酶)Ab空白的吸收值(待测样品未加酶)上述实施例1和2酶抑制活性测定实验中，每个样品重复三次取其平均值，以平均值计算酶活性抑制率。表1葛根素对α-葡萄糖苷酶和α_淀粉酶活件的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>实施例3取葛根素1kg，加入Ikg淀粉，0.2kg微晶纤维素，硬脂酸镁0.Olkg,滑石粉0.02kg,置混合机中混合均勻，分装胶囊。实施例4取琼脂55g溶于适量的蒸馏水中，加热使溶，加入200g甘油在搅拌下混勻，最后滴加尼泊金乙酯乙醇溶液100ml(SOg^L-1)；另称取过80目筛的葛根素粉100g，置研钵中，分次加入上述琼脂溶液，随加研磨，适当时间后，置搅拌机中高速搅拌至颗粒均勻细腻为止，加蒸馏水至10L，121°C灭菌20分钟，即得口服液。实施例5取葛根素1kg，加入淀粉1kg、微晶纤维素0.2kg、羧甲基淀粉钠0.1kg，置混合机中混合均勻，用70%乙醇水溶液湿法制粒，70°C干燥，整粒，加硬脂酸镁0.Olkg,滑石粉0.02kg，混勻，压片。权利要求葛根素在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂方面的应用。2.葛根素在制备a-淀粉酶抑制剂方面的应用。3.葛根素在制备治疗糖尿病药物方面的应用。4.一种治疗糖尿病的药物，其特征在于，包括重量含量为5%100%的葛根素。5.权利要求4所述治疗糖尿病的药物，其特征在于，还包括药学上可接受的载体。6.权利要求4所述治疗糖尿病的药物，其特征在于，剂型为片剂、颗粒剂、胶囊、软胶囊、滴丸、口服液或注射剂。全文摘要本发明涉及医药领域，公开了葛根素的医药用途。葛根素对于α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶有抑制作用，其抑制效果是阿卡波糖的1～3倍。因此可用于制备α-葡萄糖苷酶抑制剂、α-淀粉酶抑制剂和制备治疗糖尿病药物。在制备α-葡萄糖苷酶抑制剂、α-淀粉酶抑制剂和制备治疗糖尿病药物方面的应用。葛根素性质稳定，安全性好；在植物中含量高，提取工艺简单，来源易得，既经济又安全，极具推广应用价值。文档编号A61K31/352GK101804045SQ20101014356公开日2010年8月18日申请日期2010年4月9日优先权日2010年4月9日发明者叶晓平,宋纯清,茅仁刚申请人:上海新康制药厂;上海师大科技开发总公司