专利名称：海藻酸钠交联莫西沙星缓释微球、其制备方法和用途以及含有所述微球的血管靶向栓塞剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种含抗结核药物的微球和含有所述微球的血管靶向栓塞剂，特别是一种以海藻酸钠为载体交联的含莫西沙星作为抗结核有效成分的缓释微球及其血管靶向栓塞剂。本发明还涉及所述缓释微球的制备方法，以及所述微球在制备介入栓塞治疗肺结核、肺结核大咯血、肺结核空洞、肾结核、甲状腺结核、颈淋巴结核、生殖器结核(输卵管，子宫内膜、睾丸、附睾)、心包结核、胸壁结核、胸膜结核和体内其他结核的药物的应用。
背景技术：
结核病是严重危害人类生命健康的主要传染性疾病之一，也成为传染性疾病中的第一号杀手和成人的首要死因。20世纪90年代后期，由于耐药菌等问题使已经销声匿迹的结核病在全世界范围卷土重来，给结核病的控制增加了难度，世界卫生组织初步统计全球有19亿人受到结核杆菌的感染，结核病人已达2000多万人，每年新发病达800万，年均 300万人由此而丧生。中国受结核菌感染者也在不断增加，结核病呈上升趋势，结核病人数居世界第2位，每年因结核病死亡的人数约有15万，结核病的防治是迫切需要解决的重大课题，研究和开发抗结核新药和新剂型迫在眉睫。结核分枝杆菌主要寄生于正常细胞内并有一定的耐药性，要杀灭细胞内的结核菌必须在细胞内达到一定的抗结核药物浓度。而抗结核药物的口服制剂常先受到首过效应的影响并在全身循环中经过蛋白结合、代谢、排泄及分解等过程，只有少量药物才能达到靶组织、靶器官、靶细胞，要提高靶区的药物浓度就必须增加剂量，从而也增加了药物的全身毒副作用。而靶向制剂具有定向释放药物，增加病变部位及细胞内药物浓度，提高药效，降低毒副作用等特点，因此认为抗结核药物靶向制剂有临床的应用价值和发展前景。莫西沙星(Moxifloxacin)属第四代氟喹诺酮类化学合成抗菌素药物，由德国拜耳公司1999年推出的产品，莫西沙星是通过抑制细菌DNA螺旋酶A亚单位和拓扑异构酶IV 的活性，阻断DNA的复制而发挥杀菌作用，其对革兰氏阴性菌，主要抑制DNA螺旋酶，而对革兰氏阳性菌的主要作用靶点是拓扑异构酶IV。莫西沙星的化学结构特点是在8位碳原子引人了甲氧基因，使其增加了药物对细菌的结合能力和细胞膜的穿透破坏能力，而且抗菌后效应(PAE)强大而持久。莫西沙星不但保留有喹喏酮类药物对革兰氏阴性菌抗菌活性和抗菌谱。而且 8-甲氧基因增加了其对革兰氏阳性菌的抗菌活性和抗菌谱。对非典型病原菌如肺炎支原体、衣原体、军团菌非常有效，对厌氧菌的活力强，包括对有芽孢和无芽胞的厌氧菌都具有显著的抗菌活性。莫西沙星对内酰胺类，大环内脂类，氨基糖肽类和四环素类抗生素耐药的细菌亦有效。莫西沙星和这些抗菌药物无交叉耐药性，不是肝细胞色素Ρ-450同工酶抑制剂，因此避免了许多潜在的药物相互作用。莫西沙星具有与异烟胼(INH)或利福平相似的早期杀菌活性，对肺结核患者的早期及延长早期有杀菌活性，表明能良好渗入结核病变，能迅速杀灭重症空洞性肺结核患者痰中的快生长菌群。
莫西沙星自从上市以来，以其抗菌谱广，抗菌力强，体内分布广，体内药物浓度高， 半衰期长，疗效好，副作用小，与其他抗菌药物无交叉耐药性，几乎无光敏反应等优点而得到临床广泛应用。随着抗结核药物在临床上的广泛应用，结核分枝杆菌的耐药率已愈来愈高，尤其是多重耐药性问题，已成为防痨界关注的课题，也是影响结核病化疗效果的主要因素。因此选择合适的抗结核剂型是当前治疗和控制结核病的重要部分。结核病复发和结核菌耐药现象日益严重，尽管产生原因复杂，但其中一个十分重要的因素是治疗疗程长，患者不能规律足量用药至疗程结束，这是全世界各国结核病治疗普遍面对的问题，在保证治疗效果的前提下，减少药物剂量，延长药物间隔时间，药物依从性的问题会得到有效的解决。为了能够获得在体内发挥长效作用的抗结核药物制剂，我们选择了生物相容性好，天然高分子材料海藻酸钠作为载体，以莫西沙星为模型药物和吸附剂进行交联，通过处方筛选，体外释放实验和体内研究获得长效释药可生物降解微球血管栓塞制剂。国内对载抗结核药物微球的研究只有零星报道，多以口服或注射用药。国外对载抗结核药微球的系统研究报道主要集中在美国、日本和印度的研究小组，研究涉及不同的载体，不同的药物，不同的微球粒径以及不同的给药途径。之前也有学者致力于抗结核缓释系统的研究，主要是口服剂、吸入齐U、注射剂以及皮下埋植剂。目前临床上抗结核药物主要为口服和注射制剂，并且注射剂的疗效也不够理想。 由于不能于病灶部位获得有效药物浓度，而且在应用过程中有明显的全身毒性和耐药性产生，极大地限制了抗结核药物的应用。少数所采用的栓塞加药物灌注疗法也存在如下缺陷 药物不能相对均勻的持续释放，当局部灌注药物浓度过高时，其药物的冲击波疗效可能产生局部组织坏死或损伤。抗结核药物微球血管栓塞剂是一种新剂型，微球沉积于肺部可以延缓药物的释放，且可保护药物不受酶水解破坏，可延长药物在肺部的滞留时间，副反应发生率低，耐受性好，安全性高。目前国内外尚无有关将海藻酸钠和吸附剂交联莫西沙星制成抗结核病血管栓塞剂，并应用于肺结核，肺结核大咯血，肺结核空洞，肺结核性支气管狭窄，耐多药性空洞性肺结核，肾结核，甲状腺结核，生殖器结核(输卵管，子宫内膜、睾丸、附睾)，颈淋巴结核，心包结核，胸壁结核全身其他部位结核等病人的介入栓塞治疗的报道。莫西沙星属第四代氟喹诺酮类化学抗菌素药物，在水和有机溶剂中溶解性较差。 临床上多采用口服和注射制剂，有口服吸收量小、注射剂量低的缺陷，病灶部位不能获得有效的药物浓度，也不能相对均勻地持续释放，还易引发不良反应。
发明内容
本发明提供了一种海藻酸钠交联莫西沙星的缓释微球，其特征在于所述的微球包括药物载体、吸附剂、抗结核药物活性成分、加强剂和固化剂，所述载体为海藻酸钠，吸附剂为人血白蛋白或牛血清白蛋白，抗结核药物活性成分为莫西沙星，加强剂为明胶或透明质酸，二价金属阳离子钙盐或钡盐为固化剂。在一个实施方案中，上述的缓释微球储存在作为保存液的植物油或液体石蜡中， 微球粒径规格为50 100μπι、50 150μπι、50 200 μ m、100 300 μ m、150 450 μ m、 300 500 μ m、500 700 μ m、700 900 μ m 或 900 1250 μ m。
在另一个实施方案中，上述的缓释微球制成干燥的粉末状颗粒，其粒径范围为 10 50 μ m、25 50 μ m、50 100 μ m、100 350 μ m、300 550 μ m 或 500 750 μ m。上述本发明的缓释微球中海藻酸钠与莫西沙星的重量比优选为1 75 0. 25 12. 5。本发明还提供了一种制备上述缓释微球的方法，其包括下述步骤1)将海藻酸钠用生理盐水或注射用水按质量体积百分比为0. 5 15%比例溶解， 得海藻酸钠溶液，即，载体溶液；2)将人血白蛋白或牛血清白蛋白用注射用水按质量体积百分比0. 1 10%比例溶解，得白蛋白溶液，即，吸附剂；3)将莫西沙星用步骤2)配制的吸附剂研磨搅拌溶解并吸附，得莫西沙星溶液， 即，药物溶液，其中莫西沙星与所述吸附剂的按质量体积百分比为1. 6 4% ；4)将二价金属阳离子钙盐或钡盐配制成质量体积百分比1 15%浓度的水溶液， 得固化液；其中阳离子钙盐优选选自氯化钙和乳酸钙，所述钡盐优选为氯化钡；5)将所得固化液中加入无水乙醇和注射用水，固化液无水乙醇注射用水的体积比为2 1 2，得含有无水乙醇的固化液；6)取明胶或透明质酸用注射用水溶解，得质量体积百分比0. 1-10%的明胶或透明质酸溶液，即，加强溶液；7)将药物溶液和载体溶液按比例合并，它们的体积比为1 1 30，磁力搅拌均勻，得制备溶液；8)将上述所得制备溶液通过高压静电多头微球发生装置，喷雾微滴，分散于固化液中，待沉淀完全后去除上清液，得含莫西沙星的海藻酸钠交联的微球或微胶珠；9)将上述制得的带微球或微胶珠放入加强溶液中，搅拌，弃去上清，得带药微球或微胶珠，即，海藻酸钠交联的莫西沙星缓释微球。在一个实施方案中，上述步骤9)得到的海藻酸钠交联的莫西沙星缓释微球保存在作为保存液的植物油或液体石蜡油中。所述的植物油可选自供注射用的大豆油、茶油、玉米油、菜籽油、棉籽油等。或者，在另一个实施方案中，上述步骤9)得到的海藻酸钠交联的莫西沙星缓释微球干燥，得粉末状颗粒，即，干球。例如，用冷冻干燥或烘箱干燥法。在一个具体实施方案中，上述方法的步骤8)所用的高压静电多头微球发生装置包括高压静电发生装置；推进泵；喷射头；无菌容器；正负电极；各种型号的无菌注射器； 升降装置。所述高压静电发生装置上有多个正负电极；所述推进泵与无菌注射器和喷射头相连；所述正极与喷射头相连；所述负极与浸在所述固化液中的不锈钢钢丝相连接；所述不锈钢钢丝与无菌容器相连；所述不锈钢钢丝与无菌容器下方有调节距离的升降装置。在将制备溶液制作微球时，接通高压静电多头微球发生仪电源后，使每组正负极间产生高电场，当推进泵以恒定速度将海藻酸钠和吸附的药物混合溶液推出时，电场力克服了海藻酸钠溶液固有的黏滞力和表面张力，使其含药的聚合物溶液分散成一定粒径的雾滴喷射至固化液中，迅速交联成海藻酸钙微球(微胶珠)。为防止水溶性药物过早地释放本发明采用了明胶溶液在微胶珠外又加了一层膜；为防止保存期水溶性药物从微球中释放 (漏出)本发明采用了植物油(或液体石蜡)保存，起到了油包水的作用，从而避免了应用前药物的丢失；本发明采用高压静电成球(囊)技术避免使用有机溶剂，有利于提高药物的稳定性，并可通过调节电压调控微球(囊)粒径，操作简便，条件温和，能避免现有技术中使用的有毒的有机溶剂和戊二醛，产品环保。本发明采用海藻酸为药物载体交联剂，抗结核药物莫西沙星为药物活性成分，用白蛋白作为吸附剂把莫西沙星和海藻酸钠相连接，在二价金属阳离子(钙离子或钡离子) 的作用下制作成微球，制成微球后再用明胶包裹，解决了水溶性药物释放过快的问题，在保存方面用高温灭菌后的植物油或液体石蜡保存湿的凝胶药物微球，使莫西沙星在不用时不释放出来。本发明改变了莫西沙星抗结核药物的剂型和投药途径，达到高效、低毒，临床应用安全有效的效果。本发明将抗结核药物莫西沙星与吸附剂人或牛血清白蛋白研磨溶解，按比例混合后吸附在一起，再于海藻酸钠载体交联，通过高压静电多头微球发生仪，在二价金属阳离子(钙离子或钡离子)的作用下，把抗结核药物莫西沙星包裹在微球里，为防止抗结核药物莫西沙星释放在保存液里，进一步采取了明胶在微球外加一层薄膜，然后再放入用高温灭菌后的植物油或液体石蜡保存湿的凝胶药物微球，制成含莫西沙星的海藻酸钠微球血管靶向栓塞剂。本发明还涉及一种血管靶向栓塞剂，其特征在于含有上述海藻酸钠交联的莫西沙星缓释微球。本发明还涉及上述海藻酸钠交联的莫西沙星缓释微球在制备血管靶向栓塞剂中的用途。所述的血管靶向栓塞剂可用于治疗结核病，例如用于介入栓塞治疗肺结核、肺结核大咯血或肺结核空洞；用于治疗肾结核、甲状腺结核、颈淋巴结核、心包结核、胸壁结核和/ 或胸膜结核；用于治疗输卵管结核、子宫内膜结核、睾丸结核或附睾结核。本发明具有以下优点1、选择产业化生产的高压静电多头微球发生仪，生产出大小可控，适合临床上不同用途的药物微球血管靶向栓塞剂；2、选择生物相容性好，天然高分子材料海藻酸钠作为药物载体，获得长效释药可生物降解微球血管靶向栓塞剂；3、选择人血清白蛋白或牛血清白蛋白作为吸附剂，很好地吸附抗结核药莫西沙 通过使用本发明的制剂，不仅能够极大地提高局部的药物浓度，降低药物在循环系统中的浓度，降低药物对正常组织的毒性，还能够极大地方便药物应用，减少疗程，缩短治疗时间，减少药物的并发症，降低病人的费用，减少药物耐受。其治疗方法采用介入放射或支气管镜介入的方法，进行靶器官动脉造影，根据造影所见，决定选用栓塞微球的直径， 进行靶器官栓塞治疗，尤其是栓塞于靶器官的末梢小动脉血管，对肺结核患者可考虑末梢小动脉血管的有(1)初治失败，又经复治抗结核方案治疗，疗程结束后涂片结核阳性，且痰培养结核分枝杆菌对HR两种或更多的抗结核药物耐受者，即耐多药结核。(2)痰结核菌持续阳性的单个簿壁或干酪空洞，且空洞周围无明显活动性病灶或病灶已较稳定者。(3) 肺结核的单个纤维空洞，久治痰菌不阴转者。(4)久治不愈痰菌持续阳性的支气管结核。(5) 肺结核大咯血的介入栓塞治疗。(6)肺外其他结核的介入治疗，如肾结核、甲状腺结核、颈淋巴结结核、心包结核、胸壁结核、胸膜结核、生殖器结核(输卵管、子宫内膜、睾丸、附睾)等。本发明使用时，优选微导管进行超选择栓塞，采用无菌操作，透视下经导管视具体情况缓慢或缓慢多次注入，直到造影剂流速明显减慢时，即完成栓塞。再次行动脉造影判定栓塞效果。使用时，若含莫西沙星抗结核药物的海藻酸钠微球血管栓塞剂是粉末状颗粒，则先将保存在密闭容器中干球溶于在生理盐水中还原(即湿球)，再加入适量或稀释后的造影剂混合均勻，使微球充分悬浮于造影剂中，再在影像设备监视下通过导管超选择性栓塞在病变部位的血管内缓慢或缓慢多次注入，直到造影剂流速明显减慢时，即完成栓塞。再次行动脉造影判定栓塞效果。本发明的突出优点是采用的人或牛血清白蛋白吸附剂安全有效，成功地解决了莫西沙星不能完全溶解于水或有机溶剂的问题，莫西沙星与白蛋白结合再和水溶性海藻酸钠溶液混合交联不沉的难题，以及解决了在正负电场作用的条件下与其它试剂反应包裹形不成药物微球的现象，制得的抗结核药物微球粒径理想可控，且制得的微球血管栓塞剂具有载药量大，在体内滞留时间长，生物利用度高，释药速度可调节，能实现药物的靶向传输， 具有靶向专一性的特点，用于介入栓塞治疗肺结核、肺结核大咯血、肺结核空洞、肾结核、甲状腺结核、颈淋巴结核、生殖器结核、(输卵管，子宫内膜、睾丸、附睾)心包结核、胸壁结核、 胸膜结核和体内其他结核等方面的应用。
具体实施例方式下面通过实施例对本发明作进一步说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。实施例1制备海藻酸钠交联莫西沙星抗结核微球血管栓塞剂1、玻璃器皿的处理将清洗干净的玻璃器皿凉干，放在高温烤箱内烘烤(除菌去热源)待用；2、微球制备仪的选择选用制球可控，大小均勻，操作简便，产量高，易大量生产的高压静电多头微球发生仪。3、各种试剂的配制方法①制备海藻酸钠溶液称取8克海藻酸钠，置于玻璃器皿内，边搅拌边加入生理盐水或注射用水500ml磁力搅拌至海藻酸钠全部溶解，得海藻酸钠溶液；②配制吸附剂将人血白蛋白(或牛血清白蛋白)按比例0.1 10% (质量体积百分比)，用注射用水溶解，得白蛋白溶液，即，吸附剂；③配制莫西沙星溶液称取12克市售莫西沙星，置于上述玻璃器皿内，用0. 1 10% (质量体积百分比) 的人血白蛋白或牛血清白蛋白溶液50ml搅拌溶解，得莫西沙星溶液；④明胶强化溶液称取30克的明胶置于玻璃器皿内，边搅拌边加入生理盐水或注射用水500ml，磁力搅拌至明胶全部溶解，得明胶强化溶液；
⑤配制含无水乙醇固化溶液称取氯化钙或氯化钡或乳酸钙200克置于玻璃器皿内，边搅拌边加入注射用水 4000ml，磁力搅拌至钙全部溶解后加入IOOOml无水乙醇，得含无水乙醇固化溶液；⑥保存溶液用购置的供注射用的大豆油(或供注射用的茶油、玉米油、花生油、菜籽油、棉籽油等)或液体石蜡为保存溶液；⑦配制混合溶液将上述制备的海藻酸钠溶液和莫西沙星溶液搅拌均勻得混合溶液；4、微球制作用无菌注射器吸取上述混合液，通过高压静电多头微球液滴发生装置滴入上述固化液溶液中，根据需要制得粒径范围不同大小的微球或微胶珠，所得海藻酸钠交联莫西沙星的微球或微胶珠沉入容器下面。所述高压静电多头微球发生仪包括高压静电发生装置，推进泵，喷射头，无菌容器，正负电极，各种型号的无菌注射器，升降装置。所述高压静电多头发生仪上每组有正负两极，所述推进泵与无菌注射器和喷射头相连，所述正极与喷射头相连，所述负极与浸在所述固化液中的不锈钢钢丝相连接，所述不锈钢钢丝与无菌容器相连，所述不锈钢钢丝与无菌容器下方有调节距离的升降装置。所述储存在保存液中的微球或微胶珠的粒径分别为50 100 μ m、50 150 μ m、 50 200 μ m、100 300 μ m、150 450 μ m、300 500 μ m、500 700 μ m、700 900 μ m 或 900 1250μπι。将上述容器的上层溶液倾析后，用生理盐水冲洗后，即时使用；将上述所得微球的上层溶液倾析，所得含莫西沙星抗结核药物的海藻酸钠微球经干燥后(用冷冻干燥或烘箱干燥法制得干球)，得粉末状颗粒；所述粉末状微粒的粒径范围为 10 50 μ m、25 50 μ m、50 100 μ m、100 350 μ m、300 550 μ m 或 500 750 μ m ； 密闭保存，使用前用生理盐水浸泡数分钟还原成湿球。采用介入放射或支气管镜介入的方法，治疗肺结核患者，将导管插入靶器官段开口，在X线监视下引入导丝，当导管嵌入血管腔后行动脉造影，根据造影所见，连续摄片证实，固定导管前端，退出导丝，保留导管，选用上述海藻酸钠交联的莫西沙星微球的适当粒径范围；将海藻酸钠交联莫西沙星微球(湿球)，用生理盐水冲洗微球三遍，一般用500 700 μ m的微球效果更好，再加入适量的造影剂混均，透视下经导管缓慢注入病灶部位，直到造影剂流速明显减慢时，即完成栓塞。再次行动脉造影判定栓塞效果。实施例2 制备海藻酸钠交联莫西沙星抗结核微球血管栓塞剂1、玻璃器皿的处理将清洗干净的玻璃器皿凉干，放在高温烤箱内烘烤(除菌去热源)待用；2、微球制备仪的选择选用制球可控，大小均勻，操作简便，产量高，易大量生产的高压静电多头微球发生仪。3、各种试剂的配制方法①制备海藻酸钠溶液称取10克海藻酸钠，置于玻璃器皿内，边搅拌边加入生理盐水或注射用水500ml磁力搅拌至海藻酸钠全部溶解，得海藻酸钠溶液；②配制吸附剂将人血白蛋白(或牛血清白蛋白)按比例0.1 10% (质量体积百分比)，用注射用水溶解；得吸附剂，即白蛋白溶液；③配制抗结核药物莫西沙星药液称取14克市售莫西沙星，置于上述玻璃器皿内，用0. 1 10% (质量体积百分比) 的人血白蛋白或牛血清白蛋白溶液50ml搅拌溶解，得抗结核药物莫西沙星溶液；④配制明胶强化溶液称取沈克的明胶置于玻璃器皿内，边搅拌边加入生理盐水或注射用水500ml，磁力搅拌至明胶全部溶解，得明胶强化溶液；⑤配制含无水乙醇固化溶液称取氯化钙或氯化钡或乳酸钙200克置于玻璃器皿内，边搅拌边加入注射用水 4000ml，磁力搅拌至钙全部溶解后加入IOOOml无水乙醇，得含无水乙醇固化溶液；⑥保存溶液用购置的供注射用的大豆油(或供注射用的茶油、玉米油、花生油、菜籽油、棉籽油等)或液体石蜡为保存溶液；⑦配制混合溶液将上述制备的海藻酸钠溶液和配制的抗结核药物莫西沙星溶液搅拌均勻得混合溶液；4、微球制作用无菌注射器吸取上述混合液，通过高压静电多头微球液滴发生装置滴入上述固化液溶液中，根据需要制得粒径范围不同大小的微球或微胶珠，所得海藻酸钠交联莫西沙星的微球或微胶珠沉入容器下面。所述高压静电多头微球发生仪包括高压静电发生装置，推进泵，喷射头，无菌容器，正负电极，各种型号的无菌注射器，升降装置。所述高压静电多头发生仪上每组有正负两极，所述推进泵与无菌注射器和喷射头相连，所述正极与喷射头相连，所述负极与浸在所述固化液中的不锈钢钢丝相连接，所述不锈钢钢丝与无菌容器相连，所述不锈钢钢丝与无菌容器下方有调节距离的升降装置。所述储存在保存液中的微球或微胶珠的粒径分别为50 100 μ m、50 150 μ m、 50 200 μ m、100 300 μ m、150 450 μ m、300 500 μ m、500 700 μ m、700 900 μ m 或 900 1250μπι。将上述容器的上层溶液倾析后，用生理盐水冲洗后，即时使用；将上述所得微球的上层溶液倾析，所得含莫西沙星抗结核药物的海藻酸钠微球经干燥后(用冷冻干燥或烘箱干燥法制得干球)，得粉末状颗粒；所述粉末状微粒的粒径范围为 10 50 μ m、25 50 μ m 或 50 100 μ m ； 100 350 μ m、300 550 μ m 或 500 750 μ m ； 密闭保存，使用前用生理盐水浸泡数分钟还原成湿球。采用介入放射或支气管镜介入的方法，治疗肺结核空洞患者，将导管插入靶器官段开口，在X线监视下引入导丝，当导管嵌入血管腔后行动脉造影，根据造影所见，连续摄片证实，固定导管前端，退出导丝，保留导管，选用上述海藻酸钠交联的莫西沙星微球的适当粒径范围；将海藻酸钠交联莫西沙星微球(湿球)，用生理盐水冲洗微球三遍，一般用700 900 μ m的微球效果更好，再加入适量的造影剂混均，透视下经导管缓慢注入病灶部位，直到造影剂流速明显减慢时，即完成栓塞。再次行动脉造影判定栓塞效果。临床实验结果显示，本发明药物微球用于栓塞末梢小动脉血管，栓塞后不会产生潜在侧支循环血管两端的压力差，不易形成继发性的侧支循环，并能将药物运送到靶器官和靶细胞，应用后可以在病变部位高度集中，正常部位只有最少的药物，提高了治疗效果， 减少全身性的毒副作用，有效地切断了结核部位的主要血供，并阻断了血流对药物的冲刷作用，延长了药物作用的持续时间，达到治疗目的。实施例3 制备海藻酸钠交联莫西沙星抗结核微球血管栓塞剂1、玻璃器皿的处理将清洗干净的玻璃器皿凉干，放在高温烤箱内烘烤(除菌去热源)待用；2、微球制备仪的选择选用制球可控，大小均勻，操作简便，产量高，易大量生产的高压静电多头微球发生仪。3、各种试剂的配制方法①制备海藻酸钠溶液称取15克海藻酸钠，置于玻璃器皿内，边搅拌边加入生理盐水或注射用水500ml 磁力搅拌至海藻酸钠全部溶解，得海藻酸钠溶液；②配制吸附剂将人血白蛋白(或牛血清白蛋白)按比例0.1 10% (质量体积百分比)，用注射用水溶解；得吸附剂，即白蛋白溶液；③配制抗结核药物莫西沙星药液称取10克市售莫西沙星，置于上述玻璃器皿内，用0. 1 10 % (质量体积百分比) 的人血白蛋白或牛血清白蛋白溶液50ml搅拌溶解，得抗结核药物莫西沙星溶液；④配制明胶强化溶液称取20克的明胶置于玻璃器皿内，边搅拌边加入生理盐水或注射用水500ml，磁力搅拌至明胶全部溶解，得明胶强化溶液；⑤配制含无水乙醇固化溶液称取氯化钙或氯化钡或乳酸钙200克置于玻璃器皿内，边搅拌边加入注射用水 4000ml，磁力搅拌至钙全部溶解后加入IOOOml无水乙醇，得含无水乙醇固化溶液；⑥保存溶液用购置的供注射用的大豆油(或供注射用的茶油、玉米油、花生油、菜籽油、棉籽油等)或液体石蜡为保存溶液；⑦配制混合溶液将上述制备的海藻酸钠溶液和配制的抗结核药物莫西沙星溶液搅拌均勻得混合溶液；4、微球制作用无菌注射器吸取上述混合液，通过高压静电多头微球液滴发生装置滴入上述固化液溶液中，根据需要制得粒径范围不同大小的微球或微胶珠，所得海藻酸钠交联莫西沙星的微球或微胶珠沉入容器下面。
所述高压静电多头微球发生仪包括高压静电发生装置，推进泵，喷射头，无菌容器，正负电极，各种型号的无菌注射器，升降装置。所述高压静电多头发生仪上每组有正负两极，所述推进泵与无菌注射器和喷射头相连，所述正极与喷射头相连，所述负极与浸在所述固化液中的不锈钢钢丝相连接，所述不锈钢钢丝与无菌容器相连，所述不锈钢钢丝与无菌容器下方有调节距离的升降装置。所述储存在保存液中的微球或微胶珠的粒径分别为50 100 μ m、50 150 μ m、 50 200 μ m、100 300 μ m、150 450 μ m、300 500 μ m、500 700 μ m、700 900 μ m 或 900 1250μπι。将上述容器的上层溶液倾析后，用生理盐水冲洗后，即时使用；将上述所得微球的上层溶液倾析，所得含莫西沙星抗结核药物的海藻酸钠微球经干燥后(用冷冻干燥或烘箱干燥法制得干球)，得粉末状颗粒；所述粉末状微粒的粒径范围为 10 50μ 、25 50μπι或 50 ΙΟΟμ ;100 350μ 、300 550μπι或 500 750μ ； 密闭保存，使用前用生理盐水浸泡数分钟还原成湿球。采用介入放射或支气管镜介入的方法，治疗肺结核大咯血患者，将导管插入靶器官供血动脉，行动脉造影，根据造影所见，选用上述含莫西沙星的海藻酸钠微球的适当粒径范围。将海藻酸钠交联莫西沙星微球(湿球)，用生理盐水洗微球三遍，一般用500 700 μ m或700 900 μ m的微球效果更好，再加入适量的造影剂混均，透视下经导管缓慢注入病灶部位，直到造影剂流速明显减慢时，即完成栓塞。再次行动脉造影判定栓塞效果。临床实验结果显示，本发明采用的溶剂安全有效，将导管插入靶血管，造影后用注射器将带药微球和造影剂混合，缓缓注入导管不凝聚，不堵管。所述药物微球粒径合适 (一般用500 700 μ m或700 900 μ m的微球效果更好)，生物相容性好，对人体无毒无害，无免疫原性，对所载药物具有亲和力等优点。毒副作用小，药物浓度大，利用率高。实施例4 制备海藻酸钠交联莫西沙星抗结核微球血管栓塞剂1、玻璃器皿的处理将清洗干净的玻璃器皿凉干，放在高温烤箱内烘烤(除菌去热源)待用；2、微球制备仪的选择选用制球可控，大小均勻，操作简便，产量高，易大量生产的高压静电多头微球发生仪。3、各种试剂的配制方法①制备海藻酸钠溶液称取20克海藻酸钠，置于玻璃器皿内，边搅拌边加入生理盐水或注射用水500ml 磁力搅拌至海藻酸钠全部溶解，得海藻酸钠溶液；②配制吸附剂将人血白蛋白(或牛血清白蛋白)按比例0.1 10% (质量体积百分比)，用注射用水溶解；得吸附剂，即白蛋白溶液；③配制抗结核药物莫西沙星药液称取22克市售莫西沙星，置于上述玻璃器皿内，用0. 1 10 % (质量体积百分比) 的人血白蛋白或牛血清白蛋白溶液50ml搅拌溶解，得抗结核药物莫西沙星溶液；④配制明胶强化溶液称取22克的明胶置于玻璃器皿内，边搅拌边加入生理盐水或注射用水500ml，磁力搅拌至明胶全部溶解，得明胶强化溶液；⑤配制含无水乙醇固化溶液称取氯化钙或氯化钡或乳酸钙200克置于玻璃器皿内，边搅拌边加入注射用水 4000ml，磁力搅拌至钙全部溶解后加入IOOOml无水乙醇，得含无水乙醇固化溶液；⑥保存溶液用购置的供注射用的大豆油(或供注射用的茶油、玉米油、花生油、菜籽油、棉籽油等)或液体石蜡为保存溶液；⑦配制混合溶液将上述制备的海藻酸钠溶液和配制的抗结核药物莫西沙星溶液搅拌均勻得混合溶液；4、微球制作用无菌注射器吸取上述混合液，通过高压静电多头微球液滴发生装置滴入上述固化液溶液中，根据需要制得粒径范围不同大小的微球或微胶珠，所得海藻酸钠交联莫西沙星的微球或微胶珠沉入容器下面。所述高压静电多头微球发生仪包括高压静电发生装置，推进泵，喷射头，无菌容器，正负电极，各种型号的无菌注射器，升降装置。所述高压静电多头发生仪上每组有正负两极，所述推进泵与无菌注射器和喷射头相连，所述正极与喷射头相连，所述负极与浸在所述固化液中的不锈钢钢丝相连接，所述不锈钢钢丝与无菌容器相连，所述不锈钢钢丝与无菌容器下方有调节距离的升降装置。所述储存在保存液中的微球或微胶珠的粒径分别为50 100 μ m、50 150 μ m、 50 200 μ m、100 300 μ m、150 450 μ m、300 500 μ m、500 700 μ m、700 900 μ m 或 900 1250μπι。将上述容器的上层溶液倾析后，用生理盐水冲洗后，即时使用；将上述所得微球的上层溶液倾析，所得含莫西沙星抗结核药物的海藻酸钠微球经干燥后(用冷冻干燥或烘箱干燥法制得干球)，得粉末状颗粒；所述粉末状微粒的粒径范围为 10 50μ 、25 50μπι或 50 ΙΟΟμ ;100 350μ 、300 550μπι或 500 750μ ； 密闭保存，使用前用生理盐水浸泡数分钟还原成湿球。采用介入放射或支气管镜介入的方法，治疗肺外其它结核的患者，如肾结核、甲状腺结核、颈淋巴结核、生殖器结核(输卵管，子宫内膜、睾丸、附睾)、心包结核、胸壁结核、 胸膜结核和体内其他结核等方面的应用。将导管插入靶器官供血动脉，行动脉造影，根据造影所见，选用上述含莫西沙星的海藻酸钠微球的适当粒径范围。将海藻酸钠交联莫西沙星微球(湿球)，用生理盐水洗微球三遍，(一般用300 500 μ m的微球效果更好)，再加入适量的造影剂混均，透视下经导管缓慢注入病灶部位，直到造影剂流速明显减慢时，即完成栓塞。再次行动脉造影判定栓塞效果。临床实验结果显示，本发明采用的溶剂安全有效，增加局部药物浓度的同时减少用药的总量，降低全身毒副作用的发生；生物降解带药微球植入结核后，药物的释放可接近零级释放速率，保持药物浓度平稳，不会产生突释效应，并且微球不需再次手术取出。本领域普通技术人员可以理解以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
权利要求
1.一种海藻酸钠交联的莫西沙星缓释微球，其特征在于所述的微球包括药物载体、吸附剂、抗结核药物活性成分、加强剂和固化剂，所述载体为海藻酸钠，吸附剂为人血白蛋白或牛血清白蛋白，抗结核药物活性成分为莫西沙星，加强剂为明胶或透明质酸，二价金属阳离子钙盐或钡盐为固化剂。
2.根据权利要求1所述的缓释微球，其特征在于所述微球储存在作为保存液的植物油或液体石赌中时，微球粒径规格为50 100 μ m、50 150 μ m、50 200 μ m、100 300 μ m、 150 450 μ m、300 500 μ m、500 700 μ m、700 900 μ m 或 900 1250 μ m。
3.根据权利要求1所述的缓释微球，其特征在于所述微球是干燥的粉末状颗粒，其粒径范围为 10 50μ 、25 50μ 、50 100 μ m、100 350μπι、300 550 μ m 或 500 750 μ m0
4.根据权利要求1所述的缓释微球，其特征在于海藻酸钠与莫西沙星的重量比为1 75 0. 25 12. 5。
5.一种制备根据权利要求1所述缓释微球的方法，其特征是包括下述步骤，1)将海藻酸钠用生理盐水或注射用水按质量体积百分比为0.5 15%比例溶解，得海藻酸钠溶液，即，载体溶液；2)将人血白蛋白或牛血清白蛋白用注射用水按质量体积百分比0.1 10%比例溶解， 得白蛋白溶液，即，吸附剂；3)将莫西沙星用步骤2)配制的吸附剂研磨搅拌溶解并吸附，得莫西沙星溶液，即，药物溶液，其中莫西沙星与吸附剂的用量按质量体积百分比为1. 6 4% ；4)将二价金属阳离子钙盐或钡盐配制成质量体积百分比1 15%浓度的水溶液，得固化液；5)将所得固化液中加入无水乙醇和注射用水，固化液无水乙醇注射用水的体积比为2 1 2，得含有无水乙醇的固化液；6)取明胶或透明质酸用注射用水溶解，得质量体积百分比0.1-10%的明胶或透明质酸溶液，即，加强溶液；7)将药物溶液和载体溶液按比例合并，它们的体积比为1 1 30，磁力搅拌均勻， 得制备溶液；8)将上述所得制备溶液通过高压静电多头微球发生装置，喷雾微滴，分散于固化液中， 待沉淀完全后去除上清液，得含莫西沙星的海藻酸钠交联的微球或微胶珠；9)将上述制得的微球或微胶珠放入加强溶液中，搅拌，弃去上清液，得带药微球或微胶珠，即，海藻酸钠交联的莫西沙星缓释微球。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于步骤9)得到的带药微球或微胶珠保存在植物油或液体石蜡油中。
7.根据权利要求5所述的方法，其中所述的阳离子钙盐选自氯化钙和乳酸钙，所述钡盐为氯化钡。
8.根据权利要求5-7任一项所述的方法，其中步骤8)所用的高压静电多头微球发生装置包括高压静电发生装置；推进泵；喷射头；无菌容器；正负电极；各种型号的无菌注射器；升降装置。所述高压静电发生装置上有多个正负电极；所述推进泵与无菌注射器和喷射头相连；所述正极与喷射头相连；所述负极与浸在所述固化液中的不锈钢钢丝相连接；所述不锈钢钢丝与无菌容器相连；所述不锈钢钢丝与无菌容器下方有调节距离的升降装置。
9.一种血管靶向栓塞剂，其特征在于含有根据权利要求1-4任一项所述的缓释微球。
10.根据权利要求1-4任一项所述的微球在制备血管靶向栓塞剂中的用途。
11.根据权利要求10所述的用途，其中所述血管靶向栓塞剂用于治疗结核病。
12.根据权利要求10所述的用途，其中所述血管靶向栓塞剂用于治疗肾结核、甲状腺结核、颈淋巴结核、心包结核、胸壁结核和/或胸膜结核。
13.根据权利要求10所述的用途，其中所述血管靶向栓塞剂用于治疗输卵管结核、子宫内膜结核、睾丸结核或附睾结核。
14.根据权利要求10所述的用途，其中所述血管靶向栓塞剂用于介入栓塞治疗肺结核、肺结核大咯血或肺结核空洞。
全文摘要
一种以海藻酸钠为载体交联的含莫西沙星抗结核有效成分的缓释微球和其血管靶向栓塞剂、所述微球的其制备方法和所述微球在制备药物中的用途。所述微球包括药物载体、吸附剂、抗结核药物活性成分、加强剂和固化剂，所述载体为海藻酸钠，吸附剂为人血白蛋白或牛血清白蛋白，抗结核药物活性成分为莫西沙星，加强剂为明胶或透明质酸，二价金属阳核、甲状腺结核、颈淋巴结核、生殖器(输卵管，子宫内膜、睾丸、附睾离子钙盐或钡盐为固化剂。该栓塞剂用于介入栓塞治疗肺结核、肺结核大咯血、肺结核空洞、肾结)结核、心包结核、胸壁结核、胸膜结核。
文档编号A61K47/48GK102309458SQ20101022244
公开日2012年1月11日 申请日期2010年7月9日 优先权日2010年7月9日
发明者李新建, 洪宏 申请人:北京圣医耀科技发展有限责任公司