专利名称：一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及药品，是一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂及其制备方法。
背景技术：
由于妇科炎症是一种发病率极高的病症，故治疗妇科炎症的药物已有许多类型，这些药剂主要针对滴虫性阴道炎、念珠菌性阴道炎、细菌性阴道炎及老年性阴道炎，治疗上述炎症的常用药物有甲硝唑、克林霉素、氧氟沙星、硝酸咪康唑、环吡酮胺、特比萘芳、苦参碱等，这些药物以栓剂、乳膏剂及凝胶剂为常见，这些药物虽然对抑制阴道炎症有较好的效果，但其不足也较为明显在治疗期间，抑制致病菌的同时，也使阴道内的优势菌群受到破坏，易导致阴道内的菌群失衡，为此，本领域技术人员多年来对如何在治疗的同时，不破坏阴道菌群进行了研究，研究发现阴道内共生的常发致病菌，如白色念珠菌、加特纳阴道杆菌、毛滴虫在阴道PH〈4. 5时，其繁殖会受到抑制，因此，如何在治疗炎症的同时，保持阴道PH〈4. 5，使阴道内菌群保持平衡，从而达到有较好治疗效果同时，不产生副作用是本领域技·术人员研究的主要课题之一。
发明内容
本发明的目的是，提供一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂及其制备方法，能够解决现有技术存在的问题。本发明为实现上述目的，通过以下技术方案实现一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂，由下述重量比的原料构成ε -聚赖氨酸15-30、壳聚糖25-40、羧甲基壳聚糖15_30、卡波姆10-20、玻璃酸钠5-10及低聚乳酸5-10。所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂，由下述重量比的原料构成ε -聚赖氨酸20-25、壳聚糖25-30、羧甲基壳聚糖20-25、卡波姆10-20、玻璃酸钠5_10及低聚乳酸5-10。所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂，所述多孔凝胶颗粒的颗粒直径为30-60 μ m,孔径为 O. 5-5 μ m。所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂，由下述重量比的原料构成ε -聚赖氨酸15、壳聚糖29、羧甲基壳聚糖25、卡波姆20、玻璃酸钠5及低聚乳酸6，多孔凝胶颗粒的颗粒直径为50-60 μ m,孔径为O. 5-5 μ m。所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂的制备方法，包括下述步骤
①取卡波姆10g-20g加入到IOOOml的去离子水中，搅拌溶解后，得到溶液；
②取壳聚糖粉末25g-40g，搅拌下加入到步骤①的溶液中，得到壳聚糖溶液；
③取ε-聚赖氨酸15g-30g、羧甲基壳聚糖15g-30g及玻璃酸钠5g_10g依次加入到步骤②的壳聚糖溶液中，搅拌均匀，溶解后得到混合溶液；
④取低聚乳酸5g-10g溶于等量的二氯甲烷中，溶解后，将该溶液加入到步骤③的混合溶液中，搅拌使其均匀分散，得到均匀分散液体；⑤将聚乙二醇二甲醚-2000制孔剂加入到步骤④的均匀分散液体中，搅拌均匀，得到含制孔剂的溶液，聚乙二醇二甲醚的用量为步骤④的均匀分散液体总量的15-25% ；
⑥取环己烷和司班80混合均匀制成混合液，再将步骤⑤的含制孔剂的溶液加入到混合液中，司班80为乳化剂，含制孔剂的溶液为分散相，乳化温度为55°C -65°C，搅拌20分钟，环己烷与含制孔剂的溶液的重量比为3-5:1 ;司班80与含制孔剂的溶液的重量比为
O.1-1. 5:1 ；
⑦交联反应当步骤⑥中的乳化温度降至30°C-40°C时，加入京尼平，搅拌反应2-5小时，使其静置分层，京尼平与含制孔剂的溶液的重量比为O. 01-0. 1:1 ；
⑧制备多孔凝胶颗粒步骤⑦的反应产物静置分层后将有机相分离，剩余物中加入2000-3000ml的无水乙醇，搅拌后真空抽滤，再真空干燥，得到治疗阴道炎的粉状多孔凝胶颗粒剂。·
所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂的制备方法，将多孔凝胶颗粒分装在塑料弹簧瓶中，每只装量为Ig或2g，铝塑包装后辐照灭菌。本发明所述的多孔凝胶颗粒剂能够解决栓剂、乳膏剂及凝胶剂等剂型的药物在阴道内分散不均匀性、生物粘附性差、在抑制致病菌的同时，使阴道内的优势菌群受到破坏、导致阴道内菌群失衡的难题。多孔凝胶颗粒剂能够直接均匀粘附在阴道粘膜的表面，并直接作用于病灶。由于多孔凝胶颗粒剂是由微球组成的，而微球孔径尺寸为O. 5-5 μ m，在致病菌的大小范围内，能够有效吸附和固定致病菌，使其失去活性，使治疗效果显著，同时，多孔凝胶颗粒剂中的微球能够吸收体液，逐步水凝胶化，能够控制羧甲基壳聚糖、卡波姆及低聚乳酸的酸性释放，调节阴道PH值使其小于4. 5，达到了改善阴道微环境的目的，在治疗的同时，恢复阴道菌群平衡。多孔凝胶颗粒剂中的ε-聚赖氨酸、壳聚糖、羧甲基壳聚糖三者复合作为高分子抗菌剂，刺激性极小，并具有抗菌谱广的物点，具有抑制和杀灭致病菌的较好作用。玻璃酸钠具有修复阴道粘膜的作用，各组份共同作用，在达到治疗目的的同时，很好的恢复了阴道的菌群平衡，对人体不产生任何副作用，本发明的多孔凝胶颗粒剂的有效作用时间为3天。本发明所述多孔凝胶颗粒剂中的壳聚糖在成球过程中，通过脱除水分和制孔剂处理，还具有凝固的作用，能够减少成球过程中交联剂的用量。本发明多孔凝胶颗粒剂的动物试验如下
抑菌试验
I、试验目的观察生物粘膜黏附粉状多孔凝胶颗粒剂微球对白色念珠菌、大肠杆菌及金色葡萄球菌的抑菌效果，为阴道常见细菌感染的治疗提供依据。2、材料
2.1材料本发明的粉状多孔凝胶颗粒剂Ig/瓶，使用时配成20mg/ml的悬浮液。2.2菌株实验室用菌株分别为白色念珠菌(ATCC10231)、大肠杆菌(ATCC25922)、金色葡萄球菌(ATCC 6538)。2. 3培养基白色念珠菌使用沙式琼脂培养基，大肠杆菌和金色葡萄球菌使用营养琼脂培养基。2. 4菌液制备取菌株第3-14代的沙式琼脂培养基或营养琼脂培养基斜面新鲜培养物(18-24 h)，用5 ml的O. 3 mol/1的磷酸盐缓冲液(PBS)洗下菌苔，使菌悬浮均匀后用上述磷酸盐缓冲液(PBS)稀释至所需浓度。
3、试验方法将试验菌24 h斜面培养物用磷酸盐缓冲液(PBS)洗下，制成菌悬液(浓度为100 ml滴于5 ml样液内，回收菌数为lX 104-9X 104cfu/ml)。被试样液取5 ml的本发明的多孔凝胶颗粒剂混悬液，对照样液取经灭菌处理后的蒸馏水，各4管。取菌悬液分别在每份样液内滴加100 ul，均匀混合，开始计时，作用2、5、10、20min，用无菌加样器分别将样液(O. 5 ml)加入含5 ml磷酸盐缓冲液(PBS)的试管内，充分混匀，作适当稀释，然后取其中2-3个稀释度，分别吸取O. 5 ml，置于两个平皿中，用凉至400C -450C的营养琼脂培养基(金色葡萄球菌和大肠杆菌)或沙式琼脂培养基(白色念珠菌)15ml作倾注，转动平皿，使其充分均匀，琼脂凝固后翻转平板，35°C ±2°C培养48 h(金色葡萄球菌和大肠杆菌)或72 h (白色念珠菌)，作活菌菌落计数。试验重复3次，按下式计算抑菌率 X4= (A-B) /AX 100% ；
式中X4—抑菌率，% ；
A—对照样品平均菌落数；
B一被试样品平均菌落数；
4、评价标准抑菌率> 50%-90%，产品有抑菌作用，抑菌率> 90%，产品有较强抑菌作用。5、试验结果抑菌试验表明本发明的粉状多孔凝胶颗粒剂对白色念珠菌的抑菌率^ 98%，对大肠杆菌的抑菌率> 99%，对金色葡萄球菌的抑菌率> 99%。阴道刺激试验
I、实验目的观察粉状多孔凝胶颗粒剂对新西兰兔的阴道粘膜是否产生刺激反应，为临床用药提供依据。2、材料
2.I试验材料本发明的粉状多孔凝胶颗粒剂O. Ig/支 2.2对照材料选用生理盐水作为对照材料。3、试验动物新西兰兔
3.I来源购于山东鲁抗医药股份有限公司动物中心，许可证号SCXK (鲁)200901002。3. 2 体重2. 2-2. 5kg
3.3性别雌性
3.4动物数量20只
3、5动物实验室环境温度20°C _25°C;湿度40%-70% ;用金属兔笼单笼饲养，自由饮水，给予颗粒兔饲料。3. 6饲料来源山东省实验动物中心，鲁动饲字200001001
4、给药途径阴道给药
5、方法取20只家兔按体重随机分成两组，10只为实验组，另10只为对照组。将家兔固定，提起家兔尾巴使其阴道口完全暴露，使用阴道给药器，将O. Ig本发明的粉状凝胶颗粒剂，喷入实验组家兔阴道内；对照组使用注射器注入家兔阴道内I ml的对照材料，用无菌脱脂纱布轻轻擦去溢出物，给药后使动物维持臀高头低位被动安静3分钟。每隔72h重复上述试验步骤，连续试验7次。6、评价方法给药7次21天后，无痛处死家兔后，取阴道组织，从上皮、白细胞浸润、血管充血、水肿四方面进行组织学评价，并按表I分别对试验组和对照组打分。分别计算出试验组和对照组总平均分，然后用试验组总评均分减去对照组总平均分得出评价分数，按表2进行评价。表I显微镜检查计分表
权利要求
1.一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂，其特征在于由下述重量比的原料构成ε -聚赖氨酸15-30、壳聚糖25-40、羧甲基壳聚糖15-30、卡波姆10-20、玻璃酸钠5-10及低聚乳酸5-10。
2.根据权利要求I所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂，其特征在于由下述重量比的原料构成ε -聚赖氨酸20-25、壳聚糖25-30、羧甲基壳聚糖20_25、卡波姆10-20、玻璃酸钠5-10及低聚乳酸5-10。
3.根据权利要求I所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂，其特征在于所述多孔凝胶颗粒的颗粒直径为30-60 μ m,孔径为O. 5-5 μ m。
4.根据权利要求I所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂，其特征在于由下述重量比的原料构成ε -聚赖氨酸15、壳聚糖29、羧甲基壳聚糖25、卡波姆20、玻璃酸钠5及低聚乳酸6，多孔凝胶颗粒的颗粒直径为50-60 μ m，孔径为O. 5-5 μ m。
5.权利要求I或4任一项所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂的制备方法，其特征在于包括下述步骤 ①取卡波姆10g-20g加入到IOOOml的去离子水中，搅拌溶解后，得到溶液； ②取壳聚糖粉末25g-40g，搅拌下加入到步骤①的溶液中，得到壳聚糖溶液； ③取ε-聚赖氨酸15g-30g、羧甲基壳聚糖15g-30g及玻璃酸钠5g_10g依次加入到步骤②的壳聚糖溶液中，搅拌均匀，溶解后得到混合溶液； ④取低聚乳酸5g-10g溶于等量的二氯甲烷中，溶解后，将该溶液加入到步骤③的混合溶液中，搅拌使其均匀分散，得到均匀分散液体； ⑤将聚乙二醇二甲醚-2000制孔剂加入到步骤④的均匀分散液体中，搅拌均匀，得到含制孔剂的溶液，聚乙二醇二甲醚的用量为步骤④的均匀分散液体总量的15-25% ； ⑥取环己烷和司班80混合均匀制成混合液，再将步骤⑤的含制孔剂的溶液加入到混合液中，司班80为乳化剂，含制孔剂的溶液为分散相，乳化温度为55°C -65°C，搅拌20分钟，环己烷与含制孔剂的溶液的重量比为3-5:1 ;司班80与含制孔剂的溶液的重量比为O.1-1. 5:1 ； ⑦交联反应当步骤⑥中的乳化温度降至30°C-40°C时，加入京尼平，搅拌反应2-5小时，使其静置分层，京尼平与含制孔剂的溶液的重量比为O. 01-0. 1:1 ； ⑧制备多孔凝胶颗粒步骤⑦的反应产物静置分层后将有机相分离，剩余物中加入2000-3000ml的无水乙醇，搅拌后真空抽滤，再真空干燥，得到治疗阴道炎的粉状多孔凝胶颗粒剂。
6.根据权利要求5所述的一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂的制备方法，其特征在于将多孔凝胶颗粒分装在塑料弹簧瓶中，每只装量为Ig或2g，铝塑包装后辐照灭菌。
全文摘要
本发明提供了一种治疗阴道炎的多孔凝胶颗粒剂及其制备方法，由下述重量比的原料构成ε-聚赖氨酸15-30、壳聚糖25-40、羧甲基壳聚糖15-30、卡波姆10-20、玻璃酸钠5-10及低聚乳酸5-10。制备方法①取卡波姆溶解后得到溶液；②取壳聚糖粉末溶解后得到壳聚糖溶液；③取ε-聚赖氨酸、羧甲基壳聚糖及玻璃酸钠加入到壳聚糖溶液中得到混合溶液；④取低聚乳酸溶于等量的二氯甲烷中得到均匀分散液体；⑤将聚乙二醇二甲醚-2000制孔剂加入到分散液体中得到含制孔剂的溶液；⑥取环己烷和司班80制成混合液，再将含制孔剂的溶液加入到混合液中；⑦交联反应；⑧得到粉状多孔凝胶颗粒剂。本发明能够解决现有技术存在的问题。
文档编号A61K31/785GK102885850SQ20121038910
公开日2013年1月23日 申请日期2012年10月15日 优先权日2012年10月15日
发明者王传栋, 王勤, 杨清华, 王伶, 王晶, 刘传永 申请人:山东省医疗器械研究所