专利名称：紫草素及其组合物的应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及紫草素及其组合物的应用。
背景技术：
随着癌症发病率的不断增高，化疗药物在临床的应用也越来越广泛。化疗是临床 治疗各种癌症、白血病、免疫性疾病的手段之一，化疗药物外渗是一种比较常见的并发症， 多数化疗药物对局部组织均有较强的刺激作用，可引起静脉炎，有的化疗药物如长春新碱 等可引起神经毒性损害。化疗药物静脉注射外渗后，轻者可引起周围组织轻度红斑、局部疼 痛肿胀、灼热，重者可引起周围组织坏死、皮肤溃疡及深部结构如肌腱和关节损伤。药物外 渗后采取积极的处理措施，对防止局部组织坏死及溃疡形成、防止感染并发症的发生，减轻 患者痛苦有重要意义。据统计，化疗的渗漏率为0.1% 0.6%，而实际发生率则更高。化 疗药物外渗的发生原因主要是化疗药物本身的刺激性及患者血管质量较差。由于化疗药物 刺激血管壁，引起血管通透性增加，组织炎性渗出，血管运动障碍(挛缩或扩张)等原因，肿 瘤患者常在化疗后发生静脉炎，轻者表现为局部红肿胀痛，血管变硬或成条索状。严重者可 形成水泡，溃疡，甚至组织坏死。化疗药物渗漏损伤血管及局部组织属中医“疮疡”范畴。中医认为，本病多责之于 局部脉络受损，血溢肌肤或血热内蕴而出现局部发红；气血不畅，凝聚肌肤，津液输布受阻 则肿胀；瘀血内蕴，日久化热则局部发热；脉络血行不畅，瘀血阻滞，不通则痛，而血瘀则贯 穿其始终。总之，本病症的发生乃因外邪入侵，热毒蕴结，气血瘀滞而成，治宜凉血解毒、活 血通络、化瘀止痛。紫草(RadixArnebiae)为紫草科植物新疆紫草 Arnebia educhroma (Royle) Johnst> 紫草 Lithospermum erythrorhizon Sieb.et Zucc.或内蒙紫草 Arnebia guttataBimge的干燥根。紫草又称紫草茸、山紫草、紫丹、紫草根、红石根。主产于新 疆、西藏、甘肃、黑龙江、吉林、辽宁、河北、河南、广西等地。紫草性味甘、咸、寒，归心、肝 经。功能凉血，活血，解毒透疹。主治血热毒盛，斑疹紫黑，麻疹不透，疮疡，湿疹，水火 烫伤等。紫草主要含有紫草素(shikonin)、乙酰紫草素(acetylshikonin), β -羟基异 戊酰紫草素(β-hydro-xyisovalerylshikonin)、β , β，_二甲基丙烯酰紫草素(β， β ‘ -dimethylacrylshikonin)等。其中，紫草素分子量为288. 30，分子式C16H16O5,别名为5，8_二羟基-2-[ (IR)-I-羟 基-4-甲基戊-3-烯基]萘-1，4-二酮，结构如图1所示，为紫褐色针状结晶，熔点147°C， 旋光度aD2° = +135° (苯)。溶于苯乙醚、丙酮、氯仿、甲醇、乙醇、甘油、动植物油和碱性水 溶液，不溶于水。色调随PH值变化，pH值4 6呈红色，pH值8呈紫色，pH值10 12间 则呈蓝色。耐光、耐热、耐氧化性好，对还原剂量不稳定，遇铁离子呈深紫色。本品具有一定 的抗癌、抗炎、抗菌等作用。临床用于治疗急、慢性肝炎、肝硬化(腹水)。皮肤科用于治疗 扁平疣、银屑病，局部应用治疗烧伤和促进伤口愈合。滴眼剂用于治疗单纯疱疹病毒性角膜 炎，对上皮型树枝状和浅实质层树枝状角膜炎有一定疗效；油剂用于治疗婴儿皮炎、湿疹、阴道炎、子宫颈炎等；含有紫草素的牙膏可防治牙龋和牙龈炎；此外紫草素亦可用于药物、 化妆品及食品的着色剂。但紫草素单体在防治化疗药物渗漏损伤血管及局部组织的作用与 功效，尚未见文献报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种紫草素的医药新用途，具体而言，是提供紫草素在制 备防治/治疗化疗药物渗漏引起的血管及局部组织损伤的药物中的应用。本发明的另一目的在于提供一种紫草素组合物的医药新用途，具体而言，是提供 紫草素组合物在制备防治/治疗化疗药物渗漏引起的血管及局部组织损伤的药物中的应用。本发明应用紫草素对采用阿霉素等造成的大鼠化疗药物渗漏损伤模型进行处理， 应用紫草素对阿霉素等造成的化疗药物损伤患者进行处理，证实紫草素具有显著的治疗作 用，因此紫草素及其组合物均能够用于制备具有防治因化疗药物渗漏引起的血管及局部组 织损伤作用的药物。
图1为紫草素的结构式。图2为大鼠背部状态图片，其中al和a2为未处理组7天和14天时的图片，bl和 b2为大豆油组7天和14天时的图片，cl和c2为喜辽妥组7天和14天时的图片，dl和d2 为紫草素组7天和14天时的图片。图3为HE染色显微镜图片，其中al和a2为未处理组3天和7天时的图片，bl和 b2为大豆油组3天和7天时的图片，cl和c2为喜辽妥组3天和7天时的图片，dl和d2为 紫草素组3天和7天时的图片。
具体实施例方式以下结合具体实施例，对本发明做进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本 发明而非用于限制本发明的范围。本发明所述紫草素可从紫草根中提取得来，也可应用现 有技术中已公开的人工合成的方法获得。在以下实施例中以是从紫草根中提取得来的紫草 素为例，进行了系列在体药理和临床研究，为开拓紫草素防治化疗药物渗漏损伤血管及局 部组织的新用途提供了科学依据。本领域人员可知，应用现有技术中已公开的人工合成的 方法获得的紫草素也具有相同的用途。实施例1紫草素的制备收集干燥紫草根5kg，粉碎，以95%乙醇超声提取3次，提取液合并，减压浓缩，用 石油醚超声脱脂后，再用乙酸乙酯萃取，过滤，乙酸乙酯萃取液减压，浓缩，干燥，得粗提物， 乙酸乙酯粗提物经硅胶柱层析1400g(粒度200-300目，IOcmX20cm)，石油醚-乙酸乙酯 (1 9 1 5)梯度洗脱，用TLC跟踪检测、合并，第8份馏份减压、浓缩至干，再经甲醇淋 洗，以除去杂质。真空干燥后得紫草素粉末，经HPLC检测，纯度大于95%，用于随后的临床 和在体药理实验。实施例2紫草素对大鼠化疗药物渗漏损伤的防治作用
4
在此实施例中，实验动物为3月龄SPF级SD雄性大鼠60只，体质量180_200g，由 第二军医大学动物实验中心提供，合格证号为SCXK[沪2007-0003]。主要药物为注射用 盐酸多柔比星(简称阿霉素，深圳万乐药液有限公司，国药准字H44024359)，多磺酸粘多 糖乳膏(简称喜辽妥，德国三共药业，批准文号H20030014)，大豆油(江西金海棠药用油有 限公司，批准文号赣食药准字20050003)，紫草素(从紫草根中提取得到)，生理盐水，10% 甲醛。药物配制方法为10mg阿霉素用6ml生理盐水稀释成1. 67mg/ml溶液备用，用大豆 油将紫草素稀释成4mg/ml混悬液，4°C保存备用。2.1造模与分组采用剪刀和电推剪将SD大鼠脱毛后，于每只大鼠左后背部皮下注射 0. 4ml(1.67mg/ml)阿霉素，制成化疗药物渗漏损伤动物模型。编号后按随机数字表法将60 只SD大鼠随机分为4组，即未处理组、大豆油辅料组、紫草素实验组和喜辽妥阳性对照组， 每组15只。2. 2干预措施造模30min后进行相应干预，除未处理组不做任何处理外，其他组用相应药物在 损伤处涂擦。外敷面积直径为15 20mm，均勻涂满为度。每天外敷2次，连续用药3周。2. 3 观察每次换药前观察并记录每组大鼠局部组织的皮肤颜色变化，肿胀或瘀血消退时 间，用油标卡尺测量局部隆起面积，算出各组肿胀消退指数(消退指数=局部隆起面积/隆 起完全消退所需时间，肿胀面积=^ /4X长径X短径)。并测量各组大鼠皮下硬结和溃疡 面积大小(长径和短径)，选择性拍照，结果如图2所示。另外，于换药的第1、3、5、7天每组 各取1只处死，分别以穿刺点及距穿刺点Icm处为中心，切下0. 25cm的皮肤组织，10%甲醛 固定24h，常规病理制片，HE染色，光镜组织学观察并分析炎细胞浸润、水肿、坏死、出血、血 栓以及纤维组织增生等病理表现，结果如图3所示。病理程度分轻、中、重3级。轻度弥散 性炎细胞浸润，表皮完好；中度组织水肿，散在出血，明显炎性细胞浸润；重度溃疡，组织 坏死，出血。大体观察主要是皮损浅红或发白、深红、水肿以及溃疡。3. 4统计学分析采用SPSS 13. Ofor Windows软件进行统计学分析，所有计数资料以均数士标准 差(χ 士S)表示，组间比较采用配对t检验。P < 0. 05表示差异有统计学意义。结果如表1 表3所示。表1肿胀消退指数 *P < 0. 05，vs 未处理组.
表2瘀斑发生率
组别标本数(只)瘀斑发生数(只)瘀斑发生率(％)紫草素组11436.36喜辽妥组11872.73大豆油组11763.64未处理组11981.82
表3 I
S痕脱落率组别标本数(只)瘢痕脱落数(只)瘢痕脱落率(％)紫草素组44100.00喜辽妥组8562.50大豆油组7457.14未处理组9444.44由上述图表可见，未处理组大鼠背部皮损深红、水肿、溃疡明显，且水肿消退时间 明显延长，瘢痕发生率高但其脱落率低，病理切片显示明显溃疡、组织坏死、严重出血。大豆 油组大鼠背部皮损深红、水肿、溃疡，且水肿消退时间较长，瘢痕发生率高而其脱落率相对 较低，病理切片显示组织水肿，散在出血，炎性细胞浸润，部分溃疡和组织坏死。喜辽妥组大 鼠背部皮损深红、水肿、溃疡，且水肿消退时间明显延长，瘢痕发生率高而其脱落率低，病理 切片显示组织水肿，散在出血，明显炎性细胞浸润，部分溃疡、组织坏死。紫草素组大鼠背部 皮损浅红、轻度水肿、溃疡较小，且水肿消退时间较短，瘢痕发生率低而其脱落率较高，病理 切片显示弥散性炎细胞浸润，表皮完好。综上所述，紫草素具有凉血解毒、活血通络、化瘀止痛等作用，对化疗药物渗漏引 起局部组织损伤具有很好的治疗作用。实施例3紫草素对患者因化疗造成局部组织损伤的作用中国人民解放军第二军医大学第一附属医院经化疗患者，因化疗药物渗漏引起 血管损伤引发静脉炎和局部组织损伤，共122人，随机分组，其中62人为喜辽妥对照组， 将喜辽妥均勻涂擦在损伤处，60人为紫草素治疗组，将紫草素溶于适宜基质均勻涂擦在损 伤处。每天给药一次，并利用肉眼观察和游标卡尺测量损伤部位变化，采用数码拍照结合 Image-Pro Plus 5. 0图像分析软件进行分析，结果如表4所示。表4紫草素与喜辽妥在治疗因化疗造成局部组织损伤的患者中的作用比较
6组别η痊愈好转治愈率(％)
喜辽妥对照组62323051.61紫草素治疗组6056493两组疗效进行X2检验，P <0.01，差异有统计学意义。从表4结果可见，紫草素对化疗性静脉炎及局部渗漏损伤有显著地治疗作用，并 较现行使用最广泛的喜辽妥效果更为明显，表明该化合物具有治疗化疗药物渗漏损伤作用。本发明通过在体药理研究和临床研究发现并证明紫草素具有缩短化疗药物渗漏 造成的局部组织水肿消退时间，促进局部组织创口愈合，防止瘢痕形成，治疗化疗药物渗漏 损伤血管及局部组织的作用，为临床指导紫草素治疗化疗药物渗漏损伤血管及局部组织更 加安全、合理使用提供一定的实验依据，同时也为紫草素进一步开发成化疗药物渗漏损伤 治疗用药提供实验基础，证实可选择紫草素来制备具有防治因化疗药物渗漏引起的血管及 局部组织损伤作用的药物，紫草素相应的组合物也可以用来制备具有防治因化疗药物渗漏 引起的血管及局部组织损伤作用的药物，所述紫草素组合物含有紫草素以及药学上可接受 的载体或赋形剂、如溶剂、稀释剂等，紫草素与一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂混 合，从而形成紫草素组合物。紫草素制备简便，成本低廉，用其制备防治化疗药物渗漏损伤 血管及局部组织的药物，市场前景广阔，蕴藏着巨大的社会和经济效益。
权利要求
一种紫草素的应用，其特征在于，制备具有防治因化疗药物渗漏引起的血管及局部组织损伤作用的药物。
2.一种紫草素组合物的应用，其特征在于，制备具有防治因化疗药物渗漏引起的血管 及局部组织损伤作用的药物。
全文摘要
本发明公开了一种紫草素及其组合物的应用，用于制备具有防治因化疗药物渗漏引起的血管及局部组织损伤作用的药物。经大鼠在体药理研究和临床研究表明紫草素具有显著地治疗化疗药物渗漏对血管及局部组织损伤并促进愈合作用，可明显缩短局部组织肿胀消退时间，加速局部组织损伤愈合过程，表明紫草素及其组合物可以用于制备具有防治因化疗药物渗漏引起的血管及局部组织损伤作用的药物。
文档编号A61P43/00GK101904831SQ201010247778
公开日2010年12月8日 申请日期2010年8月6日 优先权日2010年8月6日
发明者凌昌全, 杨延龙, 苏永华 申请人:中国人民解放军第二军医大学