专利名称：一种从百子莲中提取百子莲皂苷的方法
技术领域：
本发明属于中药有效成分提取技术领域，涉及一种从百子莲中提取百子莲皂苷的方法。
背景技术：
留体皂苷是自然界中分布很广的一种天然有机化合物，这类物质多具有溶血及毒鱼、毒贝等生物作用，过去主要用作留体避孕药和激素类等药物的重要合成原料。然而，越来越多的研究结果表明，留体皂苷具有广泛的药理作用和重要的生物活性，如抗肿瘤、抗真菌、防治心血管疾病、降血糖、免疫调节等，引起了全世界的关注。但是，目前以留体皂苷作为药物在临床上应用的还不多，为了更好的开发留体皂苷药用植物资源，本发明提供一种从百子莲中提取百子莲皂苷的方法。百子莲为百合科百子莲属植物闭口百子莲Agapanthus inapertus，其主要化学成分为留体皂苷类化合物，已从其地下部分分离得到百子莲皂苷A (25R)5a_螺甾烷2α、3Ρ、5α-三羟基-3-0-a-L-鼠李吡喃糖基(1 — 2) _0_[ β-D-葡萄吡喃糖基 (1 — 3)]-0_β-D-葡萄吡喃糖苷等4种不同糖链皂苷，这些留体皂苷成分具有强的抑制磷酸二酯酶(PDE)的活性。目前尚未见百子莲总皂苷的提取分离方法方面的研究报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从百子莲中提取百子莲皂苷的方法。本发明方法萃取百子莲皂苷，方法简单，节能，易于控制。本发明的目的是采用以下技术方案实现的
一种从百子莲中提取百子莲皂苷的方法，其特征在于将百子莲原料粉碎，加入夹带剂，经超临界(X)2萃取，萃取条件为萃取压力25-40MPa，萃取温度30_60°C，萃取时间3_6h， 收集得到的萃取物用30-95%乙醇索氏提取，提取液减压浓缩至小体积，用水分散，通过大孔吸附树脂柱吸附，洗脱液再通过氧化镁柱，收集下注液，减压浓缩，冷冻干燥即得百子莲总皂苷。所述夹带剂为加有十二烷基硫酸钠的乙醇、正丁醇混合溶液，十二烷基硫酸钠的浓度为0. 02-0. 05mol/L,乙醇、正丁醇体积比为3:7-5:5，乙醇为80-95%的乙醇水溶液，夹带剂加入量为l_5ml/g生药。所述大孔吸附树脂选用DlOl、AB_8或HPD100中的一种，洗脱剂为3_6倍柱体积的 60%-90%乙醇溶液。本发明的有益效果是本发明使用表面活性剂与多元醇的混合溶液作为夹带剂， 提高了超临界CO2萃取率，同时具有良好的选择性，可获得较高纯度的百子莲皂苷萃取物； 本发明方法具有工艺简单、易于控制、产品纯度高、低耗能等优点。
具体实施方式
实施例1
称取IOOOg百子莲放入萃取罐中，配制含有0. 02mol/L十二烷基硫酸钠的乙醇正丁醇混合溶液(80%乙醇正丁醇=3:7)作为夹带剂，加入2000ml于萃取罐中，在萃取压力 25. 6MPa，萃取温度35°C条件下动态萃取4h，收集从分离器中放出的萃取物，用70%乙醇索氏提取2小时，提取液减压浓缩至小体积，加水分散后通过AB-8大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱至水洗液近无色，弃去洗脱液，再用4倍柱体积的60%乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液再通过氧化镁柱，收集下注液，减压浓缩，回收乙醇，冷冻干燥、粉碎，得到112g白色粉末， 其中百子莲总皂苷含量82%。实施例2:
称取IOOOg百子莲放入萃取罐中，配制含有0. 03mol/L十二烷基硫酸钠的乙醇正丁醇混合溶液(85%乙醇正丁醇=5:5)作为夹带剂，加入IOOOml于萃取罐中，在萃取压力 28. 3MPa，萃取温度30°C条件下动态萃取6h，收集从分离器中放出的萃取物，用30%乙醇索氏提取2小时，提取液减压浓缩至小体积，加水分散后通过DlOl大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱至水洗液近无色，弃去洗脱液，再用3倍柱体积的65%乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液再通过氧化镁柱，收集下注液，减压浓缩，回收乙醇，冷冻干燥、粉碎，得到118g白色粉末， 其中百子莲总皂苷含量78%。实施例3:
称取IOOOg百子莲放入萃取罐中，配制含有0. 04mol/L十二烷基硫酸钠的乙醇正丁醇混合溶液(90%乙醇正丁醇=4:6)作为夹带剂，加入5000ml于萃取罐中，在萃取压力 30. 3MPa，萃取温度42°C条件下动态萃取3h，收集从分离器中放出的萃取物，用80%乙醇索氏提取2小时，提取液减压浓缩至小体积，加水分散后通过HPD100大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱至水洗液近无色，弃去洗脱液，再用5倍柱体积的70%乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液再通过氧化镁柱，收集下注液，减压浓缩，回收乙醇，冷冻干燥、粉碎，得到114g白色粉末，其中百子莲总皂苷含量80%。实施例4:
称取2000g百子莲放入萃取罐中，配制含有0. 05mol/L十二烷基硫酸钠的乙醇正丁醇混合溶液(95%乙醇正丁醇=3:7)作为夹带剂，加入4000ml于萃取罐中，在萃取压力 40MPa，萃取温度55°C条件下动态萃取5h，收集从分离器中放出的萃取物，用95%乙醇索氏提取2小时，提取液减压浓缩至小体积，加水分散后通过DlOl大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱至水洗液近无色，弃去洗脱液，再用3倍柱体积的80%乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液再通过氧化镁柱，收集下注液，减压浓缩，回收乙醇，冷冻干燥、粉碎，得到233g白色粉末，其中百子莲总皂苷含量79%。实施例5:
称取2000g百子莲放入萃取罐中，配制含有0. 03mol/L十二烷基硫酸钠的乙醇正丁醇混合溶液(85%乙醇正丁醇=4:6)作为夹带剂，加入2000ml于萃取罐中，在萃取压力37. 8MPa，萃取温度60°C条件下动态萃取4h，收集从分离器中放出的萃取物，用60%乙醇索氏提取2小时，提取液减压浓缩至小体积，加水分散后通过AB-8大孔吸附树脂柱吸附，先用水洗脱至水洗液近无色，弃去洗脱液，再用6倍柱体积的90%乙醇洗脱，收集洗脱液，洗脱液再通过氧化镁柱，收集下注液，减压浓缩，回收乙醇，冷冻干燥、粉碎，得到224g白色粉末，其中百子莲总皂苷含量83%。
权利要求
1.一种从百子莲中提取百子莲皂苷的方法，其特征在于将百子莲原料粉碎，加入夹带剂，经超临界CO2萃取，萃取条件为萃取压力25-40MPa，萃取温度30-60°C，萃取时间 3_6h，收集得到的萃取物用30-95%乙醇索氏提取，提取液减压浓缩至小体积，用水分散，通过大孔吸附树脂柱吸附，洗脱液再通过氧化镁柱，收集下注液，减压浓缩，冷冻干燥即得百子莲总皂苷。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述夹带剂为加有十二烷基硫酸钠的乙醇、正丁醇混合溶液，十二烷基硫酸钠的浓度为0. 02-0. 05mol/L,乙醇、正丁醇体积比为 3:7-5:5，乙醇为80-95%的乙醇水溶液，夹带剂加入量为l_5ml/g生药。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂选用D101、AB-8或HPD100 中的一种，洗脱剂为3-6倍柱体积的60%-90%乙醇溶液。
全文摘要
本发明公开了一种从百子莲中提取百子莲皂苷的方法。其技术特点是将百子莲原料粉碎后经超临界CO2萃取，萃取物用30-95%乙醇索氏提取，提取液减压浓缩，通过大孔吸附树脂柱吸附，洗脱液再通过氧化镁柱，收集下注液，减压浓缩，冷冻干燥，得百子莲总皂苷。
文档编号A61K36/896GK102266467SQ20111022552
公开日2011年12月7日 申请日期2011年8月8日 优先权日2011年8月8日
发明者刘东锋, 郭琴 申请人:南京泽朗医药科技有限公司