专利名称：免疫诱导剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及包含气孔率在50%以下的β -磷酸三I丐(β -Tricalcium phosphate:下文也称为“ β -TCP”)的免疫诱导剂，更具体而言，涉及通过移植或注射到生物体内从而在其附近诱导淋巴细胞和树突细胞(下文也称为“DC细胞”)的免疫诱导剂。
β -TCP等磷酸钙类化合物由于其优秀的生物体亲和力而用于多种制品。例如，市场上销售一种人工骨骼填充剂等(例如，参见非专利文献I)，所述人工骨骼填充剂具有气孔率约75%的、包含100 400 μ m的连续大孔和小孔的高纯度β -TCP结晶层，性质为在手术现场易于加工的强度即2 3MPa的压缩强度；这样的β-TCP多孔体兼有替换自身骨骼这一作为人工骨骼填充材料而言理想的性质，对于这一性质，对在生物体内化学溶解和由细胞吞食这2种机制所致的吸收作用进行了简要说明(例如，参见专利文献I)。
本发明人等已经确认，使用在柔软的薄片构件的表面包被具有75%以上的气孔率、粒径为25 75 μ m的β -TCP多孔体粉末而制成的癌细胞抑制薄片，使癌症直接与β -TCP接触，能够通过激活巨噬细胞运动而抑制恶性肿瘤(例如，参见专利文献2)。在该发明中，没有确认到β -TCP多孔体粉末介导的淋巴细胞和树突细胞聚集的作用，由于需要进行导入薄片这类侵入性处理，难以进行多次施用、浓度变化型施用等细致处理。此外，在β-TCP多孔体粉末的情况下，当其粒径小于25 μ m时，初期的细胞抑制效果与粒径为25 75 μ m的情况相同，但是随时间流逝，存在抑制效果降低的问题。
现有技术文 献
专利文献
专利文献1:日本特开2001-259016号公报
专利文献2:日本特开2010-126434号公报
非专利文献
非专利文献1:七5彡〃 ^ 43 (2008)第11期，第967-988页发明内容
发明要解决的问题
本发明的问题是提供可以用简单的操作移植或注射到生物体内，可以在生物体内无副作用地激活免疫作用的免疫诱导剂。
用于解决问题的方案
本发明人等通过改变β-TCP的气孔率而研究它的免疫诱导作用时，发现将气孔率在50%以下的β-TCP移植、注射到生物体内时，在β-TCP的附近区域，聚集、诱导了与免疫作用相关的B细胞、T细胞、天然杀伤细胞(下文也称为“ΝΚ细胞”)等淋巴细胞、树突细胞。此外，确认了在移植β-TCP的部位附近的非病变部位中，构建了与天然淋巴结相似的细胞结构，从而完成了本发明。
换言之，本发明涉及(I) 一种免疫诱导剂，其包含气孔率在50%以下的β-磷酸三钙(β-TCP) ; (2)上述(I)所述的免疫诱导剂，其特征在于，用于移植或注射到生物体内；(3)上述(I)或(2)所述的免疫诱导剂，其特征在于，在附近诱导淋巴细胞和树突细胞；(4)上述(I) (3)的任一项所述的免疫诱导剂，其特征在于，淋巴细胞是选自T细胞、B细胞和NK细胞中的I种或2种以上；(5)上述(I广(4)的任一项所述的免疫诱导剂，其特征在于，剂型是粒径在0.05 μ m以上且小于25 μ m的粒子或颗粒；(6)上述(I广(4)的任一项所述的免疫诱导剂，其特征在于，剂型是片剂或柱状体；(7)通过上述(I广(6)的任一项所述的免疫诱导剂形成的淋巴结样组织。
此外，作为本发明的其他形态，可以列举将气孔率在50%以下的β -TCP移植或注射到生物体内，诱导免疫反应的方法；将气孔率在50%以下的β -TCP移植或注射到生物体内，激活免疫作用的方法；将气孔率在50%以下的β-TCP移植或注射到生物体内，形成淋巴结样组织的方法；将气孔率在50%以下的β-TCP作为向生物体内移植或注射使用的免疫诱导剂的使用方法；将气孔率在50%以下的β-TCP作为向生物体内移植或注射使用的淋巴结样组织的形成剂的使用方法；气孔率在50%以下的β-TCP用于制备向生物体内移植或注射使用的免疫诱导剂的用途；气孔率在50%以下的β-TCP用于制备向生物体内移植或注射使用的淋巴结样组织的形成剂的用途。
发明的效果
通过本发明，通过简单的操作，即，将包含气孔率在50%以下的β -TCP的免疫诱导剂移植或注射到生物体内，特别是癌症等病变部位附近(非病变部位)，激活免疫作用，可以对病变部位产生治疗效果，并可以预期进一步在切除了癌症等病变部位的部位中实现阻止复发。此外，移植或注射的是具有生物相容性的β-TCP，由于诱导患者体内原本存在的淋巴细胞和树突细胞，因此可以阻止在体内发生免疫激活以外的反应。
此外，在注射或移植粒径在0.05 μ m以上且小于25 μ m的、气孔率在50%以下的β -TCP粒子或颗粒的情况下，相比注射或移植25 μ m以上、气孔率在50%以下的β -TCP粒子或颗粒的情况，可以诱导更多的淋巴细胞、树突细胞。在注射或移植气孔率在50%以下的β -TCP片剂的情况下，可以预期长期的免疫诱导效果。在气孔率在50%以下的β -TCP粒子(颗粒)或β -TCP柱状体的情况下，可以通过注射器等，简单地进行多次施用、局部施用。
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图1是作为本发明的免疫诱导剂的实施方案之一的β -TCP片剂的整体结构图。
图2是气孔率18%的β -TCP片剂的切面的SEM照片。
图3是移植了气孔率18%的β -TCP片剂的皮肤组织的HE染色照片。
图4是放大图3的区域a的照片。
图5是放大图3的区域b的照片。
图6是未处理的正常皮肤组织的HE染色照片。
图7是移植了气孔率60%的β -TCP多孔体的皮肤组织的HE染色照片。
图8是移植了气孔率75%的β -TCP多孔体的皮肤组织的HE染色照片。
图9是移植了塑料的皮肤组织的HE染色照片。
图10是显示移植到皮肤组织的移植片的种类、由该移植片诱导的淋巴细胞和巨噬细胞的细胞数之间的关系的图。
图11是显示β -TCP的气孔率与淋巴细胞诱导之间的关系的表。
图12是使用T细胞特异性抗体进行免疫染色的P -TCP移植部位的照片(X 10倍)。图13是使用T细胞特异性抗体进行免疫染色的小鼠脾淋巴组织的照片(X 10倍)。图14是使用B细胞特异性抗体进行免疫染色的P -TCP移植部位的照片(X 10倍)。图15是使用B细胞特异性抗体进行免疫染色的小鼠脾淋巴组织的照片(X 10倍)。图16是使用NK细胞特异性抗体进行免疫染色的P -TCP移植部位的照片(X40倍)。图17是使用NK细胞特异性抗体进行免疫染色的小鼠脾淋巴组织的照片(X40倍)。图18是使用DC细胞特异性抗体进行免疫染色的@ -TCP移植部位的照片(X40倍)。图19是使用DC细胞特异性抗体进行免疫染色的小鼠脾淋巴组织的照片(X40倍)。图20是移 植了 P -TCP粉末的皮肤组织的HE染色照片。图21是显示P -TCP粉末的粒径与细胞诱导之间的关系的表。图22是P -TCP粉末的粒径0.05 25 u m级分的SEM照片。图23是P -TCP粉末的粒径0.05 25 u m级分的粒度分布图。
具体实施例方式本发明的免疫诱导剂只要是含有气孔率在50%以下的P -磷酸三钙(P -TCP)的免疫诱导剂即可，没有特殊的限制，在本文中，免疫诱导是指诱导免疫反应，即，诱导免疫系统对异物(抗原)所发生的作用。上述P-TCP是用Ca3 (PO4)2表示的组合物的一种结晶形态，是在常温下稳定的具有生物体亲和性的化合物。此外，上述3-TCP优选是烧结体。计算上述P -TCP的气孔率的方法可列举这样的方法:测定气孔率为0%的P -TCP石(与作为测定对象的烧结体组成相同，结晶型的不具有气孔的P-TCP烧结体)的真密度P，根据作为测定对象的烧结体的体积和重量计算表观密度P’，由此计算气孔率P(%)=(1-P ’ / P ) XlOOo此外，本发明的免疫诱导剂可列举气孔率在50%以下的P -TCP粒子、气孔率在50%以下的P -TCP颗粒(多个粒子的结合体)、气孔率在50%以下的P -TCP片剂、气孔率在50%以下的P-TCP柱状体等，这些可以是仅由P-TCP组成的，还可以是以P-TCP作为有效成分并含有其他成分的。在50%以下的P -TCP的气孔率优选在40%以下，更优选在30%以下，其中特别优选在20%以下。以粉末、悬浮液(溶胶)、浓稠物(凝胶)等形态，将上述P -TCP粒子、P -TCP颗粒施用到生物体的癌症等病变部位附近等(非癌症部位等)。可以使用例如ACCuPyC1330系列(株式会社岛津制作所生产)测定这些3 -TCP粒子、3 -TCP颗粒的气孔率P。上述0 -TCP粒子、P -TCP颗粒的制备方法可列举例如下述方法:将磷酸氢钙和碳酸钙的粉末按摩尔比1:广3，优选1:1.5^2.5称量、混合，向这些磷酸氢钙-碳酸钙混合物中加入纯水，配制为浆料，用球磨机湿磨处理所配制的浆料约24小时，通过机械化学(mechano chemical)法进行反应,在70 90°C,优选75 85°C干燥经研磨处理的衆料,将干燥获得的固体物质粉碎，在70(T800°C预烧所获得的P -TCP粉末数小时，制备P -TCP预烧粉末，将获得的3-TCP预烧粉末过筛，可以获得各粒径的级分，测定各级分的气孔率，可以获得气孔率在50%以下的级分。具体而言，首先，将通过105 u m筛孔的筛且残留在75 y m筛孔的筛上的P -TCP作为级分(A);然而,将通过75 y m筛孔的筛且残留在25 U m筛孔的筛上的@-TCP作为级分(B);再将通过25 筛孔的筛的P-TCP作为级分(C)，在此情况下，以级分(C)作为气孔率实际上在50%以下的P -TCP。上述P -TCP粒子、P -TCP颗粒的粒径可列举例如0.05 ii m以上且小于500 U m,优选小于10011111，更优选小于5011111，更优选小于2511111，其中优选小于15iim。所述粒径可以通过上述利用过筛实现的分级或通过在SEM照片中与标志物进行比较而确认的P -TCP粒子、颗粒的大小来进行评价。只要可以发挥免疫诱导效果，对移植或注射的P-TCP粒子、P-TCP颗粒的施用量没有限制，可以根据疾病种类、病变大小、患者体重等恰当的决定，可示例优选
0.0lmg IOOg,更优选0.1mg IOg,更优选Img lg。移植和/或注射的频率可示例每I周 6周进行I次。上述P-TCP片剂、P-TCP柱 状体的形状可列举圆板状、圆柱状、近似圆柱状、椭圆柱状、三角-七角柱体等柱状体，可以考虑病变部位的种类、施用部位、病变大小、患者的体重等，恰当的决定上述P-TCP片剂、柱状体的大小。P-TCP片剂的直径可列举
1.0^10.0mm,优选 3.0^7.0mm,更优选 4.0^6.0mm,高度可列举 0.5^4.0mm,优选 1.0^3.0mm,更优选1.5^2.5mm。上述0 ^TCP柱状体的直径可列举0.2.0mm,优选0.3^1.0mm,更优选
0.4 0.6mm,长度可列举1.0 6.0mm,优选2.0 5.0mm,更优选3.0 4.0mm。上述0 -TCP片剂、^ -TCP柱状体的制备方法可列举可以制备气孔率在50%以下、单一相或几乎单一相的P-TCP片剂、柱状体的方法。具体而言，可列举这样的方法，即:如上所述制备3-TCP预烧粉末，将获得的3-TCP预烧粉末压缩成形(压片)赋予片剂、柱状体的形状，在45(T650°C，优选600°C烧结这些赋形了的P -TCP预烧片剂、柱状体2.5^3.5小时，优选3小时，然后在85(T950°C，优选900°C下烧结0.5^1.5小时，优选I小时，再在1000 13001:下烧结0.75 1.5小时，优选I小时，获得作为烧结体的P-TCP片剂、柱状体；还可以烧结上述P-TCP预烧粉末，在获得作为P-TCP烧结体的粉末后，压缩成形(压片)，制备3-TCP片剂、柱状体。还可以通过将3-TCP片剂冲压成柱状，制备3-TCP柱状体。本发明中的生物体内只要是除骨骼和牙齿以外的部位即可，没有特殊的限制，可列举皮下、皮内、肌肉内、腹腔内、胸腔内、脑内，优选可列举皮下。一旦将本发明的免疫诱导剂移植和/或注射到生物体内，T细胞、B细胞、NK细胞等淋巴细胞和树突细胞就可以聚集到移植和/或注射的免疫诱导剂附近，构成淋巴结样组织。在本文中，淋巴结样组织意指淋巴细胞、树突细胞聚集而成的细胞团。上述诱导淋巴细胞和树突细胞的免疫诱导剂附近可列举位于病变部位附近的非病变部位的部位、离开病变部位的远离部位、切除病变部位后的部位，具体而言，可列举离病变部位或病变切除部位Imm以上且IOOcm以内，优选50cm以内，更优选5cm以内，更优选3cm以内，例如1.5cnT2.0cm距离的区域。诱导至免疫诱导剂附近的淋巴细胞和树突细胞是原本存在于患者体内的淋巴细胞、树突细胞，因而阻止了在体内发生除激活免疫以外的反应。
本发 明中的病变只要是除骨骼和牙齿以外的病变即可，没有特殊的限制，可列举癌症、过敏、感染症，其中优选可以列举癌症，可特别优选示例头盖骨内组织的癌症、肺癌、皮肤癌、乳腺癌、软组织癌、膀胱癌、胃癌、肝癌、胆囊癌、胰腺癌、头部的癌症、颈部的癌症、肾癌、肾上腺癌、前列腺癌、大肠癌、小肠癌、食道癌、女性生殖器官癌(例如卵巢癌、子宫癌)或甲状腺癌。
本发明的免疫诱导剂的移植方法可列举将上述片剂放置在经外科处理而切开的部位的方法，将上述粒子、颗粒散布在经外科处理而切开的部位的方法；本发明的免疫诱导剂的注射方法可列举使用填充了上述粒子、颗粒的悬浮液等的注射器，自最低限度的开口部位直接注射到生物体内的方法，使用注射针中安装了上述柱状物的注射器，自最低限度的开口部位直接按压注射到生物体内的方法。
只要不削弱或抑制本发明的效果，本发明的免疫诱导剂可以包含除β-TCP以外的药学可接受的常规载体、结合剂、稳定剂、赋形剂、稀释剂、PH缓冲剂、崩解剂、溶解剂、助溶剂、等渗剂等各种用于制备的配伍成分，这些成分可以与上述粒子或颗粒混合后注射，也可以一开始混合并压缩成形(压片)来制备。
下面通过实施例具体说明本发明，但本发明的技术范围不限于这些示例。
实施例1
(制备β -TCP 片剂)
将磷酸氢钙和碳酸钙的粉末按摩尔比1:2称量、混合，向这些磷酸氢钙-碳酸钙混合物中加入恰当比例的纯水，配制为浆料，用球磨机湿磨处理所配制的浆料约I天，在80°C下干燥经研磨处理的浆料数小时，将干燥获得的固体物质粉碎，获得β -TCP粉末。在750°C预烧所获得的β-TCP粉末数小时，制备β-TCP预烧粉末。将上述β-TCP预烧粉末容纳到内径5mm、高2mm的容器内，用旋转数IOOrpm压片，赋予片剂形状。这些片剂在600°C下3小时、900°C下I小时、再在100(Γ1300 下I小时进行烧结。所获得的β-TCP片剂由于一部分具有晶体构造，所以是半透明的，具有高吸湿性的特征。图1是β-TCP片剂的整体组成图。
( β -TCP片剂的物理性质)
调查上述β -TCP片剂的气孔率。测定气孔率为0%的β -TCP石(与作为测定对象的烧结体组成相同，结晶型的不具有气孔的β-TCP烧结体)的真密度P，根据作为测定对象的烧结体的体积和重量计算表观密度P ’，由此计算气孔率P(%) =Cl-P Vp )Χ100。结果获得了气孔率3、8、18、42、50、60和75%的β-TCP片剂。图2是用扫描电子显微镜(SEM)观察气孔率18%的β-TCP片剂的切面的照片。照片内的珠子是作为尺寸指标使用的，直径是 2 μ m。
实施例2
(研究β-TCP片剂的免疫细胞诱导效果)
在上述实施例1制备的β -TCP片剂中，使用气孔率18%的β -TCP片剂，移植到2只7周龄小鼠的皮下，评估本申请的免疫诱导剂的免疫细胞诱导效果。具体而言，麻醉小鼠，切开约IOmm背部皮肤，将气孔率18%的β-TCP片剂移植到皮下后，喂养小鼠2周，采集含移植片剂部位的皮肤组织。用福尔马林固定所采集的皮肤组织后，石蜡包埋，制备用于病理标本的超薄切片，进行HE (苏木精 伊红)染色，用光学显微镜观察。图:T图5显示了移植气孔率18%的P -TCP片剂的情况下的照片。图4和图5分别是放大图3的移植部位的边缘部分a或中心部分b的照片。此外，图6显示了从作为阴性对照的未移植P -TCP片剂的皮肤组织制备的超薄切片的HE染色图像。作为比较实验，用气孔率60%的P -TCP片剂、气孔率75%的P -TCP片剂或塑料片替代气孔率18%的P -TCP片剂作为移植片，除此之外，用与实施例3相同的步骤移植、喂养和制备、染色超薄切片，用光学显微镜观察。图7显示了移植气孔率60%的P-TCP片剂、图8显示了移植气孔率75%的P-TCP片剂、图9显示了移植塑料片的结果。此外，在所拍摄的移植了各移植片的皮肤组织的HE染色图像中，比较移植片中诱导的淋巴细胞和巨噬细胞的数量。结果显示在图10中。(结果)根据图3 图5，在移植气孔率18%的P -TCP片剂的情况下，片剂周围全部分布了大量淋巴细胞，特别是在片剂边缘部分，确认形成了淋巴细胞以高密度进行定位的淋巴结样组织。具体而言，由图10可知，在气孔率18%的P -TCP片剂的移植部位中，存在数量为比较实验中使用的其他移植片约120飞50倍的淋巴细胞，另一方面，几乎不存在巨噬细胞。在移植气孔率60%和75%的P -TCP多孔体的情况下，以移植部位的边缘部分为中心确认到成骨细胞，而几乎没有确认到淋巴细胞，在移植塑料的情况下，确认了分散的淋巴细胞，其数量极少。图11显示了对上述实施例1中制备的气孔率3、8、18、42、50、60、75%的P-TCP片剂实施相同分析的结果。结论是当气孔率在50%以下时，确认诱导淋巴细胞，而气孔率在60%和75%的P -TCP片剂则无法确认到任一种淋巴细胞的诱导。根据上述结果，确认了气孔率在50%以下的P -TCP片剂具有免疫诱导作用，S卩，有效地诱导淋巴细胞，通过所诱导的淋巴细胞激活免疫机能。实施例3(研究淋巴细胞的种类和分布)通过免疫染色，研究用上述实施例1中制备的P -TCP片剂诱导的淋巴细胞的种类和分布。用与上述实施例2相同的步骤，将气孔率18%的P -TCP片剂移植到小鼠皮下，移植后喂养小鼠2周，采集移植部位，制备超薄切片，使用特异性抗体，对超薄切片中的T细胞、B细胞、NK细胞和DC细胞分别实施免疫染色。此外，对由移植了免疫诱导剂的小鼠中采集的淋巴结超薄切片，也进行各细胞的免疫染色。图12 图19显示了通过光学显微镜观察移植了气孔率18%的P -TCP的移植部位附近和未进行移植的上述小鼠的脾淋巴组织的结果。图12和图13分别是对上述移植部位附近的和脾淋巴组织中的T细胞染色的结果。在两者中同样可见T细胞在中心部分的密度高于边缘部分。图14和图15分别是对上述移植部位附近的和脾淋巴组织中的B细胞染色的结果。在两者中冋样可见B细胞在边缘部分聚集(参见图14和图15的ft]■头)。图16和图17分别是对上述移植部位附 近的和脾淋巴组织中的NK细胞染色的结果。箭头指示的细胞是NK细胞。在两者中都确认了同样分散了少数NK细胞。图18和图19分别是对上述移植部位附近的和脾淋巴组织中的树突细胞染色的结果。箭头指示的细胞是DC细胞。在两者中都确认了同样分散了少数DC细胞。
根据上述免疫染色的观察结果，确认在上述实施例1中制备的β -TCP片剂可以诱导T细胞、B细胞、NK细胞等各种淋巴细胞，并且还诱导树突细胞，移植到体内后，具有与正常淋巴结相同的分布和密度，组成与正常淋巴结相同的细胞团块结构。这些结果提示，本发明的包含β-TCP的片剂可以诱导与天然淋巴结相同的淋巴结样组织、发挥免疫机能，是优秀的免疫诱导剂。
实施例4
(制备β-TCP粒子或颗粒)
将上述实施例1获得的β-TCP预烧粉末过筛，首先，将通过105 μ m筛孔的筛、进而残留在75 μ m筛孔的筛上的β-TCP作为β-TCP粒径在75 μ m以上且小于105 μ m的(A);将通过75 μ m筛孔的筛、残留在25 μ m筛孔的筛上的β -TCP作为β -TCP粒径在25 μ m以上且小于75 μ m的(B);将通过25 μ m筛孔的筛的β -TCP作为β -TCP粒径在0.05 μ m以上且小于25 μ m的(C)，获得3种级分(A) (C)0
( β -TCP粒子或颗粒的气孔率)
用干式自动密度计(AccuPycl330、株式会社岛津制作所生产)计算测定上述(A) (C) 3种级分的气孔率，确认(A)级分的气孔率:60-70% ； (B)级分的气孔率:40-50% ； (C)级分的气孔率:0 30%。
(研究β-TCP粒子或颗粒的免疫细胞诱导效果)
混合等量的上述挑选的(A) (C)级分，再按200g/ml的比例悬浮在PBS中。之后，注射移植到皮内，进行HE染色，通过光学显微镜观察超薄切片。图20显示了它的观察结果照片。此外，图21显示了 β-TCP粉末的粒径与细胞诱导之间的关系。
在图20中，分别显示A是气孔率6(Γ70%、Β是气孔率40 50%、C是气孔率0 30%的β-TCP粉末。确认A的周围分布了大量的巨噬细胞。与此相对，确认B的周围分布了淋巴细胞，C的周围定位有非常高密度的淋巴细胞。由此可见，特别是在C中更有效地诱导了淋巴细胞。在图22中显示了作为(C)级分的下限的粒径0.05 μ m的粒子的SEM图像。此外，在图23中显示了(C)级分的粉末粒度分布。
实施例5
( β -TCP片剂的抗肿瘤效果)
使用气孔率0.1 12%的圆板状β-TCP片剂(直径5mm、高2mm)，研究在小鼠中的抗肿瘤效果。作为对照，使用同样大小的、不含可能具有免疫原性的异种蛋白质的塑料载体材料。
(方法)
在6周龄雄性裸小鼠(BALB/c-nu/nu)皮内移植2.5 X IO6个人大肠癌细胞C0L0205(从ATCC公司购入)，5 7天后，计算测定在小鼠中形成的肿瘤大小，计算肿瘤体积。根据下列数学式计算肿瘤体积。
肿瘤体积=(长径X短径2) /2 (mm3)
(结果)
将β -TCP片剂和作为对照的塑料载体材料分别移植到离所形成的肿瘤15 20mm部位的皮下。约I个月后，测定肿瘤大小，观察β-TCP对肿瘤增殖的作用。结果是相对于对照的1400mm3的肿瘤体积，β -TCP片剂施用组中的肿瘤体积减少至1200mm3。
附图标记说明
I 免疫诱导剂
2 β -TCP
权利要求
1.一种免疫诱导剂，其包含气孔率在50%以下的P -磷酸三钙(P -TCP)。
2.根据权利要求1所述的免疫诱导剂，其特征在于，用于移植或注射到生物体内。
3.根据权利要求1或2所述的免疫诱导剂，其特征在于，在附近诱导淋巴细胞和树突细胞。
4.根据权利要求广3的任一项所述的免疫诱导剂，其特征在于，淋巴细胞是选自T细胞、B细胞和NK细胞中的I种或2种以上。
5.根据权利要求r4的任一项所述的免疫诱导剂，其特征在于，剂型是粒径在0.05 i! m以上且小于25 ii m的粒子或颗粒。
6.根据权利要求广4的任一项所述的免疫诱导剂，其特征在于，剂型是片剂或柱状体。
7.—种通过权利要求f 6的任`一项所述的免疫诱导剂形成的淋巴结样组织。
全文摘要
以提供可以用简单的操作移植或注射到生物体内，可以在生物体内无副作用地激活免疫作用的免疫诱导剂为课题。作为解决手段，将包含气孔率在50%以下的β-磷酸三钙(β-TCP)的免疫诱导剂移植或注射到生物体内，特别是癌症等病变部位附近(非病变部位)。可以在β-TCP的附近诱导T细胞、B细胞、NK细胞等淋巴细胞、树突细胞，形成淋巴细胞以高密度进行定位的淋巴结样组织。免疫诱导剂的剂型可列举粒径在0.05μm以上且小于25μm的粒子或颗粒、片剂或柱状体。
文档编号A61K33/42GK103153317SQ201180035998
公开日2013年6月12日 申请日期2011年7月28日 优先权日2010年7月28日
发明者程锦雁, 丸山宏二 申请人:奥林巴斯株式会社, 静冈县