专利名称：水溶性还原型辅酶q10组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种辅酶QlO组合物及其制备方法。
背景技术：
辅酶Q是在从细菌到哺乳动物的生物体中广泛分布的必需成分。辅酶Q的基 本结构是含有类异戊二烯侧链的2，3-二甲氧基-5-甲基苯醌核，在人体中的辅酶Q含有 十个这样的基本结构，即辅酶Q10，1957年首次由Frederrick从牛心肌中分离得到。已 知在人体中，辅酶Q的侧链具有10个重复结构即辅酶QlO为主要成分。辅酶QlO (分子式 C59H9tlO4)是作为生物体的细胞中的线粒体的电子传递体系构成成分存在的生理学成分，在 生物体内反复进行氧化和还原而在电子传递体系中作为传递成分而起作用。已知辅酶QlO具有氧化型和还原型两种，在生物体内通常约40-90%以还原型存 在。与氧化型辅酶QlO相比，还原型辅酶QlO显示高水平的口服可吸收性。还原型辅酶QlO是脂溶性物质，难溶于水，还原型辅酶QlO对光、热、空气不稳定在 空气暴露极短时间即被氧化，变成辅酶Q10，生物活性大大降低。针对这种情况，近年已经开 发出多种提高口服给药生物利用度及注射给药技术的方法，如包合技术、自乳化技术、脂质 体等。包合技术是解决还原型辅酶QlO溶解度和提高其稳定的一个较好方法。CN03802446. 2公开了一种还原型辅酶QlO的稳定方法和组合物，其方法是将还 原型辅酶Q10、油脂(其中橄榄油除外)和/或多元醇制成实质上不阻碍还原型辅酶QlO 的稳定化的组合物。另外，还制成含有还原型辅酶Q10、聚甘油脂肪酸酯与油脂和/或多元 醇的组合物。另外CN02813705. 1 和 CN02824009. X02824009. X 也公开了还原型辅酶 QlO 的稳定 方法，其方法是将氧化型辅酶QlO在一定条件下还原成还原型辅酶QlO使其稳定。然而，以上专利均未报道有如何制备稳定的水溶性还原型辅酶Q10。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种水溶性还原型辅酶QlO组合物，它的溶解度高、有 效物质含量高、稳定性高、成本低。本发明的目的之二是提供一种水溶性还原型辅酶QlO组合物的制备方法。本发明的技术解决方案是
一种水溶性还原型辅酶QlO组合物，包括原料辅酶Q10、水溶性载体和乳化剂，其特征 在于各原料的质量份组成为还原型辅酶QlO 5-15、水溶性载体10-120、乳化剂0.5-40 ； 其中所述的水溶性载体为麦芽糊精、羧甲基纤维素(CMC)、纯胶、可溶性淀粉、乳糖、果 糖、山梨醇、甘露醇、阿拉伯胶、卡拉胶中的一种或几种；
3所述的乳化剂为非离子表面活性剂。固体分散技术是将难溶性药物高度分散在另一种固体载体中的技术，它的优点是 可以增加难溶性药物的溶解度和溶出速率，缺点是固体分散体的分散状态稳定性不高。本 发明采用包合技术与固体分散技术相结合的方法将难溶性的还原型辅酶Q10、水溶性载体 与乳化剂混合制成一种新的固体分散体，它是一种新的物相，即还原型辅酶QlO被分散包 合在水溶性载体中，并通过喷雾干燥获得喷雾粉，即粉状固体，扩大了表面积；另外，本发明 的水溶性载体本身对药物的溶出有促进作用，从而使药物的溶解度大大提高，改善了药物 的吸收和生物利用度。本发明通过水溶性载体与乳化剂材料的选择及配比试验，发现制得的水溶性还原 型辅酶QlO组合物，溶出速度快，无悬浮或沉淀，且不易被氧化成氧化型辅酶，稳定性提高。所述的水溶性还原型辅酶QlO组合物还包括0. 1-2质量份的活性成分，所述的活 性成分为维生素、氨基酸、矿物质、多酚、有机酸、糖类、肽或蛋白质中的一种或几种。所述的乳化剂为多元醇型非离子表面活性剂或聚氧乙烯型非离子表面活性剂。所述的多元醇型非离子表面活性剂为蔗糖脂肪酸酯类、甘油脂肪酸酯类、聚甘油 脂肪酸酯类、吐温类、山梨醇脂肪酸酯类等非离子表面活性剂。所述的聚氧乙烯型非离子表面活性剂为卖泽类、苄泽类、聚氧乙烯硬脂酸酯类、泊 洛沙姆等非离子表面活性剂。更优选地，所述的聚氧乙烯型非离子表面活性剂为聚氧乙烯-40-硬脂酸酯。一种水溶性还原型辅酶QlO组合物的制备方法，用还原型辅酶QlO与乳化剂直接 加热熔融制备或先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂后再与乳化剂混合溶解制备
所述还原型辅酶QlO与乳化剂直接加热熔融制备的方法是按质量份取还原型辅酶 Q10、水溶性载体和乳化剂，溶于相当于水溶性载体10-20倍水中，加热至40-60°C，然后用 剪切分散机或均质机使溶液均一，再喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成品；
所述先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂后再与乳化剂混合溶解制备的方法是按质量 份取还原型辅酶QlO和乳化剂，加入相当于还原型辅酶QlO的10倍量的有机溶剂中，搅拌 成澄清透明溶液作备用液；然后按质量份取水溶性载体，溶于相当于水溶性载体10-20倍 的40-60°C水中，搅拌成澄清溶液，以0. 2-0. 5ml/s的滴加速率加入备用液，然后用均质机 均质两次后，取出喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成品。所述先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂、再与乳化剂混合溶解制备的方法还包括 在搅拌澄清溶液前按质量份加入活性成分。所述的有机溶剂是丙酮、乙酸乙酯或乙醇中的一种或几种。所述喷雾干燥的参数为进风150_190°C，出风70_110°C。按照上述方法得到的水溶性还原型辅酶QlO组合物为乳白色或淡黄色粉状固体。本发明的有益效果是本发明将难溶性的还原型辅酶Q10、水溶性载体(如麦芽糊 精、CMC、纯胶、可溶性淀粉、乳糖、果糖、山梨醇、甘露醇、阿拉伯胶、卡拉胶)、乳化剂(多元醇 型非离子表面活性剂或聚氧乙烯型非离子表面活性剂)混合制成水溶性还原型辅酶QlO组 合物，综合了包合技术与固体分散技术的优点，克服了其缺点，解决了还原型辅酶QlO难溶 性的问题，经过一系列试验证明其具有水溶性且溶解度高；溶出速度快，无悬浮或沉淀，且 不易被还原成还原型辅酶，因此稳定性高；选用的水溶性载体和乳化剂在市面上容易获得，
4成本低；经采用高效液相色谱法测定，其有效物质即还原型辅酶QlO含量高。
具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明不局限于这些实施例。实施例一
采用先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂后再与乳化剂混合溶解的方法制备 取IOg还原型辅酶QlO和20g聚氧乙烯-40-硬脂酸酯，溶解在20ml乙酸乙酯中，搅 拌成澄清透明溶液作备用液；取IOOOml的50°C热水，加入69g纯胶和Ig维C，在氮气气氛 下搅拌溶解使溶液澄清的同时，以0. 35 ml/s的滴加速率加入备用液，用均质机以80MPa、 160MPa均质两次，每次20min后取出，在进风170°C、出风90°C的干燥参数下喷雾干燥，收集 喷雾粉过筛得成品。以下是对所得水溶性还原型辅酶QlO组合物的性能测试水溶性还原型辅酶QlO 组合物含量测定方法主要是采用高效液相色谱法，方法是取适量还原型辅酶QlO组合物， 用甲醇定容至规定浓度后，过滤，取滤液作为供试品溶液，进样，色谱条件C18柱，流动相 为甲醇无水乙醇=1:1，检测波长291nm，外标法定量。1.稳定性试验
氧化型辅酶QlO的最大吸收波长为275士 lnm，还原型辅酶QlO的最大吸收波长为 291 士 1 nm nm。本实验水溶性还原型辅酶QlO组合物在色谱条件(C18柱，流动相为甲醇 无水乙醇=1:1，检测波长275nm)下检测值为0，证明本实验水溶性还原型辅酶QlO组合物 稳定，不会转化成氧化型辅酶Q10。而传统的辅酶QlO的环糊精包合物至少15%转化成氧化 型辅酶Q10。取以往专利制备的辅酶QlO的环糊精包合物、原料还原型辅酶QlO与本实施例的 水溶性还原型辅酶QlO组合物进行影响因素试验及长期稳定性考察。(1)光影响试验
取本实施例组合物(5%)、辅酶QlO的环糊精包合物(5%)、原料还原型辅酶QlO在 4000LX光下放置10天，分别于0天、5天、10天取样测定，结果见表1。表1表明光对辅酶QlO有较大影响。本发明实施例一的水溶性还原型辅酶QlO组 合物稳定性最高，其次是辅酶QlO的环糊精包合物，原料还原型辅酶QlO稳定性最低。(2)高温影响试验
取本实施例组合物、辅酶QlO的环糊精包合物、原料还原型辅酶QlO在60°C下放置 10天，分别于0天、5天、10天取样测定，结果见表2。表2表明高温对原料还原型辅酶QlO影响最大，对实施例一的水溶性还原型辅酶 QlO组合物和辅酶QlO的环糊精包合物影响小。2.溶解度测定分别取本实施例组合物、辅酶QlO的环糊精包合物、原料还原型 辅酶QlO适量，加入到IOml纯水中，超声振荡10分钟，过滤，取滤液为供试液，采用高效液 相法测定，结果表明，本实施例组合物以C59H9tlO4计溶解度为250 μ g/ml，而以往专利制备的 辅酶QlO的环糊精包合物的溶解度为210 μ g/ml，原料还原型辅酶QlO的溶解度为0。3.溶出度测定分别取本实施例组合物、辅酶QlO的环糊精包合物(以C59H9tlO4计
5为10mg)、原料还原型辅酶QlO 10mg，加入到IOml纯水中，超声振荡10分钟，过滤，取滤液
为供试液，采用高效液相法测定，结果见表3。表3表明本实施例组合物溶出度在15min内达到最大值99，较辅酶QlO的环糊精 包合物的溶出度快；而且证明本实施例组合物溶解度最大。4.生物利用度试验
10名健康男性，体重60-80公斤，年龄20-30岁，无肝肾功能及心功能异常，两周内未 服用其他药物，无过敏史，受试者均填写知情志愿书。血浆中辅酶QlO组合物含量测定方 法主要是采用高效液相色谱法，色谱条件C18柱，流动相为无水乙醇水冰乙酸=90:2 0. 7，检测波长275nm。血浆样品处理，于暗室中，取肝素化的血浆适量，加辅酶Q9为内标溶 液(15 μ g/ml )，经处理得供试品溶液。试验采用交叉实验设计，分别服用本实施例水溶性还原型辅酶QlO组合物及辅酶 QlO的环糊精包合物，连续服用5天，采血测定及数据统计，得出本实施例水溶性还原型辅 酶QlO组合物相对生物利用度是辅酶QlO的环糊精包合物的195%，因此证明实施例一的水 溶性还原型辅酶QlO组合物的有效物质含量高。
实施例二
采用还原型辅酶QlO与乳化剂直接加热熔融的方法制备
取IOg还原型辅酶Q10、80g纯胶、30g蔗糖脂肪酸酯和0. 5g维生E，溶于200ml水中， 加热至60°C熔融，然后用均质机以100MPa、180MPa均质两次，每次15min后取出，在进风 170°C、出风90°C的干燥参数下喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成品。所得水溶性还原型辅酶QlO组合物的性能测试方法同实施例一。1.稳定性试验
本实验水溶性还原型辅酶QlO组合物在色谱条件(C18柱，流动相为甲醇无水乙醇 =1 1，检测波长275nm)下检测值为0，证明本实验水溶性还原型辅酶QlO组合物稳定，不会 转化成氧化型辅酶Q10。取以往专利制备的辅酶QlO的环糊精包合物、原料还原型辅酶QlO与本实施例的 水溶性还原型辅酶QlO组合物进行影响因素试验及长期稳定性考察。(1)光影响试验
取本实施例组合物(5%)、辅酶QlO的环糊精包合物(5%)、原料还原型辅酶QlO在 4000LX光下放置10天，分别于O天、5天、10天取样测定，结果见表1。表1表明光对辅酶QlO有较大影响。本发明实施例2的水溶性还原型辅酶QlO组 合物稳定性最高，其次是辅酶QlO的环糊精包合物，原料还原型辅酶QlO稳定性最低。(2)高温影响试验
取本实施例组合物、辅酶QlO的环糊精包合物、原料还原型辅酶QlO在60°C下放置 10天，分别于O天、5天、10天取样测定，结果见表2。表2表明高温对原料还原型辅酶QlO影响最大，对本发明实施例2的水溶性还原 型辅酶QlO组合物和辅酶QlO的环糊精包合物影响小。2.溶解度测定分别取本实施例组合物、辅酶QlO的环糊精包合物、原料还原型 辅酶QlO适量，加入到IOml纯水中，超声振荡10分钟，过滤，取滤液为供试液，采用高效液相法测定，结果表明，本实施例组合物以C59H9tlO4计溶解度为230 μ g/ml，而以往专利制备的 辅酶QlO的环糊精包合物的溶解度为210 μ g/ml，原料还原型辅酶QlO的溶解度为0。3.溶出度测定分别取本实施例组合物、辅酶QlO的环糊精包合物(以C59H9tlO4计 为10mg)、原料还原型辅酶QlO 10mg，加入到IOml纯水中，超声振荡10分钟，过滤，取滤液 为供试液，采用高效液相法测定，结果见表3。表3表明本实施例组合物溶出速度较辅酶QlO的环糊精包合物快，溶解度高。4.生物利用度试验 检测方法同实施例一。试验采用交叉实验设计，分别服用本实施例水溶性还原型辅酶QlO组合物及辅酶 QlO的环糊精包合物，连续服用5天，采血测定及数据统计，得出本实施例水溶性还原型辅 酶QlO组合物相对生物利用度是辅酶QlO的环糊精包合物的190%，因此证明实施例二的水 溶性还原型辅酶QlO组合物的有效物质含量高。
实施例三
采用先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂后再与乳化剂混合溶解的方法制备 取15g还原型辅酶Q10、20g山梨醇脂肪酸酯和20g泊洛沙姆，溶解在150ml乙酸乙酯 中，搅拌成澄清透明溶液作备用液；取3000ml的40°C热水，加入60g乳糖和40g阿拉伯胶， 搅拌溶解使溶液澄清的同时，以0. 5 ml/s的滴加速率加入备用液，用用均质机以70MPa均 质75min后取出，在进风190°C、出风110°C的干燥参数下喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成
P
ΡΠ O所得水溶性还原型辅酶QlO组合物的性能测试方法同实施例一，结果见表1、表2 和表3。表1表明光对辅酶QlO有较大影响。本发明实施例3的水溶性还原型辅酶QlO组 合物稳定性最高，其次是辅酶QlO的环糊精包合物，原料还原型辅酶QlO稳定性最低。表2表明高温对原料还原型辅酶QlO影响最大，对本发明实施例2的水溶性还原 型辅酶QlO组合物和辅酶QlO的环糊精包合物影响小。表3表明本实施例组合物溶出速度较辅酶QlO的环糊精包合物快，溶解度高。反映有效物质含量的生物利用度试验同实施例一，结果表明本实施例水溶性还原 型辅酶QlO组合物相对生物利用度是辅酶QlO的环糊精包合物的185%，因此证明本发明的 水溶性还原型辅酶QlO组合物的有效物质含量高。
实施例四
采用还原型辅酶QlO与乳化剂直接加热熔融的方法制备
取IOg还原型辅酶Q10、30g卡拉胶、30g麦芽糊精和1.5g蛋白质，溶于IOOml水中，加 热至50°C熔融，然后用剪切分散机以2000rpm速度剪切50min后取出，在进风160°C、出风 80°C的干燥参数下喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成品。所得水溶性还原型辅酶QlO组合物的性能测试方法同实施例一，结果见表1、表2 和表3。反映有效物质含量的生物利用度试验同实施例一，结果表明本实施例水溶性还原
7型辅酶QlO组合物相对生物利用度是辅酶QlO的环糊精包合物的180%，因此证明本发明的 水溶性还原型辅酶QlO组合物的有效物质含量高。
实施例五
采用先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂后再与乳化剂混合溶解的方法制备 取IOg还原型辅酶Q10、15g聚甘油脂肪酸酯和15g吐温20，溶解在IOOml丙酮中，搅拌 成澄清透明溶液作备用液；取2000ml的40°C热水，加入70g果糖、50g甘露醇和2g肽，搅 拌溶解使溶液澄清的同时，以0. 4 ml/s的滴加速率加入备用液，用用均质机以IOOMPa均质 65min后取出，在进风150°C、出风70°C的干燥参数下喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成品。
实施例六
采用还原型辅酶QlO与乳化剂直接加热熔融的方法制备
取IOg还原型辅酶Q10、30g水溶性淀粉、30gCMC，溶于IOOml水中，加热至45°C熔融，然 后用剪切分散机以2500rpm速度剪切70min后取出，在进风175°C、出风100°C的干燥参数 下喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成品。
实施例七
采用先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂后再与乳化剂混合溶解的方法制备 取IOg还原型辅酶Q10、30g聚氧乙烯-40-硬脂酸酯，溶解在IOOml乙酸乙酯中，搅拌成 澄清透明溶液作备用液；取IOOOml的65°C热水，加入IOOg纯胶和0. 3g苯二酚，搅拌溶解 使溶液澄清的同时，以0. 25 ml/s的滴加速率加入备用液，用用均质机以SOMPa均质20min、 以280MPa均质12min后取出，在进风175°C、出风70°C的干燥参数下喷雾干燥，收集喷雾粉 过筛得成品。
8
权利要求
一种水溶性还原型辅酶Q10组合物，包括原料辅酶Q10、水溶性载体和乳化剂，其特征在于各原料的质量份组成为还原型辅酶Q10 5 15、水溶性载体 10 120、乳化剂0.5 40；其中所述的水溶性载体为麦芽糊精、羧甲基纤维素(CMC)、纯胶、可溶性淀粉、乳糖、果糖、山梨醇、甘露醇、阿拉伯胶、卡拉胶中的一种或几种；所述的乳化剂为非离子表面活性剂。
2.根据权利要求1所述的水溶性还原型辅酶QlO组合物，其特征在于还包括0.1-2质 量份的活性成分，所述的活性成分为维生素、氨基酸、矿物质、多酚、有机酸、糖类、肽或蛋白 质中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的水溶性还原型辅酶QlO组合物，所述的乳化剂为多元醇型非 离子表面活性剂或聚氧乙烯型非离子表面活性剂。
4.根据权利要求3所述的水溶性还原型辅酶QlO组合物，其特征在于所述的多元醇型 非离子表面活性剂为蔗糖脂肪酸酯类、甘油脂肪酸酯类、聚甘油脂肪酸酯类、吐温类、山梨 醇脂肪酸酯类等非离子表面活性剂。
5.根据权利要求3所述的水溶性还原型辅酶QlO组合物，其特征在于所述的聚氧乙烯 型非离子表面活性剂为卖泽类、苄泽类、聚氧乙烯硬脂酸酯类、泊洛沙姆等非离子表面活性 剂。
6.根据权利要求5所述的水溶性还原型辅酶QlO组合物，其特征在于所述的聚氧乙烯 型非离子表面活性剂为聚氧乙烯-40-硬脂酸酯。
7.根据权利要求1所述的一种水溶性还原型辅酶QlO组合物的制备方法，其特征在 于用还原型辅酶QlO与乳化剂直接加热熔融制备或先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂后 再与乳化剂混合溶解制备所述还原型辅酶QlO与乳化剂直接加热熔融制备的方法是按质量份取还原型辅酶 Q10、水溶性载体和乳化剂，溶于相当于水溶性载体10-20倍水中，加热至40-60°C，然后用 剪切分散机或均质机使溶液均一，再喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成品；所述先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂后再与乳化剂混合溶解制备的方法是按质量 份取还原型辅酶QlO和乳化剂，加入相当于还原型辅酶QlO的10倍量的有机溶剂中，搅拌 成澄清透明溶液作备用液；然后按质量份取水溶性载体，溶于相当于水溶性载体10-20倍 的40-60°C水中，搅拌成澄清溶液，以0. 2-0. 5ml/s的滴加速率加入备用液，然后用均质机 均质后，取出喷雾干燥，收集喷雾粉过筛得成品。
8.根据权利要求7所述的一种水溶性还原型辅酶QlO组合物的制备方法，其特征在 于所述先把还原型辅酶QlO溶于有机溶剂、再与乳化剂混合溶解制备的方法还包括在搅 拌成澄清溶液前按质量份加入活性成分。
9.根据权利要求7或8所述的一种水溶性还原型辅酶QlO组合物的制备方法，其特征 在于所述有机溶剂是丙酮、乙酸乙酯或乙醇中的一种或几种。
10.根据权利要求7或8所述的一种水溶性还原型辅酶QlO组合物的制备方法，其特征 在于所述喷雾干燥的参数为进风150-190°C，出风70-110°C。
全文摘要
本发明涉及一种还原型辅酶Q10组合物及其制备方法，提供了一种水溶性还原型辅酶Q10组合物，包括原料及其质量份组成为还原型辅酶Q105-15、水溶性载体10-120、乳化剂0.5-40；其中所述的水溶性载体为麦芽糊精、CMC、纯胶、可溶性淀粉、乳糖、果糖、山梨醇、甘露醇、阿拉伯胶、卡拉胶中的一种或几种；所述的乳化剂为非离子表面活性剂。本发明还提供了所述水溶性还原型辅酶Q10组合物的制备方法。本发明将难溶性的还原型辅酶Q10与水溶性载体、乳化剂混合制成水溶性还原型辅酶Q10组合物，综合了包合技术与固体分散技术的优点，克服了其缺点，解决了还原型辅酶Q10难溶性的问题，经过一系列试验证明其具有水溶性且溶解度高；溶出速度快，稳定性高，有效物质含量高。
文档编号A61K38/00GK101966171SQ201010297959
公开日2011年2月9日 申请日期2010年9月30日 优先权日2010年9月30日
发明者周建仁, 毛海明, 王维, 蒋风 申请人:杭州华东医药集团康润制药有限公司