十大功劳萃取物、制备方法及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种十大功劳（Mahonia）萃取物，藉由乙醇萃取十大功劳而得。该十大功劳萃取物具有抗氧化、镇痛、抗发炎及护肝的功效。此外，本发明亦提供该十大功劳萃取物的制备方法以及其用途，该用途包含用于制备抗氧化、镇痛、抗发炎及护肝的医药的用途。
【专利说明】十大功劳萃取物、制备方法及其应用
【技术领域】
[0001]本发明关于十大功劳(Mahonia)萃取物及其于医疗保健上的应用，特别是关于一种含有活性成分的十大功劳(Mahonia)萃取物及其于抗氧化、镇痛、抗发炎及护肝的用途。
【背景技术】
[0002]国人肝脏疾病罹患率甚高，慢性肝病及肝硬化为十大死亡原因的第六位，每年死亡人数在三千人以上。造成肝脏疾病的主要因素有病毒性、酒精性与化学性三大类。其中化学性肝损伤当四氯化碳进入体内后，肝脏微粒体中细胞色素P450 (cytochrome P450)参与四氯化碳(CCl4)的代谢，形成三氯甲烧自由基(Trichloromethyl Free Radical, CCl3.),三氯甲烷自由基会与氧作用，产生活性更大且半衰期更短的过氧化三氯甲烷自由基(Trichloromethylperoxyl Radical, CCl3O0.)。过氧化三氯甲烧自由基会促使麸胱甘肽还原酶(Glutathione Reductase, GRD)、鉄胱甘妝过氧化酶(Glutathione Peroxidase, GPX)>超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)及过氧化氢酶(Catalase, CAT)等抗氧化酵素活性降低，以至抗氧化物质随的减少，因而产生脂质过氧化物，使肝脏中AST (AspartateAminotransferase)及 ALT (Alanine Aminotransferase)的酵素释放于血衆中，导致血衆中AST及ALT的活性上升，最后造成肝纤维化、肝细胞坏死而造成肝损伤。此外，四氯化碳也会促进内生性的活性氧及活性氮分子的形成，其于肝毒性的致病机制中扮演很重要的角色。此外，于此过程中，活化的肝巨噬细胞会释放发炎因子，其亦可促进由四氯化碳所诱发的肝损伤。
[0003]十大功劳，为小蘗科(Berberidaceae)常绿灌木植物,其干燥叶、果实、莖及根皆可入药，有燥湿、泻 火、解毒止痢的功效，可用于改善肺痨咳血、骨蒸潮热、头晕目眩、高血压。现代药理研究更证明其具有增加冠状动脉血流量、强心作用、避孕、抗生育及增强免疫等药理作用。虽然，十大功劳于民间已知有多种有益的功效，然而，其的有效成分仍属不明。此外，十大功劳的生理活性并未完全开发，其仍具有未知的疗效，故有研究十大功劳于其他生理用途的必要。因此，若能开发出具有更多未知疗效(如:护肝、抗氧化等功效)的十大功劳萃取物，对于医疗保健产业而言，可说是刻不容缓且极为重要的事。
[0004]本案发明人经试验验证，意外发现经萃取的十大功劳萃取物，具有多种未知的功效，如:抗氧化、镇痛、抗发炎及护肝等，除了可供长期为肝病所苦的患者提供一良方，亦可作为日常医疗保健所用。
【发明内容】
[0005]本发明的一目的在于提供一种十大功劳萃取物，其具有多种有益的生理活性。
[0006]本发明的另一目的在于提供该十大功劳萃取物，其于抗氧化、镇痛、抗发炎及护肝上的用途。
[0007]本发明的又一目的在于提供制备该十大功劳萃取物的方法。
[0008]本发明的再一目的在于提供该十大功劳萃取物，用于制备医药的用途。[0009]可达成上述发明目的的方法，包括有:一种十大功劳萃取物，其藉由下列步骤的方法以制得:以乙醇萃取十大功劳，以制得十大功劳乙醇萃取物，并将乙醇移除后，即可制得。经本发明的试验发现，该十大功劳萃取物具有抗氧化、抗发炎、镇痛及护肝的功效。因此，本发明的十大功劳萃取物可用于制备抗氧化、抗发炎、镇痛及护肝的医药上的用途。该等用途包含将该萃取物制备成各式组合物的形式，包含食品、饮品、健康食品、添加物、医疗组合物等日常生活易于使用的形式，以供一般服用者、或病患，可易于长期服用，以达日常保健、或病情控制的效。
[0010]本发明可藉由以下较佳具体实施例的描述以及搭配之后的图示，得以更为明晰；即便其中可能会有变化或修饰，但皆不背离本发明所揭露的精神及范畴。
【专利附图】
【附图说明】
[0011]图1为十大功劳萃取物的扭体试验结果。
[0012]图2为十大功劳萃取物的福尔马林舔足试验结果。
[0013]图3A至C为十大功劳萃取物于四氯化碳诱导肝损伤的切片结果分析。其中图3A为正常老鼠的肝脏切片、图3B为四氯化碳诱导组的肝脏切片、及图3C为经四氯化碳诱导，及喂食本发明的十大功劳萃取物的肝脏切片。
【具体实施方式】
[0014]本发明中所述的所有技术性及科学术语，除非另外有所定义，皆为该所属领域具有通常技艺者可共同了解的意义。
[0015]于本发明中所使用的单数形式「一」、及「该」包含复数形式，除非文中另有清楚指明者。因此，例如，当提及「一样本」时，包含复数个该等样本及对该领域具有通常技艺者所知的同等物。
[0016]本文所使用的「约」、「大约」或「近乎」乙词实质上代表所述的数值或范围位于20%以内，较佳为于10%以内，以及更佳者为于5%以内。于本文所提供的数字化的量为近似值，意旨若术语「约」、「大约」或「近乎」没有被使用时亦可被推得。
[0017]本发明意外地发现一种十大功劳萃取物，其具有多种有益的生物活性，如:抗氧化、抗发炎、镇痛及护肝的功效。该十大功劳萃取物系以下列方法所制备而得:以乙醇萃取十大功劳，以制得十大功劳乙醇萃取物，接着将乙醇移除后，即可制得十大功劳萃取物。
[0018]于一实施例中，该十大功劳为阿里山十大功劳(Mahonia oiwakensis)或称玉山十大功劳，翠峰十大功劳。
[0019]于一实施例中，该乙醇的浓度约介于30%至95%(体积百分比)之间，较佳者为50%。
[0020]于一实施例中，该十大功劳萃取部位系指根部、茎部、叶部，较佳者为茎部及根部。
[0021]于一实施例中，将乙醇移除的步骤可使用减压浓缩方式以移除之，或采用该领域具有通常技艺者所熟知的其他适用方法以移除乙醇。
[0022] 于一实施例中，该十大功劳萃取物经试验证实，具有抗氧化、抗发炎、镇痛及护肝的功效，可用于制备医药的用途。该等医药可为各种易于使用的形式，如:口服、注射、涂抹等。为了达到各种易于使用的形式，将视需要搭配适用的药学上可接受的赋形剂或载剂。该药学上可接受的赋形剂可为适合于肠外、肠内施用的药学上可接受的有机或无机载体物质，且该赋形剂不会与本发明的活性萃取物产生有害的反应。适合的赋形剂包含但不限于水、盐类溶液、蔬菜油、聚乙二醇、明胶、直链淀粉、乳糖、硬脂酸镁、滑石、硅酸、黏性石蜡、脂肪酸单甘酯和甘油、脂肪酸酯、羟甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等。该药学上可接受的载剂包含一或多种选自于下列的试剂:溶剂(solvent)、乳化剂(emulsifier)、悬浮剂(suspending agent)、分解剂(decomposer)、黏结剂(binding agent)、安定剂(stabilizing agent)、螯合剂(chelating agent)、稀释剂(diluent)、胶凝剂(gellingagent)、防腐剂(preservative)、润滑剂(lubricant)、界面活性剂(surfactant)、佐剂(adjuvant),及其他类似或适用本发明的载剂。
[0023]术语“保护、对抗”意谓，相较于未使用本发明十大功劳萃取物的动物或细胞样本，使用本发明十大功劳萃取物的动物或细胞样本，具有较高的抗氧化能力、抗发炎能力、痛觉舒缓能力及保护肝脏的能力。
[0024]本发明进一步藉由以下实例阐述之，其仅用于示例的目的而非用以局限本发明。
[0025]实施例一十大功劳萃取物的制备
[0026]阿里山十大功劳(Mahonia oiwakensis)采集自台湾阿里山。将阿里山十大功劳的根、茎、叶分别切成小块后，置于干燥箱中烘干，待干燥后，分别进行磨碎成粉末。将10公升的50%乙醇分别加入该根、茎、叶的粉末中，分别进行萃取48小时。将萃取物进行过滤，将滤液于40° C进行减压浓缩，即可制得十大功劳萃取物(根部萃取物(M0R)、茎部萃取物(M0S)、叶部萃取物(M0L))。其中的减压浓缩步骤系为了将乙醇移除，其他习知的适用方式亦可适用之。 [0027]实施例二十大功劳萃取物的抗氧化能力分析(DPPH)
[0028]将根部萃取物(M0R)、茎部萃取物(M0S)、叶部萃取物(MOL)分别进行DPPH自由基清除能力试验，以评估其的抗氧化能力。DPPH试验方法,简述如下:DPPH自由基是一种稳定的自由基，若所加入的样品能将其清除，则表示样品具有降低羟自由基、烷自由基或过氧化自由基的能力和中止脂质过氧化的链锁反应作用。DPPH甲醇溶液呈深紫色，在517nm有强吸收，加入样品后在波长517nm下以分光亮度计测定，可测定其对DPPH的清除效果。将样品配制成不同浓度的溶液(2000，1000，500，250，125and62.5 μ g/ml)，在96孔微量盘中加入25 μ I不同浓度的样品的溶液，随即加入175 μ 10.3mM DPPH甲醇溶液，使最后体积为200 μ I。振荡均匀混合15秒后，于室温下避光静置30分钟，在波长517nm下，以分光光度计测定其吸光值。当DPPH自由基被清除愈多时，其吸光值会下降的愈多，利用相对于空白对照组的吸光值下降百分比，可判断样品清除DPPH自由基能力的强弱，亦即表示样品供氢能力的强弱。自由基清除能力计算公式如下:自由基清除百分比(%)=【1-(ABS517样本/ABS517控制组)】X 100%ο
[0029]结果如表一所示，与维他命C (Vit.C)及BHT抗氧化剂(2，6-D1-tert-butyl-4_methylphenol)相似，茎部萃取物(M0S)、及根部萃取物(MOR)具DPPH自由基清除能力，证实十大功劳萃取物的抗氧化能力。
[0030]表一^h大功劳萃取物的DPPH自由基清除能力
[0031]
【权利要求】
1.一种十大功劳(Mahonia)萃取物，经下列步骤的方法所制得:以乙醇萃取十大功劳，以制得十大功劳乙醇萃取物，将乙醇移除后，即可制得十大功劳萃取物。
2.如权利要求1所述的萃取物，其中该十大功劳为阿里山十大功劳(Mahoniaoiwakensis)。
3.如权利要求1所述的萃取物，其中该乙醇介于30至95%的体积百分比浓度。
4.如权利要求1所述的萃取物，其中该十大功劳系指十大功劳的根及茎部。
5.如权利要求1项所述的萃取物，其中该十大功劳萃取物具有抗氧化、抗发炎、镇痛及护肝的功效。
6.—种十大功劳(Mahonia)萃取物的制备方法,包含下列步骤: 以乙醇萃取十大功劳，以制得十大功劳乙醇萃取物，将乙醇移除后，即可制得十大功劳萃取物。
7.如权利要求1所述的萃取物，其中该十大功劳为阿里山十大功劳(Mahoniaoiwakensis)。
8.如权利要求1所述的萃取物，其中该乙醇为30至95%的体积百分比浓度。
9.如权利要求1所述的萃取物，其中该十大功劳系指十大功劳的根及茎部。
10.一种如权利要求1所述的十大功劳(Mahonia)萃取物于制备抗氧化、抗发炎、镇痛及护肝的医药的用途。
【文档编号】A61K36/29GK103961389SQ201310034208
【公开日】2014年8月6日 申请日期:2013年1月29日 优先权日:2013年1月29日
【发明者】郑皓元, 赵嵘, 彭文煌, 谢明村, 李孟修 申请人:郑皓元