专利名称：：涂覆的支架和用蛋白涂覆的方法涂覆的支架和用蛋白涂覆的方法本发明涉及涂覆的(coated)医疗装置例如可植入构件(implantablestructures)例如支架，以及用蛋白涂覆可植入构件、例如支架和其它医疗装置的新方法。本发明还涉及用含有特定蛋白疏水蛋白(单独的)或与其它组分例如肝素组合的疏水蛋白的组合物涂覆医疗装置例如支架、吻合装置(anastomoticdevice)和血管周包物(perivascularwrap)的方法。许多可植入构件例如支架是已知的，尤其是胆管支架。塑料和金属的支架被用于各种目的，但是仍无法得到具有低生产成本、持久功能以及使用和更换易于操作的高质量支架。本发明涉及医疗装置例如可植入构件(I)，其涂覆有疏水蛋白，并且在一个具体的实施方案中，其可用于例如药物或药物组合的局部递送，例如用于预防和治疗血管疾病。本发明还涉及医疗装置，包括涂覆有疏水蛋白的支架、吻合装置、血管周包物、缝合线(sutures)和钉(staples)。这些医疗装置可以用于治疗和预防疾病，并且最小化或基本消除生物体对医疗装置引入到生物体内的反应。此外，所述涂覆的装置可以用于促进愈合和内皮化。本发明还涉及医疗装置尤其是可植入构件例如支架的涂料(coatings)。本发明还包括用于控制可植入医疗装置的药物、活性剂和/或化合物的流出速度的涂料。本发明还涉及用于药物的局部递送的药物递送系统，例如用于治疗血管疾病。本发明还涉及涂覆的医疗装置例如可植入构件，其具有固定在其上的疏水蛋白和药物，用于治疗疾病。疏水蛋白及其衍生物是具有大约100-150个氨基酸的小蛋白，其存在于丝状真菌如裂裙菌(Schizophyllumcommune)中。它们通常在分子中具有8个半胱氨酸单元(Cys)。疏水蛋白是真菌来源的最具表面活性的蛋白。疏水蛋白含有不同的氨基酸序列，其通过形成四个二硫键在它们的基本序列中共享八个Cys残基的特征模式。已知通过Cys残基形成的二硫键解释为防止在溶液中自发自组装的在亲水-疏水界面处的控制装置。已经发现这些蛋白对于地面生长(例如，气生菌丝、孢子和子实体例如蘑菇)和真菌附着在固体支持物上是重要的。疏水蛋白相当稳定，能够忍受接近于水的沸点的温度。疏水蛋白能够从天然源中分离得到，但是它们还能够通过重组法获得，例如公开于W02006/082251或W02006/131564中的那些。现有技术已经提出几种疏水蛋白在不同应用中的用途。W01996/41882公开了疏水蛋白作为乳化剂和稠化剂用于亲水化疏水表面的用途。还已公开使用疏水蛋白作为反乳化剂，参见W02006/103251中；作为蒸发阻滞剂，参见W02006/128877;或作为污损抑制剂，参见W02006/103215。W02006/082253和EP-A1252516中描述了疏水蛋白衍生物从水溶液沉积到不同表面的方法，所述表面例如塑料聚合物表面、玻璃、金属表面、自然表面例如皮革、棉和纸。本发明涉及用疏水蛋白涂覆医疗装置。本发明一个具体方面涉及涂覆可植入构件(I)的新方法，其包括使用含有至少一种疏水蛋白衍生物(H)的组合物处理可植入构件(I)的表面的步骤。本发明还涉及涂覆可植入构件(I)的方法，特征在于可植入构件(I)是支架，并且使用包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)和至少一种其它组分(F)的组合物处理所述表面。本发明还涉及涂覆可植入构件(I)的方法，其中所述组合物包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)和水、以及可能有的其它组分(F)，其中基于全部组合物，疏水蛋白衍生物(H)的量为O.0001-20重量％，通常为O.001-10重量％。在可植入构件(I)的表面上，疏水蛋白衍生物的量通常为O.l-10mg/m2。其它组分可以是例如聚合物添加剂、溶剂、缓冲剂、药学活性物质和/或辅助剂。术语辅助剂包括药学可接受、无生理活性的成分，例如粘合剂、填充剂和形成涂层的化合物。任选的辅助赋形剂的其它实例是抗粘附剂、防腐剂、助流剂、润滑剂和吸附剂。合适的物质是本领域已知的。通常,所述组合物是水基(water-based)组合物。本发明还涉及涂覆可植入构件(I)的方法，其中所述可植入构件(I)是用包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)、水和可能有的其它组分(F)的组合物处理的支架，其中，基于全部组合物，疏水蛋白衍生物(H)的量为O.001-10重量％。本发明还涉及涂覆可植入构件(I)的方法，其中将组合物应用至所述可植入构件(I)的表面，所述组合物包含疏水蛋白衍生物(H)、水和至少一种其它药学活性化合物(D)。所述方法可以包括其它步骤例如清洁和加水(watering)步骤。本发明还涉及涂覆可植入构件(I)的方法，其中将组合物应用至所述可植入构件(I)的表面，所述组合物包含疏水蛋白衍生物(H)、水和作为其它药学活性化合物(D)的一种或多种化合物，所述化合物选自肝素、抗生素(例如氨苄西林或舒巴坦或左氧氟沙星)和细胞抑制化合物(例如alkylantia、抗代谢物、有丝分裂抑制剂或激素)。疏水蛋白和肝素以及其衍生物(例如依诺肝素)的组合是特别关注的。其它实例是包含疏水蛋白和香豆素衍生物例如华法林、苯丙香豆素或双香豆乙酯(Ethylbiscoumacetat)的组合物。所述其它药学活性化合物(D)也可以被化学连接到疏水蛋白。本发明还涉及涂覆可植入构件(I)的方法，其中使用的疏水蛋白衍生物(H)是融合疏水蛋白或其衍生物。本发明还涉及涂覆可植入构件(I)的方法，其中将包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)的组合物于4°C至95°C的温度下、特别是20°C至90°C、在O.01小时至48小时、优选O.I至20小时、通常I至10小时的时间内应用至可植入构件⑴的表面。本发明另一方面是涂覆的可植入构件(I)，其具有至少部分用疏水蛋白衍生物(H)处理的表面。本发明还涉及一种涂覆的可植入构件(I)，其通过上述方法被疏水蛋白衍生物(H)至少部分表面涂覆。本发明还涉及一种涂覆的可植入构件(I)，其中可植入构件(I)是支架，特别是胆管支架。本发明另一个目的是提供一种用于涂覆可植入构件(I)的组合物，其中所述组合物包含基于全部组合物的O.0001至20重量％的疏水蛋白(H)和99.999至80重量％的其它组分(F)。就其它组分而言，通常使用溶剂水。本发明还涉及一种用于涂覆可植入构件(I)的组合物，其中所述组合物包含至少O.001至10重量％的至少一种疏水蛋白衍生物(H)、至少50重量％的水和可能有的其它组分(F)。另一方面是疏水蛋白衍生物(H)用于涂覆可植入构件(I)、特别是支架的用途。多种类型的医疗装置例如可植入构件(I)通常在使用前被涂覆。作为可植入构件的一个实例，胆管支架用于治疗发生于胆管中的阻塞。胆汁是一种帮助消化脂肪的物质，其由肝脏产生，通过胆管分泌并且储存于胆囊中。在进食含有脂肪的饮食后，其被释放入小肠。存有多种能够引起胆管狭窄的情况(恶性的或良性的)。胰腺癌是一种常见的恶性原因，胆囊、胆管、肝脏和大肠的癌症是其它的实例。胆管狭窄的非癌症原因包括胆囊切除手术中胆管的损伤、胰腺炎(胰腺感染)、原发性硬化性胆管炎(胆管感染)、胆结石、放射疗法和腹部钝伤。胆管支架通常为细的、类管状结构，其可以是被表面涂覆的而且其用于支撑胆管的狭窄部分并且预防狭窄的再形成。支架可以由例如塑料或金属制造。两种最常见的用于放置胆管支架的方法为内窥镜逆行胰胆管造影(ERCP)和经皮经肝胆管造影(PTC)。使用涂覆的装置对于两种方法都是有利的。ERCP是一种用于诊断胰脏、肝脏、胆囊和胆管疾病的成像技术，且同样具有用作治疗装置的优点。内窥镜是一种细的、发光的、连接到显示屏的中空管，并且其能被插入患者口腔内，进入食道，通过胃，进入小肠的上部，直至到达胆管排空的地方。此时，将称作套管的小管通过内窥镜插入，并且向胆管内注射对照染料。然后当染料通过胆管移动时施行一系列的X射线。如果X射线表明胆管狭窄存在，可以将涂覆的·支架放置入胆管内以减轻阻塞。为了做到这一点，将特定的仪器插入内窥镜中，并且进行括约肌切开术以提供进入胆管的通路。在某些情况下，胆管狭窄部位首先使用称作导管的细的柔性管进行扩张，随后使用充气的气球型装置进行扩张。然后将涂覆的支架插入胆管内。另一施用涂覆支架的方法(经皮经肝胆管造影或PTC)与ERCP类似的是所述测试用于诊断和治疗影响胆汁从肝脏流向胃肠道的阻塞。使用细针头将对照染料通过皮肤注射入肝脏或胆囊内。当染料移动通过胆管时，获取X射线图像。如果胆管狭窄得到证实，然后则可以放置涂覆的支架。将中空针头引入胆管内，并且将细的导丝插入针头内。将所述丝导向阻塞区域，然后所述涂覆的支架越过丝前进并放置于阻塞的胆管内。支架也可以用于其它医疗领域。许多个体患有由遍布在心脏和其它主要器官的血管的进行性阻滞引起的循环系统疾病。非常严重的血管阻塞通常引起高血压、缺血性损伤、中风或心肌梗死。动脉粥样硬化病变是缺血性心脏病的主要原因。经皮腔内冠状动脉成形术是一种目的是增加通过动脉的血流量的医疗操作。经皮腔内冠状动脉成形术是冠状血管狭窄的主要疗法。经皮腔内冠状动脉成形术的一个局限之处在于血管的突然闭合，其可能在该操作和再狭窄后立刻发生，再狭窄在该操作后逐渐发生。众多物质被用于在支架上测试其在再狭窄中的抗增殖作用，并且在实验动物模型中表现出一些活性。一些物质已经在动物模型中表现出成功降低内膜增生程度，其包括肝素和肝素片段、紫杉醇、血管紧张素转换酶抑制剂、血管肽素(angiopeptin)、环孢霉素A、特比萘芬、干扰素Y、雷帕霉素、留类、反义寡核苷酸和基因载体。涂覆的支架还可以用于减少再狭窄。这些涂覆的支架通常是可气球膨胀的有槽金属管(例如不锈钢)，当在血管成形术管状动脉的内腔中膨胀时，其通过刚性支架为动脉壁提供结构支撑。这种支撑有助于维持血管内腔的通畅。在经皮腔内冠状动脉成形术后，这些涂覆的支架能够表现出成功的血管造影增加。此外，具有疏水蛋白和最终其它化合物例如肝素及其衍生物的支架的涂覆表现出具有降低支架植入后亚急性血栓形成的附加效果。具有疏水蛋白和肝素(以及最终的其它化合物)的支架涂料可能具有临床用处。还已经发现，疏水蛋白涂覆的支架的应用是局部药物递送的一种方法。其中特定药物(或药物组合)固定至局部递送装置例如支架的这种方式起到发挥这类治疗的效力的作用。本发明的一个典型方式是将药物分子通过化学方法固定在涂覆于装置表面的疏水蛋白上。用于将药物(或药物组合)固定至支架的方法和材料应当不干扰药物的起效。此外，使用的方法和材料应当是生物相容的，而且应当将药物或药物组合保持在局部装置至递送并持续很长的时间。需要用于预防和治疗疾病例如血管损伤的能够用作局部递送装置的特定蛋白涂覆的支架。许多支架涂覆的方法和组合物已经被公开。涂料本身可能能够降低支架对受损部分(例如内腔壁)的刺激，从而减少血栓或再狭窄的趋势。或者，涂料可以递送药物。药物递送的机理是例如所述活性剂通过本体聚合物(bulkpolymer)或在聚合物结构上产生的孔或通过生物可降解涂料的侵蚀进行扩散。也可以通过使用疏水蛋白将药物化合物涂覆到支架表面。已经报道生物可吸收的和生物稳定的组合物都可作为支架的涂覆材料。聚合物涂料可以封装药物。其它将所述活性剂固定至表面的方法是已知的，例如肝素涂覆的支架。以多种方法将这些涂料应用至支架，所述方法包括浸溃、喷雾或旋转涂覆方法。一类已经报道的用作支架涂料的生物稳定的聚合物材料是多氟(polyfluoro)均聚物。聚四氟乙烯(PTFE)均聚物用作植入物已经很多年了。这些均聚物在合理温度下不溶于任何溶剂，因此很难在保持装置的重要特征(例如支架中的槽)的情况下将其涂覆到小的医疗装置上。已经建议具有聚偏二氟乙烯均聚物制备的涂料并含有用于释放的药物物质/治疗剂或药物的支架。但是，很难在不使其承受相对高温的情况下将它们作为高质量的膜应用至表面上。现在已经发现开发含有疏水蛋白或其衍生物的可植入构件的涂料是有利的。这些涂料能够通过使用含有疏水蛋白的组合物应用至医疗装置的表面。这些涂料可应用于可植入医疗装置，可能包括(但不是必须)使用药物活性剂或药物。这些涂覆的装置具有对于使用有效的物理和机械性能。涂覆的医疗装置与药物联合使用可能是有利于的，所述药物治疗疾病和最小化或基本消除活生物体对医疗装置植入的反应。在某些情况下，发展与促进伤口愈合以及医疗装置的内皮化的药物例如肝素联用的疏水蛋白涂覆的医疗装置是有利的。本发明文本中，术语“疏水蛋白”或“疏水蛋白衍生物”可以理解为特别是意指具有结构通式(I)的多肽，X^C^X^^-C^Xo^-C^X^^o-C^X^^o-C^X^^-C^Xo^-C^X^^-C^X^I)其中X可以是20种天然存在的氨基酸(Phe、Leu、Ser>Tyr>Cys、Trp>Pro、His、Gin、Arg、lie、Met、Thr>Asn、Lys>Val、Ala、Asp、Glu、Gly)中的任意氨基酸。在通式中，X基团在各情况中可以是相同或不同的。X旁边的指数各自是特定部分的序列X中的氨基酸的数目，C是半胱氨酸、丙氨酸、丝氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸或苏氨酸，其中至少四个用C代表的残基是半胱氨酸，而指数η和m各自独立地是O至500之间、优选15至300之间的自然数。通式(I)的多肽也可以用以下性能表征在室温下，在涂敷玻璃表面后，在各情况下与相同大小的水滴和未涂覆的玻璃表面的接触角相比，它们使得与水滴的接触角增加至少20°、优选至少25°且更优选30°。C1至C8代表的氨基酸优选是半胱氨酸。但是，它们也可以被具有相似空间填充的其它氨基酸所替代，所述其它氨基酸优选是丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、甲硫氨酸或甘氨酸。但是，C1至C8位置中的至少四个、优选至少五个、更优选至少六个以及尤其是至少七个由半胱氨酸组成。在本发明的蛋白质中，半胱氨酸可以以还原形式存在或相互形成二硫键。特别优选的是分子内形成C-C键，特别是具有至少一个分子内二硫键、优选两个、更优选三个以及最优选四个分子内二硫键。在上述使用具有相似空间填充的氨基酸替代半胱氨酸的情况中，所述C位置有利地由能够相互形成分子内二硫键的氨基酸成对替代。如果半胱氨酸、丝氨酸、丙氨酸、甘氨酸、甲硫氨酸或苏氨酸也用于X代表的位置，则通式中各C位置的编号可相应地改变。优选使用通式(II)的疏水蛋白来实施本发明xn-c1-x3_25-c2-x0_2-c3-x5_50-c4-x2_35-c5-x2_15-c6-x0_2-c7-x3_35-c8-xffl(n)其中X、C以及X和C旁边的指数均如上所定义，指数η和m各自是O至350之间、优选15至300之间的数，而且所述蛋白另外特征在于上面所述的接触角变化，此外，至少六个用C代表的残基是半胱氨酸。更优选地，所有的C残基都是半胱氨酸。特别优选使用通式(III)的疏水蛋白Xn-C1-X5_9-C2-C3-X11_39-C4X2_23-C5-X5_6-C6-C7-X6_18-C8-Xm(III)其中X、C以及X旁边的指数均如上所定义，指数η和m各自是O至200之间的数，而且所述蛋白另外特征在于上面所述的接触角变化，并且至少六个用C代表的残基是半胱氨酸。更优选地，所有的C残基都是半胱氨酸。Xn和Xm残基可以是也天然连接到疏水蛋白的肽序列。但是，一个或这两个残基也可以是非天然连接到疏水蛋白的肽序列。这也可以理解为意指那些Xn和/或Xm残基，其中天然存在于疏水蛋白中的肽序列被非天然存在于疏水蛋白中的肽序列延长。如果Xn和/或Xm是非天然键合至疏水蛋白的肽序列，这些序列通常为至少20、优选至少35个氨基酸长度。例如，它们可以是20至500、优选30至400、更优选35至100个氨基酸的序列。这种不是天然连接到疏水蛋白的残基在下文中还称作融合伴侣(fusionpartner)。这意欲表示蛋白可以由至少一个疏水蛋白部分和融合伴侣部分组成,其在自然界中不以这种形式一起存在。由融合伴侣和疏水蛋白部分组成的融合疏水蛋白描述在例如W02006/080225UW02006/082253和W02006/131564中。所述融合伴侣部分可以选自许多蛋白质。可以仅一个单一融合伴侣键合至所述疏水蛋白部分，或者也可以多个融合伴侣键合至一个疏水蛋白部分，例如在疏水蛋白部分的氨基端(Xn)和羧基端(Xm)上。但是，也可以例如两个融合伴侣键合至本发明所述蛋白的一个位置(xn*xm)上。特别合适的融合伴侣是天然存在于微生物优选大肠杆菌(Escherischiacoli)或枯草杆菌(Bacillussubtilis)中的蛋白。这类融合伴侣的实例是序列yaad(SEQIDNO:16，于W02006/082251中)，yaae(SEQIDNO:18，于W02006/082251中)、泛素和硫氧还蛋白。十分合适的还有这些序列的片段或衍生物，其只包含有一些例如70至99%、优选5至50%和更优选10至40%的所述序列，或与所述序列相比其中个体氨基酸或核苷酸已经改变，在上述情况中所述百分比都是基于氨基酸的数目。替代完整的融合伴侣，使用截短的残基可能是有利的。特别是，所述截短的残基可以包含至少20个、优选至少35个氨基酸。在一个更优选的实施方案中，所述融合疏水蛋白以及作为乂或乂1基团之一或作为所述基团的末端组成的所述融合伴侣还具有所谓的亲和域(亲和标记物/亲和尾部)。原则上已知的是，这包括够锚定基团，所述锚定基团与特定的互补基团相互作用，并且能使蛋白的后处理和纯化更简单。所述亲和域的实例包括(His)k、(Arg)k,(Asp)k,(Phe)k或(Cys)k基团，其中k通常为I至10的自然数。其可以优选是(His)k基团，其中k是4至6。这种情况中，XjP/或Xm基团可以只由此亲和域组成，或者天然或非天然键合到疏水蛋白的Xn*Xm基团被末端亲和域延长。本发明使用的疏水蛋白也可以在其多肽序列上被修饰，例如通过糖基化、乙酰化或通过化学交联(例如使用戊二醛)。所述疏水蛋白也可以与多糖例如肝素交联。已经发现，开发在植入医疗装置时不会不利的影响涂料的涂覆的装置是有利的。此外，此类疏水蛋白涂覆的装置使得医生能够简单而准确地将所述医疗装置放置在目标区域。也已经发现，开发医疗装置的疏水蛋白涂料是有利的，所述涂料使得能够精确控制药物(例如肝素)从医疗装置的流出的速率。本发明的主题还包括疏水蛋白涂覆的装置，其使得释放一种或多种通过不同分子机制起作用而影响细胞增殖的活性剂。为了测试目的，将商业可用的胆管塑料支架用单独的疏水蛋白涂覆或用疏水蛋白和抗生素和/或肝素涂覆。在人胆汁内温育28天后，研究涂覆的支架表面的阻塞物质是否减少。已经发现，具有疏水蛋白的塑料支架的涂覆能够明显减少支架表面的粘附物质。还测试了将氨苄西林/舒巴坦或左氧氟沙星连接到疏水蛋白涂覆的支架上。发现具有疏水蛋白或具有疏水蛋白和肝素的胆管塑料支架的涂覆是一种延缓阻塞过程的有前途的方法。如果临床环境需要支架放置较长时间，通常需要更换内窥镜支架，但是已经发现具有较长通畅率的疏水蛋白涂覆的胆管支架的开发是特别有用的。在一个体外模型中，测试了具有疏水蛋白的商用胆管塑料支架的不同涂覆。发现了阻塞过程的降低。而且，将抗生素和肝素与该蛋白(疏水蛋白)偶联以进一步改进塑料支架的性能。该观点产生于表明细微的线似乎在阻塞过程中起关键作用的电子扫描显微研究的结果。实施例I接下来的研究中，使用直径为lOFrench，两瓣之间的长度为8厘米的胆管塑料支架(聚乙烯，Cotton-Leung.型，Fa.CookMedical)。原本的(Native)塑料支架和疏水蛋白涂覆的支架放入人体胆汁中28天。然后通过扫描电子显微法检测所述支架。在开始涂覆步骤之前，将支架切成I厘米的小段(适于最后的扫描电子显微法)。通过使用具有修饰的疏水蛋白的涂料来完成表面修饰和/或各种活性物质的靶向。这种蛋白“H*蛋白A”的生成和性质已经描述在Wohllebenff,SubkowskiT,BollschweilerC等在EurBiophysJ,2009发表的“Recombinantlyproducedhydrophobinsfromfungalanaloguesashighlysurface-activeperformanceproteins，，中0在第一个试验中，使用了14个原本的支架。通过通常的涂覆技术，将11个支架使用疏水蛋白OT蛋白A，BASFSE)涂覆，将3个支架使用疏水蛋白OT蛋白A联合氨苄西林+舒巴坦(Unacid,PfizerPharma))涂覆。此外,对组合H*蛋白A/左氧氟沙星(Tavanic,SanofiAventis)和H*蛋白A/肝素进行测试。在制备IOmg疏水蛋白(H蛋白A)/mL的无囷蒸懼水溶液后,将蛋白在涂覆缓冲液50mMTris-HClpH8.O,ImMCaCl2中稀释到lmg/mL。将支架在80°C、在ImL的H*蛋白A溶液中培育过夜，在蒸馏水中洗涤三次，然后干燥。实施例2(表面上的疏水蛋白的检测)通过定向于蛋白的六-His标签的特异性抗体检测H*蛋白A涂覆·-将涂覆和未涂覆的支架培育在TTBS缓冲液(20mMTris-HClpH7.5，150mMNaCl，O.05%吐温20)中的1%的封闭液(Roche1921673)里；室温(RT)下I小时-使用TTBS缓冲液洗涤三次-使用抗-poly-His-POD抗体共轭物(SigmaA7058)培育，以I2000稀释于TTBS缓冲液/0.01%BSA(SigmaA7888)中；室温下I小时-使用TTBS缓冲液洗涤两次-使用TBS缓冲液(2OmMTris-HClpH7.5,15OmMNaCl)洗涤-使用pH4.9的IOOmM醋酸钠洗涤-加入过氧化物酶底物I片TMB底物(SigmaT5525)在100μL的DMSO中IOmL0.IM的醋酸钠，pH4.914.7μL3%的H2O2-在室温下培育5分钟-在405nm下检测实施例3(具有疏水蛋白和肝素的塑料支架的涂覆)将肝素偶联至支架的H*蛋白A涂料中。新制备肝素(肝素钠盐，SigmaH4784)与偶联剂I-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)(Sigma7750)lmg/mL的于IOOmM的pH4.5的MES缓冲液(SigmaM2933)中的混合物。肝素的终浓度为50U/mL/500U/mL和5000U/mL。在旋转器中使用ImL的偶联溶液在室温下培育支架两小时后，通过使用无菌蒸馏水的三次洗涤步骤结束所述反应。通过游离羧基基团，肝素偶联到H*蛋白A的氨基基团EDC用作羧基活化剂用于偶联伯胺得到酰胺键。实施例4(使用H*蛋白A和氨节西林+舒巴坦(Unacid,PfizerPharma)涂覆的支架)将Unacid溶解在无菌蒸懼水中至100mg/mL的总浓度(氨节西林+舒巴坦)。通过添加100μg/mL最终总浓度的Unacid和终浓度为0.05%的戊二醛(Aldrich34，085-5)在蒸馏水中与支架表面上的H*蛋白A进行反应。在室温下过夜培育后，使用无菌蒸馏水洗涤支架三次。在所述反应条件下作为Unacid中两种活性化合物之一的氨苄西林能够被偶联通过戊二醛使氨苄西林的伯氨基和H*蛋白A中易接近的氨基基团交联。实施例5(使用H*蛋白A和左氧氟沙星(Tavanic,SanofiAventis)涂覆的支架)将Tavanic溶解在pH4.5的IOOmMMES缓冲液中至I.3mg/mL的终浓度，并与EDC(终浓度I.6mg/mL)混合。与H*蛋自A涂覆的支架的反应在室温下进行2.5小时。最后使用无菌蒸馏水洗涤支架三次。通过形成酰胺将左氧氟沙星偶联到H*蛋白A上通过EDC使左氧氟沙星的羧基与H*蛋白A的氨基交联。实施例6(在人胆汁中培育)将所有涂覆的支架在充满人胆汁(经皮经肝胆管引流收集，患者对于使用其胆汁已知情同意)的管中储存28天。使用如图I所示的装置以2rpm(每分钟的转数)的速度转动管。在图I中，缩写T是储存支架的含有人胆汁的管，B是缓慢钟摆移动的板，E是电动机。进行所述装置中的这种处理以模拟胆汁流动。在37°C的恒温下进行培育。实施例7(电子扫描显微法)培育28天后，所有支架使用无菌蒸馏水洗涤，固定并储存于4%的缓冲的戊二醛中。在用等级系列的乙醇脱水后，将所有样品用临界点干燥仪干燥，用粘性箔粘附在柱(stub)上，然后用15nm的金-钯溅射涂覆。使用带有数字输出的Philips场致发射SEM进行SEM测定。首先将未涂覆支架的测定结果与涂覆有H*蛋白A的支架进行比较。然后将涂覆有H*蛋白A的支架与涂覆有H*蛋白A和抗生素药物化合物或肝素的支架进行比较。发现如下结果a)未涂覆的支架28天的培育后，电子扫描显微法显示未涂覆支架的内表面和外表面具有相似量的附着物质。发现所述物质在支架内表面上更加融合(confluent),而在外表面上更加波动(undulating)。在附着物质的组成方面并没有区别。所述组分主要是无定形物质，其具有不同量的细菌和接近于细菌以及不依赖于它们的存在的微小结构。b)H*蛋白A涂覆的支架本研究中使用的修饰疏水蛋白由构巢曲霉(Aspergillusnidulans)的疏水蛋白DewA,N端融合蛋白yaad和C端六-His标签组成。因为这种标签序列的特异性抗体，可以进行表面上的蛋白质的“类蛋白质印迹(westernblotlike)”检测。所述POD(偶联至抗体的)酶可以通过特异底物的颜色产生进行检测。405nm的光密度检测权利要求1.一种涂覆可植入构件(I)的方法，其包括用组合物处理所述可植入构件(I)的表面的步骤，所述组合物包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)。2.权利要求I所述的涂覆可植入构件(I)的方法，特征在于所述可植入构件(I)是支架，并且用包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)和至少一种其它组分(F)的组合物处理所述表面。3.权利要求I和2中任意一项所述的涂覆可植入构件(I)的方法，其中所述组合物包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)和水，并且可能包含其它组分(F)，其中基于全部组合物，疏水蛋白衍生物(H)的量为O.0001-20重量％。4.权利要求I至3中任意一项所述的涂覆可植入构件(I)的方法，其中所述可植入构件(I)是支架，所述支架被包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)、水并且可能包含其它组分(F)的组合物处理，其中基于全部组合物，疏水蛋白衍生物(H)的量为O.001-10重量％。5.权利要求I至4中任意一项所述的涂覆可植入构件(I)的方法，其中将组合物应用至可植入构件(I)的表面，所述组合物包含疏水蛋白衍生物(H)、水和至少一种其它药学活性化合物⑶。6.权利要求I至5中任意一项所述的涂覆可植入构件(I)的方法，其中将组合物应用至可植入构件(I)的表面，所述组合物包含疏水蛋白衍生物(H)、水和作为其它药学活性化合物(D)的选自肝素、抗生素和细胞抑制化合物的化合物。7.权利要求I至6中任意一项所述的涂覆可植入构件(I)的方法，其中使用的疏水蛋白衍生物(H)是融合疏水蛋白或其衍生物。8.权利要求I至7中任意一项所述的涂覆可植入构件(I)的方法，其中将包含至少一种疏水蛋白衍生物⑶的组合物于4°C至95°C的温度下、在O.01小时至48小时的时间内应用至可植入构件(I)的表面。9.一种涂覆的可植入构件(I)，其具有至少部分被疏水蛋白衍生物(H)处理的表面。10.一种涂覆的可植入构件(I)，其通过权利要求I至8中任意一项所述的方法用疏水蛋白衍生物(H)至少部分表面涂覆。11.权利要求10所述的涂覆的可植入构件(I)，其中可植入构件(I)是支架，尤其是胆管支架。12.用于涂覆可植入构件(I)的组合物，其中所述组合物包含O.0001至20重量％的疏水蛋白⑶和99.999至80重量％的其它组分(F)。13.用于涂覆权利要求11所述的可植入构件(I)的组合物，其中所述组合物包含至少O.001至10重量％的至少一种疏水蛋白衍生物(H)、至少50重量％的水和可能有的其它组分(F)。14.疏水蛋白衍生物(H)用于涂覆可植入构件(I)的用途。15.疏水蛋白衍生物(H)用于涂覆支架的用途。全文摘要一种涂覆可植入构件例如支架的方法，通过使用包含至少一种疏水蛋白衍生物(H)、水和其它组分的组合物致使得到可长时间使用的植入物。文档编号A61L31/16GK102892443SQ201180017765公开日2013年1月23日申请日期2011年3月30日优先权日2010年3月31日发明者T·萨布科夫斯基,U·维克特申请人:巴斯夫欧洲公司