专利名称：三花接骨散的制备方法
技术领域：
本发明属于中药组合物的制备方法。
背景技术：
三花接骨散由三七、血竭、西红花等18为中草药合制而成，是一方纯中药制剂。“三花接骨散”，止痛快、止血快、消肿快和临床治愈快，并能增强人体内矿物质含量，具有补骨、壮骨，使人延年益寿之功效。无论是粉碎性骨折或开放性骨折，老年人、中年人、青年人和少幼，无论是骨质疏松症或糖尿病患者，均已临床治愈成功。该三花接骨散中的一个重要成分马钱子具有散血通经、消结止痛的作用。马钱子含有吲哚类生物碱，总碱含量3% 5%，其中番木鳖碱(士的宁，strychnine)为主要活性成分，其次为马钱子碱(brucine)，尚含多种微量生物碱，如a-及0 -可鲁勃林(a -, -colubrine),异番木鳘喊(isostrychnine)、伪番木鳘喊(pseudostrychnine)、伪马钱子碱(pseudobrucine)、番木鳘次碱(vomicine)、马钱子新碱(novacine)、依卡精(icajine)等，这些生物碱中占比例最大的是番木鳖碱，其毒性很大，成人用5_10mg即可发生中毒现象，30mg可致死亡。为了降低毒性，传统治疗骨折的马钱子的炮制方法是将每千每斤生马钱子加甘草100克，同置缸内用冷水浸泡，每日换水一次，15天后将马钱子毛刷净，切片晒干，用细砂炒成黄色，再浸在童便中(冬季2 3周，夏季4飞天)，然后用流水冲洗一天半，阴干。这种方法虽然基本消除了马钱子的毒性，但是，处理方法过于复杂、费时，尤其是需要大量的童尿，在现代工业中难以适用。马钱子的其他炮制方法包括砂炙、油炙和水炙，在操作上简便了些，但是，这些方法得到的制马钱子仍然含有番木鳖碱，而且各批次的产品、不同提供商提供的产品在质量上难以稳定，在用药安全上存在隐患。
发明内容
本发明的目的是提出一种新的三花接骨散的制备方法，以降低三花接骨散中马钱子的毒性。本发明的另一个目的是提高马钱子炮制的生产效率。根据本发明，通过微波照射炮制马钱子，将其中的番木鳖碱和马钱子碱转化为各自的衍生物。进一步地，对马钱子采取微波加热的形式进行处理。更进一步地，在进行微波辐照之前，用过氧化物溶液氧化处理马钱子。其中，所述过氧化物优选是过氧乙酸、过氧苯甲酸。较佳地，用紫外灯照射马钱子粉末。更优选的方案是，将200目的马钱子粉末铺成不超过2cm的层，用每厘米100瓦的强紫外线高压水银灯照射15-20分钟。本发明的方法还包括:将大黄、牛膝、续断、土鳖虫、三七、地龙、桂枝和骨碎补各自或者混合后在60-80°C下干燥，粉碎后过100目筛；将木香、川穹、白芷、当归、沉香和西红花在40-50°C下干燥、粉碎之后过100目筛；然后将血竭、自然铜、冰片粉碎过100目筛；将上述各粉末与马钱子粉末混合。本发明的方法解决了传统三花接骨散中存在的马钱子具有高毒性的问题。骨折病人的服药期较长，通常至少半个月，甚至一个月。另一方面，马钱子碱和番木鳖碱不仅毒性大，而且在人体内代谢时间较长。这样，骨折病人长期服用传统药，可能存在安全隐患。本发明的方法大大降低了三花接骨散中的有毒成分，而且制备方法简单，产品质量稳定性高。
具体实施例方式马钱子中含量最高的生物碱是番木鳖碱，其次是马钱子碱。但是，番木鳖碱的毒性最大，并没有镇痛效果，而且现有的炮制方法难以转化全部番木鳖碱。相比之下，马钱子碱比番木鳖碱容易转化，砂炙、油炙后的马钱子基本不含有马钱子碱。发明人为了降低三花接骨散中毒性成分含量，进行了多种尝试，最终提出本发明。本发明的一个重要特点在于，使用微波照射处理马钱子，达到破坏番木鳖碱和马钱子碱的目的。在一种具体实施方式
中，对马钱子采取微波加热的形式进行处理，为了使物料被均匀受热，可以使用传送带式微波加热装置。在这种方式中，将马钱子以既定厚度铺设在传送带上，传送带缓慢经过微波加热区进行加热。还可以使用箱式微波设备，在使用箱式设备的情况下，可以将马钱子分若干层，均匀铺设在微波加热箱内，例如使用济南创新工业微波设备有限公司提供的型号为CXW-60KW的微波干燥装置。在另一种具体实施方式
中，对马钱子进行紫外线照射。发明人发现，紫外线可以有效地转化番木鳖碱和马钱子碱。为了使马钱子充分接收紫外线，必须将马钱子粉碎成粉末，例如粒径小于等于100目，优选 小于等于200目。上述各种微波辐照方式皆很容易控制，通过设定固定的辐照功率和辐照时间，甚至设定马钱子在辐照设备中的放置方式。这样，将各工艺参数固定，即可以稳定控制各批次的产品质量。在本发明的一种最佳实施方式中，将200目的马钱子粉末铺成不超过2cm的层，用每厘米100瓦的强紫外线高压水银灯(灯管为纯石英，灯光谱有效范围在350-450nm之间，主波峰为365nm)照射15-20分钟，所得到的马钱子基本上消除了番木鳖碱和马钱子碱。作为对上述各种方式的进一步优选，在进行辐照之前，用过氧化物溶液预先处理马钱子，可以进一步降低马钱子的毒性，可能的原因是过氧化物预先破坏了部分的番木鳖碱、马钱子碱、及其N-氧化物，还有可能进一步破坏其它类似的衍生物。可以使用的过氧化物包含双氧水、过氧乙酸、过氧化苯甲酸。可以用含有过氧化物的水溶液浸泡马钱子3-8小时。然后水洗、干燥，在需要时将其粉碎至适宜的尺寸。本发明的三花接骨散包含三七、西红花、马钱子、桂枝、沉香、当归、地龙、牛膝、冰片、木香、川穹(芎)、土鳖虫、续断、骨碎补、血竭、大黄、自然铜和白芷十八种成分。在一种优选的方式中，按照三七24-28、西红花40-48、马钱子25-30、桂枝85-95、沉香40-48、当归85-95、地龙 42-48、牛膝 32-38、冰片 24-30、木香 32-38、川穹(芎)85-95、土鳖虫 85-95、续断85-95、骨碎补42-48、血竭138-145、大黄15-20、自然铜32-38和白芷32-38的重量比组成组合物。为了制备本发明的药物组合物，作为举例，可以将大黄、牛膝、续断、土鳖虫、三七、地龙、桂枝和骨碎补各自或者混合后在60-80°C下干燥，粉碎后过100目筛，将木香、川穹、白芷、当归、沉香和西红花在40-50°C下干燥、粉碎之后过100目筛，然后将血竭、自然铜、冰片粉碎过100目筛，最后将上述各粉末与马钱子粉末混合即可。实施例1将马钱子干燥后粉碎至100目以下，然后在耐微波材料上铺成2cm厚，放入CXW-60KW的微波干燥机，箱内放置8层。加热处理I小时，得到可药用马钱子粉末。按照上述常规方法制备其他成分然后混合，各成分按重量为:三七24-28、西红花40-48、马钱子25-30、桂枝85-95、沉香40-48、当归85-95、地龙42-48、牛膝32-38、冰片24-30、木香32-38、川穹(芎)85-95、土鳖虫 85-95、续断 85-95、骨碎补 42-48、血竭 138-145、大黄 15-20、自然铜32-38和白芷32-38，得到样品I。取本品4.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加氯仿30ml与浓氨试液1ml，轻轻摇匀，于室温放置24小时，滤过，精密量取滤液15ml，用硫酸溶液(3— 100)提取4次，第一次20ml，以后每次15ml，合并硫酸液，用氯仿洗涤2次，每次20ml，弃去氯仿液，加浓氨试液呈碱性，用氯仿提取3次，每次30ml，合并氯仿液，蒸干，放冷，残渣中精密加氯仿5ml使溶解，作为供试品溶液。另取士的宁对照品，加氯仿制成Iml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液20 yl、对照品溶液2 Ul与5 y 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(5:4:1:0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上所显斑点小于对照品溶液2 Ul的斑点。实施例2将干燥的马 钱子粉碎，用10%的过氧乙酸浸泡3小时，滤出，干燥，然后在耐微波材料上铺成2cm厚，放入CXW-60KW的微波干燥机，箱内放置8层，加热处理I小时，得到可药用马钱子粉末。按照同实施例1的常规方法制备其他成分然后混合，各成分按重量为:三七24-28、西红花40-48、马钱子25-30、桂枝85-95、沉香40-48、当归85-95、地龙42-48、牛膝32-38、冰片 24-30、木香 32-38、川穹(芎)85-95、土鳖虫 85-95、续断 85-95、骨碎补 42-48、血竭138-145、大黄15-20、自然铜32-38和白芷32-38，得到样品2。取本品4.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加氯仿30ml与浓氨试液1ml，轻轻摇匀，于室温放置24小时，滤过，精密量取滤液15ml，用硫酸溶液(3 — 100)提取4次，第一次20ml，以后每次15ml，合并硫酸液，用氯仿洗涤2次，每次20ml，弃去氯仿液，加浓氨试液呈碱性，用氯仿提取3次，每次30ml，合并氯仿液，蒸干，放冷，残渣中精密加氯仿5ml使溶解，作为供试品溶液。另取士的宁对照品，加氯仿制成Iml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液20 yl、对照品溶液2 Ul与5 y 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(5:4:1:0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上所显斑点小于对照品溶液2 Ul的斑点，且颜色很弱。实施例3将马钱子粉碎成200目的粉末，铺成2cm的层，用每厘米100瓦的强紫外线高压水银灯(灯管为纯石英，灯光谱有效范围在350-450nm之间，主波峰为365nm)照射15分钟，得到可药用马钱子粉末。按照同实施例1的常规方法制备其他成分然后混合，各成分按重量为:三七24-28、西红花40-48、马钱子25-30、桂枝85-95、沉香40-48、当归85-95、地龙42-48、牛膝 32-38、冰片 24-30、木香 32-38、川穹(芎)85-95、土鳖虫 85-95、续断 85-95、骨碎补42-48、血竭138-145、大黄15-20、自然铜32-38和白芷32-38，得到样品3。
取本品4.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加氯仿30ml与浓氨试液1ml，轻轻摇匀，于室温放置24小时，滤过，精密量取滤液15ml，用硫酸溶液(3 — 100)提取4次，第一次20ml，以后每次15ml，合并硫酸液，用氯仿洗涤2次，每次20ml，弃去氯仿液，加浓氨试液呈碱性，用氯仿提取3次，每次30ml，合并氯仿液，蒸干，放冷，残渣中精密加氯仿5ml使溶解，作为供试品溶液。另取士的宁对照品，加氯仿制成Iml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液20 yl、对照品溶液2 Ul与5 y 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(5:4:1:0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上所显斑点小于对照品溶液2 Ul的斑点，且颜色很弱，几乎不可见。对比例按照实施例1的配方配成对照品，区别在于用市售的油炙马钱子代替本发明方法制得的马钱子。取本品4.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加氯仿30ml与浓氨试液1ml，轻轻摇匀，于室温放置24小时，滤过，精密量取滤液15ml，用硫酸溶液(3 — 100)提取4次，第一次20ml，以后每次15ml，合并硫酸液，用氯仿洗涤2次，每次20ml，弃去氯仿液，加浓氨试液呈碱性，用氯仿提取3次，每次30ml，合并氯仿液，蒸干，放冷，残渣中精密加氯仿5ml使溶解，作为供试品溶液。另取士的宁对照品，加氯仿制成Iml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典1995年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液20 yl、对照品溶液2 Ul与5 y 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-乙醇-浓氨试液(5:4:1:0.3)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上所显斑点大于对照品溶液2 Ul的斑点，小于对照品溶液2 Ul的斑点。为了比较对照品和样品3对骨折的治疗效果，进行了动物实验。将SD大鼠(普通级，购自上海市放射医学研究所)60只，雌性，平均体重368±40g，按如下方法造骨折模型:用0.35%的戊巴比妥钠溶液进行腹腔麻醉，无菌条件下从胫骨平台前缘插入一根预制的消毒医用克氏针(￠0.9_)，然后把大鼠后肢小腿人工固定于造模支架的铁砧上，暴力撞击点位于胫骨中段前方最高点处，助手提起重锤至30cm高处，让其沿中轴自由落体通过撞击托盘，力传导至刀片上，撞击胫骨中段造成骨折。以石膏纱布固定，7天后拆除。将大鼠随机分成实验组、对照组和空白组，试验组按7mg/100g的剂量喂饲样品3，每天两次；对照组按同样剂量喂饲对照品；空白组喂饲5%的阿拉伯胶。14天和28天断头取血测血清GH浓度，同时取垂体测重量，并观察经免疫组化染色的垂体生长激素细胞面积和灰度。结果表明血清GH14天时试验组与对照组基本相仿，但是与空白组有显著差异。试验组和对照组的生长激素细胞灰度也明显高于空白组，但是在骨折愈合后或停药后可以恢复到正常水平。这说明根据本发明得到的药物与传统药物具有相近的治疗效果。本发明的方法解决了传统三花接骨散中存在的马钱子具有高毒性的问题。骨折病人的服药期较长，通常至少半个月，甚至一个月。另一方面，马钱子碱和番木鳖碱不仅毒性大，而且在人体内代谢时间较长。这样，骨折病人长期服用传统药，可能存在安全隐患。本发明的方法大大降低了三花接骨散中的有毒成分， 而且制备方法简单，产品质量稳定性高。
权利要求
1.三花接骨散的制备方法，其特征在于，通过微波照射炮制马钱子，将其中的番木鳖碱和马钱子碱转化为各自的衍生物。
2.如权利要求1所述的方法，其中，对马钱子采取微波加热的形式进行处理。
3.如权利要求2所述的方法，其中，在进行微波辐照之前，用过氧化物溶液氧化处理马钱子。
4.如权利要求3所述的方法，其中，所述过氧化物是过氧乙酸、过氧苯甲酸。
5.如权利要求1所述的方法，其中，用紫外灯照射马钱子粉末。
6.如权利要求5所述的方法，其中，将200目的马钱子粉末铺成不超过2cm的层，用每厘米100瓦的强紫外线高压水银灯照射15-20分钟。
7.如权利要求1至6任一项所述的方法，其中，还包括:将大黄、牛膝、续断、土鳖虫、三七、地龙、桂枝和骨碎补各自或者混合后在60-8(TC下干燥，粉碎后过100目筛；将木香、川穹、白芷、当归、沉香和西红花在40-50°C下干燥、粉碎之后过100目筛；然后将血竭、自然铜、冰片粉碎过100目筛 ；将上述各粉末与马钱子粉末混合。
全文摘要
本发明提出一种新的三花接骨散的制备方法，其中重点涉及马钱子的炮制，以降低三花接骨散中马钱子的毒性。本发明通过微波照射炮制马钱子，将其中的番木鳖碱和马钱子碱转化为各自的衍生物。优选的方法是在进行微波辐照之前，用过氧化物溶液氧化处理马钱子。本制备方法简单，可以保持产品质量的稳定性。
文档编号A61K31/045GK103156917SQ201310084269
公开日2013年6月19日 申请日期2013年3月16日 优先权日2013年3月16日
发明者卢敏, 张波 申请人:营口三花制药有限公司