专利名称：生姜与白胡椒组合物、其制备方法及其在制备癌症放、化疗中减毒增效药物中的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种天然药物组合物，更具体地涉及一种由生姜白胡椒水煎浓缩提取 物、姜辣素、白胡椒水提取物与胡椒碱组成的天然药物组合物，该天然药物组合物的制备方 法以及该天然药物组合物在用于制备减少癌症放、化疗引起的呕吐副作用并对治疗癌症起 增效作用的药物中的用途。
背景技术：
癌症目前已成为人类面临的一大杀手，死亡率仅次于心血管疾病，而且呈逐年上 升的趋势。我国每年有180万恶性肿瘤患者，其中2/3的病人接受放、化疗，虽然有一定的 疗效，但放、化疗后大部分患者会出现不同程度的副作用，其中最常见的副作用是恶心、呕 吐等胃肠道反应。频繁的呕吐可导致消化液大量丢失，水、电解质、酸碱平衡紊乱，使病人痛 苦不堪，严重影响病人的生存质量，不仅会影响到疗效，甚至使病人难以忍受而中断治疗。目前，临床常用的止吐药主要有组胺(H2)、乙酰胆碱(M)及多巴胺(DA)受体拮抗 药和大麻类药物等，但这些药物对放、化疗后呕吐的疗效差，而且毒副作用强，应用上受到 很大限制。新型止吐药，如NK1受体拮抗剂和5-HT3受体拮抗类药物，虽然对放、化疗后呕吐 止吐效果好，但价格昂贵，使用范围窄，而且毒副反应大，临床多需联合用药，且未见抗癌增 效作用，因此期待着天然抗癌减毒增效药物的研制。中医药对于癌症放、化疗减毒增效的研究，令人瞩目。目前尚无对抗癌症放、化疗 具有减轻呕吐副作用及增效作用的中成药。因此，研发一种高效低毒、价格低廉，易于推广 的可用于减轻癌症放、化疗呕吐副作用并起增效减毒作用的天然中药成为临床亟待解决的 问题。中药姜(zingiber)被誉为“呕吐圣药”。姜辣素是从姜中提取的活性成份，本发明 人观察到姜辣素可对抗无机及有机毒物硫酸铜和顺钼所致呕吐，并抑制肠道嗜铬细胞释放 致吐因子5-HT和P物质，姜辣素作用于化疗呕吐最相关的NK1和5-HT3等受体，为多靶点、 天然低毒止吐药。白胡椒为胡椒科植物胡椒(Pipernigrum L)的成熟果实，味辛、热；有温 中下气、和胃止呕的功效，主要用于治疗胃寒呕吐、腹痛泄泻等。近年来生姜和白胡椒的抗 癌作用得到证实，尤其是白胡椒的提取物胡椒碱(piperine)。已有众多实验证实胡椒碱具 有抗肿瘤活性，是一种有开发前景的天然抗癌新药。本发明人经过大量的各配方比例的研 究和实验以及临床实践，最后获得了本发明的最佳药物比例组合物，是与多受体靶点比例 相契合的创新性的组合物，并证明了其对癌症放、化疗引起的呕吐等副作用有极好的疗效 并能同时起到辅助抑制肿瘤的效果，由此完成了本发明。
发明内容
本发明第一个目的在于提供一种天然药物组合物，该组合物低毒高效，疗效确切、 便于应用及推广，既可以抗肿瘤，又能对抗放、化疗后呕吐等副作用。
本发明第二个目的在于提供上述天然药物组合物的制备方法。本发明第三个目的在于提供上述天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用 并对治疗癌症起增效减毒作用的药物中的用途。本发明提供的一种天然药物组合物，由生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡 椒水提取物与胡椒碱以重量计按1-3 3-5 4-8 2-9的比例组成。上述天然药物组合物，其中生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒水提取物 与胡椒碱的用量比例是3 5 8 9。其中，生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒水提取物可通过本领域技术人 员公知的常规方法进行提纯获得，姜辣素与胡椒碱可以商业购得，采用常规方法获得的这 些成分或采用商业购得的成分组成的本发明的天然药物均能获得相同的疗效。以下列出的 方法仅仅是发明人认为更优选的方法，并不意在对该天然药物组合物中各成分的提取方法 作出特别的限制。优选地，上述天然药物组合物中生姜白胡椒水煎浓缩提取物的制备方法是按照配伍比例为1 2-5取生姜、白胡椒，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉 网的电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将 两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥3 得棕黄 色粉末，即为生姜白胡椒水煎浓缩提取物。上述天然药物组合物中姜辣素的制备方法是将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细 粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波 频率下超声提取15min，离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转 蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。上述天然药物组合物中白胡椒水提取物制备方法是取白胡椒，干燥，粉碎，过筛，加水回流提取2次，每次2小时。第一次加10倍量的 水，过滤，药渣第二次加8倍量的水，过滤。将2次滤液合并，离心(3000rpm) 15分钟，分离 上清液，水浴蒸干浓缩，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得。上述天然药物组合物中胡椒碱制备方法是将白胡椒颗粒粉碎成20目，用7-10倍乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸 泡12h，将两次滤液合并，减压浓缩至粘稠状，浓缩液放冷处静置1-2天，析出胡椒碱，过滤 得粗品，将干燥的粗品溶于乙醚中，10% KOH溶液洗涤三次，收集乙醚层，蒸去乙醚得淡黄 色固体粉末，将所得粉末溶于乙醇中，活性炭脱色重结晶，即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。本发明还提供了该天然药物组合物的优选的制备方法，包括(1)生姜白胡椒水煎浓缩提取物的制备按照配伍比例为1 2-5取生姜、白胡椒，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉 网的电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将 两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥3 得棕黄 色粉末，即为生姜白胡椒水煎浓缩提取物。(2)姜辣素的制备将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波 频率下超声提取15min ；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转 蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。(3)白胡椒水提取物制备取白胡椒，干燥，粉碎，过筛，加水回流提取2次，每次2小时。第一次加10倍量的 水，过滤，药渣第二次加8倍量的水，过滤。将2次滤液合并，离心(3000rpm) 15分钟，分离 上清液，水浴蒸干浓缩，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得。(4)胡椒碱制备将白胡椒颗粒粉碎成20目，用7-10倍乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸 泡12h，将两次滤液合并，减压浓缩至粘稠状，浓缩液放冷处静置1-2天，析出胡椒碱，过滤 得粗品，将干燥的粗品溶于乙醚中，10% KOH溶液洗涤三次，收集乙醚层，蒸去乙醚得淡黄 色固体粉末，将所得粉末溶于乙醇中，活性炭脱色重结晶，即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。(5)按比例选取生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒水提取物与胡椒碱， 均勻混合，即得。上述天然药物组合物的制备方法，还包括将步骤( 制得的产品进一步通过常 规的制药手段制成含有天然药物组合物IOOmg或200mg规格的胶囊，或将按湿法制粒工艺 制成含天然药物组合物IOOmg或200mg规格的片剂。本发明还包括天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用并对治疗癌症起增 效作用的药物中的用途，以及在制备减少癌症放、化疗引起的呕吐反应并对治疗癌症起增 效作用的药物中的用途。本发明天然药物组合物的服用方法治疗癌症放、化疗后呕吐可用胶囊剂或片剂， 每人每天600mg，分三次饭后服用。本发明天然药物组合物在抗呕吐及抑制肿瘤方面的有益效果如下1、本发明天然药物组合物具有良好的抗呕吐作用，现已完成临床前在水貂呕吐模 型的药理学研究。采用我们首创的水貂呕吐模型，观察该天然药物组合物对顺钼导致水貂 呕吐模型在一定时期内的对抗作用。研究表明该天然药物组合物对于顺钼所致水貂的呕 吐反应有明显的对抗作用，其作用优于单独应用生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡 椒水提取物。同时，其降低致呕率方面，其作用与西药昂丹司琼媲美。2、本发明天然药物组合物具有抑制肿瘤的作用，现已完成临床前在小鼠肿瘤模型 上的药理学研究。采用了小鼠肿瘤模型，观察天然药物组合物对小鼠体内肿瘤的抑制作用。 研究表明该天然药物组合物对于小鼠体内肿瘤有明显的抑制作用。3、另外证明了本天然药物组合物能增强化疗药物对肿瘤的抑制作用，现已完成临 床前在小鼠肿瘤细胞模型上的药理学研究。采用了小鼠肿瘤模型，观察该天然药物组合物 与环磷酰胺联合对小鼠体内肿瘤的抑制作用。研究表明该天然药物组合物能明显增加环 磷酰胺对于肿瘤的抑制作用。4、同时完成了在小鼠的急性毒理研究，研究表明该天然药物组合物对进食及行 为活动等无影响，脏器及病理学观察也未见异常。说明该天然药物组合物毒性很小。5、本发明人独创地将生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒水提取物与胡 椒碱进行组合，并通过大量实验确定这些组分之间的用量配比，使该组合物发挥了很好的协同作用，获得意外的效果。经过我们反复实验研究，令发明人惊讶的是本发明的天然药物 组合物各组分之间的比例在1-3 3-5 4-8 2-9时产生了出乎意料的协同作用，增效明 显，对副作用起到非常好的效果，尤其在各组分的用量比例是3 :5:8: 9时尤其明显， 这是本发明人在之前发表的论文基础上通过继续努力付出大量创造性劳动而获得的，本领 域普通技术人员仅仅通过公开的内容无法简单获得这种配比范围以及最佳用量比例。6、该天然药物组合物生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒水提取物与胡 椒碱各组分均可通过常规手段获得，其中一些组分例如姜辣素与胡椒碱还可通过商业购 得，这样的组合物本身具有获得方便、成本较低的效果。这也是发明人通过大量创造性劳动 方获得的兼具极佳疗效和较高工业实用性的产品。
具体实施例方式下面通过实施例和试验例进一步阐述本发明天然药物组合物的制备，以及其在抗 呕吐和抗肿瘤中应用的有益效果。实施方案(1)生姜白胡椒水煎浓缩提取物的制备按照配伍比例为1 2-5取生姜、白胡椒，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉 网的电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将 两次滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥3 得棕黄 色粉末，即为生姜白胡椒水煎浓缩提取物。(2)姜辣素的制备将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细 粉放入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波 频率下超声提取15min ；离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转 蒸发仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。(3)白胡椒水提取物制备取白胡椒，干燥，粉碎，过筛，加水回流提取2次，每次2小时。第一次加10倍量的 水，过滤，药渣第二次加8倍量的水，过滤。将2次滤液合并，离心(3000rpm) 15分钟，分离 上清液，水浴蒸干浓缩，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得。(4)胡椒碱制备将白胡椒颗粒粉碎成20目，用7-10倍乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸 泡12h，将两次滤液合并，减压浓缩至粘稠状，浓缩液放冷处静置1-2天，析出胡椒碱，过滤 得粗品，将干燥的粗品溶于乙醚中，10% KOH溶液洗涤三次，收集乙醚层，蒸去乙醚得淡黄 色固体粉末，将所得粉末溶于乙醇中，活性炭脱色重结晶，即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。第二步制剂的制备(1)本发明天然药物组合物胶囊制剂的制备分别称取上述步骤制备的生姜白胡椒水煎浓缩提取物lang、姜辣素20mg、白胡椒 水提取物32mg与胡椒碱36mg，同时称取淀粉395mg、硬脂酸镁5mg，均勻混合，填充胶囊，制 成每个纯重500mg的胶囊剂。(2)本发明天然药物组合物片剂的制备
分别称取上述步骤制备的生姜白胡椒水煎浓缩提取物lang、姜辣素20mg、白胡椒 水提取物32mg与胡椒碱36mg，同时称取淀粉^5mg、乳糖lOOmg，均勻混合，用湿法制粒、干 燥，整粒后与5mg硬脂酸镁混合，压片，制成每片纯重500mg的片剂。药效及药理学资料在下述试验例子中组合物为生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒 水提取物与胡椒碱的用量比例为3 5 8 9。发明人对上述各成分用量比例在 1-3 3-5 4-8 2-9之间时的多种配比组合获得的组合物进行了与上相同的实验，均发 现在这种用量范围内的天然药物组合物能获得很好的协同作用，对癌症放、化疗副作用能 起到很好的效果并对癌症的治疗有增效作用。并且，发明人发现生姜白胡椒水煎浓缩提取 物、姜辣素、白胡椒水提取物与胡椒碱还可以是以常规手段获得的成分，而不仅仅是用上述 的方法获得的成分，由常规手段制得的或商业购得的上述四种成分组成的组合物具有与上 述方法制得的组合物相同的效果，其实验资料这里不再列举，本领域技术人员对此能够认 可。以下是优选的实施方式获得的药效及药理学资料试验例1 天然药物组合物治疗呕吐作用的药效学研究1、试验材料(1)白胡椒，由青岛众生大药房购买并由山东中医药大学钱秋海教授鉴定为胡椒 科植物胡椒(Pipernigrum L)的成熟果实。生姜，购于山东平度，由本学院技术室主任鉴定 为姜科植物姜的块茎。(2)顺钼(cisplatin)，山东齐鲁制药厂生产，批号903005CE，20mg/支。(3)盐酸昂丹司琼注射液，奥赛康制药，，批号090102，anl:^ig.(4)健康成年水貂，体重1. 3-1. mcg，雄性，由青岛特种养殖动物饲养中心提供，每 只动物单独置于75CmX50CmX50Cm的铁笼中，24h自然光照射，实验前自由进食饮水。2、试验方法将水貂随机分为7组，每组6只，A组为姜辣素组，B组为白胡椒水提取物组，C组 为姜辣素与白胡椒水提取物配伍组(比例为5 8)，D组为生姜白胡椒水煎浓缩提取物， E组为本发明的天然药物组合物(生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒水提取物与 胡椒碱按3 :5:8: 9比例混合)，F组为顺钼阳性对照组，G组为昂丹司琼组。A组先 以姜辣素10g. kg—1 (相当于含生药量)ig预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；B组给予白 胡椒水提取物10g. kg—1 (相当于含生药量)ig预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；C组给 予姜辣素与白胡椒水提取物配伍药物10g. kg"1 (相当于含生药量)ig预处理，30min给予顺 钼7. 5mg. kg_Hp ；D组给予生姜白胡椒水煎浓缩提取物10g. kg—1 (相当于含生药量)ig预处 理，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；E组给予本发明的天然药物组合物10g. kg—1 (相当于含生 药量)ig预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；F组给予生理盐水，30min给予顺钼7. 5mg. kg^ip ；G组先以昂丹司琼组7. 5g. kg-1预处理，30min给予顺钼7. 5mg. kg—Hp。为观察水貂 在给药后他内的呕吐反应，记录其呕吐潜伏期，干呕及呕吐次数。3、实验结果与对照组比较，各治疗组均能明显减轻干呕及呕吐次数并有效延长呕吐潜伏期(P < 0. 05，P < 0. 01)。姜辣素组、姜辣素与白胡椒水提取物配伍组，生姜白胡椒水煎浓缩提 取物组，及本发明的天然药物组合物能够有效降低致呕率。其中生姜白胡椒水煎浓缩提取物组与昂丹司琼组相同；而本发明的天然药物组合物组致呕率低于昂丹司琼组。结果见表 1. 表1 提取物配伍对顺钼(7. 5mg/kg, ip)致呕作用的影响(X士s, η = 6)
权利要求
1.一种天然药物组合物，其特征在于该组合物由生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、 白胡椒水提取物与胡椒碱以重量计按1-3 3-5 4-8 2-9的比例组成，其中生姜白胡椒水煎浓缩提取物的制备方法是按照配伍比例为1 2-5取生姜、白胡椒，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉网的 电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次 滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥3 得棕黄色粉 末，即为生姜白胡椒水煎浓缩提取物。其中白胡椒水提取物的制备方法是取白胡椒，干燥，粉碎，过筛，加水回流提取2次，每次2小时。第一次加10倍量的水， 过滤，药渣第二次加8倍量的水，过滤。将2次滤液合并，离心(3000rpm) 15分钟，分离上清 液，水浴蒸干浓缩，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得。其中胡椒碱的制备方法是将白胡椒颗粒粉碎成20目，用7-10倍乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸泡 12h，将两次滤液合并，减压浓缩至粘稠状，浓缩液放冷处静置1-2天，析出胡椒碱，过滤得 粗品，将干燥的粗品溶于乙醚中，10% KOH溶液洗涤三次，收集乙醚层，蒸去乙醚得淡黄色 固体粉末，将所得粉末溶于乙醇中，活性炭脱色重结晶，即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。
2.如权利要求1所述的天然药物组合物，其中生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白 胡椒水提取物与胡椒碱的用量比例是4 7 9 3。
3.如权利要求1所述的天然药物组合物，其中姜辣素的制备方法是将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放 入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波频率 下超声提取15min，离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发 仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。
4.如权利要求1或2的天然药物组合物的制备方法，其特征在于该方法包括(1)生姜白胡椒水煎浓缩提取物的制备按照配伍比例为1 2-5取生姜、白胡椒，加入10倍量蒸馏水，浸泡lh，于加石棉网的 电炉上加热煎煮lh，绢布过滤，保存滤液，药渣加6倍蒸馏水，同法浸泡、煎煮、过滤，将两次 滤液混合，加热浓缩至小体积，超滤膜过滤，采用真空干燥箱70°C减压干燥3 得棕黄色粉 末，即为生姜白胡椒水煎浓缩提取物。(2)姜辣素的制备将生姜切成薄片，自然干燥，用高速万能粉碎机打成粉末，过30目筛，再将过筛细粉放 入5000mL大磨口瓶中，以6倍量95%的乙醇常温下浸泡72h ；在40°C，40KHz的超声波频率 下超声提取15min，离心得到上清液，残渣弃去；将上清液再减压抽滤，滤液置于旋转蒸发 仪中真空浓缩得姜油状混合物，再将该混合物进行多次浓缩干燥纯化得到姜辣素。(3)白胡椒水提取物制备取白胡椒，干燥，粉碎，过筛，加水回流提取2次，每次2小时。第一次加10倍量的水， 过滤，药渣第二次加8倍量的水，过滤。将2次滤液合并，离心(3000rpm) 15分钟，分离上清 液，水浴蒸干浓缩，再减压干燥成干浸膏，粉碎，过100目筛，即得。(4)胡椒碱制备将白胡椒颗粒粉碎成20目，用7-10倍乙醇浸泡12h，过滤取澄清液，残渣继续浸泡 12h，将两次滤液合并，减压浓缩至粘稠状，浓缩液放冷处静置1-2天，析出胡椒碱，过滤得 粗品，将干燥的粗品溶于乙醚中，10% KOH溶液洗涤三次，收集乙醚层，蒸去乙醚得淡黄色 固体粉末，将所得粉末溶于乙醇中，活性炭脱色重结晶，即得单斜棱柱结晶的胡椒碱。(5)按比例选取生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒水提取物与胡椒碱均勻混 合，即得。
5.如权利要求书4所述的天然药物组合物的制备方法，还包括将步骤(5)制得的产 品进一步通过常规的制药手段制成含有天然药物组合物IOOmg或200mg规格的胶囊，或将 按湿法制粒工艺制成含天然药物组合物IOOmg或200mg规格的片剂。
6.如权利要求1-3任一项所述的天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗副作用并对 治疗癌症起增效作用的药物中的用途。
7.如权利要求1-3任一项所述的天然药物组合物在制备减少癌症放、化疗引起的呕吐 反应并对治疗癌症起增效作用的药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及一种天然药物组合物、其制备方法及其在制备癌症放、化疗中减毒增效药物中的用途，该天然药物组合物由生姜白胡椒水煎浓缩提取物、姜辣素、白胡椒水提取物与胡椒碱按1-3∶3-5∶4-8∶2-9的比例组成，该组合物对由癌症放、化疗引起的呕吐等副作用有极好的疗效并能同时起到抑制肿瘤的作用。
文档编号A61K36/9068GK102133385SQ20111004935
公开日2011年7月27日 申请日期2011年3月2日 优先权日2011年3月2日
发明者倪倍倍, 岳旺, 石振艳, 韩梅 申请人:青岛大学