专利名称：脉络宁酯及其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药领域，涉及脉络宁酯及其制备方法和用途。该脉络宁酯化学名为(E) -(5-formylfuran-2-yl) -methyl-3-(3, 4-dihydroxyphenyl) -acrylate,是从脉络宁注射液中提取分离得到的一种酯类新化合物。
背景技术：
心血管系统疾病严重威胁着人们的生命和健康，在临床上已成为死亡的第一杀手，世界各国都高度重视防治心血管药的研发。中药复方制剂脉络宁注射液是在著名医方“四妙勇安汤”临床应用的基础上研究开发出来的、具有自立知识产权的，并于1985年正式批准生产的中药复方静脉注射剂，由中药石斛、玄参、牛膝、金银花经科学提取精制而成。具有活血化淤、行气止痛、养阴通络和补益肝肾的功效，主要用于治疗缺血性中风急性期、血栓闭塞性脉管炎、下肢深静脉血栓形成、动脉硬化性闭塞症、脑梗塞、心绞痛、心肌梗死、血液循环障碍及其后遗症等疾病，总有效率可达94. 5%，与同类药品比较具有见效快、疗效高、疗程短、价格低廉、副作用少、安全性高等优点。脉络宁注射液在市场上经受近30年的考验，深受广大医生和患者的欢迎，已成为全国名优中成药。2009年7月入选国家新医改基本药物目录基层版307种，为仅有的3个中药注射剂品种之一，医改给脉络宁注射液带来了新的成长契机，是一个走向更广阔市场的极好机会，显示着很强的生命力和广阔的应用前景。由于中医药的复杂性和特殊性，中药现代化进程中仍存在不少问题,针对重大疾病的优势品种开发不足，大部分处于低水平重复的状况严重，同时，针对农村地区的适合我国国情的质优价廉的中药品种开发不足，要解决这些问题，必须采用国际先进技术和质量标准，提高我国中药的研发水平，尤其是对中药进行二次开发。把开展中药新的药用成分或部位和新临床适应症的研究作为中药二次开发的重点研究课题，通过严格的科学实验，提供充足的实验数据，提升原有品种的档次，可以起到创新的效果，对提升我国医药产业的创新性、开发具有独立核心知识产权的中药产品，都具有划时代意义。中药现代化发展的重要推动力是创新，而中药二次开发又是我国中药创新药物研发的重要源泉，是积极发展中医药的一种新途径和新方法。中药复方制剂脉络宁注射液成分复杂，其中未知成分占有相当比例，有效成分尚不明确、质量标准不够合理等关键科学问题，是脉络宁注射剂研发的核心技术问题。这些瓶颈问题一直困扰着企业生产，影响产品声誉和销售，国家食品药品监督管理局在2007年颁布的《中药、天然药物注射剂基本技术要求》中规定了 “有效成分制成的注射剂，单一成分含量不得低于90% ;多成分制成的中药注射剂，总固体中结构明确成分的含量不得少于60%，所测成分应大于80%”。因此，对脉络宁注射液的二次开发显得格外重要，迫在眉睫。
发明内容
本发明的目的是提供一种从脉络宁注射液中提取的酯类新化合物——脉络宁酯((E)-(5-formylfuran-2-yl)-methyl-3-(3, 4-dihydroxyphenyl)-acrylate)。本发明的另一个目的是提供上述化合物的制备方法。本发明还有一个目的是提供上述化合物在制备治疗心血管疾病的药物中的应用。本发明的目的是通过下列技术措施实现的本发明公开了该化合物的结构式如式I O
i7UQ
2 h H0Z 4,4
OH
式I分子式为=C15H12O6,分子量288。命名为脉络宁酯(化学名为(E)-(5-formylfuran_2-yl)-methyl-3-(3，4-dihydroxyphenyl)-acrylate )。所述脉络宁酯的制备方法，该方法以脉络宁注射液为原料，采用硅胶柱、凝胶柱、大孔树脂柱、反相柱中的一种或多种经过多次层析分离提纯得到。所述的制备方法，其中娃胶柱采用200 300目娃胶；凝胶柱为SephadexLH-20 ;大孔树脂为D101、AB-8、HP-20或MCI ;反相柱为0DS。所述的制备方法，该方法以脉络宁注射液为原料，经S印hadex LH-20凝胶柱，采用甲醇、乙醇、2(Γ80%的甲醇-水、或者2(Γ80%的乙醇-水进行等度洗脱，洗脱液再经ODS反相柱，采用5 95%乙醇-水或5 95%甲醇-水进行梯度洗脱，洗脱液再经硅胶柱，采用石油醚-乙酸乙酯-丙酮溶剂系统、氯仿-甲醇、或者二氯甲烷-甲醇进行洗脱，洗脱液再经Sephadex LH-20凝胶柱，采用甲醇、乙醇进行洗脱，洗脱液采用重结晶分离提纯，得到脉络宁酯。所述的脉络宁酯与药学上可接受的药用辅料组成的药物制剂。所述的药物制剂，其剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或注射剂。所述的脉络宁酯在制备治疗心血管疾病的药物中的应用。所述的应用，其中心血管疾病为导致心肌缺血和/或缺氧的疾病，尤其是心肌梗塞、心肌炎、心肌肥大、冠心病。本发明有益效果本发明提供的脉络宁配是从脉络宁注射液中提取分离得到的一种酯类新化合物，该化合物能够减少LDH从心肌细胞胞浆中漏出，降低MDA含量，提高SOD活性，调节心肌细胞内iNOS表达及NO的合成，明显提高H2O2及缺氧/复氧损伤心肌细胞的存活率，对心肌细胞具有保护作用，可用于制备治疗心血管疾病的药物中的应用。
图I、化合物I的1H-NMR谱。图2、化合物I的13C-NMR谱。图3、化合物I的1H-1H COSY的谱。图4、化合物I的HMQC谱。图5、化合物I的HMBC谱。图6、化合物I的ESI-MS谱。图7、脉络宁酯(化合物I )制备工艺流程图。
具体实施方式
结合具体实施方式
对本发明作进一步说明，但本发明的内容并不仅仅限于所列举的实施方式。实施例I.从脉络宁注射液中分离和鉴定化合物II、仪器与材料质谱用PackardllOOMSD质谱检测器(ESI-MS70V)测定；核磁共振谱用BrukerAV-300型核磁共振仪(TSM内标)测定；熔点用Reichert型微量熔点仪测定；S^hadexLH-20为Pharmacia公司产品，正相柱层析及薄层层析硅胶均为青岛海洋化工厂产品，反相柱材料为YMCAA12S50，所用试剂均为分析纯。高效液相分析柱为Nova-PakC18柱(3. 9 X 150mm,粒径5 μ m, Waters公司),高效液相所用试剂为色谱纯；2、药品脉络宁注射液，金陵药业股份有限公司提供(批号为20110467，部颁标准)。3、制备方法开启脉络宁注射液700 支约 7000mL,经 Sephadex LH-20 柱(7. 5X 120cm), 50%乙醇洗脱，共收集10个流份,流份6反复经ODS反相柱、娃胶柱、SephadexLH-20柱层析(如流分6经ODS反相柱，采用5-95%甲醇-水溶剂体系进行梯度洗脱，洗脱液再经硅胶柱(200目)，采用二氯甲烷-甲醇进行洗脱，洗脱液再经Sephadex LH-20凝胶柱，采用甲醇、乙醇进行洗脱，洗脱液采用重结晶分离提纯)，分离提纯过程中全程采用高效液相色谱监测，选择特征吸收峰比较大的流分进行下一级分离，从脉络宁注射液中提纯分离得到多个单体化合物，经化学、波谱方法鉴定分别为5_羟甲基糠醛(MLN-1)、肉桂酸(MLN-2)、绿原酸(MLN-3),6, 7- 二羟基香豆素(MLN-4)、琥珀酸(MLN-5)、长链脂肪烃(MLN-6)、脉络宁酯(MLN-7 )、3，5- 二咖啡酰奎宁酸(MLN-8 )、对羟基肉桂酸(MLN-9 )、隐绿原酸(MLN-10 )、原儿茶酸(MLN-11 )、竹节参皂苷(MLN-14)，其中脉络宁酯(化学名为(E) - (5-formylfuran-2-yl)-methyl-3-(3, 4-dihydroxyphenyl)-acrylate)是新化合物。4、化合物I (脉络宁酯)结构经核磁共振谱鉴定如下化合物I :黄色针晶(氯仿-甲醇)，易溶于氯仿甲醇混合溶液。254nm有吸收，12蒸汽显褐色、喷FeCl3M色剂显蓝色，5%-香草醛浓硫酸显黑色。ESI-MS (m/z) 287 (M-H) _，311 (M+Na)+，分子量为288，结合氢谱、碳谱推测分子式为C15H1206。氢谱显示12个质子信号，其中I个醛基氢质子Sh9.60(1H，s)，4个烯氢质子，其中 2 个反式烯氢质子 δΗ6. 34(1Η, d, J=15. 9Hz)和 δ Η7· 54(1H，d，J=15. 9Hz)、2 个顺式烯氢质子 δ Η6· 84 (1Η, d, J=3. 5Ηζ)和 δ Η7· 53 (1Η, d, J=3. 5Hz)，I 个亚甲基 δ Η5· 27 (2Η, s)，3 个 ABX 系统的芳氢质子信号 δ η7· 08 (1Η, d, J=L 8Hz)、δ Η6· 77 (1Η, d, J = 8. IHz)和δ η7· 03 (1Η, dd, J=L 8，8. IHz)，2 个羟基质子信号 3_ΟΗ, 4-ΟΗ δ Η5_9 (2Η, brs)。碳谱显示15个碳信号，其中I个醛基碳信号δ^78.5，1个酯羰基碳信号δε166. 0，10个芳碳信号，2个反式烯碳信号δε146. 3和δ c121. 8，I个亚甲基δ c57. 4。在1H-1H COSY相关谱中可以找到3组有相关关系的质子，即第一组δΗ7. 08(1H, d, J=L 8Ηζ), δ H6. 77 (1H, d, J = 8. 1Hz)和 δΗ7. 03(1H, dd, J=L 8, 8. 1Hz)；第二 组δ Η6· 34(1H，d，J=15. 9Hz)和 δ Η7· 54 (1H，d，J=15. 9Hz);第三组δ η6· 84 (1H, d, J=3. 5Hz)和 δ Η7· 53 (1Η, d, J=3. 5Hz)，结合 HMQC 谱可以推出以下 3 个简单小
片段
权利要求
1.一种脉络宁酯，其特征在于该化合物的化学名为(E)-(5-formylfuran-2-yl)methyl-3-(3，4-dihydroxyphenyl) acrylate,结构式为
2.权利要求I所述脉络宁酯的制备方法，其特征在于以脉络宁注射液为原料，采用硅胶柱、凝胶柱、大孔树脂柱、反相柱中的一种或多种经过多次层析分离提纯得到。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于硅胶柱采用20(Γ300目硅胶；凝胶柱为S印hadex LH-20 ;大孔树脂为D101、AB-8、HP-20或MCI ;反相柱为ODS。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于该方法以脉络宁注射液为原料，经Sephadex LH-20凝胶柱，采用甲醇、乙醇、20 80%的甲醇-水、或者20 80%的乙醇-水进行等度洗脱，洗脱液再经ODS反相柱，采用5、5%乙醇-水或5 95%甲醇-水进行梯度洗脱，洗脱液再经硅胶柱，采用石油醚-乙酸乙酯-丙酮溶剂系统、氯仿-甲醇、或者二氯甲烷-甲醇进行洗脱，洗脱液再经S印hadex LH-20凝胶柱，采用甲醇、乙醇进行洗脱，洗脱液采用重结晶分离提纯，得到脉络宁酯。
5.权利要求I所述的脉络宁酯与药学上可接受的药用辅料组成的药物制剂。
6.根据权利要求5所述的药物制剂，其剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂或注射剂。
7.权利要求I所述的脉络宁酯在制备治疗心血管疾病的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于心血管疾病为导致心肌缺血和/或缺氧的疾病，尤其是心肌梗塞、心肌炎、心肌肥大、冠心病。
全文摘要
本发明属于医药领域，公开了脉络宁酯及其制备方法和应用。该脉络宁酯的化学名为(E)-(5-formylfuran-2-yl)methyl-3-(3,4-dihydroxyphenyl)acrylate，结构式为该脉络宁酯对心肌细胞具有保护作用，可用于制备治疗心血管疾病的药物。
文档编号A61P9/00GK102838570SQ201210292520
公开日2012年12月26日 申请日期2012年8月17日 优先权日2012年8月17日
发明者冯煦, 汤卫国, 王奇志, 徐向阳, 王鸣, 蔡莹, 陈雨, 赵友谊, 张蕙, 印敏 申请人:金陵药业股份有限公司